HP083特定蛋白分析平台检测项目的临床应用培训课件.ppt
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1、HP083特定蛋白分析平台特定蛋白分析平台检测项目的临床应用检测项目的临床应用禾柏生物技术股份有限公司幸运检测项目的临床意义检测项目的临床意义1、超敏C-反应蛋白(Hs-CRP)2、糖化血红蛋白(HbA1c)3、D-二聚体(D-Dimer)4、尿微量白蛋白(MALB)5、抗链球菌溶血素O(ASO)6、类风湿因子(RF)7、降钙素原(PCT)幸运CRP定义:C-Reactive Protein,简称CRP,是一类正急性时相反应蛋白,随着损伤、炎症或各类疾病的发生迅速增加。1930年由Tillet和Francis发现这种能在Ca2+存在时与肺炎链球菌的荚膜C多糖结合的物质,称为C反应素。1941年
2、Avery等测知它是一种蛋白质,故称为C反应蛋白(CRP)。C C反应蛋白反应蛋白CRP的形成:在肝细胞内持续合成,分泌至各种体液中由细胞因子(IL-1,IL-6,TNF-)刺激肝细胞和上皮细胞合成,由活化的吞噬细胞(巨噬细胞)释放 1、CRP简介简介幸运CRP的生物学特点:敏感:病理状态可升高1-1000倍反应快速:在急性时相4-6小时浓度增高,24-48小时后达高峰;生物半衰期5-7小时,随着恢复下降也快CRP浓度在细菌感染时增高,而病毒感染没有标志性升高受影响因素少:不受生理活动、化疗、放疗和激素治疗的影响浓度变化与病程同步:CRP 上升速度、幅度及持续时间与病情及组织损伤的严重程度密切
3、相关CRP的理化特点:由五个相同的非共价结合的单体组成,呈环状五聚体,其亚基由206个氨基酸残基组成。幸运C反应蛋白和超敏反应蛋白和超敏C反应蛋白反应蛋白 C反应蛋白:采用临床常规方法测定CRP时,检测的线性范围一般为8200 mg/L,因检测方法缺乏足够的敏感性,无法测出血液中含量更低的CRP。超敏C反应蛋白:与普通CRP属同一种蛋白,只是由于其测定方法更敏感而得名。近年来相继采用胶乳增强的免疫散射比浊法、免疫投射比浊法、免疫发光法等技术使检测的灵敏度得到了很大提高,检测低限延伸为0.0050.10 mg/L,使得低浓度CRP(如0.1510 mg/L)的测定更加准确。hs-CRP和CRP实
4、际上测定的都是C反应蛋白,只是测定方法、灵敏度、精密度以及可测定的线性范围不同。幸运应用上的异同应用上的异同 近年来关于CRP、hs-CRP的研究越来越多,应用越来越广泛。在感染、心脑血管性疾病、糖尿病、代谢综合征、外周血管病、慢性阻塞性肺病、哮喘、肿瘤等多种疾病中用于指导临床诊疗。目前已经知道,CRP和hs-CRP的临床意义并不完全相同:CRP在感染性疾病和结缔组织病中有较高的应用价值 hs-CRP近年来在心脑血管疾病、糖尿病中越来越受到关注幸运参考值水平参考值水平 不同人群C反应蛋白水平不一 健康成年人:10 mg/L 新生儿感染判定:2.0mg/L (新生儿免疫系统不完善,肝脏功能不强盛
5、)疑似或有心血管病史患者的风险控制:3.0mg/L(没有其他因素的影响下)幸运检测检测C反应蛋白的作用反应蛋白的作用 一、判断病情 评估病情的程度,动态监控病情变化和治疗疗效 C反应蛋白的急相性能及时的体现病情的程度、变化,以及治疗的效果。幸运动态监控病程 广泛烧伤时 CRP显著升高,如无感染,三天后即下降且在超过一个月的愈合期内持续 下降。如期间有感染发生,CRP又会升高,所以CRP可用来监测整个病程。烧伤病人血清CRP值变化图幸运治疗时发生并发症,此时动态检测CRP是非常有效的方法幸运二、鉴别感染源二、鉴别感染源 区分细菌感染和病毒感染,指导抗生素使用,防止抗生素滥用。细菌感染时,血清CR
6、P的水平可以中等度至明显升高,阳性率可达90%以上。而病毒等感染时CRP水平多正常或轻度升高,因此可以帮助细菌感染与非细菌感染的鉴别诊断。幸运 此外,定量测定脑脊液、胸腔积液中的CRP水平亦可以对脑膜炎、胸膜炎的鉴别诊断有一定意义。不仅如此,CRP水平还与感染范围和感染严重程度有一定关系。各种细菌感染均可引起CRP水平的升高,1099 mg/L提示局灶性或浅表性感染,100 mg/L提示败血症或侵袭性感染等严重情况。使临床能根据病情选择治疗方案。幸运鉴别细菌性或病毒性感染,指导是否使用抗生素幸运指导抗生素使用的检测指标指导抗生素使用的检测指标病原体检测、培养、药敏试验病原体检测、培养、药敏试验
7、WBC检测检测ESR检测检测CRP检测检测CRP与其他检测指标的比较与其他检测指标的比较病原体检测、培养、药敏试验病原体检测、培养、药敏试验缺点:缺点:1、需要专业的设备、条件和人员、需要专业的设备、条件和人员 2、结果往往、结果往往48小时以后出来小时以后出来 3、检出率不是很高、检出率不是很高幸运WBC检测检测缺点:1、敏感性差:升高较慢、幅度小,治疗有效后变化缓慢 2、影响因素众多:疾病初期,机体应激反应、剧烈运动、跑步、紧张、恐惧、妊娠、肾上腺皮质激素使用CRP在区分细菌和病毒感染方面能提供比WBC更精确的信息幸运ESR检测检测缺点:1、感染时变化缓慢,2-3天可见升高,至少2-3周恢
8、复正常 2、易受温度、贫血、血沉管位置、异常免疫球蛋白或复合物、药物等 影响骨髓炎病人抗生素治疗后30天内CRP、ESR变化幸运CRP与常用感染指标与常用感染指标WBC、ESR的比较的比较幸运三、超敏三、超敏CRP提高心血管病风险性预测的准确度提高心血管病风险性预测的准确度现有研究证实,未被细菌感染的健康人,体内CRP的低浓度值与动脉血栓危险性相关。超敏CRP被认为是心血管疾病危险评估的“金标准”。幸运现认为:正常人的CRP应1mg/L;若多次测试CRP2-3mg/L,这是炎症持续存在的信号,提示存在动脉粥样硬化危险。基本浓度2.1mg/L,相当于(1)初发心梗危险度增加2.9倍;(2)发生缺
9、血性中风危险度增加1.9倍;(3)发生严重外周动脉血管性疾病危险度增加4.1倍。四、超敏CRP为新生儿细菌感染诊断提供依据新生儿的CRP参考值比成人低,通常CRP 1-2mg/L;若CRP2mg/L,提示可能有败血症的存在。由于新生儿的细菌感染发展很快,没有足够时间产生大量CRP。幸运CRP浓度的解释检测结果(mg/L)临床应用建议 10.0病程大于6-12小时,可基本排除细菌感染或细菌已被清除 10.050.0如病程尚短,不能排除细菌感染,应数小时后复查50.0100.0常为细菌感染,病毒感染不常见100.0提示细菌感染,可排除病毒感染超敏CRP浓度的解释检测结果(mg/L)临床应用建议成人
10、1.0心血管疾病:低危险性1.03.0心血管疾病:中危险性3.0心血管疾病:高危险性新生儿2.0提示新生儿感染幸运五、结缔组织病 结缔组织病为多系统受累的自身免疫性疾病,包括系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿关节炎等多种疾病,尽管其病因、病理及临床表现和治疗各不相同,但自身免疫性炎症在其疾病发生和发展过程中均发挥重要作用。CRP作为一种急性期反应蛋白,在大多数结缔组织病(如类风湿关节炎、幼年特发性关节炎、系统性血管炎等)的活动期均可升高,CRP水平是类风湿关节炎早期关节破坏以及判断预后的重要预测指标之一。风湿四项:RF+ASO+ESC+CRP幸运5、CRP在不同临床疾病中的应用在不同临床疾病中的
11、应用脑膜炎脑膜炎 己经证实脑膜炎时检测CRP很有用处,因为它可以用来区别细菌或病毒感染,敏感性为96%,特异性93%,阴性预期值99%,其他实验室指标无一能达到此水平。CRP60mg/L提示为细菌性肺炎。幸运上颌窦炎上颌窦炎 流感杆菌是急性上颌窦炎的最常见病原菌,此时的CRP约为20mg/L;CRP40mg/L提示有可能为化脓性链球菌、肺炎链球菌感染。咽喉炎咽喉炎 测定CRP可以提高对咽喉部感染的诊断精度;细菌或非细菌性咽喉炎的CRP分界值约35mg/L。尿路感染尿路感染 CRP在区分一般的下尿道感染(膀胱炎)及较严重的上尿道感染(肾盂肾炎)时,是一个可靠的实验室指标。CRP大约100-140
12、mg/L提示肾盂肾炎幸运心肌梗死心肌梗死 广泛梗死时CRP平均160mg/L;局部梗死时CRP平均60mg/L。阑尾炎阑尾炎 若WBC和CRP均正常,则急性阑尾炎的可能性不大;未穿孔者CRP轻度增高,在20mg/L以上;约15%-25阑尾穿孔病人CRP100mg/L。幸运手术手术 术前CRP升高者,术后感染发生率远高于术前CRP不高者,前者住院日也显著大于后者。器官移植器官移植 器官移植后,CRP是个很有用的监测指标。移植后头3天升高,后即开始下降,如CRP不降可怀疑存在早期排异反应;推荐移植术前测每个患者的CRP基础浓度,作为移植后的参考,这样要比使用一个固定参考值准确得多。幸运例1:13岁
13、女孩,咽痛3天,虚弱,体温3839,基本情况良好,咽喉中度红肿 初步诊断:急性咽炎,病因不明 实验室检测:CRP8mg/L 测试后诊断:病毒性咽炎 开止痛片,多喝热茶,2天后热退病例幸运 37岁男性,腰部区域疼痛23天,体温38。病人职业是林业工人,经常暴露在湿冷的环境下,基本情况良好。触诊:后腰右侧痛 初步诊断:普通感冒,重体力劳动导致的腰痛 实验室检测:CRP 117mg/L 测试后诊断:急性肾盂肾炎 开诺氟沙星,9天后症状缓解,CRP 8mg/L例2:幸运结论CRP快速检测在确保诊断的正确性和治疗的有效性方面堪称一“完美工具”CRP检测快速准确、立等可取是临床得以广泛开展的重要原因减少了
14、不必要的抗生素使用和住院费用,节约经济,节省资源CRP快速检测在疾病进程监控,治疗效果监测方面作用重大最重要的是:医生能据此制定正确的治疗方案,患者能得到有效合理的治疗幸运检测线性及样本选择 目前禾柏的散射比浊Hs-CRP检测试剂盒线性范围是0.5200.0 mg/L 样本为2.5 l全血,末梢血或静脉抗凝血均可,使用抗凝血时注意混匀抗凝管,尤其是高血脂样本,抗凝剂可以是EDTA、枸橼酸钠和肝素钠保存条件可见试剂盒,使用前需要先复温。幸运糖化血红蛋白定义:是一种糖蛋白,是血红蛋白与血糖发生缓慢的、不可逆的、非酶促反应而形成的产物。主要成分是HbA1c,是血红蛋白亚基的N端与一个己糖相连构成的糖
15、蛋白。其比例与血糖浓度成正比,且保持120天左右,所以可以观测到120天之前的血糖浓度。糖化血红蛋白测试通常可以反映患者近812周的血糖控制情况。糖化血红蛋白糖化血红蛋白-HbA1cHbA1c的生物学特点:不受短期内或偶尔出现的血糖波动的影响,反映前两个月的平均葡萄糖水平抽血时间、是否空腹、是否使用胰岛素等因素对其干扰不大与血糖浓度、血糖与血红蛋白接触时间及红细胞存活时间相关幸运HbA1c的临床意义与应用:1)是国际公认的监测糖尿病的“金标准”2)评价血糖的总体控制情况血糖越高,糖化血红蛋白就越高,所以能反映血糖控制水平。如果患者经常监测血糖都显示控制较好,而糖化血红蛋白偏高,则需要考虑是否平
16、时监测血糖不够全面。3)鉴别糖尿病性高血糖及应激性高血糖前者糖化血红蛋白水平增高而后者正常。4)检验治疗方案是否有效如果某糖尿病患者定期监测糖化血红蛋白均在67,而最近一次为8.2,这表明以往的治疗方案已不能较好的控制血糖,需重新调整。幸运对正常人:4%-6%:正常值对糖尿病患者:6%-7%:控制理想 7%-8%:可以接受 8%-9%:控制较差 9%:控制很差,慢性并发症发生发展的危险因素,并有可能出现酮症酸中毒等急性合并症世界权威机构对于糖化血红蛋白有着明确的控制指标,ADA(美国糖尿病学会)建议糖化血红蛋白控制在小于7%,IDF(国际糖尿病联盟)建议糖化血红蛋白控制标准为小于6.5%,目前
17、我国将糖尿病患者糖化血红蛋白的控制标准定为6.5%以下。结果解释:幸运 糖化血红蛋白不能作为诊断糖尿病的依据,也不能取代糖耐量试验,可作为糖尿病的普查和健康检查的项目。对于不同的糖尿病患者,有的是需要控制餐后血糖,有的则是控制空腹血糖。同时测定血糖与糖化血红蛋白可以更好地全面判断病情,指导治疗。幸运 对昏迷病人的鉴别:在脑血管急症时,由于应激反应可使血糖增高,但糖化血红蛋白检测正常。若糖化血红蛋白增高预示患者处于高血糖状态。糖化血红蛋白很高的患者要警惕酮症酸中毒的发生。对妊娠糖尿病仅测定血糖是不够的,一定要监测糖化血红蛋白,并使其保持在8%以下。如此可避免巨大胎儿、死胎和畸形胎儿的发生。指导治
18、疗:如已测定了某病人的糖化血红蛋白,可推算出平均血糖的水平,再用推算值与同一标本的空腹血糖值对比,可预测出近期血糖控制的好坏。幸运特殊情况 1.如果一个糖尿病患者经常发生低血糖或高血糖,由于糖化血红蛋白是反映血糖的平均值,而其糖化血红蛋白完全有可能维持在正常范围,在这种情况下,它的数值就不能反映真正的血糖变化了。2.糖化血红蛋白还受红细胞的影响,在合并影响红细胞的质和量的疾病时,所测得的糖化血红蛋白可能反映不出真正的血糖水平。幸运检测线性及样本选择 目前禾柏的散射比浊Hs-CRP检测试剂盒线性范围是2.014.0%样本为10 l全血,末梢血或静脉抗凝血均可,使用抗凝血时注意混匀抗凝管,尤其是高
19、血脂样本,抗凝剂可以是EDTA、枸橼酸钠和肝素钠保存条件可见试剂盒,使用前需要先复温。幸运D-二聚体(D-Dimer)D-二聚体是纤维蛋白单体经活化因子XIII交联后,再经纤溶酶水解所产生的一种特异性降解产物,是一个特异性的纤溶过程标记物。D-二聚体来源于纤溶酶溶解的交联纤维蛋白凝块。因此,D-二聚体的血清含量直接反应了体内的纤维蛋白溶解功能。幸运 D-二聚体现在没有统一的国际标准。由于其类型多样,由于不同检测试剂只测定其中某种类型,而非降解片段的全部,因此各类试剂在对同一标本进行测定时,其敏感性显著不同。目前,30种检测方法(20余种单克隆抗体)被应用于临床,不同试剂间差异非常显著。禾柏的D
20、-二聚体试剂盒检测的参考值是01.35 mg/L幸运D-二聚体临床应用 只要机体血管内有活化的血栓形成及纤维溶解活动,D-二聚体就会升高。心肌梗死、脑梗死、肺栓塞、静脉血栓形成、手术、肿瘤、弥漫性血管内凝血、感染及组织坏死等均可导致D-二聚体升高。特别对老年人及住院患者,因患菌血症等病易引起凝血异常而导致D-二聚体升高。因此,D-二聚体主要用于阴性排查以及溶栓治疗的检测,最主要的临床价值是用于排除静脉血栓性疾病(如DVT和PE等)。D-Dimer的半衰期为6-8小时,当纤维蛋白形成终止后,D-Dimer可能在12-24小时内发生较大幅度的变化。幸运 对于血栓的排除还有其他一些方法,比如造影,诊
21、断DVT和PE的“金标准”,是最有效和直观的方法,但是造影对人体有一定侵入性伤害,并且对小血栓同样不能明确,收费也相对高昂。其他的方法,比如多普勒、白细胞和中性变化都有一定的局限性 检测血清D-二聚体水品简单便捷,价格低廉,特别适合普通人群的常规筛查。幸运D-二聚体检测溶栓治疗在溶栓治疗中,D-二聚体含量变化一般有以下特点:溶栓后D-二聚体含量在短期内明显上升,而后逐渐下降,提示治疗有效;溶栓后D-二聚体含量持续升高或下降缓慢,提示溶栓药物用量不足;溶栓治疗应持续到D-二聚体含量下降至正常范围。恢复正常的D-二聚体是停止溶栓的指征。幸运 1.弥漫性血管内凝血(DIC)的诊断:DIC时,由于广泛
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