无菌操作技术实践课件3.ppt

1、知知识识点点一一知知识识点点二二当当堂堂即即时时达达标标学学业业分分层层测测评评微微 生生 物物 的的 分分 离离选择 固体 单个菌落 混合平板 固体 选择培养 抑制 菌落 固体 形态结构 生长群体 形状 颜色 分类 比较操作特点结果涂布平板法取一定稀释度的样品涂布平板用无菌玻璃刮铲将样品涂布均匀先制作琼脂平板后加入菌液细菌菌落通常仅在平板表面生长混合平板法取一定稀释度的样品与熔化的琼脂混合将与样品混合后的琼脂倒入无菌培养皿菌液与琼脂混合，共同倒平板细菌菌落出现在平板表面及内部比较方面平板划线法稀释涂布平板法需在无菌条件下操作不需无菌操作培养基中不加琼脂培养基中加有琼脂不可计算菌液中的活菌数可

2、计算菌液中的活菌数需要接种环需要玻璃刮铲编号成分含量KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖10.0 g尿素1.0 g琼脂15.0 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL土土 壤壤 微微 生生 物物 的的 分分 离离 、培培 养养 与与 数数 量量 测测 定定稀释倍数 血球计数板 载玻片 25 400 盖玻片 毛细滴管 5 稀释倍数 纤维素 土壤悬液 接种培养 项目直接计数法间接计数法主要用具显微镜、细菌计数板培养基计数依据菌株本身培养基上菌落数优点计数方便、操作简单计数的是活菌缺点死菌、活菌都计算在内操作较复杂，且有一定误差计算公式每毫升原

3、液含菌株数400104每小格平均菌株数稀释倍数每毫升原液含菌株数培养基上平均菌落数稀释倍数(涂布所用稀释液为1 mL)网络构建网络构建核心回扣核心回扣1.实验室中分离微生物的方法有平板分离法和选实验室中分离微生物的方法有平板分离法和选择培养分离，平板分离法常用的有涂布平板法和择培养分离，平板分离法常用的有涂布平板法和混合平板法。混合平板法。2.针对某种微生物的特性，设计一个特定的环境，针对某种微生物的特性，设计一个特定的环境，使之特别适合这种微生物的生长，而抑制其他微使之特别适合这种微生物的生长，而抑制其他微生物的生长。这种通过选择培养进行微生物纯培生物的生长。这种通过选择培养进行微生物纯培养

4、分离的技术称为选择培养分离。养分离的技术称为选择培养分离。3.测定微生物数量的常用方法有涂布平板法和显测定微生物数量的常用方法有涂布平板法和显微镜直接计数法。涂布平板法计数的结果与待测微镜直接计数法。涂布平板法计数的结果与待测样品中真正的含菌数量相比往往偏低。样品中真正的含菌数量相比往往偏低。4.涂布平板法培养和计数微生物的流程为：准备涂布平板法培养和计数微生物的流程为：准备实验器材实验器材采集土壤，制备悬液采集土壤，制备悬液选择适于分离选择适于分离特定微生物的培养基特定微生物的培养基接种接种培养与观察培养与观察计数计数菌落。菌落。5.涂布平板法计数微生物的公式：每克土壤样品涂布平板法计数微生物的公式：每克土壤样品的细菌数某一稀释度几次重复培养后的菌落平的细菌数某一稀释度几次重复培养后的菌落平均数均数稀释倍数稀释倍数(涂布所用稀释液为涂布所用稀释液为1 mL)学业分层测评（三）学业分层测评（三）点击图标进入点击图标进入