医学精品课件：北京协和医院李永哲(进修生讲课1）.ppt

1、自身抗体检测及临床应用价值,北京协和医院风湿免疫科 李永哲,自身免疫性疾病,自身抗体检测及临床应用,推广普及,规范检测,合理应用,临床 实验室 项目选择 报告解释,质量保证 方法程序,基本项目 分级检测,特征性临床表现,相关实验室检查,疾病分类标准诊断标准专家共识,自身免疫性疾病(AID)诊断,体外诊断实验-实验室检查 临床检验常规检查 临床免疫学常规检查 特殊实验室检查 影像学检查 组织病理学检查,相关实验室检查,自身免疫性疾病(AID)诊断,一般临床检验常规检查 血常规尿常规脑脊液胸水腹水 急性期反应物:ESRCRP 生化常规检查 肝功肾功甲功蛋白电泳肌酶谱血尿酸 免疫学常规检查 免疫分子

2、，蛋白：Ig/亚类补体CICASO冷球蛋白 细胞免疫功能：免疫功能低下 自身抗体 微生物常规检查 鉴别诊断 合并感染 ：细菌 病毒 真菌,AID临床实验室检查常规项目,AID临床实验室检查特殊项目,口干燥征实验室检查 唾液流率试验 唇腺活检 腮腺照影 唾液腺放射性核素扫描 干燥性角膜炎实验室检查 泪液分泌试验 泪膜破碎时间检查 角膜染色检查 结膜活检 滑液检查 狼疮带试验 遗传标志物检查 HLA-B27 HLA-B5 HLA-DR2、3、4,自身抗体:是指抗自身细胞内、细胞表面和 细胞外抗原成分的免疫球蛋白 是自身免疫应答和AID最重要特征之一 某些AID伴有特征性的自身抗体(谱) 自身抗体检

3、测对AID诊断和鉴别诊断至关重要 自身抗体检测已成为诊断AID的重要手段,自身抗体（autoantibidies）,国外临床常规自身抗体检测项目已达百种以上 主要包括： 抗核抗体谱、抗中性粒细胞胞浆抗体谱、抗磷脂抗体谱、类风湿因子、类风湿关节炎早期诊断自身抗体谱 自身免疫性肝病自身抗体谱、自身免疫性甲状腺疾病自身抗体谱、1型自身免疫性糖尿病自身抗体谱、不孕/不育自身抗体谱、炎症性肠病自身抗体谱、自身免疫性胃炎/恶性贫血自身抗体谱、麦胶（麸质）敏感性肠病自身抗体谱、副肿瘤综合征自身抗体谱和重症肌无力自身抗体谱等 国内:临床常规项目少，普及性低,自身抗体临床检测及应用,自身抗体临床意义,诊断 鉴别

4、诊断,病情评估 治疗监测,病程转归 预后判断,预测、预防 个体化医疗,自身抗体 临床意义,相关性自身抗体,标记性自身抗体,生理性自身抗体,非特异性自身抗体,特异性自身抗体,预警性自身抗体,自身抗体临床价值分类,抗核抗体谱 抗磷脂抗体谱 抗中性粒细胞胞浆抗体谱 类风湿关节炎自身抗体谱 自身免疫性肝病自身抗体谱,风湿免疫病常见自身抗体谱,抗核抗体谱（ANAs）分类 根据细胞内靶抗原分子理化特性和分布部位将ANAs分类： 抗DNA抗体（anti-dsDNA，anti-ssDNA ） 抗组蛋白抗体（histons: H1 , H2A , H2B , H3 , H4 , H2A-H2B复合物） 抗ENA

5、抗体（抗体: Sm , nRNP , SSA/Ro , SSB/La, rRNP , Scl-70 , Jo-1 , PCNA , RA33 , ANAs 抗非组蛋白抗体 Ku,RANA,Mi-1,Mi-2,PL-7,PL-12.） 抗着丝点抗体（ anti-CENP -A , B , C ，D，F，G） 抗核仁抗体（抗体: RNA-polymerase-1 , PM-Scl/PM-1，Th/To, U3nRNP/Fibrillaria，4-6-S-RNA） 抗其他细胞成分抗体（高尔基体，中心体，纺锤体，线粒体，溶酶体，肌动蛋白，Vimentin，细胞角蛋白，Lamin),ANA筛选试验 抗d

6、sDNA抗体 抗ENA抗体 抗Sm抗体：SLE标记性抗体（20%-30%） 抗nRNP抗体：MCTD 95 -100%（高滴度） 抗SSA抗体：PSS 60 -75%，其它CTD 抗SSB抗体： PSS 10 -40%，其它CTD 抗Scl-70抗体：SSc 25 -75%, 标记性抗体 抗Jo-1抗体：PM/DM 25%，标记性抗体 抗rRNP抗体： SLE特异性抗体（10%-30%） 抗DNP 抗核小体 抗组蛋白抗体,抗核抗体谱,抗核抗体谱检测方法,抗磷脂综合征（APS）1/3 SLE（凝血危险） RA 炎性疾病 狼疮抗凝物（LA） 抗心磷脂抗体（aCL） 抗2糖蛋白-1（2GP-1）抗体

7、 抗磷脂酰丝氨酸抗体 抗磷脂酸抗体,抗磷脂抗体谱,pANCA ,cANCA ,xANCA 抗蛋白酶3（PR3），抗髓过氧化物酶（MPO） 其他： 抗杀菌/通透性增高蛋白（BPI） 抗人白细胞弹性蛋白酶（HLE） 抗组织蛋白酶G（CG） 抗溶菌酶（LYS） 抗乳铁蛋白（LF） 系统性血管炎 炎症性肠病 自身免疫性肝病 结缔组织病 药物性疾病 感染性疾病,抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）谱,类风湿因子（RF） 抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体） 抗角质蛋白抗体（AKA） 抗核周因子（APF） 抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA） 抗MCV（Sa） 抗RA33抗体 葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）抗原,p

8、rofilaggrin/filaggrin,类风湿关节炎相关自身抗体谱,疾病类型 相关自身抗体 自身免疫性肝炎（ AIH ） 型AIH ANA/ASMA，anti-SLA 型AIH anti-LKM-1 anti-LC-1 原发性胆汁性肝硬化（ PBC） AMA (M2/M4/M8/M9 ) ACA anti-gp210 sp100 原发性硬化性胆管炎（PSC） pANCA,自身免疫性肝病相关自身抗体谱,器官特异性自身免疫病自身抗体谱,1975:ANA IIF,80年代初:抗ENA、AMA/ASM 、TE-IF 、TG/TM,80年代末:WB 、ICA,90年代初:HEP-2;ANCA,200

9、0年代:特异性自身抗体,90年代末:商品试剂盒,50-70年代:LE,标准化、规范化、自动化,自身抗体临床应用概况,自身抗体常用检测方法,ANCAs anti-PR3 anti-MPO,总抗体检测 特异性抗体检测 提高临床应用价值,ASMAs anti- Factin,AMA AMA-M2,anti- Sp100,anti- gp210 anti- p62 anti-LBR,Automation,自身抗体检测标准化高通量自动化,检测项目：靶抗原特异化 总抗体特异性抗体 纯化、合成肽、重组抗原 检测方法：标准化、多元化、自动化 检测质量：准确、稳定，质量保证 应用临床 ：迅速，临床应用周期变短,

10、自身抗体检测与临床应用进展,自身抗体检测目前存在问题,检测人员：质量管理理念 检测方法：初级阶段 检测程序：规范性 检测试剂仪器：质量问题,自身抗体检测质量：假阳性假阴性可比性差,检测结果影响诊疗,2020年4月6日,29,抗CCP抗体定量结果,参加277家，210家回报 总体回报率：75.81%,自身抗体比对最低准确率,参加277家，其中210家回报,总体回报率75.81%,检验结果可比性,检查结果不再因实验室、仪器、试剂、地域、操作人员不同而不同,自身抗体检测质量管理策略,自身抗体检测项目选择与实验结果解释,项目选择：疾病自身抗体(谱) ，分型 临床意义? 结果解释:临床表现与实验室结果解

11、释困惑 临床复杂性:没有绝对，只有相对 实验室检测局限性 假阳性 假阴性 可比性,自身抗体检测项目合理选择,自身抗体临床应用： 自身抗体(谱) ，分型 大撒网式筛查不是好医生 临床需求，基本项目,检测项目、检测程序合理选择,疾病诊疗临床路径,自身抗体检测项目的选择,自身抗体临床应用：特异性抗体，分型 临床医生：临床需求有价值、准确、快速 患者：经济，解决问题 实验室:检测流程，报告时间 检测项目选择、检测程序合理选择,疾病诊疗临床路径,Antinuclear antibody(ANA) Anti-dsDNA antibody Anti-Sm antibody Anti-cardiolipin

12、antibody Lupus anticoagulant（LA) Anti-Nucleosomes antibodies Anti-ribosomal RNP antibodies Anti-2GPantibody,系统性红斑狼疮（SLE）,SLE中存在的自身抗体达百种以上 Yaniv S et al1.Semin ArthritiRheum,2004,34:501-537 .,血常规血沉 尿常规、沉渣、24小时尿蛋白 肝肾功能 补体、免疫球蛋白 ANA 、抗dsDNA 、抗ENA 、 ACL,SLE随访,血常规血沉 尿常规、沉渣、24小时尿蛋白 肝肾功能 补体、免疫球蛋白 ANA谱 、 AC

13、L 、抗B2GPI、狼疮抗凝物 Coombs试验,SLE初筛（全套）,血常规血沉 尿常规、沉渣、24小时尿蛋白 肝肾功能 补体、免疫球蛋白 ANA 、抗dsDNA,SLE初筛（普通）,检测项目的选择,自身抗体检测结果的解释,疾病标记（志）性自身抗体 疾病特异性自身抗体 疾病相关性自身抗体 疾病非特异性自身抗体 生理性自身抗体 疾病前期存在 检测方法及检测程序局限性 检测质量:假阴性假阳性,解读困难,检测方法局限性：假阳性，假阴性 临床意义局限性：非特异性，生理性，疾病前期 临床表现阳性，实验室检查阴性 实验室检查阳性，临床表现阴性,自身抗体检测结果正确解读,总抗体与特异性抗体检测差异 ANAs

14、 ANCAs AMAs 不同实验室检测差异 不同方法学检测差异,自身抗体检测结果正确解读,自身免疫病自身抗体非常复杂,Semin Arthritis Rheum. 2004 Oct;34(2):501-37.,SLE患者中存在100多种自身抗体,APS患者中存在30种自身抗体,J Autoimmun, 2008. 30(1-2): p. 74-83.,自身抗体在SLE发病前9.4年出现,N Engl J Med 2003;349:1526-33.,疾病预警,自身抗体疾病预警价值,2012年月-7月：健康体检932例 自身抗体阳性：10 临床评估：51例 确诊：例，CTD 5例，pSS 3例 疑

15、诊：例，CTD 例，pSS 例，例,临床复杂性,抗CCP抗体在丙肝中8.5,各种自身抗体检测方法的优缺点,Diagn Pathol, 2009. 4,方法学局限性,抗rRNP抗体三种检测方法诊断SLE的比较 检测方法 敏感型 特异性 ELISA 40.0 % 100 % ID 22.0 % 100 % IB 12.0 % 96.7 %,舒彗君等中华微生物学和免疫学杂志，2004，24：496-497.,方法学局限性,风湿免疫病 ANAs（IIF-ANA、anti-DNA、anti-ENA） ANCAs（ IIF-ANCA、anti-PR3、anti-MPO） anti-Acl 、 anti-2GP-1 RF、anti-CCP 器官特异性自身免疫病 肝：ANA/ASMA/AMA(M2) 血液：anti-PLT、 Coombs T 甲状腺：anti-TG/anti-TPO 胰：ICA/anti-GAD 皮肤： 神经：,自身抗体基本检测项目,实验室：推广普及 检测质量 临床：检测项目合理选择 报告解读 临床与实验室：沟通联系,自身抗体检测及其临床应用,北京协和医院风湿免疫科 李永哲 yongzhelipumch,谢 谢,Thats all，thank you.,