血糖食物糖消化课件.ppt

1、 血糖浓度的测定血糖浓度的测定生物化学与分子生物学教研室生物化学与分子生物学教研室实验十二实验十二【实验目的实验目的】1.1.巩固复习血糖的相关知识。巩固复习血糖的相关知识。2.2.掌握分光光度计的原理及使用。掌握分光光度计的原理及使用。3.3.掌握测定血糖浓度的方法。掌握测定血糖浓度的方法。血糖及血糖水平的概念血糖及血糖水平的概念 *血糖血糖，指血液中的葡萄糖。，指血液中的葡萄糖。*血糖水平血糖水平，即血糖浓度。，即血糖浓度。正常血糖浓度正常血糖浓度 ：3.89-6.11mmol/L 3.89-6.11mmol/L 血血糖糖食食 物物 糖糖 消化，消化，吸收吸收 肝糖原肝糖原 分解分解 非糖

2、物质非糖物质 糖异生糖异生 氧化氧化分解分解 CO2+H2O 糖原合成糖原合成 肝（肌）糖原肝（肌）糖原 磷酸戊糖途径等磷酸戊糖途径等 其它糖其它糖 脂类、氨基酸合成代谢脂类、氨基酸合成代谢 脂肪、氨基酸脂肪、氨基酸 血糖来源和去路血糖来源和去路【实验原理实验原理】利用利用物质的光吸收特性物质的光吸收特性进行进行含量分析含量分析与与性性质鉴定质鉴定的技术的技术1.1.分光光度技术分光光度技术 （Absorption Photometry）用颜色进行定量分析颜 色浓 度 颜色如何量化？颜色如何量化？n同种溶液颜色越深，吸光能力越强n溶液的颜色：由于物质的结构不同，会选择性吸收特定波长的单色光颜

3、色浓 度吸光能力浓 度 如何检测吸光能力？如何检测吸光能力？用吸光能力进行定量分析分光光度计工作示意图朗伯-比尔定律A A 吸光度吸光度(Absorbance)(Absorbance)C C 溶液浓度溶液浓度L L 液层厚度液层厚度K K 吸光系数吸光系数 无色溶液适用吗？无色溶液适用吗？物质的光吸收曲线（吸收光谱）n直接反映物质对各单色光的吸收情况n间接反映物质的结构特点最大吸收光定性n标准溶液法标准溶液法标准溶液与待测溶液的吸光度进行比较n标准曲线法标准曲线法测出不同浓度标准溶液的吸光度，绘制标准曲线标准曲线bacA？测c54.0测A例：LKCALKCA测测标标未知浓度的测定未知浓度的测定

4、光源 单色器样品池(比色杯)检测系统国产721型分光光度计2.2.血糖浓度测定的原理血糖浓度测定的原理 葡萄糖的醛基与邻甲苯胺在热醋酸溶液中缩合成葡萄糖基胺，再脱水葡萄糖的醛基与邻甲苯胺在热醋酸溶液中缩合成葡萄糖基胺，再脱水生成希夫氏（生成希夫氏（SchiffSchiff）碱，然后经分子重排，生成一组蓝绿色化合物，）碱，然后经分子重排，生成一组蓝绿色化合物，在在630nm630nm处有一吸收峰，吸光度大小与血糖浓度成正比。处有一吸收峰，吸光度大小与血糖浓度成正比。CH2NH2+OCCCCCCHHOHHOHOHHHHOHOHHCH2NHHCCCCCCOHHOHHOHOHHHHOHOHHH2OCH

5、2NHCCCCCCHOHHOHOHHHHOHOHH邻甲苯胺葡萄糖葡基胺希夫氏碱【实验原理实验原理】【试剂试剂】1 1邻甲苯胺试剂邻甲苯胺试剂：新配试剂应放置24小时后（待老化）使用。此试剂腐蚀性极强，应避免与皮肤接触而造成灼伤。2 2葡萄糖标准应用液（葡萄糖标准应用液（5mmol/L5mmol/L）准确吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml，置于100ml容量瓶中，再以12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度。【器材器材】水浴箱，分光光度计，试管，烧杯，容量瓶。水浴箱，分光光度计，试管，烧杯，容量瓶。【试剂与器材试剂与器材】1.1.选试管选试管3 3支，分别标以支，分别标以“测定测定”、“标准标准”和和“

6、空白空白”，然后按下表，然后按下表操作。操作。加入物（ml）测定管标准管空白管血清葡萄糖标准应用液蒸馏水邻甲苯胺试剂0.1 5.00.15.00.15.0 2.2.将上述各管分别将上述各管分别混匀混匀后，置沸水浴中煮沸后，置沸水浴中煮沸1212分钟，取出用自来水流分钟，取出用自来水流水冷却水冷却5 5分钟。分钟。3.3.用分光光度计，在波长用分光光度计，在波长630nm630nm下，以空白管调零，读取各管吸光度。下，以空白管调零，读取各管吸光度。【参考值参考值】3.89 3.896.11mmol/L6.11mmol/L（7070110mg/dl110mg/dl）【步骤步骤】1 1饭后饭后1 1

7、2 2小时、摄入高糖食物后、情绪紧张导致肾上腺素小时、摄入高糖食物后、情绪紧张导致肾上腺素分泌增加时，均可出现高血糖。此为生理性高血糖。分泌增加时，均可出现高血糖。此为生理性高血糖。2 2饥饿或剧烈运动后可出现生理性低血糖。饥饿或剧烈运动后可出现生理性低血糖。3 3糖尿病、对抗胰岛素的激素分泌过多、颅内压增加时可出糖尿病、对抗胰岛素的激素分泌过多、颅内压增加时可出现病理性高血糖。现病理性高血糖。4 4胰岛胰岛细胞增生或癌瘤、对抗胰岛素的激素分泌不足、严细胞增生或癌瘤、对抗胰岛素的激素分泌不足、严重肝病患者可出现病理性低血糖。重肝病患者可出现病理性低血糖。【临床意义临床意义】尿葡萄糖定性实验尿葡

8、萄糖定性实验生物化学与分子生物学教研室生物化学与分子生物学教研室实验十三实验十三【实验目的实验目的】掌握尿糖的检测方法。掌握尿糖的检测方法。【实验原理实验原理】葡萄糖葡萄糖在在葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶的催化作用下形成的催化作用下形成葡萄糖酸和过氧化氢葡萄糖酸和过氧化氢，过氧过氧化氢化氢在在过氧化氢酶过氧化氢酶的催化作用下形成的催化作用下形成水和氧水和氧，氧氧可将可将某种无色化合物某种无色化合物氧化成有色的化合物氧化成有色的化合物，将上述两种酶和无色化合物固定在纸条上，制，将上述两种酶和无色化合物固定在纸条上，制成测试尿糖含量的酶试纸。这种酶试纸与尿液相遇时，很快会因为尿成测试尿糖含量的酶试纸。

9、这种酶试纸与尿液相遇时，很快会因为尿液中葡萄糖的含量的少到多而依次呈现液中葡萄糖的含量的少到多而依次呈现浅蓝、浅绿、棕或深棕色浅蓝、浅绿、棕或深棕色。【试剂与器材试剂与器材】目测尿糖试纸、尿杯目测尿糖试纸、尿杯【步骤步骤】1.1.将试纸带浸入尿液中将试纸带浸入尿液中(中段尿液最佳中段尿液最佳),),湿透湿透(约约1-21-2秒钟秒钟)后取出后取出;2.2.在在30-6030-60秒内观察试纸带颜色并与比色板对照秒内观察试纸带颜色并与比色板对照,测得结果；测得结果；3.3.结果判断：（试纸由浅蓝到棕红色变化来表示检测结果）浅蓝色表示没有糖尿病，用结果判断：（试纸由浅蓝到棕红色变化来表示检测结果）浅蓝色表示没有糖尿病，用“-”-”表示；颜色愈深表示；颜色愈深“+”+”号愈多号愈多,尿糖愈高。尿糖愈高。【参考值参考值】正常应为阴性。正常应为阴性。【注意事项注意事项】1 1尿液应新鲜，如放置后细菌生长。可分解糖而使结果偏低；尿液应新鲜，如放置后细菌生长。可分解糖而使结果偏低；2 2不要在尿样中加入防腐剂，尿样不可离心。不要在尿样中加入防腐剂，尿样不可离心。【临床意义临床意义】尿糖阳性见于糖尿病、肾性糖尿、甲亢等。内服、注射大量葡萄糖及精神激动等也可致阳尿糖阳性见于糖尿病、肾性糖尿、甲亢等。内服、注射大量葡萄糖及精神激动等也可致阳性反应。性反应。THANK YOU