洁净区微生物及卫生知识培训根据GMP版课件.ppt

1、洁净区微生物及卫生知识培训质保部12微生物基础知识微生物的污染与控制洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的监测微生物室简述目CONTENTS录34518:052Chapter1第一章微生物基础知识1.微生物的分类2.微生物的特点3.相关术语4.微生物与药品18:053微生物基微生物基础知识1.微生物的分类微生物定义：一类形态微小，结构简单，用肉眼难以看到，必须借助光学显微镜或电子显微镜才能看清的低等微小生物的系统。微生物第一章非细胞生物原核生物部分真核生物无细胞结构有细胞结构，但无细胞核有细胞结构，有细胞核病毒亚病毒细菌蓝藻支原体衣原体等霉菌、酵母菌藻类等18:054微生物基微生物基础知识微

2、生物的特点第一章体积小，比表面积大吸收多，转化快生长旺，繁殖速度快适应性强，易变异分布广，种类多微生物的微生物的特点点18:055微生物基微生物基础知识微生物的特点微生物按形态分类第一章金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、肺炎链球菌、脑膜炎球菌（大部分是G+也有G-）球菌大肠杆菌、鼠疫杆菌、双岐杆杆菌分为弧菌和螺菌：幽门螺杆菌、霍 乱 弧 菌、副 溶 血 弧 菌 菌（常见的益生菌）、结核分歧杆菌（生活在淡水或海水里）螺旋菌革兰氏阳性?细胞壁含肽聚糖多，脂类少。革兰氏阴性?细胞壁含肽聚糖少，脂类多。18:056微生物基微生物基础知识微生物的特点微生物按形态分类第一章球菌葡萄球菌链球菌双球

3、菌四联球菌八叠球菌球杆菌杆菌18:05链杆菌弧菌螺旋菌螺菌放线菌7微生物基微生物基础知识3.1菌落3.相关术语是由单个细菌（或其他微生物）、细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落。酵母细菌霉菌菌菌菌落菌落落单个或少数细菌细胞生第一章主要指丝状真菌。菌落特征与细菌相长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团。细菌的菌落特征可作为鉴定细往往能形成分枝繁茂的菌丝体，但又不像蘑菇那样产生大型的子实体。似，但比细菌菌落大而厚，菌落表面光滑、湿润、粘稠，易挑起，菌落颜色菌菌种的依据均一。18:05cfu：Colony-Form

4、ing Units（菌落形成单位）在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落，称为菌落形成单位，以其表达活菌的数量。8微生物基微生物基础知识3.2培养基3.相关术语第一章培养基是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的营养基质。A.营养因素水碳源氮源无机盐生长因子B.微生物生长的影响因素营养物18:05pH温度氧气渗透压9微生物基微生物基础知识微生物与药品微生物与药品第一章微生物的分 布极为广泛，它们在自然界的物质转换作用中，绝大多数数对人类人类是有有益的的，在制药工业中，有些药品和制剂，本 身就是微生物，如菌苗、疫苗、微生物制剂；有些 药品是以微

5、生物的代谢物作为原料或经其有效作用参与制药过程，如抗生素制剂、葡萄糖、氨基酸、从药品生产的卫生 学而论：微生物对药品原料、生产环境和 成品的污染，都是造成生产失败、成品不合格，直接或间接 对人类造成危害的重要因素。受到污染的 药品会引起使用者的感染甚至引起严重后果。注射了污染微生物的 针剂会导致局部感染或败血症；使用了污染的软膏或乳膏会引起皮肤和粘膜感染；服用了污染大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌的制剂会 导致肠道传染病的发生和 流行。受到微生物污染的 药品还可能产生化学和物理变化而变质，使药品失效或产生毒 害作用。药品中污染的微生物类型有 很多种，如细菌、霉菌、酵母菌、放线菌等。酶类制剂等。18:

6、0510Chapter2第二章微生物的污染与控制1.相关术语2.洁净室（区）污染来源3.GMP与微生物控制4.污染途径与预防手段5.污染来源与控制18:0511微生物的污染与控制微生物的污染与控制1.1污染1.相关术语第二章污染：指当某物与不洁净的或腐坏物接触或混合在一起使该物变得不纯净或不适用时，即受污染。1.2污染源污染源：指向环境排放或释放有害物质或对环境产生有害影响的场所、设备和装置。微生物传播污染的四大媒介：人、空气、水和表面。在无菌药品生产中人员带来的污染是最大的污染源。18:0512微生物的污染与控制微生物的污染与控制1.3微生物的污染?1.相关术语第二章定义：因微生物产生、附着

7、而给特定的环境带来的不良影响。微生物对药品、生产环境和成品的污染是造成生产失败、导致产品腐败变质。成品不合格的重要因素。0101自自身污染污染由于患者和员工自身携带微生物而污染。02020303040418:05接接触污染污染控制污染的途径：?有效地阻止室外的污染侵入室内；?迅速有效地排除室内已发生的污染；?控制污染源，减少污染发生量由于和非无菌的用具、机械或人的接触而污染。空气污染空气污染由于空气中所含微生物的沉降、附着或被吸入而污染。其他污染其他污染由于其他因素（如昆虫）而污染。13微生物的污染与控制微生物的污染与控制洁净室（区）污染来源第二章010203污染类型污染类型尘粒污染微生物污染

8、传播污染媒介传播污染媒介空气水造成污染的原因造成污染的原因原辅材料内包装材料残留物污染表面人员设备与容器生产环境操作人员生产过程18:0514微生物的污染与控制微生物的污染与控制洁净室（区）污染来源第二章风险：?通过气锁间传递；?在进入之前的消毒失效风险：?环境控制或屏障系统失控；?公用设施（气体、水等）失控风险：?手部的交叉污染?皮肤屑片的脱落与散布?不正确的穿着工作服?不正确的行为18:0515微生物的污染与控制微生物的污染与控制坐着不动能产生10万个颗粒走能产生500万个颗粒洁净室（区）污染来源第二章跑能产生1500万个颗粒18:0516微生物的污染与控制微生物的污染与控制GMP与微生物

9、控制3.与微生物控制第二章工艺卫生监测空气净化技术原料卫生清洁验证环境卫生监测生产环境卫生公用设备卫生辅料卫生包装材料卫生灭菌验证设备验证个人卫生监测厂房与房与设施机构与人员与人员体检管理物料物料设备工艺用水设备清洁验证验证生产生产管理理清洁规程质量控制量控制与与质量保证量保证微生物控制生产人员卫生卫生培训卫生管理规程防止污染、交叉污染的措施18:0517微生物的污染与控制微生物的污染与控制药品生产工艺过程中污染途径与预防手段污染途径与预防手段第二章污染途径污染途径污染物污染物的类型的类型危害程度危害程度无菌工艺无菌工艺要求要求程度程度预防手段预防手段容器、管道污染严重?几率大非无菌工艺：非无

10、菌工艺：无菌（无菌工艺）消毒消毒（非无菌工艺）?器具清洗、干燥或器具清洗、干燥或直接污染人员的手指无菌部件内包装材料?污染负荷高涉及范围广有可能整批报废灭菌灭菌设备容器密封设备容器密封清洁卫生操作清洁卫生操作?一般?操作间的空气操作人员的身体?几率小污染负荷低涉及范围小?18:06?区域的封闭控制区域的封闭控制人员的培训与更衣人员的培训与更衣高效过滤器高效过滤器区域的气流设计和区域的气流设计和控制控制日常的消毒与监控日常的消毒与监控间接污染消毒消毒18微生物的污染与控制微生物的污染与控制5.1 空气、压缩空气污染来源与控制第二章存在的微生物类型存在的微生物类型?产芽孢的细菌：杆菌属、梭菌属的菌

11、种?不产芽孢的细菌：葡萄球菌属、链球菌属?霉菌：青霉属、曲霉属的菌种?酵母菌：红酵母菌属的菌种来源来源影响因素影响因素监测方法监测方法措施与手段措施与手段过滤过滤尘埃人的皮肤人的体液衣服水滴附着的微粒大小浮游菌监测层流技术层流技术沉降菌监测化学消毒化学消毒表面微生物监测紫外线（紫外线（UV）空气湿度决定的沉降系数18:0619微生物的污染与控制微生物的污染与控制5.2 水污染来源与控制第二章存在的微生物类型存在的微生物类型?革兰氏阴性菌（98%）微球菌属来源来源原水软化水去离子水蒸馏水反渗透水分配系统影响因素影响因素监测方法监测方法措施与手段措施与手段化学法化学法原水质量?酵母菌真菌放线菌膜过

12、滤法水的处理与分配过滤法过滤法物理处理法物理处理法18:0620微生物的污染与控制微生物的污染与控制5.3 人员（皮肤与呼吸道）污染来源与控制第二章存在的微生物类型存在的微生物类型?金黄色葡萄球菌八叠球菌类白喉菌来源来源影响因素影响因素监测方法监测方法措施与手段措施与手段皮肤头发耳道分泌物不良操作习惯接触药物的几率个人卫生措施（个人卫生措施（?不动杆菌产碱菌亲脂的酵母菌真菌类的表皮癣菌、小芽胞癣菌、发癣菌洗涤、更衣、消洗涤、更衣、消卫生操作习惯卫生操作习惯接触皿法毒）毒）人员培训与考核人员培训与考核防护衣防护衣?浮生细菌（耳道）18:0621微生物的污染与控制微生物的污染与控制5.4 物料污染

13、来源与控制第二章存在的微生物类型存在的微生物类型?植物源性致病菌来源来源未经处理的物料影响因素影响因素物料处理的效率监测方法监测方法措施与手段措施与手段热处理热处理过滤过滤辐射辐射如：欧文菌、假单胞菌、乳酸菌、芽孢杆菌、链球菌、黑霉菌、链格菌、镰刀霉菌、无菌丝酵母菌等等物料操作中的污染，如取样、操作等储存条件微生物限度检查环氧乙烷环氧乙烷从灭菌溶剂再结从灭菌溶剂再结晶晶卫生操作卫生操作物料未保护，导致污染18:0622微生物的污染与控制微生物的污染与控制5.5 建筑、设备污染来源与控制第二章存在的微生物类型存在的微生物类型来源来源墙壁天花板影响因素影响因素材料选型监测方法监测方法措施与手段措施

14、与手段卫生设计卫生设计卫生材料卫生材料?霉菌：分歧孢子霉菌、曲霉菌地板排水门窗设备管道施工接触皿法清洁（清洁（SOP、清、清洁剂、消毒剂）洁剂、消毒剂）维护清洁验证灭菌灭菌清洗室设计清洗室设计洁净设计清洁工具清洁工具18:0623Chapter第三章洁净室（区）环境的控制31.洁净室（区）的简介2.洁净室（区）的布局图3.洁净室（区）的管理18:0624洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.1相关定义1.洁净室（区）的简介第三章?洁净室（区）：需要对悬浮粒子及微生物含量进行控制的房间（区域）。其建筑结构、装备及其使用均具有防止该区域内污染物的引入、产生和滞留的功能。?HVAC：Hea

15、ting,Ventilation and Air Conditioning或者Heating,Ventilation,Air-conditioning and Cooling的英文缩写，就是供热通风与空气调节。HVAC旨在：HVAC不能做什么？不能做什么？?确保人员的舒适性；?去除粒子不能对已污染的表面进行?保护设施内部人员和设施外部人员不受保证房间压差去除污染物清洁；空气中有害物质的危害；提供新鲜的空气?不能弥补操作人员不按程?保证产品质量；序操作带来的负面影响；?保证产品生产所要求的空气环境。?不能创造奇迹！制冷or采暖1826空气调节除湿or加湿4565%2518:06洁净室（区）环境的

16、控制洁净室（区）环境的控制1.1相关定义1.洁净室（区）的简介第三章?单向流（unidirectional airflow）：沿着平行流线，以一定流速、单一通路、单一方向流动的气流，曾被称为层流。?非单向流（nonunidirectional airflow）：具有多个通路循环特性或气流方向不平行的，不满足单向流定义的气流，曾被称为乱流。?送风口送风口：含静压箱，高效过滤器，散流板，在改建和新建各级洁净室，可作为终端高效过滤装置在洁净顶棚等处。?回风口回风口：回风用的。室内负荷一定时，需要给室内送的冷风量是一定的。室内风相对于新风来说，夏季温度一般较低，所以利用回风道回一些风进空调箱，跟少量新

17、风混后，制成冷风送入室内。相对于全部用新风制冷风来说，可以有效地节能。?排风口排风口：排风用的。18:0626洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.1相关定义1.洁净室（区）的简介第三章传递窗（Transfer window）：主要适用于洁净区与非洁净区之间，或洁净室与洁净室之间的小货物传递，可有效的减少洁净室门的开启次数，把洁净区的污染减少到最低程度。气锁室（air lock）：一般设置在洁净室的出入口，是用以阻隔外界污染气流和控制压差而设置的缓冲间，这些气锁室通过若干扇门对出入空间进行控制，同时还为穿/脱洁净服、消毒、净化等操作提供场所。18:0627洁净室（区）环境的控制洁净室

18、（区）环境的控制1.1相关定义1.洁净室（区）的简介第三章洁净度洁净度洁净室（区）的洁净度必须以悬浮粒子悬浮粒子尘粒和微生物为环沉降菌沉降菌洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径分的洁净程度。境控制对象。因为：1、存在范围广用于空气洁净度分级的空用标准（GB/T 16294）气 悬浮 粒子 尺寸 范围 在液体粒子。提及的方法收集空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。悬浮粒子的统计数量来区0.1m1000m的固体和二者相比，微生物更难控制。浮游菌浮游菌洁净工作服洁净工作服自净时间自净时间洁净室被污染后，净化空调系统开始运行至恢复到稳定的规定室内洁净度

19、等级的时间。2、生长速度快用标准（GB/T 16293）为把工作人员产生的粒子提及的方法收集悬浮在空限制在最小程度所使用的3、生存能力强气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。发尘量少的洁净服装。18:0628洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.1相关定义灭菌指杀灭或去除物体上所有微生物的方法，包括抵抗力极强的细菌芽胞。1.洁净室（区）的简介消毒杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法。通常用化学的方法来达到消毒的作用。用以消毒的药品称为消毒剂。第三章sterilizationdisinfection防腐利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生

20、长繁殖anticorrosive杀菌杀灭物体中的致病菌，物体中还含有芽孢、嗜热菌等非致病菌anticorrosive无菌指没有活菌的意思。防止细菌进入人体或其他物品的操作技术，称为无菌操作。sterile18:0629洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.2 HVAC工作原理简介1.洁净室（区）的简介第三章?利用过滤器有效地控制送入室内的全部空气的洁净度，由于细菌都会依附在微粒上，微粒过滤同时也滤掉了细菌；?利用合理的气流组织排除已经发生的污染，由送风口送入洁净空气，使室内产生的微粒和细菌被洁净空气稀释后强迫其由回风口进入系统的回风管路，在空调设备的混合段和从室外引入的经过过滤的新风

21、混合，再经过进一步过滤后又进入室内，通过反复的循环就可以把污染控制在一个稳定的水平上，这个水平就应该低于相应的洁净度级别；?通过调整，洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净区之间的压差不低于洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净区之间的压差不低于10帕帕，相同洁净度级别的不同功能操作间之间保持适当的压差梯度，防止污染或交叉污染。18:0630洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.2 HVAC工作原理简介1.洁净室（区）的简介第三章空气流量C级：25次/hD级：15次/h换气次数C、D级：非单向流A级：单向流空气流型气流方向空调系统排风位置房间压力空气速率A级：0.360.54m/s过滤效率1

22、8:0631洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.3洁净室（区）的特点1.洁净室（区）的简介第三章?表面光滑、易于清洁、无死角；?不同洁净度级别的房间有足够的压差；?天花板密封；?A级区无地漏、其他区域地漏应液封?设置更衣室；?更衣室的洁净度级别与高级别的房间相同?门设计成连锁；?HVAC系统有报警装置；?气流流型有效。18:0632洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制1.4洁净室（区）分级1.洁净室（区）的简介第三章A级|B级|高风险操作区，应当用单向流操作台（罩）维持该区域的环境状态。单向流系统在其工作区域必须均匀送风。（0.360.54m/s）高风险A级洁净区所处的背景

23、区域CD|18:06无菌药品生产过程中重要程度较低操作步骤的洁净区33洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制2.1洁净室（区）布局图洁净厂房洁净室（区）的布局图第三章18:0634洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制2.2洁净室（区）布局图微生物室洁净室（区）的布局图第三章清洗灭菌室?培养基的配制、灭菌；污染物的处理、灭菌；平皿、三角瓶的洗刷；器皿的晾干微生物限度室?对试样进行微生物限度检查；?培养基平板制备；?致病菌检查时的初步增菌试验；?限度检查方法学验证试验?阳性对照试验；菌种的传代等；增菌培养后的检查；培养基适用性检查微生物阳性室培养室生化室18:06?增菌及培养?微生物

24、计数及结果观察；?菌种保存；?已灭菌培养基的储存35洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3 洁净室（区）的管理3.1洁净室（区）卫生3.1.1消毒方法第三章?物理消毒：机械、热力、辐射（紫外和电离）化学消毒：含氯化合物（漂白粉、次氯酸钙、二氧化氯、二氯异氰尿酸钠等）、醇类（75%乙醇）、酸类（乳酸）、过氧化物类（过氧乙酸、过氧化氢、臭氧等）物理消毒?清洁工具如拖布、擦布等?紫外灯照射等化学消毒?0.1%新洁尔灭溶液（临用现配）?75%乙醇溶液（保存期一周）18:0636洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3 洁净室（区）的管理3.1洁净室（区）卫生3.1.2灭菌方法第三章?常用

25、的灭菌方法有湿热灭菌法、干热灭菌法、辐射灭菌法、气体灭菌法和过滤除菌法。?只要物品允许，应尽可能选用最终灭菌法灭菌。?湿热灭菌法应确认灭菌柜在不同装载时可能存在的冷点。当用生物指示剂进一步确认灭菌效果时，应将其置于冷点处。本法常用的生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子。?微生物室常用的灭菌方式是湿热灭菌法，灭菌条件有 12115min和12130min。18:0637洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3 洁净室（区）的管理3.2进出管理第三章人员：?只允许经过批准并受过专门训练的工作人员进入洁净区，进入洁净区的人员不得化妆，不得佩戴饰物。?工作人员首先在入口处换上专用洁净鞋，进入一更，脱

26、去普通工作服，洗手进入二更。?自上而下穿戴好相应洁净级别的口罩、工作服、工作鞋，进入缓冲间，用75%乙醇消毒双手及手腕部，方可进入洁净室。?工作结束后，进入二更 自下而上脱掉洁净工作鞋、工作服、口罩，折好放入布袋中。?进入一更，穿上普通工作服，在入口处脱下专用洁净鞋，方可走出洁净区。物品：?物品由一般区进入洁净区时，先将物品用浸润75%乙醇的擦布擦拭干净，将一般区传递窗打开，把物品放入传递窗中，将门关闭。打开传递窗紫外灯照射消毒 30分钟，关闭紫外灯后，方可从洁净区内将传递窗打开，取出物品，将门关闭。?物品由洁净区传递至一般区时，将洁净区传递窗打开，把物品放入传递窗中，将门关闭。从一般区将传递

27、窗打开，取出物品，将门关闭。?不能通过传递窗进入洁净区的大的物品，先要在一般区清洁干净，然后在缓冲间内进一步用 75%乙醇擦拭消毒后，再搬进洁净室。18:0638洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3 洁净室（区）的管理3.2进出管理3.2.1进出一般区第三章进出洗操走廊换鞋手更衣作工序3.2.2进出洁净区进走廊脱（穿）鞋脱（穿）衣洗手出18:06穿（脱）洁净服手消毒操作工序39洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3 洁净室（区）的管理3.3清洁、消毒方法清洁内容清洁内容清洁方法清洁方法清洁周期清洁周期清洁剂、消毒剂清洁剂、消毒剂第三章地面、墙湿拖、擦1次天走 廊洗衣房水池、清

28、洁工具、地漏洁净区清洁卫生管理规程湿擦、水冲1次天更衣室清洁房顶湿擦1次周间衣柜、门窗及相关设施湿擦1次周?正常生产情况下，洁净区的清洁内容和频率见附表。湿拖、擦1次天器具清洗间地面、墙湿擦、水冲1次天器具存放间水池、清洁工具、地漏?长期停产的房间必须经彻底清洁并消毒后方可使用。内包材暂存托盘、运输车、秤、吸尘湿擦1次天间原料暂存 器间中间站等门窗及相关设施?生产工序彻底清场后需用消毒剂全面消毒，每周一次。生产前再用湿擦1次周房间房顶湿擦1次周地面、墙湿拖、擦。1次天75%乙醇对接触物料的设备、器具表面消毒生产操作间门窗及相关设施湿擦1次天房顶及相关设施湿擦1次/周?大扫除：彻底清洗地板、墙、

29、房顶、电气设备、窗、固定和可移动清洁工具消毒1次/周消毒剂1或3消毒1次/周消毒剂1或3整个级区墙、房顶及相关设施设备，每年至少4次。在大扫除期间，不得进行生产。水池、地漏、地框消毒每天生产结束后消毒剂2或3消毒剂1、75%乙醇；2、0.5%醋酸洗必泰，3、0.1新吉尔灭。18:0640洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3 洁净室（区）的管理3.4常用的清洁剂、消毒剂3.4.1清洁剂洗洁精管道，设备油渍处理；地板，墙面的油渍处理；洁净区工作服、帽、鞋的洗涤，拖布的洗涤；视污渍严重程度予以稀释使用。高效洁厕灵各种陶瓷制品表面清洁；不得用于搪瓷表面清洁第三章ABCD1%氢氧化钠溶液供设备

30、、管道等清洗用玻璃清洗剂玻璃，瓷表面的清洁；喷雾至玻璃上揩擦皂液、洗涤剂、洗衣粉溶液：按说明书使用E18:0641洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3 洁净室（区）的管理3.4常用的清洁剂、消毒剂3.4.2消毒剂0.1%新洁尔灭：与普通肥皂或肥皂粉接触时能使灭菌效果消除或减弱，因此必须用水充分清洗后使用。第三章AB75%乙醇：储存在加锁的房间内，避开日光直射和热源0.5%醋酸洗必泰：贮存在加锁的房间内，避开日光和热源。供地漏消毒用含0.5%醋酸洗必泰的75%乙醇液：贮存在加锁的房间内，避开日光和热源。供洁净室和设备消毒用CDE3%双氧水：兼有洁净和 杀菌作用，可用于洁净室生产用具和

31、设备的清洗和消毒灭菌18:06消毒剂的配制区域：根据使用区域，一般区直接在使用地点或清洗间配制，洁净区在清洗间配制。42洁净室（区）环境的控制洁净室（区）环境的控制3 洁净室（区）的管理3.5关键控制参数第三章控制参数控制参数影响影响影响产品工艺条件和细菌的繁殖条件、由操作舒适度带来的对产品质量的影响温度()和相对湿度(%)换气次数(次/h)影响洁净度和人员舒适度第五十三条 产尘操作间（如干燥物料静压差(pa)或产品的取样、称量、混合、包装等影响洁净度操作间）应保持相对负压或采取专门3)悬浮粒子(粒/m主要影响产品纯度的措施，防止粉尘扩散、避免交叉污微生物限度(cfu/皿)影响产品质量、交叉污

32、染和无菌程度染并便于清洁。照度(lux)影响产品的工艺条件（课件异物检测）系统自净时间(t)代表洁净室系统的洁净状态的“恢复能力”18:0643Chapter第四章洁净室（区）环境的监测41.环境监测简述2.环境监测相关术语3.环境监测标准及频率4.环境监测操作步骤简述18:0644洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测环境监测的目的1 环境监测简述第四章?药品制造厂房洁净生产区和其他控制过程都是药品生产保证程序中的一个 重要部分重要部分。?环境监测是用于评价生产环境控制效果的一种工具。?环境监测的数据是用来评价清洁与灭菌程序的有效性。第四章 厂房与设施第二节 生产区第四十八条应当根据药

33、品品种、生产操作要求及外部环境状况等配置空调净化系统，使生产区有效通风，并有温度、湿度控制和空气净化过滤，保证药品的生产环境符合要求。第九章 生产管理第二节 防止生产过程中的污染和交叉污染第一百九十八条应定期检查防止污染和交叉污染的措施并评估其适用性和有效性。18:0645洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测环境监测的必要性1 环境监测简述第四章质量符合性法规符合性降低质量成本满足供应充分利用产能缩短放行周期18:0646洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测环境监测相关术语第四章相关相关术语警戒限限超出关键参数的正常工作范围，应采取调查和纠偏措施以防止达到纠偏限度。纠偏限限当超

34、出某一关键参数的可接受标准，应进行调查并采 取纠偏措施。18:0647洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测环境监测相关术语第四章测试测试状态态静态：静态a：洁净室（区）在净化空气调空态：节系统已安装完毕且功 能完备的情动态：洁净室（区）在净化空气调节系统况下，生产工艺洁净室（区）已处 设备于正 已 常生产安装、洁净状态已安装完毕且功能完备的情况下，室（区）内，设备在指没定的方有生产人员的式下进行，并状态。且但是没有生产设备、原材料或人员静指有态定的人员按b：洁净室（区）在生产操作照规范操作。全的状态。部结束，生产操作人员 撤离现场并经过20min自净后。010203空态静态动态18:0

35、648洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测3.环境监测标准及频率air cleanliness class洁净空间单位体积空气中，以大于或等于被考虑粒径的粒子最大浓度限值进行划分的等级标准。悬浮粒子最大允许数悬浮粒子最大允许数5m（静（静态）态）20292900第四章洁净度等级洁净度等级洁净度级别洁净度级别A级B级C级悬浮粒子最大允许数悬浮粒子最大允许数0.5m（静态）（静态）35203 520035 2000D级洁净级别A级B级C级352 0000沉降菌cfu/4小时（动态）15501002 9000浮游菌cfu/m3（动态）110100200沉降菌18:06浮游菌洁净度级别A级B级

36、C级D级D级49洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测3.环境监测标准及频率第四章洁净级别气流组织空气流速换气次数压差温度相对湿度标准单向流非单向流非单向流频率24个月标准0.360.54m/s频率12个月标准频率标准洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净区之间的压差不小于10Pa频率标准频率标准频率A级C级D级2040/h620/h12个月12个月每周一次1826每次实验4565%每次实验引自中国药典2015年版18:0650洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测3.环境监测标准及频率空气悬浮粒子浮游菌标准cfu/m3警戒限/纠偏限频率（动态）标准cfu/4小时小时沉降菌警戒限/纠偏

37、限第四章洁净级别A级分类层流净化台限度室、阳性室微生物室辅助间操作间辅助间标准频率（静态静态）频率（动态）见下表见下表见下表见下表见下表每月每月每季度每季度每半年每半年每季度每季度每半年每半年11001002001/150/7050/70100/140每月每月每季度每季度每半年每半年每季度每季度每半年每半年150501001/125/3525/3550/70每次实验每次实验每季度每季度每半年每半年每季度每季度每半年每半年C级D级悬浮粒子最大允许数/立方米静态洁净度级别标准A级C级D级18:0635203520000.5m警戒限/纠偏限1700/240017000/24000标准2029005.

38、0m警戒限/纠偏限10/141400/200014000/20000标准35203520000不作规定0.5m警戒限/纠偏限不监测1700000不作规定标准2029000不作规定动态5.0m警戒限/纠偏限不监测14000不作规定3520000 170000/2400002900051洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测环境监测操作步骤简述4.1洁净区环境监测第四章悬浮粒子沉降菌浮游菌?采样时，带浮游微生物的仪器：CLJ-E301型激光尘采用沉降法，即通过 自然010203悬浮粒子埃粒子计数器。沉降空气高速通过微孔，被均匀原理收集在空气中的生?将悬浮粒子计数器表面消物粒子于培养基平皿，经

39、若撞击在培养皿内的琼脂表面；沉降菌毒后，放入物料缓冲间。干时间，在适宜的条件下让这些活体微生物在琼脂表面?检测人员按人员进入洁净其繁殖到可见的菌落进行计获得营养均匀和充分，在培浮游菌区的要求穿好相应级别洁净数，以平板培养皿中的菌落养过程中，快速发生动态再服，戴好口罩进入洁净室。数来判定洁净环境内的活微水化过程，高速生长，从而生物数，并以此来评定洁净更快得出结果。室（区）的洁净度。18:06悬浮粒子计数器原理示意图52洁净室（区）环境的监测洁净室（区）环境的监测环境监测操作步骤简述4.2测试时间?在空态或静态a测试时，对单向流洁净室（区）测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于10min后开始

40、。对非单向流洁净室（区）测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。在静态b测试时，对单向流流洁净室（区）测试宜在生产操作人员撤离现场并经过10min自净后开始。对非单向流洁净室（区），测试宜在生产操作人员撤离现场并经过20min自净后开始。在动态测试时，应记录生产开始的时间以及测试时间。C、D级空态或静态aA级静态bC、D级人员撤离后，净化至少20分钟后人员撤离后，净化至少10分钟后净化至少30分钟后第四章?18:0653Chapter5第五章微生物室简述1.微生物洁净室简介2.微生物室管理3.相关工作18:0654微生物室微生物室简述1.1洁净室分布1.微生物洁净室简介第五

41、章中国药典2015年版 非无菌产品微生物限度检查限度检查室用于检查非 无菌制品 受微生物污染的程度。检查项目包括 需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、大肠埃希菌、沙门菌等。阳性对照室用于对菌种的 处理，以及阳性对照试验等。18:0655微生物室微生物室简述1.2产品检测项目项目性状鉴别溶液的澄清度与颜色氯化物干燥失重炽灼残渣钙盐铅执行标准中国药典2015年版四部企业标准执行标准中国药典2015年版四部1.微生物洁净室简介第五章项目性状鉴别酸度淀粉氯化物干燥失重炽灼残渣铁盐重金属砷盐含量企业标准重金属砷盐黏度pH值微生物限度微生物限度18:0656微生物室微生物室简述1.2产品检测项目1.微生物洁净室

42、简介第五章微生物限度检查：微生物限度检查：01微生物计数用于能在有 氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数需氧菌菌总数计数数计数胰酪大豆胨 琼脂培养基胰酪大豆胨液 体培养基霉菌和菌和酵母菌菌总数计数数计数沙氏葡萄糖 琼脂培养基大肠埃埃希菌检查菌检查胰酪大豆胨液 体培养基麦康凯液体培养基麦康凯琼脂培养基沙门菌检查门菌检查胰酪大豆胨液 体培养基RV沙门菌增菌液体培养基木糖赖氨酸脱氧胆酸盐 琼脂培养基三糖铁琼脂培养基020304控制菌检查18:06用于在规定的试验条件下，检查供试品种是否存在特定的微生物57微生物室微生物室简述1.3相关术语1.微生物洁净室简介第五章01010202复壮复壮Rejuven

43、ation对已衰退的菌种(群体)进行纯种分离和选择性培养，使其中未衰退的个体获得大量繁殖，重新成为纯种群体的措施。培养培养Culture在实验室条件下，以人工使纯菌种大量生长和繁殖的方法，叫做培养。030304040505接种接种Inoculation按无菌操作技术要求将目的微生物移接到培养基质中的过程。无菌操作菌操作Aseptic technique用于防止微生物进入人体组织或其它无菌范围的操作技术称为无菌操作。在各种生物实验中,为了防止微生物地生长和繁殖影响实验的进行,也要在无菌的环境下进行。阳性对照阳性对照Positive control加入不大于100cfu的对照菌，按供试品检查。阳性

44、对照试验应检出相应菌.18:0658微生物室微生物室简述2.1非洁净区管理微生物室管理第五章与检验中心其他区域类似。?新员工和转岗人员由所在岗位负责人具体培训，原则上三个月后进行岗位技能鉴定，合格后方可签字，岗位技能鉴定由岗位负责人和部门负责人进行。?实验人员进入实验室应更衣、换鞋，着装整齐，工作服、鞋保持清洁，严禁将食品带入实验室。每天晨会后，进行卫生的清扫。实验过程中，保持实验区域包括操作面、房间、实验走廊的卫生。实验结束后及时进行后清场。非本区域工作人员，在未经部门负责人批准前禁止进入实验区域。18:0659微生物室微生物室简述2.2洁净区管理微生物室管理第五章环境环境微生物限度室和阳性

45、室应为C C级条件下级条件下 局部部 级级单向流空气区域空气区域。室内 温度控制在1 1826，相对湿度，空气洁净级别不同的相邻房间之间的静压差、洁净室（区）与室外 大气的静压差应大于10。室内紫外线杀菌灯的使用寿命为1000 小清场清场进入洁净区前保证紫外灯和洁净区空每周至少一次对洁净区进行全面清洁和消毒，用 浸有消毒 液的毛巾擦遍各 房间六面、墙角等后，打开紫外灯照射 30分钟，完毕后填写 实验室洁净区消毒记录，按照相应的环境监测 规程进行环境监测。气过滤器工作至少一个小时，进入操作室后先打开净化台开关，运行2030分钟，同时用0 1 新洁尔灭、酒精或其它适宜消毒液（消毒剂每月更换一次）擦

46、拭操作台面、仪器，同时观察记录温度、相对湿度及压差。每次操作完毕后将实验物品通过传递窗一并移出洁净区，然后进行后清场，清洁操作台面、仪器、地面，达到无积水无杂物。检查时（或根据 厂家说明书 时间为准），根据 累积使用时间进行更换，填写紫 外灯使用记录，并由专人于每月确认各项仪器设备处于停止状态并断电。人员离开操作室前对操作台面、仪器、地面进行擦拭消毒，所有操作人员离开后，打开紫外灯开关，照射30分钟，填写实验室洁净日之前汇总上月紫外灯使用累积时间。18:06区清场记录。60微生物室微生物室简述3.相关工作概述1.产品、工艺用水等微生物限度检查产品、工艺用水等微生物限度检查；2.洁净室（区）的环

47、境监测洁净室（区）的环境监测；3.培养基适用性检查；4.微生物检查方法适用性检查试验；第五章5.微生物检验相关仪器的验证；6.菌种的复壮与传代；7.培养基、菌种的储藏；8.部分菌种的鉴别 相关工作18:0661微生物室微生物室简述3.1微生物计数法3.相关工作概述第五章产品1需氧菌总数结胰酪大豆胨琼脂培养基R2A琼脂培养基沙氏葡萄糖琼脂培养基产品2霉菌和酵母菌总数3035培养35天3035培养不少于5天2025培养57天果观察纯化水生活饮用水需氧菌总数18:0662微生物室微生物室简述3.2控制菌检查3.相关工作概述第五章增菌培养胰酪大豆胨液体培养基30351824h选择培养麦康凯液体培养基42442448h鉴别培养麦康凯琼脂培养基结果大肠埃希菌产品1产品2沙门菌胰酪大豆胨液体培养基30351824h观察30351824hRV沙门菌增菌液体培养基木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基30351848h三糖铁琼脂培养基18:066318:0664