食品微生物第十二章常见致病G-资料课件.ppt

1、第十二章第十二章 常见革兰氏阳性致病菌常见革兰氏阳性致病菌基本内容基本内容:葡萄球菌（金黄色葡萄球菌）、葡萄球菌（金黄色葡萄球菌）、单核细胞增生李斯特氏单核细胞增生李斯特氏菌和蜡样芽孢杆菌的菌和蜡样芽孢杆菌的基本生物学特性，来源、分布及传播基本生物学特性，来源、分布及传播途径，导致的常见疾病（症状和致病机理），常用检测方途径，导致的常见疾病（症状和致病机理），常用检测方法，预防和控制方法。法，预防和控制方法。重点和难点重点和难点:金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌和蜡样芽单核细胞增生李斯特氏菌和蜡样芽孢杆菌的生物学特性，常见病症状和致病机理，检测方法。孢杆菌的生物学特性，常

2、见病症状和致病机理，检测方法。第一节第一节 葡萄球菌和金黄色葡萄球菌病葡萄球菌和金黄色葡萄球菌病一、概述一、概述18801880年，巴斯德首次从一患者瘀肿的脓汁中发现葡年，巴斯德首次从一患者瘀肿的脓汁中发现葡萄状排列的细菌，将其注射给家兔后可致脓疮；萄状排列的细菌，将其注射给家兔后可致脓疮；18831883年，年，BeckerBecker获得了纯培养，获得了纯培养，证实该菌为葡萄球菌属；证实该菌为葡萄球菌属；18811881年，年，OgstenOgsten确证化脓过程确证化脓过程是是“某某”菌所致；菌所致；一、概述一、概述葡萄球菌（葡萄球菌（Staphylococcus)因因堆聚成葡萄串状而得

3、名，为最堆聚成葡萄串状而得名，为最常见的化脓性球菌；常见的化脓性球菌；葡萄球菌属在分类地位上属于葡萄球菌属在分类地位上属于微球菌科微球菌科的一个的一个属属（目前有（目前有32种，寄生人体的有种，寄生人体的有16种），大部分为非种），大部分为非致病菌，少数可导致疾病。致病菌，少数可导致疾病。葡萄球菌是医院交叉感葡萄球菌是医院交叉感染的重要来源。染的重要来源。金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌（S.aureus)表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌（S.epedermidis)葡葡萄萄球球菌菌属属腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌（S.saprophyticus)根据生理生化特性及细胞结构成分根据生理生化特性及细胞结构成分金

4、黄色葡萄球菌为最常见致病菌金黄色葡萄球菌为最常见致病菌一、概述一、概述美国美国CDCCDC报道：美国由报道：美国由金黄色葡萄球菌肠毒素金黄色葡萄球菌肠毒素引引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%33%，加加拿大为拿大为45%45%；我国和其它国家也有类似的情况。我国和其它国家也有类似的情况。金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)在在自然界中无处不在，空气、土壤、水、饲料、自然界中无处不在，空气、土壤、水、饲料、食品、灰尘及人和动物的排泄物中均可找到；食品、灰尘及人和动物的排泄物中均可找到；一、概述一、概述二、葡萄球菌的基

5、本特性二、葡萄球菌的基本特性2.1 2.1 形态结构形态结构 葡萄球菌呈球形或稍呈椭圆形，直径葡萄球菌呈球形或稍呈椭圆形，直径0.40.41.2m1.2m，分裂后许多菌体无规则的堆积，分裂后许多菌体无规则的堆积在一起，成葡萄串状。在一起，成葡萄串状。葡萄球菌无鞭毛，不能葡萄球菌无鞭毛，不能运动。无芽胞，除少数菌株运动。无芽胞，除少数菌株外外一般不形成荚膜一般不形成荚膜。易被常。易被常用的碱性染料着色，革兰氏用的碱性染料着色，革兰氏染色为阳性。染色为阳性。二、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性(2.1 形态结构）形态结构）其衰老、死亡或被白细胞吞噬后，以及耐药的其衰老、死亡或被白细胞吞噬后

6、，以及耐药的某些菌株可被染成革兰氏阴性。某些菌株可被染成革兰氏阴性。二、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性2.2 2.2 培养特征培养特征 营养要求不高，普通琼脂培养营养要求不高，普通琼脂培养基上生长良好，形成圆形凸起，边基上生长良好，形成圆形凸起，边缘整齐，表面光滑，湿润，不透明缘整齐，表面光滑，湿润，不透明的菌落。的菌落。在含有血液和葡萄糖的培养基中生长更佳。在含有血液和葡萄糖的培养基中生长更佳。在肉汤培养基中在肉汤培养基中24h后呈均匀混浊生长。后呈均匀混浊生长。需氧或兼性厌氧，少数专性厌氧。需氧或兼性厌氧，少数专性厌氧。不同种的菌株产生不同的色素，不同种的菌株产生不同的色素，色素

7、为色素为脂溶性脂溶性，如金黄色、白色、，如金黄色、白色、柠檬色。柠檬色。血琼脂平板上形成的菌落较大，血琼脂平板上形成的菌落较大，有的菌株菌落周围形成明显的全透有的菌株菌落周围形成明显的全透明溶血环（明溶血环（溶血），也有不发生溶血），也有不发生溶血者。溶血者。凡溶血性菌株大多具有致病性凡溶血性菌株大多具有致病性。二、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性（2.2 培养特征）培养特征）金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（溶血）溶血）表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌 28-38 28-38均能生长，致病菌最适温度均能生长，致病菌最适温度为为3737，pHpH为为4.5-9.84.5-9.8，最适为，最适为7

8、.47.4；二、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性（2.2 培养特征）培养特征）在含有在含有202030%CO30%CO2 2的环境中培养，可产的环境中培养，可产生大量毒素。生大量毒素。耐盐性强，在含有耐盐性强，在含有101015%15%的的NaClNaCl培养培养基中能生长；基中能生长；二、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性2.3 2.3 生理生化特性生理生化特性主要性状主要性状金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌葡萄糖分解葡萄糖分解麦芽糖分解麦芽糖分解蔗糖分解蔗糖分解分解甘露醇分解甘露醇（极少）（极少）（极少）（极少）溶血素溶血素、（极少

9、）（极少）耐热核酸酶活性耐热核酸酶活性细胞壁中蛋白细胞壁中蛋白A各种葡萄球菌的主要生理生化特性各种葡萄球菌的主要生理生化特性主要性状主要性状金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌色素颜色色素颜色主要为金黄色主要为金黄色主要为白色主要为白色主要为柠檬色主要为柠檬色产血浆凝固酶产血浆凝固酶磷壁酸类型磷壁酸类型核糖型醇核糖型醇甘油型甘油型甘油型甘油型杀白细胞素杀白细胞素噬菌体分型噬菌体分型多数能分型多数能分型不能分型不能分型不能分型不能分型致病性致病性强强弱或无弱或无无无各种葡萄球菌的主要生理生化性状各种葡萄球菌的主要生理生化性状（续表续表）二、葡萄球菌的基本特

10、性二、葡萄球菌的基本特性（2.3 生理生化特性）生理生化特性）二、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性（2.3 生理生化特性）生理生化特性）注：注：“”为阳性，为阳性，“”为阴性。为阴性。主要性状主要性状金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌MR试验试验V-P试验试验弱阳性弱阳性弱阳性弱阳性弱阳性弱阳性分解精氨酸产氨分解精氨酸产氨多数分解多数分解多数分解多数分解多数分解多数分解水解尿素水解尿素多数分解多数分解多数分解多数分解分解或不分解分解或不分解还原硝酸盐还原硝酸盐多数还原多数还原多数还原多数还原多数还原多数还原吲哚试验吲哚试验明胶液化明胶液化各种葡

11、萄球菌的主要生理生化性状各种葡萄球菌的主要生理生化性状（续表续表）二、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性2.4 2.4 抗原结构抗原结构 葡萄球菌抗原结构复杂，已发现的有葡萄球菌抗原结构复杂，已发现的有30种以上，种以上，对其活性及组成比较了解的有以下几种：对其活性及组成比较了解的有以下几种：2.4.1 葡萄球菌葡萄球菌A蛋白蛋白（Staphylococcal protein A，SPA)SPA是存在于是存在于90%以上的金黄色葡萄球菌细以上的金黄色葡萄球菌细胞壁表面的一种蛋白质，胞壁表面的一种蛋白质，是一种单链多肽，与细是一种单链多肽，与细胞壁肽聚糖共价连接，但有胞壁肽聚糖共价连接，但

12、有1/3分泌于胞外。分泌于胞外。SPA SPA为完全抗原，具有特为完全抗原，具有特异性，它可与人异性，它可与人IgG1IgG1、IgG2IgG2和和IgG4IgG4的的FcFc段发生非特段发生非特异性结合。异性结合。具有与吞噬细具有与吞噬细胞竞争胞竞争FcFc段复合物、促细胞段复合物、促细胞分裂、引起超敏反应、损伤分裂、引起超敏反应、损伤血小板等多种生物活性。血小板等多种生物活性。二、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性（2.4 抗原结构）抗原结构）所有来自人类的菌株均有此抗原，动物源株则少见。所有来自人类的菌株均有此抗原，动物源株则少见。二、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性（2.

13、4 抗原结构）抗原结构）2.4.2 2.4.2 多糖抗原多糖抗原 多糖抗原为半抗原，有多糖抗原为半抗原，有两种两种，具群特异性，具群特异性，可用以分可用以分群群。A A群多糖抗原多存在于金黄色葡萄球菌，其群多糖抗原多存在于金黄色葡萄球菌，其化学组成为化学组成为N-N-乙酰葡萄糖胺核糖醇磷壁酸（乙酰葡萄糖胺核糖醇磷壁酸（多多糖糖A A）。）。B B群多糖抗原多存在于表皮葡萄球菌，化学群多糖抗原多存在于表皮葡萄球菌，化学组成是组成是N-N-乙酰葡萄糖甘油型磷壁酸（乙酰葡萄糖甘油型磷壁酸（多糖多糖B B）。）。二、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性（2.4 抗原结构）抗原结构）2.4.3 荚膜

14、抗原荚膜抗原 主要为金黄色葡萄球菌菌主要为金黄色葡萄球菌菌株的表面抗原株的表面抗原。几乎几乎所有所有金黄色葡萄球菌菌株表面都金黄色葡萄球菌菌株表面都有荚膜抗原的存在，有荚膜抗原的存在，个别个别表皮葡萄球菌菌表皮葡萄球菌菌株有此抗原。株有此抗原。二、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性2.5 2.5 抵抗力抵抗力 葡萄球菌抵抗力较强，葡萄球菌抵抗力较强，为不形成芽孢的细菌中最为不形成芽孢的细菌中最强者强者。在干燥的脓汁或血液中可存活数月；在干燥的脓汁或血液中可存活数月；8080加热加热30 30 minmin才能将其杀死，煮沸可迅速使其死亡；在才能将其杀死，煮沸可迅速使其死亡；在5%5%石炭

15、石炭酸或酸或0.1%0.1%汞中汞中101015min15min死亡。死亡。对某些染料较敏感，对某些染料较敏感，1100 0001100 0001200 0001200 000稀稀释的龙胆紫溶液能抑制其生长；对磺胺类药物的敏感释的龙胆紫溶液能抑制其生长；对磺胺类药物的敏感较低，对青霉素、红霉素和庆大霉素高度敏感。较低，对青霉素、红霉素和庆大霉素高度敏感。葡萄球菌肠毒素葡萄球菌肠毒素是一种是一种外毒素外毒素，具耐热性，经具耐热性，经100100加热加热30min30min而不而不被破坏，要使其完全破坏需煮沸被破坏，要使其完全破坏需煮沸2h2h（葡萄球菌肠毒素的特点葡萄球菌肠毒素的特点）；）；二、

16、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性（2.5 抵抗力）抵抗力）其他如溶血素、杀白血球素等经其他如溶血素、杀白血球素等经100100加加热热10min10min或或8080加热加热20min20min就可丧失毒性。就可丧失毒性。二、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性2.6 2.6 金黄色葡萄球菌噬菌体型金黄色葡萄球菌噬菌体型 依据：依据：绝大多数金黄色葡萄球菌可被相绝大多数金黄色葡萄球菌可被相应的噬菌体裂解。应的噬菌体裂解。根据噬菌体对金黄色葡萄球菌菌株的裂根据噬菌体对金黄色葡萄球菌菌株的裂解反应，可将金黄色葡萄球菌分为解反应，可将金黄色葡萄球菌分为5群群26型型（见下表）：（见下表）

17、：二、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性（2.6 金黄色葡萄球菌噬菌体分型）金黄色葡萄球菌噬菌体分型）群群噬噬 菌菌 体体 型型29、52、52A、79、803A、3B、3C、55、716、7、42E、47、53、54、70、73、75、77、83A、84、8542D混合混合81、187金黄色葡萄球菌噬菌体分型金黄色葡萄球菌噬菌体分型二、葡萄球菌的基本特性二、葡萄球菌的基本特性（2.6 金黄色葡萄球菌噬菌体分型）金黄色葡萄球菌噬菌体分型）肠毒素型食物中毒主要是由肠毒素型食物中毒主要是由、群群的的金黄色葡萄球菌引起；金黄色葡萄球菌引起；造成医院感染严重流行的多为造成医院感染严重流行的多为群

18、群中的中的5252、52A52A、8080型引起。型引起。噬菌体分型在金黄色葡萄球菌噬菌体分型在金黄色葡萄球菌流行病学流行病学调查调查、追踪传染源追踪传染源及及研究菌型与疾病研究菌型与疾病的关系的关系等方面均有重要意义。等方面均有重要意义。三、致病性葡萄球菌的分布及污染途径三、致病性葡萄球菌的分布及污染途径3.1 3.1 分布分布 流行呈季节性分布，多见于夏、秋两季。流行呈季节性分布，多见于夏、秋两季。引起中毒食品种类：引起中毒食品种类：奶、肉、蛋、鱼及奶、肉、蛋、鱼及其制品等其制品等动物性产品动物性产品；此外，剩饭、油煎蛋、；此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕、凉粉等也经常被其污染而导致中毒。糯米糕

19、、凉粉等也经常被其污染而导致中毒。三、致病性葡萄球菌的分布及污染途径三、致病性葡萄球菌的分布及污染途径3.2 3.2 污染途径污染途径途径一：途径一：人体或动物体人体或动物体食品食品人（动物）群种类人（动物）群种类带菌率（带菌率（%）鼻腔鼻腔感染患者感染患者83.5接触冷饮、乳制品生产人员接触冷饮、乳制品生产人员1620炊事员、熟食加工、糖果面包生产工人炊事员、熟食加工、糖果面包生产工人3.2 8.6患乳房炎的奶牛患乳房炎的奶牛带致病葡萄球菌带致病葡萄球菌有化脓症状的宰畜肉尸有化脓症状的宰畜肉尸带致病葡萄球菌带致病葡萄球菌不同人群或动物金黄色葡萄球菌带菌率不同人群或动物金黄色葡萄球菌带菌率三、

20、致病性葡萄球菌的分布及污染途径三、致病性葡萄球菌的分布及污染途径途径二：途径二：食品二次污染食品二次污染 熟肉类食品熟肉类食品如在熟后污染了致病性葡萄如在熟后污染了致病性葡萄球菌，又在球菌，又在20203030的环境下放置较长时间，的环境下放置较长时间，极易引起中毒；极易引起中毒；奶和奶制品奶和奶制品，用奶制作的冷饮（冰激凌、，用奶制作的冷饮（冰激凌、冰棍）和奶油糕点常是引起中毒的食品；冰棍）和奶油糕点常是引起中毒的食品；三、致病性葡萄球菌的分布及污染途径三、致病性葡萄球菌的分布及污染途径（3.2 3.2 污染途径）污染途径）油煎鸡蛋、熏鱼、油浸鱼罐头等含油油煎鸡蛋、熏鱼、油浸鱼罐头等含油脂较

21、多的食品，在污染上致病性葡萄球菌脂较多的食品，在污染上致病性葡萄球菌以后也能产生毒素。以后也能产生毒素。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性4.1 4.1 致病类型及症状致病类型及症状有有侵袭性疾病侵袭性疾病和和毒素性疾病毒素性疾病两种类型。两种类型。4.1.1 4.1.1 侵袭性疾病侵袭性疾病症状：主要引起化脓性感染症状：主要引起化脓性感染。金黄色葡萄球菌可通过多种途径侵入金黄色葡萄球菌可通过多种途径侵入肌体，引起肌体，引起局部组织、内脏器官或全身性局部组织、内脏器官或全身性化脓感染化脓感染。局部感染主要表局部感染主要表现为现为：甲沟炎、麦粒：甲沟炎、麦粒肿、蜂窝织炎、伤口肿

22、、蜂窝织炎、伤口化脓等；化脓等；四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.1 4.1 致病类型及症状）致病类型及症状）甲沟炎甲沟炎麦粒肿麦粒肿蜂窝织炎蜂窝织炎 内脏器官感内脏器官感染如染如：肺炎、脓：肺炎、脓胸、中耳炎、脑胸、中耳炎、脑膜炎、心包炎、膜炎、心包炎、心内膜炎等；心内膜炎等；全身感染如全身感染如：败血症、脓毒血败血症、脓毒血症等。症等。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.1 致病类型及症状）致病类型及症状）心心包包炎炎心心内内膜膜炎炎4.1.2 4.1.2 毒素性疾病毒素性疾病 主要由主要由金黄色葡萄球菌毒素金黄色葡萄球菌毒素所致。毒素所致。毒

23、素性疾病有两种：性疾病有两种：A.食物中毒：食物中毒：人摄入含毒素污染的食物后人摄入含毒素污染的食物后16h即可出现头晕、恶心、腹泻、呕吐等急性胃肠炎即可出现头晕、恶心、腹泻、呕吐等急性胃肠炎症状。发病症状。发病12d可自行恢复，愈后良好。可自行恢复，愈后良好。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.1 4.1 致病类型及症状）致病类型及症状）四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.1 4.1 致病类型及症状）致病类型及症状）B.B.毒性休克综合症毒性休克综合症 由由毒性休克综合症毒素毒性休克综合症毒素1 1（TSST-1TSST-1）引起。引起。主要表现：

24、高热、低血压、主要表现：高热、低血压、呕吐、腹泻、猩红样皮疹、严呕吐、腹泻、猩红样皮疹、严重者出现休克。重者出现休克。注意：注意：TSST-1TSST-1并非是引起该综合症的唯并非是引起该综合症的唯一病因，细菌内毒素、葡萄球菌肠毒素也与毒性一病因，细菌内毒素、葡萄球菌肠毒素也与毒性休克综合症发病有关。休克综合症发病有关。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性4.2 4.2 致病因子及相应致病机理致病因子及相应致病机理 金黄色葡萄球菌的致病性取决于其产生的毒金黄色葡萄球菌的致病性取决于其产生的毒素的致病能力。素的致病能力。4.2.1 血浆凝固酶血浆凝固酶（Coagulase)是一种

25、能使含有柠檬酸钠或肝素抗凝剂的兔或是一种能使含有柠檬酸钠或肝素抗凝剂的兔或人血浆发生凝固的酶。人血浆发生凝固的酶。大多数致病性葡萄球菌可产生此酶大多数致病性葡萄球菌可产生此酶，非致病菌，非致病菌则不产生。则不产生。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）血浆凝固酶有血浆凝固酶有2 2种：种：A：游离凝固酶：游离凝固酶（free coagulase)分泌至胞外，被血浆中凝固酶反应因子激活，分泌至胞外，被血浆中凝固酶反应因子激活，形成葡萄球菌凝血酶形成葡萄球菌凝血酶（staphylothrombin)，能使，能使纤纤维蛋

26、白原维蛋白原变为变为纤维蛋白纤维蛋白，导致，导致血浆凝固血浆凝固。纤维蛋白纤维蛋白沉积于菌体表面沉积于菌体表面，阻碍体内吞噬细胞的，阻碍体内吞噬细胞的吞噬，即使被吞噬后，也不易被杀死。吞噬，即使被吞噬后，也不易被杀死。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）凝固酶集聚在菌体四周，可能保护病菌不受血凝固酶集聚在菌体四周，可能保护病菌不受血清中杀菌物质的作用。清中杀菌物质的作用。B：结合凝固酶：结合凝固酶（bound coagulase)也叫凝聚因子也叫凝聚因子（clumping factor)，在菌体表，在菌体表面并不

27、释放，为面并不释放，为纤维蛋白原纤维蛋白原特异性受体，能与人特异性受体，能与人或兔血浆中纤维蛋白原交联而引起细菌凝聚。或兔血浆中纤维蛋白原交联而引起细菌凝聚。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）凝固酶试验是鉴定金黄色葡萄球菌的重要标志。凝固酶试验是鉴定金黄色葡萄球菌的重要标志。凝固酶较耐热，凝固酶较耐热，100加加热热30min或高压灭菌后仍保或高压灭菌后仍保存部分活性，但易被蛋白分存部分活性，但易被蛋白分解酶破坏。解酶破坏。凝固酶具有凝固酶具有免疫原性免疫原性，刺激机体产生的，刺激机体产生的抗体对凝固酶阳性的细菌感染有

28、一定的保护抗体对凝固酶阳性的细菌感染有一定的保护作用。作用。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）凝固酶具抗原性，可用于金黄色葡萄球凝固酶具抗原性，可用于金黄色葡萄球菌的分型研究及流行病学研究。菌的分型研究及流行病学研究。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）4.2.2 溶细胞毒素溶细胞毒素 该毒素为膜损伤毒素，主要有该毒素为膜损伤毒素，主要有葡萄球菌溶素葡萄球菌溶素（staphylolysin)和和杀白细胞素杀白细胞素（leukocidin)。A A

29、：葡萄球菌溶素：葡萄球菌溶素 外毒素，多数外毒素，多数致病菌株致病菌株能产能产生，可使动物红细胞溶解，使血生，可使动物红细胞溶解，使血琼脂平板菌落周围出现溶血环，琼脂平板菌落周围出现溶血环，在试管中出现溶血反应。在试管中出现溶血反应。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）根据其对动物细胞的溶血范围、抗原性、根据其对动物细胞的溶血范围、抗原性、溶血时所需温度不同等可将金黄色葡萄球菌产溶血时所需温度不同等可将金黄色葡萄球菌产生的葡萄球菌溶素分为生的葡萄球菌溶素分为、五种。五种。五种溶素都是蛋白质，具抗原性。五种溶素都是蛋白质，

30、具抗原性。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）对人体有致病作用的主要是对人体有致病作用的主要是溶素和溶素和溶素。溶素。溶素：溶素：由质粒或染色体编码，分子量为由质粒或染色体编码，分子量为30kD，不耐热，不耐热，60加热加热3min即可被破坏。除对多种哺乳即可被破坏。除对多种哺乳动物红细胞有溶血作用外，对白细胞、血小板、肝细动物红细胞有溶血作用外，对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞膜、血管平滑肌等均有毒性作用，可胞、成纤维细胞膜、血管平滑肌等均有毒性作用，可引起组织坏死。引起组织坏死。作用机理：作用机理：毒素分子插入细

31、胞膜疏水区，从而破毒素分子插入细胞膜疏水区，从而破坏膜完整性造成细胞溶解。坏膜完整性造成细胞溶解。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）溶素：溶素：为神经鞘磷脂酶为神经鞘磷脂酶C （sphingomyelinase C)，能水解细胞膜磷能水解细胞膜磷脂，损伤红细胞、白细胞、巨噬细胞和纤脂，损伤红细胞、白细胞、巨噬细胞和纤维细胞维细胞，与组织坏死和脓肿形成有关。，与组织坏死和脓肿形成有关。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）B：杀白细胞素杀白细

32、胞素 又称为又称为Panton-Valentine(PV)杀白细胞素，杀白细胞素，由大多数由大多数致病性葡萄球菌致病性葡萄球菌产生，不耐热，有产生，不耐热，有F和和S两个组分。细胞膜上，两个组分。细胞膜上，S组分的受体主组分的受体主要是神经节苷脂要是神经节苷脂GM1；F组分受体则为卵磷组分受体则为卵磷脂。脂。致病原理：致病原理：杀白细胞素与受体结合，改杀白细胞素与受体结合，改变细胞膜的结构，使细胞对阳离子（变细胞膜的结构，使细胞对阳离子（K离子）离子）的通透性增加，引起人和动物中性粒细胞和的通透性增加，引起人和动物中性粒细胞和巨噬细胞的损伤，最终导致细胞死亡。巨噬细胞的损伤，最终导致细胞死亡。

33、死亡细胞可形成脓栓，加重组织感染；死亡细胞可形成脓栓，加重组织感染；大量吞噬细胞的损伤可影响肌体的免疫防御大量吞噬细胞的损伤可影响肌体的免疫防御能力。能力。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）4.2.3 葡萄球菌肠毒素葡萄球菌肠毒素(staphylococcus enterotoxin,SE)葡萄球菌肠毒素：葡萄球菌肠毒素：为血浆凝固酶或耐热核酸为血浆凝固酶或耐热核酸酶阳性菌株产生的一类结构相似、毒力相似、抗酶阳

34、性菌株产生的一类结构相似、毒力相似、抗原不同的胞外蛋白质。原不同的胞外蛋白质。金黄色葡萄球菌是引起食品污染的常见细菌，金黄色葡萄球菌是引起食品污染的常见细菌，被其污染的食品中，被其污染的食品中，在在2037C下经下经48h即可产即可产生大量的毒素生大量的毒素。约有。约有3050%的菌株可以产生肠的菌株可以产生肠毒素。毒素。基本特性：基本特性：蛋白质，分子量为蛋白质，分子量为26KD30KD，热稳定，热稳定，10030min不被破坏，不不被破坏，不受胰蛋白酶影响，能抵抗胃液中蛋白酶的水受胰蛋白酶影响，能抵抗胃液中蛋白酶的水解作用。解作用。资料报道，在每资料报道，在每100g100g食物中含有不足

35、食物中含有不足18g18g的葡萄球菌肠毒素便能引起金黄色葡萄的葡萄球菌肠毒素便能引起金黄色葡萄球菌食物中毒症状。球菌食物中毒症状。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）迄今从血清型上已被鉴定的迄今从血清型上已被鉴定的SESE有有1111种，种，分别为：分别为：A A、B B、C C、D D、E E、F F、G G、H H、I I、J J、K K型，其中型，其中C C型又根据等电点的不同分为型又根据等电点的不同分为3

36、 3个亚个亚型（型（C1C1、C2C2、C3C3）。）。各型肠毒素均可引起食物中毒，其中以各型肠毒素均可引起食物中毒，其中以A A型引起的食物中毒最多型引起的食物中毒最多，B B型和型和C C型次之，型次之，F F型型肠毒素是引起毒性休克症的毒素肠毒素是引起毒性休克症的毒素。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）致病机理：致病机理：葡萄球菌肠毒素是一种超抗原，葡萄球菌肠毒素是一种超抗原，和普通抗原相比，可激活更多的和普通抗原相比，可激活更多的T T细胞，释放过细胞，释放过量的细胞因子（如量的细胞因子（如INFINF，IL-

37、1IL-1，IFN-IFN-）而致病。）而致病。另外，该毒素在肠道作用于内脂神经受体，另外，该毒素在肠道作用于内脂神经受体，传入中枢，刺激呕吐中枢，引起呕吐，并产生传入中枢，刺激呕吐中枢，引起呕吐，并产生急性胃肠炎症急性胃肠炎症状。状。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）葡萄球菌肠毒素导致葡萄球菌肠毒素导致的急性肠胃炎病一般潜伏的急性肠胃炎病一般潜伏期为期为1 16 6小时，最短者小时，最短者0.50.5小时即发病，出现头小时即发病，出现头晕、呕吐、腹泻等症状，晕、呕吐、腹泻等症状，发病发病1 12 2日可自行恢复，日可

38、自行恢复，预后良好。预后良好。1-61-6小时小时四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）4.2.4 剥脱毒素（剥脱毒素（exfoliatin)该毒素由蛋白质组成。该毒素由蛋白质组成。剥剥脱脱毒毒素素A型：由位于金黄色葡萄球菌染色体上型：由位于金黄色葡萄球菌染色体上的噬菌体基因组编码。的噬菌体基因组编码。B型：由质粒编码。型：由质粒编码。按血清按血清学特性学特性 致病机理：致病机理：具丝氨酸具丝氨酸蛋白酶功能，可裂解细胞蛋白酶功能，可裂解细胞间桥小体，破坏细胞间的间桥小体，破坏细胞间的连接，引起葡萄球菌烫伤连接，引起葡萄球菌

39、烫伤样皮肤综合症样皮肤综合症（staphylococcal scalded skin syndrome,SSSS)。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）4.2.5 毒性休克综合症毒素毒性休克综合症毒素1（toxin shock syndrome toxin-1,TSST-1)该毒素也称致热外毒素该毒素也称致热外毒素C和肠毒素和肠毒素F，是某些金，是某些金黄色葡萄球菌在生长过程中分泌的一种黄色葡萄球菌在生长过程中分

40、泌的一种外毒素外毒素。该。该毒性蛋白由细菌染色体编码，含有毒性蛋白由细菌染色体编码，含有194个氨基酸，个氨基酸，分子量为分子量为2.049KD。毒素结构类似于葡萄球菌肠毒素毒素结构类似于葡萄球菌肠毒素B，引起发热、，引起发热、休克及脱屑性皮疹，称为毒性休克综合症（休克及脱屑性皮疹，称为毒性休克综合症（toxic shock syndrome，TSS）。）。致病机理：致病机理：抑制内毒素脱毒或直接损伤肝脏细胞，抑制内毒素脱毒或直接损伤肝脏细胞，使内毒素在体内蓄积；使内毒素在体内蓄积；刺激单核吞噬细胞刺激单核吞噬细胞系统释放血管活性物质，干扰心血管系统及系统释放血管活性物质，干扰心血管系统及血液

41、动力学；血液动力学；增加毛细血管通透性，造成增加毛细血管通透性，造成心血管功能损伤而导致休克。心血管功能损伤而导致休克。四、金黄色葡萄球菌的致病性四、金黄色葡萄球菌的致病性（4.2 致病因子及相应致病机理）致病因子及相应致病机理）五、金黄色葡萄球菌的检测五、金黄色葡萄球菌的检测5.1 常用检测方法：常用检测方法：GB/T4789.102008流程：流程：检样检样25g(ml)+225ml灭灭菌生理盐水菌生理盐水增菌培养法增菌培养法7.5%氯化钠肉汤或氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤胰酪胨大豆肉汤血平板，血平板，Baird-Parker平板平板36 1 24h血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验直接记数法直接

42、记数法Baird-Parker平板平板0.3ml、0.3ml、0.4ml36 1 24h血平板血平板36 1 24h36 1 24h观察溶血观察溶血涂片染色涂片染色报告报告五、金黄色葡萄球菌的检测五、金黄色葡萄球菌的检测（5.1 常用检测方法）常用检测方法）S.aureus on Baird-Parker Agar五、金黄色葡萄球菌的检测五、金黄色葡萄球菌的检测5.2 金黄色葡萄球菌快速检测方法金黄色葡萄球菌快速检测方法5.2.1 金黄色葡萄球菌鉴别培养基金黄色葡萄球菌鉴别培养基Baird-Parker-f-RPF培养基培养基 由法国生物梅里埃公司研制，该培养由法国生物梅里埃公司研制，该培养基

43、是在基是在BP琼脂的基础上加入琼脂的基础上加入RPF（兔血浆（兔血浆纤维蛋白原）。纤维蛋白原）。该培养基营养丰该培养基营养丰富，以氯化锂代替亚富，以氯化锂代替亚碲酸钾，碲酸钾，血浆凝固血浆凝固酶阳性的金黄色葡萄酶阳性的金黄色葡萄球菌，将在培养基中球菌，将在培养基中呈现有晕环的黑色菌呈现有晕环的黑色菌落。落。五、金黄色葡萄球菌的检测五、金黄色葡萄球菌的检测（5.2 金黄色葡萄球菌快速检测方法）金黄色葡萄球菌快速检测方法）五、金黄色葡萄球菌的检测五、金黄色葡萄球菌的检测（5.2 金黄色葡萄球菌快速检测方法）金黄色葡萄球菌快速检测方法）5.2.2 3M金黄色葡萄球菌快速测试法金黄色葡萄球菌快速测试法

44、 原理：原理：Petrifilm.RSA Count Plate由美由美国国3M公司研制生产，是一种薄膜型快速检公司研制生产，是一种薄膜型快速检测金黄色葡萄球菌的记数平板。测金黄色葡萄球菌的记数平板。3M Petrifilm Staph aureus Count 测试薄膜是由二部分组成。测试薄膜是由二部分组成。第一部分第一部分是黄金色葡萄球菌培养基片。此培养是黄金色葡萄球菌培养基片。此培养基中含有经修正的基中含有经修正的Barid-Parker营养成分及冷水可营养成分及冷水可溶解的胶质。溶解的胶质。第二部分第二部分是一种耐热核酸酶（是一种耐热核酸酶（TNase）反应片。）反应片。含有含有DNA

45、、甲苯胺蓝、甲苯胺蓝(Toluidine Blue-O)及四唑及四唑指示剂指示剂(Tetraeolium)，此指示剂有助于菌落的计，此指示剂有助于菌落的计数及确定葡萄球菌耐热核酸酶的存在。数及确定葡萄球菌耐热核酸酶的存在。五、金黄色葡萄球菌的检测五、金黄色葡萄球菌的检测（5.2 金黄色葡萄球菌快速检测方法）金黄色葡萄球菌快速检测方法）耐热脱氧核糖核酸酶耐热脱氧核糖核酸酶为产毒金黄色葡萄为产毒金黄色葡萄球菌的典型特征酶，是鉴定金黄色葡萄球菌球菌的典型特征酶，是鉴定金黄色葡萄球菌的标志酶之一。的标志酶之一。在在Petrifilm.RSA 检测片上，耐热检测片上，耐热DNA酶酶反应呈粉红色环带，包围

46、着一个红色或蓝色反应呈粉红色环带，包围着一个红色或蓝色的菌落。的菌落。五、金黄色葡萄球菌的检测五、金黄色葡萄球菌的检测（5.2 金黄色葡萄球菌快速检测方法）金黄色葡萄球菌快速检测方法）五、金黄色葡萄球菌的检测五、金黄色葡萄球菌的检测5.3 金黄色葡萄球菌肠毒素的检测方法金黄色葡萄球菌肠毒素的检测方法5.3.1 动物学试验法动物学试验法可疑菌株可疑菌株肠毒素产肠毒素产生培养基生培养基可疑菌株可疑菌株1 10或或1 100稀释稀释肠毒素肠毒素上清液上清液或滤液或滤液腹腔注射或饲腹腔注射或饲喂实验动物喂实验动物观察结果观察结果五、金黄色葡萄球菌的检测五、金黄色葡萄球菌的检测（5.2 金黄色葡萄球菌快

47、速检测方法）金黄色葡萄球菌快速检测方法）5.3.2 血清学试验法血清学试验法 金黄色葡萄球菌肠毒素金黄色葡萄球菌肠毒素为胞外蛋白，为超为胞外蛋白，为超抗原，可用抗原，可用ELISA法进行检测。法进行检测。5.3.3 分子生物学方法分子生物学方法 如：核酸分子杂交法和如：核酸分子杂交法和PCR法。可用来检测法。可用来检测编码肠毒素的特异性基因（编码肠毒素的特异性基因（entA、entB、entC、entD、entE等）。等）。六、金黄色葡萄球菌的预防与控制措施六、金黄色葡萄球菌的预防与控制措施6.1 6.1 防止金黄色葡萄球菌污染食品防止金黄色葡萄球菌污染食品（1）防止带菌人群对各种食物的污染：

48、）防止带菌人群对各种食物的污染：定期对生产加工人员进行健康检查，患局部定期对生产加工人员进行健康检查，患局部化脓性感染（如疥疮、手指化脓等）、上呼化脓性感染（如疥疮、手指化脓等）、上呼吸道感染（如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾吸道感染（如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等）的人员要暂时停止其工作或调换岗位。病等）的人员要暂时停止其工作或调换岗位。（2）防止金黄色葡萄球菌对奶及其制品的污染：）防止金黄色葡萄球菌对奶及其制品的污染：如牛奶厂要定期检查奶牛的乳房，不能挤用患化脓如牛奶厂要定期检查奶牛的乳房，不能挤用患化脓性乳腺炎的牛奶；奶挤出后，要迅速冷至性乳腺炎的牛奶；奶挤出后，要迅速冷至-10以下，以下

49、，以防毒素生成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为以防毒素生成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为原料，注意低温保存。原料，注意低温保存。六、金黄色葡萄球菌的预防与控制措施六、金黄色葡萄球菌的预防与控制措施（6.1 防止金黄色葡萄球菌污染食品防止金黄色葡萄球菌污染食品）（3）防止金黄色葡萄球菌对肉及其制品的污染：）防止金黄色葡萄球菌对肉及其制品的污染：对肉制品加工厂，患局部化脓感染的禽、畜尸体应对肉制品加工厂，患局部化脓感染的禽、畜尸体应除去病变部位，经高温或其他适当方式处理后进行除去病变部位，经高温或其他适当方式处理后进行加工生产。加工生产。6.2 6.2 防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成防止金黄色葡

50、萄球菌肠毒素的生成 应在低温和通风良好的条件下贮藏食应在低温和通风良好的条件下贮藏食物，以防肠毒素形成；在气温高的春夏季，物，以防肠毒素形成；在气温高的春夏季，食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超过食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超过6小时，并且食用前要彻底加热。小时，并且食用前要彻底加热。六、金黄色葡萄球菌的预防与控制措施六、金黄色葡萄球菌的预防与控制措施第二节第二节 单核细胞增生李斯特氏菌及其食物中毒单核细胞增生李斯特氏菌及其食物中毒一、概论一、概论 单核细胞增生李斯特氏菌单核细胞增生李斯特氏菌（Listeria.monocytohenes）是一种能在）是一种能在冷藏温度冷藏温度存活的致病菌。存