梅毒感染的实验室检测流程及策略课件.pptx
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- 梅毒 感染 实验室 检测 流程 策略 课件
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1、浙江大学医学院附属第二医院浙江大学医学院附属第二医院检验科检验科 陶志陶志华华E-mail:E-mail: 梅毒感染的实验室梅毒感染的实验室检测检测流程与策略流程与策略1ppt课件课件n 梅毒流行病学简介梅毒流行病学简介n 梅毒实验室检测梅毒实验室检测流程流程n 罗氏梅毒检测试剂多中心研究结果罗氏梅毒检测试剂多中心研究结果n梅毒实验室检测策略梅毒实验室检测策略主要内容2ppt课件课件据最新估计,全球每年有1200万新发梅毒感染病例,其中200万为孕妇WHO.2011;WHO.2012;WHO.2011;WHO.2012;UNICEF.2011.UNICEF.2011.梅毒感染新发病例(单位:百
2、万)全球梅毒流行现状3ppt课件课件 梅毒起源于美洲,然后从美洲到西班牙,从欧洲到亚洲印度,15051505年年从印度传入广东岭南(“广东疮”),后传到全国各地。少数民族地区居民梅毒感染率=10%牧区人群梅毒感染率=48%部分城市地区人群梅毒感染率=5%部分农村地区人群梅毒感染率=2-3%(此幻灯片内容源自中国疾病预防控制中心性病控制中心陈祥生教授)我国梅毒流行现状4ppt课件课件 通过三大措施,梅毒在我国实现基本消灭n 健康教育和宣传运动健康教育和宣传运动n 免费梅毒筛查(梅毒血清制动试验、荧光抗免费梅毒筛查(梅毒血清制动试验、荧光抗体试验)体试验)n 治疗治疗我国梅毒基本消灭我国梅毒基本消
3、灭(1950-1964(1950-1964年年)作为重大防治成就、学术成就,作为重大防治成就、学术成就,赢得国际上的广泛认可。赢得国际上的广泛认可。n19781978年获得全国科学大会奖年获得全国科学大会奖n发表论文发表论文我国对梅毒的控制和我国对梅毒的控制和消灭消灭、梅毒的传播及在中国梅毒的传播及在中国的消灭的消灭(此幻灯片内容源自中国疾病预防控制中心性病控制中心陈祥生教授)我国梅毒流行现状5ppt课件课件中国梅毒报告发病趋势中国梅毒报告发病趋势n梅毒报告病例数梅毒报告病例数448 620448 620例,居甲乙类传染病第例,居甲乙类传染病第3 3位位n梅毒报病较梅毒报病较20112011年
4、增长年增长4.41%4.41%,隐性梅毒增长的贡献率,隐性梅毒增长的贡献率99.6%99.6%(此幻灯片内容源自中国疾病预防控制中心性病控制中心龚向东教授)我国梅毒流行现状6ppt课件课件梅毒是一个可以临床治愈的传染病病例诊断依据n病史病史n症状症状n实验室检查实验室检查实验室检查结果对梅毒诊断及判愈有决定性意义实验室检查结果对梅毒诊断及判愈有决定性意义我国梅毒流行现状7ppt课件课件我国政府梅毒控制相关政策我国政府梅毒控制相关政策l卫生部于2010年6月3日下发了关于中国预防与控制梅毒规划(2010-2020年)l卫生部2011年2月12日下发预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播工作实施方案l国务
5、院2012年1月13日中国预防控制艾滋病五年行动计划(21011-2015年)l2013年1月实施性病防治管理办法梅毒控制主要措施:梅毒控制主要措施:提高梅毒实验室检测质量提高梅毒实验室检测质量加强梅毒筛查力度加强梅毒筛查力度我国梅毒流行现状8ppt课件课件n 梅毒流行病学简介梅毒流行病学简介n 梅毒实验室检测梅毒实验室检测流程流程n 罗氏梅毒检测试剂多中心研究结果罗氏梅毒检测试剂多中心研究结果n梅毒实验室检测策略梅毒实验室检测策略主要内容9ppt课件课件常用梅毒实验室检测方法n 病原学检测病原学检测n 血清学检测血清学检测10ppt课件课件病原学检查病原学检查原理:原理:一期、二期梅毒时一期
6、、二期梅毒时,取硬下疳、扁平湿疣、,取硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组织液,在暗视野显微镜下,光线从聚光器的边缘斜织液,在暗视野显微镜下,光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光,从而可根据射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光,从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。其特殊形态和运动方式进行检测。方法:方法:(1 1)暗视显微镜检查)暗视显微镜检查 (2 2)镀银染色法)镀银染色法 (3 3)核酸检测(血液标本?)核酸检测(血液标本?)注:梅毒螺旋体目前体外人工培养还没有获得成功,注:梅毒螺旋体目前体外人工培养还
7、没有获得成功,仅能通过接种兔睾丸等部位进行有限增殖。仅能通过接种兔睾丸等部位进行有限增殖。11ppt课件课件病原学检查的临床意义n 螺旋体检查是诊断早期梅毒螺旋体检查是诊断早期梅毒的最佳方法,对于患者的早期诊的最佳方法,对于患者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十分重要的意义。传染源都有十分重要的意义。n 如未见到梅毒螺旋体,并不如未见到梅毒螺旋体,并不能排除患梅毒的可能性。能排除患梅毒的可能性。12ppt课件课件梅毒血清学检测方法n非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验 (非特异性梅毒抗体非特异性梅毒抗体)n 梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒
8、螺旋体抗原血清学试验 (特异性梅毒抗体特异性梅毒抗体)两类方法。)两类方法。13ppt课件课件非梅毒螺旋体抗原血清学检测方法包括:方法包括:(1 1)快速血浆反应素环状卡片试验)快速血浆反应素环状卡片试验 (RPRRPR)(2 2)甲苯胺红不加热血清试验()甲苯胺红不加热血清试验(TRUSTTRUST)(3 3)性病研究实验室试验)性病研究实验室试验 (VDRLVDRL)等。等。基本成分是基本成分是心磷脂心磷脂 卵磷脂和胆固醇卵磷脂和胆固醇抗原抗体结合形成复合物,凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见抗原抗体结合形成复合物,凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见上述方法的敏感性和特异性都基本相似上述方法的敏感性和
9、特异性都基本相似14ppt课件课件梅毒螺旋体抗原血清学检测n 抗原为梅毒螺旋体特异蛋白(包括螺旋体重组特抗原为梅毒螺旋体特异蛋白(包括螺旋体重组特异抗原),检测梅毒患者血中特异性抗梅毒螺旋体异抗原),检测梅毒患者血中特异性抗梅毒螺旋体抗原的抗体。抗原的抗体。n 感染梅毒螺旋体后,一旦梅毒螺旋体抗体试验呈感染梅毒螺旋体后,一旦梅毒螺旋体抗体试验呈阳性,则阳性,则患者终身阳性患者终身阳性。15ppt课件课件梅毒螺旋体抗原血清学试验方法n梅毒螺旋体颗粒凝集试验梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPATPPA)n 梅毒螺旋体血球凝集试验梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHATPHA)n 梅毒酶联免疫吸附试验(梅毒
10、酶联免疫吸附试验(ELISAELISA)n 化学发光免疫分析法化学发光免疫分析法(CLIACLIA)n 梅毒免疫层析法梅毒免疫层析法-梅毒快速检测梅毒快速检测(RTRT)n 荧光螺旋体抗体吸收试验(荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABSFTA-ABS)n 梅毒螺旋体蛋白印迹试验(梅毒螺旋体蛋白印迹试验(WBWB)16ppt课件课件梅毒螺旋体免疫学检测的发展历程1980s2000EIA被FDA批准用于确认试验和血液筛查英国公共健康实验室指南:EIA可以作为替代VDRL/RPR+TPHA的选择之一2001FDA批准EIA用于临床诊断2008欧盟指南推荐:EIA/CIA/TPPA用于筛查,不再推荐V
11、DRL/RPR2009美国CDC-APHL报告:EIA/CIA用于筛查www.FDA.govwww.FDA.gov.European guideline on the management of syphilis 2008European guideline on the management of syphilis 2008STD treatment guideline 2006 US CDC STD treatment guideline 2006 US CDC 17ppt课件课件2014欧洲梅毒管理指南自动化的化学发光检测已经用于许多大型的欧洲实验室,尤其适合对无症状的人群和献血者进行高
12、通量的筛查。该检测流程更能检测非常早期的梅毒感染。European guideline European guideline on on the management the management of syphilis 2014of syphilis 201418ppt课件课件美国梅毒检测类型的变化 化学发光的测试数量逐年增加19ppt课件课件为何选择ECLIA/CLIA?ECLIA/CLIA?n 自动化(高通量)n 低成本(高样本量的情况下)n 更少的实验室职业危害n 没有假阴性n 结果客观n 检测IgMIgM抗体,可用于诊断非常早期的感染VSUS CDC:reverse sequence
13、 US CDC:reverse sequence syphilis screeningsyphilis screening20ppt课件课件检测原理:双抗原夹心法(DAGS),检测时间18 分钟IgG:IgG:样本中,抗样本中,抗-TpN17TpN17,或抗或抗-TpN15TpN15抗体抗体钌标记的钌标记的TpN17TpN17,TpN47TpN47抗抗原原9 9 分钟分钟测定测定IgM:IgM:样本中,抗样本中,抗-TpN17TpN17,或抗或抗-TpN47TpN47抗体抗体生物素标记的生物素标记的TpN17,TpN17,TpN15TpN15抗原抗原9 9 分钟分钟快速高效全自动电化学发光(E
14、CLIAECLIA)免疫检测原理21ppt课件课件n 梅毒流行病学简介梅毒流行病学简介n 梅毒实验室检测梅毒实验室检测流程流程n 罗氏梅毒检测试剂多中心研究结果罗氏梅毒检测试剂多中心研究结果n梅毒实验室检测策略梅毒实验室检测策略主要内容22ppt课件课件国际多中心研究Clinical and Vaccine Immunology January 2015 Volume 22 Number 123ppt课件课件意大利德国(3家中心)土耳其中国(华西医院)泰国奥地利全球共8家研究中心(6个国家)国际多中心研究24ppt课件课件 研究设计 ElecsysElecsysLiaisonLiaison S
15、erodiaSerodiaImmuliteImmuliteArchitectArchitectLiaisonSerodiaImmuliteArchitect敏感性评估特异性评估VitrosEnzygnost25ppt课件课件样本信息特异性评估样本来源干扰样本8079例3500常规样本225HIV91EBV10Lyme病4579献血员敏感性评估确诊样本干扰样本928例922阳性228合并HIV6阴性26ppt课件课件国家/中心样本量ElecsysElecsysLiaisonLiaison SerodiaSerodia ImmuliteImmulite ArchitectArchitectTMTM
16、德国 lab1301100%100%100%德国 lab283100%100%98.8%98.8%意大利218100%100%100%泰国124*100%100%中国202100%总体928928*100%100%100%100%100%100%99.67%99.67%99.51%99.51%研究结果 敏感性结果*ElecsysElecsys 梅毒检测试剂在所有实验室中的敏感度结果均达到 100%100%*2例样本结果为“不确定”,4例为“无反应性”27ppt课件课件梅毒分期样本量确认阳性ElecsysElecsysI期梅毒101101100%II期梅毒124124100%隐性梅毒470470
17、100%未知分期229227*100%总体924#922*100%研究结果 梅毒分期样本的敏感性结果*ElecsysElecsys 梅毒检测试剂在能100%100%检测出不同分期梅毒样本#排除4例疑似操作错误的样本最终计算结果时排除2例确证试验结果为未确定的样本*排除2例确证试验结果为未确定的样本28ppt课件课件样本Lot P1Lot P1Lot P2Lot P2Lot P3Lot P3常规样本99.80%99.90%100.00%献血员样本99.93%99.82%99.82%总体特异性99.88%99.85%99.89%研究结果 总体特异性结果(3批次试剂)*ElecsysElecsys
18、梅毒检测试剂的总体特异性大于 99.85%99.85%29ppt课件课件 研究结果特异性结果-献血员样本*ElecsysElecsys 梅毒检测试剂在献血员样本中的总体特异性达到 99.93%99.93%30ppt课件课件 研究结果特异性结果-常规样本*ElecsysElecsys 梅毒检测试剂在常规样本中的总体特异性达到 99.80%99.80%31ppt课件课件 研究结果干扰样本结果*ElecsysElecsys 梅毒检测试剂在可能的干扰样本中的敏感性和特异性均更高EBV(+)/Syphilis(-)EBV(+)/Syphilis(-)特异性HIV HIV(+)(+)/Syphilis(-
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