项目二-红细胞检查课件.ppt
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1、1常用的红细胞检查项目:常用的红细胞检查项目:红细胞计数红细胞计数 本次本次血红蛋白测定血红蛋白测定 授课内容授课内容红细胞形态观察红细胞形态观察血细胞比容血细胞比容 红细胞平均指数计算红细胞平均指数计算 网织红细胞计数网织红细胞计数 嗜碱性点彩红细胞计数嗜碱性点彩红细胞计数 红细胞沉降率测定红细胞沉降率测定3457272小时小时4848小时小时血红蛋白血红蛋白(血色素,血色素,Hb 或或 HGB)是一种微红是一种微红色的胶体物质,分子量为色的胶体物质,分子量为 64 458。是一种呼吸载体,每克血红蛋白可携带氧是一种呼吸载体,每克血红蛋白可携带氧1.34 毫升成人红细胞总量约有毫升成人红细胞
2、总量约有 600 g 血红血红蛋白,可携氧蛋白,可携氧 800 毫升。毫升。71.1.血红蛋白组成血红蛋白组成FEPFe+血红素血红素HPHb82.2.血红蛋白分子结构及成分血红蛋白分子结构及成分组成组成 Hb 的多肽链两大类:的多肽链两大类:类链:类链:和和链;链;非非链:链:链。链。链由链由 141 个氨基酸组成,个氨基酸组成,链由链由 146 个氨基酸组成。个氨基酸组成。9每个每个 Hb 分子由分子由 2 条条类肽链和类肽链和 2 条条类肽链组成,类肽链组成,每条珠蛋白肽链含有每条珠蛋白肽链含有 1 个亚铁血红素。个亚铁血红素。在人体不同生长时期,在人体不同生长时期,Hb Hb 种类与比
3、例不同:种类与比例不同:11 检测方法检测方法1.手工显微镜法手工显微镜法:2.血液分析仪法血液分析仪法:12定义:测定每升血液中所含红细胞数目,用?.?X1012/L表示。13计数板计数板141516【操作操作】1.1.准备计数板准备计数板2.2.加稀释液:加稀释液:2ml2ml3.3.加血:加血:1010l l混匀混匀4.4.充池充池5.5.计数计数6.6.计算:红细胞数计算:红细胞数=N/5=N/5*2525*1010*200200*10106 6/L/L17 1 1手工法手工法误差来源:标本、操作、器材、固有误差 2 2仪器法仪器法 严格按照操作规程、定期进行室内和室间质控 181.1
4、.手工显微镜法手工显微镜法 血液分析仪的校正 白细胞减少时的对照核实。血小板计数受小红细胞干扰时的校正 2 2血液分析仪法血液分析仪法 方法精确,且操作简便、快速,已广泛应用。19成年:男性(45.5)1012/L 女性(3.55.0)1012/L新生儿:(6.07.0)1012/L201生理性变化生理性变化(1)年龄与性别的年龄与性别的 差异差异(2)精神因素精神因素(3)剧烈体力运动剧烈体力运动和劳动和劳动(4)气压降低气压降低(5)妊娠中、后期妊娠中、后期 21 2病理性变化病理性变化 (2)红细胞增多红细胞增多 1)原发性红细胞增多 2)继发性红细胞增多3)相对性红细胞增多(1)红细胞
5、和血红蛋红细胞和血红蛋白量减少白量减少1)红细胞生成障碍2)造血原料缺乏3)利用障碍红细胞4)破坏过多和失血22 医学决定水平医学决定水平高于6.8l012/L,应采取相应的治疗措施。低于3.51012/L为诊断贫血的界限,应继续寻找原因。低于1.5l012L应考虑输血 指该项目结果如高指该项目结果如高于或低于某一个值时于或低于某一个值时就应该采取一定的措就应该采取一定的措施,为患者处理起提施,为患者处理起提供依据的作用。供依据的作用。23 定义:血红蛋白测定是指测定血液中各种血红蛋白的总浓度,用g/l表示241 1氰化高铁血红蛋白氰化高铁血红蛋白(HiCN)(HiCN)测定法测定法 2 2其
6、他测定法其他测定法 十二烷基硫酸钠血红蛋白(SDS-Hb)法叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法碱羟血红蛋白法沙利(Sahli)酸化血红蛋白法溴代十六烷基三甲胺血红蛋白测定法(CTAB)等 25HiCNHiCN转化液:即文齐氏液转化液:即文齐氏液540 nm 540 nm 处有一吸收波峰,用分光光度计测定处有一吸收波峰,用分光光度计测定换算成每升血液中的血红蛋白浓度,或制备标准曲线供查阅。换算成每升血液中的血红蛋白浓度,或制备标准曲线供查阅。CN-血红蛋白血红蛋白高铁血高铁血红蛋白红蛋白氰化高铁氰化高铁血红蛋白血红蛋白高铁氰高铁氰化钾化钾540nm血红蛋血红蛋白浓度白浓度吸光度吸光度2627血红蛋白
7、浓度计算公式:血红蛋白浓度计算公式:Hb(g/L)=A?540HiCN64458/44000251 =A367.728 方法方法 优点优点 缺点缺点 HiCN操作简便、快速操作简便、快速(5min),结果稳,结果稳定可靠,定可靠,试剂容易保存,便于试剂容易保存,便于质控,为质控,为参考方法参考方法KCN有剧毒有剧毒高白细胞和高球蛋白可致浑浊。高白细胞和高球蛋白可致浑浊。HbCO转化慢转化慢 SDS-Hb 不用剧毒试剂、无公害,操作简不用剧毒试剂、无公害,操作简便,呈色稳定,准确度和精度高便,呈色稳定,准确度和精度高 SDS-Hb消光系数未确定消光系数未确定SDS质量差异性大。质量差异性大。SD
8、S溶血活力大,不适于同时进溶血活力大,不适于同时进行自动化分析行自动化分析 AHD575 同同HiCN法,不用剧毒试剂法,不用剧毒试剂 不便于自动检测、氯化血红素纯度不便于自动检测、氯化血红素纯度达不到标准达不到标准 HiN3 准确度和精密度高,试剂毒性低准确度和精密度高,试剂毒性低HbCO转化慢转化慢 CTAB溶血活力强,但不破坏白细胞,溶血活力强,但不破坏白细胞,适合自动化分析适合自动化分析精密度和准确性低精密度和准确性低2930 31 成年:成年:男性:120160gL;女性:llO150gL。新生儿:新生儿:170200gL。老年老年(70(70岁以上岁以上):男性:94122gL;女
9、性87112gL。32u 轻度贫血,成年男性轻度贫血,成年男性HbHb120g/L120g/L,成年女性成年女性100g/L100g/L;u中度贫血中度贫血90g/L90g/L;u重度贫血重度贫血60g/L60g/L;u极度贫血极度贫血30g/L30g/L。34红细胞大小、形态、染色和内涵物的是否异常红细胞大小、形态、染色和内涵物的是否异常 1显微镜分析法显微镜分析法 采用人工显微镜法血涂片染色观察,采用人工显微镜法血涂片染色观察,是仪器法校准的参考方法和检测的复核方法。是仪器法校准的参考方法和检测的复核方法。2 2计算机图像分析计算机图像分析 建立统计模型,以正常红细胞形态建立统计模型,以正
10、常红细胞形态 为参比、作出分析,为参比、作出分析,可用于与红细胞形态变化疾病的辅助诊断。可用于与红细胞形态变化疾病的辅助诊断。3.3.血液分析仪法血液分析仪法 提供红细胞数量及其他相关参数,对异提供红细胞数量及其他相关参数,对异 常结果报警,常结果报警,但不能提供确切信息,需用镜检血涂片核实。但不能提供确切信息,需用镜检血涂片核实。1.有合格的血液细胞形态检验人员有合格的血液细胞形态检验人员 2.2.选择细胞分布均匀区域进行镜检选择细胞分布均匀区域进行镜检 3.3.注意完整规范的检查顺序注意完整规范的检查顺序 低倍镜低倍镜 细胞分布和染色细胞分布和染色 油镜油镜 细胞形态细胞形态,是否存在其他
11、异常细胞是否存在其他异常细胞 4 4减少人为影响因素减少人为影响因素 全片浏览全片浏览质量质量保证保证3738双凹圆盘形双凹圆盘形大小均一,大小均一,平均平均7.2m 7.2m(6.7-7.7m)(6.7-7.7m);淡粉红色,淡粉红色,HbHb充盈良好,充盈良好,中央部位为生理性淡染中央部位为生理性淡染区,大小约为直径的区,大小约为直径的1 13 3;胞质内无异常结。胞质内无异常结。39404142小红细胞大红细胞4445464748495051525354555657585960616263646566寄生虫寄生虫:当患者感染疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫等时,可见红细胞胞质内相应的病原体。
12、6768 血细胞比容血细胞比容(HctHct或或PCVPCV),以前称为红细胞压积,是指,以前称为红细胞压积,是指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。占体积的比值。HCTHCT的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关 1.常量法常量法(Wintrobe法法)和微量法和微量法(microhematocrit)将抗凝血液标本置于孔径统一的温氏管或毛细玻璃管中,将抗凝血液标本置于孔径统一的温氏管或毛细玻璃管中,以一定转速离心一定时间后,计算红细胞层占全血的体积比。以一定转速离心一定时间后
13、,计算红细胞层占全血的体积比。5层:血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原层:血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原红细胞层和氧合红细胞层。红细胞层和氧合红细胞层。2.血液分析仪法血液分析仪法 由红细胞平均体积和红细胞计数两项指标后导出,由红细胞平均体积和红细胞计数两项指标后导出,Hct红细胞计数红细胞计数红细胞平均体积。红细胞平均体积。检测原理检测原理方法方法优点优点 缺点缺点温氏法温氏法无需特殊仪器,广泛无需特殊仪器,广泛应用应用不能完全排除残留血浆,且不能完全排除残留血浆,且单独采血,用血量大单独采血,用血量大微量法微量法快速快速(5min)标本用量标本用量小、结果准确、小、
14、结果准确、重复重复性好。性好。WHO推荐的首推荐的首选参考方法选参考方法有残留血浆,但较温氏法少有残留血浆,但较温氏法少电阻抗法电阻抗法简便快速简便快速(5-15s)白细胞、血小板增多可引白细胞、血小板增多可引起血液导电异常,使结果不起血液导电异常,使结果不可靠可靠血细胞分析仪法血细胞分析仪法简便快速、精密度高,简便快速、精密度高,无需单独采血无需单独采血准确性稍低,结果仅供参考准确性稍低,结果仅供参考71 1.操作规范化操作规范化 避免操作误差,如抗凝量不准,混匀不充分,离心避免操作误差,如抗凝量不准,混匀不充分,离心速度不均等。速度不均等。2注意干扰因素注意干扰因素 假性增高:红细胞形态异
15、常和红细胞增多时应注明,假性增高:红细胞形态异常和红细胞增多时应注明,(细胞变形性减低和数量增多细胞变形性减低和数量增多 血浆残留量增加血浆残留量增加);高网织红细胞或高白细胞等高网织红细胞或高白细胞等 假性降低:体外溶血、自身凝集等。假性降低:体外溶血、自身凝集等。质量保证质量保证参考值参考值男性:男性:0.3800.508;女性:女性:0.3350.450 临床意义临床意义HCT的临床意义与红细胞计数相似。的临床意义与红细胞计数相似。HCT减低是诊断贫血的指标,减低是诊断贫血的指标,HCT的高低与红细胞的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关数量及平均体积、血浆量有关主要用于贫血、真性红细
16、胞增多症和红细胞增多的主要用于贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断、血液稀释和血液浓缩变化的测定、计算红细胞诊断、血液稀释和血液浓缩变化的测定、计算红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度等。平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度等。临床意义临床意义 1临床补液量的参考临床补液量的参考 各种原因导致脱水时,各种原因导致脱水时,HCT都会增高,补液时可都会增高,补液时可监测监测HCT,HCT恢复正常表示血容量得到纠正。恢复正常表示血容量得到纠正。2真性红细胞增多症诊断指标真性红细胞增多症诊断指标 当当HCT大于大于0.7,RBC为为(7-10)X1012L,Hb大于大于180gL,即可诊断。,即可诊
17、断。临床意义临床意义 3红细胞平均指数计算的基础数据红细胞平均指数计算的基础数据 红细胞平均值红细胞平均值(MCV、MCHC)可用于贫血的形态可用于贫血的形态学分类。学分类。4血液流变学指标血液流变学指标 HCT增高表明红细胞数量偏高,增高表明红细胞数量偏高,全血黏度增加,严重者表现为高黏滞综合征,全血黏度增加,严重者表现为高黏滞综合征,微循环障碍、组织缺氧。微循环障碍、组织缺氧。HCT与其他血液流变学指标联合应用,可对一些与其他血液流变学指标联合应用,可对一些血栓前状态进行监测。血栓前状态进行监测。77红细胞平均容积红细胞平均容积(mean corpuscular volume,MCV),指
18、每个,指每个红细胞平均体积的大小,以飞升红细胞平均体积的大小,以飞升(f1)为单位;为单位;红细胞血平均红蛋白含量红细胞血平均红蛋白含量(mean corpuscular he-moglobin,MCH),指每个红细胞内平均所含血红蛋白的量,以皮克,指每个红细胞内平均所含血红蛋白的量,以皮克(pg)为为单位;单位;红细胞平均血红蛋白浓度红细胞平均血红蛋白浓度(mean corpuscular Hemoglobin concentration,MCHC),指平均每升红细胞,指平均每升红细胞中所含血红蛋白中所含血红蛋白浓度浓度(gL)。(1)MCV=1)MCV=每升血液中红细胞体积每升血液中红细胞
19、体积/每升血液中红每升血液中红细胞个数细胞个数=HctHct/RB(f1)/RB(f1)(2)MCH=(2)MCH=每升血液中血红蛋白含量每升血液中血红蛋白含量/每升血液中每升血液中红细胞个数红细胞个数=HbHb/RBC(pg)/RBC(pg)(3)MCHC=(3)MCHC=每升血液中血红蛋白含量每升血液中血红蛋白含量/每升血液每升血液中红细胞比容中红细胞比容=HbHb/HctHct78 检测原理检测原理 1手工法手工法 同时计数红细胞,同时计数红细胞,测定血红蛋白和血细胞比容,测定血红蛋白和血细胞比容,计算出红细胞计算出红细胞3个平均指数。个平均指数。例:例:RBC为为3.50X1012L,
20、Hct为为0.36,Hb为为120g/L Hct 0.36MCV(fl)103(fl)RBC 3.50X1012L Hb HbMCH(pg),),MCHC(gL)RBC Hct检测原理检测原理2血液分析仪血液分析仪 能直接导出能直接导出MCV的值,再的值,再结合仪器直接测定的结合仪器直接测定的RBC和和Hb,计算出,计算出MCH和和MCHC MCHHbRBC,MCHCHb(RBCMCV)。81参考值参考值临床意义临床意义贫血分类贫血分类 MCVMCHMCHC 贫血贫血 正细胞贫血正细胞贫血 正常正常正常正常正常正常再生障碍性贫血、急再生障碍性贫血、急性失血性贫血、某些性失血性贫血、某些溶血性贫
21、血溶血性贫血大细胞贫血大细胞贫血 增高增高增高增高正常正常 各种造血物质缺乏或各种造血物质缺乏或利用不良的贫血利用不良的贫血单纯小细胞贫血单纯小细胞贫血 减低减低减低减低正常正常慢性感染、慢性肝肾慢性感染、慢性肝肾疾病性贫血疾病性贫血小细胞低色素贫小细胞低色素贫血血 减低减低减低减低减低减低缺铁性贫血及铁利用缺铁性贫血及铁利用不良贫血,慢性失血不良贫血,慢性失血性贫血性贫血作为贫血的红细胞形态学分类作为贫血的红细胞形态学分类83网织红细胞网织红细胞(reticulocytereticulocyte,Ret)Ret)是晚幼红细胞脱核后到是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞完全成熟红细胞
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