《病理诊断技术》课件：包涵体染色.ppt

1、包涵体包涵体 包涵体（包涵体（Inclusion body）：病毒感染）：病毒感染细胞后在胞浆内形成的一种光学显微细胞后在胞浆内形成的一种光学显微镜下可见的特殊结构，富含病毒的区镜下可见的特殊结构，富含病毒的区域。域。大多数包涵体由病毒子组成，大多数包涵体由病毒子组成，少数包涵体是细胞对病毒反应的产物。少数包涵体是细胞对病毒反应的产物。如狂犬病的如狂犬病的 Negri 氏体。氏体。病毒包涵体染色法病毒包涵体染色法病毒染色法病毒染色法 Mann亚甲蓝伊红染色法亚甲蓝伊红染色法 Stovall-Black包涵体染色法包涵体染色法 Lendrum包涵体染色法包涵体染色法 Giemsa包涵体染色法包涵

2、体染色法 病毒包涵体染色法病毒包涵体染色法 Mann亚甲蓝伊红染色法亚甲蓝伊红染色法亚甲篮伊红染液：亚甲篮伊红染液：1亚甲蓝水溶液亚甲蓝水溶液6ml，1伊红伊红Y水溶液水溶液6ml，蒸馏水，蒸馏水28ml。分化液：分化液：无水酒精无水酒精100ml，40氢氧化氢氧化钠钠3滴。滴。操作方法操作方法 切片脱蜡至水；切片脱蜡至水；亚甲蓝伊红染液亚甲蓝伊红染液824h；蒸馏水蒸馏水1020sec；分化液分化液2030sec；丙酮脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。丙酮脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。结果：结果：包涵体、尼氏体呈红色，包涵体、尼氏体呈红色，细胞核呈蓝色。细胞核呈蓝色。Giemsa法显示多种病

3、毒包涵体。法显示多种病毒包涵体。1.切片脱蜡至水，蒸馏水洗。2.浸入0.01M磷酸盐溶液(PBS)PH7.6中,换洗3次,3分钟/次。3.浸染于PH7.6的Giemsa染液中过夜。4.PBS冲洗15分钟。5.0.01%柠檬酸水溶液分化，于镜下控制。6.蒸馏水洗。7.吸水纸吸干或风干切片。8.丙酮脱水，1-2分钟。9.入1：1丙酮和二甲苯1-2分钟。10.二甲苯透明，中性树胶封固。Giemsa法显示多种病毒包涵体法显示多种病毒包涵体结果：结果：SARS病毒包涵体于肺细胞胞浆中病毒包涵体于肺细胞胞浆中呈现鲜红色；合胞病毒，巨细胞病毒包涵呈现鲜红色；合胞病毒，巨细胞病毒包涵体于肺组织的细胞核内，在没

4、有形成包涵体于肺组织的细胞核内，在没有形成包涵体前呈鲜红色，形成包涵体后呈深紫色至体前呈鲜红色，形成包涵体后呈深紫色至蓝色。红血细胞显示绿色。蓝色。红血细胞显示绿色。病毒包涵体染色方法（苏木素病毒包涵体染色方法（苏木素-伊红）伊红）(1)二甲苯（二甲苯（）20min；(2)二甲苯（二甲苯（）20min；（；（3）100无水乙无水乙醇醇 2min；(4)95%乙醇乙醇 2min；(5)80%乙醇乙醇2min；(6)70%乙醇乙醇 2min;(7)流水冲洗流水冲洗 5min(8)苏木素染色苏木素染色 5min(9)流水洗流水洗 5min(10)盐酸分化盐酸分化 20s(11)流水冲洗返蓝流水冲洗返蓝5min(12)伊红液染色伊红液染色 30s(13)95%乙醇乙醇 20s;(14)100%乙醇乙醇 5min;(15)100%乙醇乙醇 5min(16)二甲苯（二甲苯（）5min(17)二甲苯（二甲苯（）5min （18）中性树胶封片）中性树胶封片思考题思考题1.包涵体形成的原理？2.包涵体染色的方法有哪些？原理是什么？