菌种制作技术课件.ppt

1、食用菌生产技术课程组原种和栽培种的生产技术原种和栽培种的生产技术 原种和栽培种的生产，无论是培养基成分，原种和栽培种的生产，无论是培养基成分，配制方法和灭菌方法基本上是相同的。配制方法和灭菌方法基本上是相同的。1）原种：是由试管斜面培养基培养的母种作种）原种：是由试管斜面培养基培养的母种作种源接种而成，主要用于繁殖栽培种，源接种而成，主要用于繁殖栽培种，也可直接也可直接用于生产。用于生产。（母种（母种原种）原种）2）栽培种：由原种作种源扩大而成，）栽培种：由原种作种源扩大而成，只能用于只能用于生产生产。（原种（原种栽培种栽培种)3ppt课件配制培养基灭 菌二级菌种培 养接 种培 养接 种灭 菌

2、配制培养基三级菌种一级菌种二级菌种原种、栽培种的制作流程原种、栽培种的制作流程 按配方称取原料按配方称取原料拌料拌料装瓶（袋）装瓶（袋）打 洞（孔 径打 洞（孔 径 1 c m 深 至 瓶 底）深 至 瓶 底）灭 菌灭 菌（1.5kgcm2，1.52h）冷却冷却接种接种（接入黄豆大小一块）（接入黄豆大小一块）培养（培养（25 27）菌丝长满瓶（袋）菌丝长满瓶（袋）培养培养7d8d扩大成栽培种。扩大成栽培种。5ppt课件（一）配制总原则（一）配制总原则 1 1选择适宜的营养物质。选择适宜的营养物质。2 2营养物质间配制的比例要恰当。营养物质间配制的比例要恰当。3 3选择经济实用、来源广泛的原料。

3、选择经济实用、来源广泛的原料。4 4适宜的适宜的pHpH值和含水量。值和含水量。培养基（料）配制原则培养基（料）配制原则掌握碳氮比例掌握碳氮比例 食用菌对碳和氮的需要有一个比例，简称碳食用菌对碳和氮的需要有一个比例，简称碳氮比（氮比（C）。）。菌丝体生长阶段：菌丝体生长阶段：C=20 1；子实体形成阶段：子实体形成阶段：C=3040 1；C 过高，菌丝体生长过旺，而子实体小、过高，菌丝体生长过旺，而子实体小、产量低。产量低。7ppt课件 选好培养材料选好培养材料首先选不含杀菌物质的木屑首先选不含杀菌物质的木屑 杉、松、樟等树种，含酚、酯、精油等杀杉、松、樟等树种，含酚、酯、精油等杀菌物质，会抑

4、制食用菌生长。要用必须经过菌物质，会抑制食用菌生长。要用必须经过处理，如：蒸煮、晒等。处理，如：蒸煮、晒等。根据食用菌的喜好选木屑根据食用菌的喜好选木屑 如：培养香菇用桦木屑就比椴木屑好；如：培养香菇用桦木屑就比椴木屑好；培养金针菇用构，楮等木屑就比用榆、槐等培养金针菇用构，楮等木屑就比用榆、槐等木屑好。木屑好。8ppt课件 注意物理性状注意物理性状 培养原料要注意颗粒粗细、质地软硬程度，培养原料要注意颗粒粗细、质地软硬程度，以及持水性能等物理性状。以及持水性能等物理性状。调节酸碱度调节酸碱度 各种食用菌需要的各种食用菌需要的pH值不同，配制培养料值不同，配制培养料时，应选用时，应选用NaOH

5、、石灰、盐酸或过磷酸钙等、石灰、盐酸或过磷酸钙等物质调节物质调节pH值。霉菌比食用菌喜欢更低的值。霉菌比食用菌喜欢更低的pH值，生产上有时为了控制这类杂菌的发生，往值，生产上有时为了控制这类杂菌的发生，往往将往将pH值适当调高值适当调高0.51。9ppt课件原料选择的注意事项（几点说明）原料选择的注意事项（几点说明）木屑：木屑：树种：树种：除松树、杉树、柏树、樟树、除松树、杉树、柏树、樟树、芸香属、按属等树种之外，绝大多数阔芸香属、按属等树种之外，绝大多数阔叶树和木屑都可以利用。（因其中含有叶树和木屑都可以利用。（因其中含有酚、酯、精油等杀菌物质）酚、酯、精油等杀菌物质）粗细：粗细：不宜过细，

6、以免培养基过湿或不宜过细，以免培养基过湿或通气不良。通气不良。10ppt课件 选择：选择：根据食用菌分解能力选择，分解能根据食用菌分解能力选择，分解能力较强的食用菌采用硬质阔叶树木屑，反之力较强的食用菌采用硬质阔叶树木屑，反之采用软质树种木屑。采用软质树种木屑。如：如：金针菇分解能力较弱，以含单宁较少木金针菇分解能力较弱，以含单宁较少木屑为宜，木屑越陈越好；屑为宜，木屑越陈越好；茯苓菌分解能力较强，可采用颗粒粗的松木茯苓菌分解能力较强，可采用颗粒粗的松木屑或松木钉。屑或松木钉。11ppt课件米糠、麸皮作用米糠、麸皮作用作用：补充氮源和作用：补充氮源和维生素维生素。稻草、麦秸、木屑、棉籽壳等纤维

7、素原料，稻草、麦秸、木屑、棉籽壳等纤维素原料，含氮量低。如：木屑含氮量含氮量低。如：木屑含氮量0.03%以下。以下。麸皮：麸皮：含氮量比米糠多，但维生素不如米糠。含氮量比米糠多，但维生素不如米糠。米糠：米糠：含氮量比麸皮少。含氮量比麸皮少。用量：一般用量：一般10%20%，过多易引起污染。，过多易引起污染。12ppt课件加糖的作用加糖的作用初期补充碳源，用量初期补充碳源，用量1%5%。诱导胞外酶的产生。诱导胞外酶的产生。纤维素原料，食用菌利用缓慢。加入纤维素原料，食用菌利用缓慢。加入少量白糖作为食用菌少量白糖作为食用菌初期补充碳源初期补充碳源，促，促进菌丝快速生长，同时诱导纤维素酶的进菌丝快速

8、生长，同时诱导纤维素酶的产生，更好地利用纤维素。产生，更好地利用纤维素。13ppt课件Ca2作用作用提供食用菌钙离子：原料中加石膏、提供食用菌钙离子：原料中加石膏、CaCO3或过磷酸钙、骨粉提供食用菌钙或过磷酸钙、骨粉提供食用菌钙离子；离子；钙不断中和食用菌产生的有机酸；钙不断中和食用菌产生的有机酸；钙还能中和单宁；钙还能中和单宁；减少过量减少过量K、Mg对菌丝中毒，促进菌对菌丝中毒，促进菌丝生长。丝生长。14ppt课件1、常用培养料的配方和配制方法、常用培养料的配方和配制方法 培培养养料料 木屑木屑米糠培养料：米糠培养料：木生菇类木生菇类，如：，如：木耳、银耳、香菇；木耳、银耳、香菇；草茎或

9、草粪草茎或草粪厩肥培养料：厩肥培养料：草生菇类草生菇类，如：蘑菇、草菇；如：蘑菇、草菇；棉籽壳棉籽壳米糠培养料米糠培养料：多种菇类。：多种菇类。15ppt课件粪草培养基（适用于蘑菇）粪草培养基（适用于蘑菇）稻草或麦秸稻草或麦秸20kg、粪肥（干）、粪肥（干）30kg、石膏、石膏500g、水适量。、水适量。方法：稻草切成方法：稻草切成2cm长粪肥长粪肥混合混合发酵发酵石石膏膏调水调水装瓶装瓶灭菌灭菌1、常用培养料的配方和配制方法、常用培养料的配方和配制方法 16ppt课件w 稻草麸皮培养基（草菇）稻草麸皮培养基（草菇）w 干稻草干稻草78%、麸皮或米糠、麸皮或米糠20%、蔗糖、蔗糖1%、过磷酸钙

10、、过磷酸钙1%、水适量、水适量w 方法：稻草切成方法：稻草切成2cm长长发酵发酵蔗糖蔗糖麸皮过磷酸钙麸皮过磷酸钙 17ppt课件木屑米糠培养基木屑米糠培养基（香菇、木耳、猴头、平菇香菇、木耳、猴头、平菇等）等）木屑木屑78%、麸皮或米糠、麸皮或米糠20%、石膏、石膏1%、蔗糖、蔗糖1%、水适量。、水适量。木屑、麸皮、黄豆粉培养基（木屑、麸皮、黄豆粉培养基（银耳银耳）木屑木屑50kg、麸皮、麸皮15kg、黄豆粉、黄豆粉1kg、蔗糖、蔗糖0.75kg、MgSO4 0.25kg、水、水7075kg。棉籽壳培养基（棉籽壳培养基（平菇、猴头、金针菇平菇、猴头、金针菇）棉籽壳棉籽壳99.7%、蔗糖、蔗糖0

11、.1%、石膏、石膏0.2%、水适量。、水适量。1、常用培养料的配方和配制方法、常用培养料的配方和配制方法 18ppt课件称料拌料调节pH值分装培养料清洁（洗或擦）瓶、袋外壁封口1.不溶性主、辅料混拌均匀2.可溶性辅料溶于水后拌入主辅料3.注意检查含水量（手测法等）比实际要求的pH值调高1左右容器：菌种瓶菌种瓶、菌种袋菌种袋要求：上紧下松，外紧内松，中间一个洞卧式高压蒸汽灭菌锅分析原因？三.二、三级菌种的接种概念：菌种移至新培养基上的过程关键：无菌操作无菌操作接种接种环境消毒灭菌酒精棉球消毒双手操作器具消毒灭菌开启的管口、瓶口靠近灯焰拔出的棉塞勿触及任何地方动作快、准、稳无菌操作要点22ppt课

12、件接种方法二级种三级种用接种耙取蚕豆大母种放于瓶中料面上用接种匙（镊、铲）取枣大原种放于袋中或瓶中料面上注意：1、严格挑选待接的菌种质量；2、勿接入表面老菌丝及老种块。23ppt课件菌种的培养实际就是对菌丝体的培养培养条件场所清洁空气清新光线暗温度约25空气湿度60%70%培养方法勿堆放过挤及时剔除污染瓶（袋）及时剔除污染瓶（袋）栽培种的菌袋缺氧时可刺孔增氧控制菌龄（菌丝长满7-10天后使用）25ppt课件菌丝白（或呈该菌种应有的颜色）菌丝白（或呈该菌种应有的颜色）均匀、粗壮、有菇香味均匀、粗壮、有菇香味接种后萌发快接种后萌发快无杂色、无黄水、无结皮、无原基、无干缩脱壁等现象菌种出售菌种出售必

13、须贴有菌种质量合格标签，必须贴有菌种质量合格标签，标明菌种种类、级别、品种、生产单位和标明菌种种类、级别、品种、生产单位和接种日期。接种日期。合格菌种26ppt课件杂菌检查（菌种检查）杂菌检查（菌种检查）接种后的原种，一般在接种后的原种，一般在3d5d左右菌丝恢左右菌丝恢复生长，应每天全面检查杂菌情况，如有复生长，应每天全面检查杂菌情况，如有污染及时剔除。（正常为白色，若混有其污染及时剔除。（正常为白色，若混有其它色泽，应及时处理）；如发现接种块无它色泽，应及时处理）；如发现接种块无新菌丝萌发，则认为是死菌，应及时补种。新菌丝萌发，则认为是死菌，应及时补种。正常：菌丝白色正常：菌丝白色 杂菌：

14、黄、红、绿、黑杂菌：黄、红、绿、黑 死菌：补种死菌：补种27ppt课件菌种制作过程中，只要做到选择正确的配方和优质原料严格灭菌优良的二、三级菌种优良的二、三级菌种严格无菌操作科学培育选择优良菌种选择优良菌种28ppt课件六、制种、保藏中易碰到的问题及处理方法六、制种、保藏中易碰到的问题及处理方法1、母种污染处理、母种污染处理细菌污染细菌污染底部取菌：底部取菌：可根据细菌只发生在可根据细菌只发生在培养基表面培养基表面，而真菌菌丝能穿透到培养基内部的特点，用无而真菌菌丝能穿透到培养基内部的特点，用无菌操作法敲破试管取出培养基，在培养基的底菌操作法敲破试管取出培养基，在培养基的底部挑取一小块带有菌丝

15、的培养基，移植到另一部挑取一小块带有菌丝的培养基，移植到另一试管中培养，可得到纯正的母种。试管中培养，可得到纯正的母种。29ppt课件1、母种污染处理、母种污染处理细菌污染细菌污染覆盖培养：覆盖培养：将熔化培养基冷却到将熔化培养基冷却到40，倒在已，倒在已污染细菌的斜面上，使之形成厚约污染细菌的斜面上，使之形成厚约20 cm的覆的覆盖层，当食用菌菌丝透过培养基形成新的菌落盖层，当食用菌菌丝透过培养基形成新的菌落时，即可挑取转管纯化。时，即可挑取转管纯化。30ppt课件1、母种污染处理、母种污染处理真菌污染真菌污染 若污染的是青霉、黄霉、木霉等真菌，只要若污染的是青霉、黄霉、木霉等真菌，只要母种

16、菌丝与这些杂菌没有相联或尚有一部分菌母种菌丝与这些杂菌没有相联或尚有一部分菌丝没有相联，并且这些杂菌的菌丝还丝没有相联，并且这些杂菌的菌丝还没有产生没有产生孢子孢子时，可以用无菌方法仔细挑取没有相联的时，可以用无菌方法仔细挑取没有相联的一部分菌丝，移植到另外的试管中继续培育，一部分菌丝，移植到另外的试管中继续培育，就能得到纯正的母种。就能得到纯正的母种。31ppt课件2、原种、栽培种被杂菌污染的原因有哪些？、原种、栽培种被杂菌污染的原因有哪些？怎样鉴别？怎样鉴别？根据杂菌开始发生的部位，大致有以下几种根据杂菌开始发生的部位，大致有以下几种污染原因：污染原因：若杂菌同时在培养基的若杂菌同时在培养

17、基的上、中、下上、中、下部位发生，部位发生，主要是由于主要是由于培养基灭菌不彻底培养基灭菌不彻底造成的。造成的。若杂菌开始发生在若杂菌开始发生在接种块接种块上，这很可能是母上，这很可能是母种或原种已经感染了杂菌；或者是由于种或原种已经感染了杂菌；或者是由于接种工接种工具不严格具不严格（消毒），把杂菌带入。（消毒），把杂菌带入。32ppt课件2、原种、栽培种被杂菌污染的原因有哪、原种、栽培种被杂菌污染的原因有哪些？怎样鉴别？些？怎样鉴别？若杂菌先在若杂菌先在培养基表面培养基表面发生，这是由于接种发生，这是由于接种过程中过程中无菌操作不严无菌操作不严而引起的。而引起的。若杂菌是在若杂菌是在接种后若

18、干天才接种后若干天才发生的，而且是发生的，而且是发生在瓶口往下挂的，这说明杂菌是从棉花塞发生在瓶口往下挂的，这说明杂菌是从棉花塞侵入培养基的。引起的原因是侵入培养基的。引起的原因是培养室湿度过大、培养室湿度过大、棉塞受潮，造成霉菌滋生所致棉塞受潮，造成霉菌滋生所致。33ppt课件3、为什么母种不能多次转管移植？、为什么母种不能多次转管移植？母种转管次数多了会削弱菌丝的生活力，降母种转管次数多了会削弱菌丝的生活力，降低出菇率，甚至造成菌丝不孕而不能形成子实低出菇率，甚至造成菌丝不孕而不能形成子实体。因此母种培育可以体。因此母种培育可以一次多培育几支试管一次多培育几支试管，不要反复多次分离转管，以

19、确保菌丝旺盛的生不要反复多次分离转管，以确保菌丝旺盛的生活力。活力。（发生变异）（发生变异）34ppt课件4、优良菌种的标准是什么？、优良菌种的标准是什么？各种食用菌菌种，既有特定的质量标准，也有各种食用菌菌种，既有特定的质量标准，也有共同的质量标准。这些共同的质量标准主要是共同的质量标准。这些共同的质量标准主要是纯、纯、壮壮两条。两条。纯：纯：除银耳菌种，其余各种栽培食用菌均是一除银耳菌种，其余各种栽培食用菌均是一种菌丝体的纯培养物，不得混入杂菌或纯培养物种菌丝体的纯培养物，不得混入杂菌或纯培养物以外的其它菌种。以外的其它菌种。例如：香菇例如：香菇7925菌种，只能是菌种，只能是7925菌株

20、菌丝体的菌株菌丝体的纯培养。纯培养。35ppt课件复习思考题 1 1简述二、三级菌种的制作流程。简述二、三级菌种的制作流程。2 2根据实际操作说明如何测定培养基的含水量和根据实际操作说明如何测定培养基的含水量和pHpH值。值。3.3.分装培养料时，为何要在料中打一个孔？分装培养料时，为何要在料中打一个孔？4.4.简述二、三级培养基的灭菌方法及要求。简述二、三级培养基的灭菌方法及要求。5.5.如何检验二、三级菌种培养基的灭菌效果？如何检验二、三级菌种培养基的灭菌效果？6.6.简述一级菌种转接二级菌种，二级菌种转接三级菌简述一级菌种转接二级菌种，二级菌种转接三级菌种的过程。种的过程。7.7.合格的培养室有什么要求？合格的培养室有什么要求？8 8试述二、三级菌种的培养方法？试述二、三级菌种的培养方法？9 9如何检查二、三级菌种质量？如何检查二、三级菌种质量？1010请你以一个菌种厂厂长或技术员的身份，谈谈如请你以一个菌种厂厂长或技术员的身份，谈谈如何搞好菌种生产。何搞好菌种生产。36ppt课件37ppt课件