Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明-2课件.ppt

1、Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明-第二章Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明*4.2.3 进样序列的保存 在命令栏“Sequence”下，单击“Save Sequence”或单击快捷操作的“Save Current Sequence”图标（左边一软盘，右边三个小瓶）；在path下选择保存路径，在此路径下选择subdiectory输入新文件名，单击“OK”，即完成。4.2.4 平衡柱子 调用相应方法后，将流速改为0ml/min，待界面变为绿色后，控制面板上显示”ready”，单击控制面板上的on，再将泵流速慢慢上升至所需流速。此时系统开始按照所设定的方法平衡柱子。Ag

2、ilent-1200型高效液相色谱仪操作说明*4.2.5 HPLC自动进样 在色谱图中可选择Change改变所要检测的波长，Balance使基线归零，Adjust使横纵坐标适应图谱，对于自动进样系统将自动平衡。等仪器准备好，基线平稳，直接点击“START”图标。5.数据分析5.1 谱图的调用Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明*单击桌面上的Instrument 1 offline 打开命令窗口，单击Data Analysis此时在当前窗口左侧将出现磁盘中所保存的文件，在下拉菜单中找到所需要分析的文件并双击打开。或在Instrument 1 online 窗口中点击Data Anal

3、ysis 按照上述程序操作画面中即出现所调用的色谱图。5.2 积分 先调用所要分析的色谱图，调出后系统将根据方法中所设定的积分选项进行积分。如欲对其中某些参数进行修改，可在命令栏“Integration”下，选择“Integrate Events”或单击快捷操作的“Edit/Set Integration Events Table”图标，此时，在屏幕下方左侧出现积分 Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明*参数表，右侧为积分结果，在积分参数表中按实际的要求输入修改的参数，在命令栏“Integration”下，选择“Integrate”或单击快捷操作的“Integrate Curren

4、t Chromatogram”图标（左边有，右边两个峰），仪器即按照新设定的积分参数重新积分，完成后，单击积分参数表上方“Exit and save events to method”的快捷图标（右下角带勾），保存所作的参数修改并退出。Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明*Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明*5.3 谱图优化 从“Signals”菜单中选择“Signals Options”，如下图所示。从“范围(Ranges)”中选择“满量程(Full)”或“自动量程(Auto Scale)”及合适的时间范围(Time Range)或选择“自定义量程(Use Rang

5、es)”调整。反复进行，直到图的比例合适为止。点击“OK”。6 打印报告 在命令栏“Report”下，选择“specify Report”或单击最右侧快捷操作的“Specify Report Calculation and Print Style”图标（右下角带叉的报告），根据实际要求选择报告的格式和输出形式等，单击“OK”，即完成。Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明*7.关机 关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机。关闭Agilent 1200各模块电源开关。8.Agilent 1200 LC维护保养Agilent-1200

6、型高效液相色谱仪操作说明*8.1 色谱柱用完后，柱内应充满溶剂，两端封死（如乙腈/甲醇适于反相色谱柱，正相色谱柱用相应的有机相）。8.2 流动相使用前必须过滤，纯缓冲盐溶液有效期应不超过7天，有机相溶液有效期不应超过1个月。8.3 带seal-wash的 1200，要配制90%水+10%异丙醇，开启seal-wash清洗泵，溶剂不能干涸。Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明*8.4 应每周检查溶剂瓶中的溶剂过滤器是否堵塞，堵塞后的处理法方法：将过滤头从组件中取下，在浓硝酸（35%）中浸泡1h，然后用二次蒸馏水冲洗干净。8.5 Agilent 1200LC泵给色谱柱提供稳定、无脉动、

7、流量准确的流动相，及时合理的维护非常重要，方法如下：8.5.1 流动相使用前请必须脱气、过滤。8.5.2 使用缓冲盐时，要加在线Seal-wash选项。Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明*8.5.3 关机前，用 100%的乙腈冲洗系统20分钟，然后关泵，（适于反相色谱柱，正相色谱柱用适当的溶剂冲洗）。8.5.4 及时更换Purge Valve内的过滤芯。（当打开Purge Valve时，压力高于10bar，表明过滤芯已堵）。8.5.5 使用合适的密封圈。8.6 使用梯度比例时要注意事项：Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明*4.8.6.1 当盐溶液与有机溶剂溶液混合时

8、，盐溶液能与有机溶剂溶液完全混溶，而不会出现沉淀。但是在比例阀的混合点，重力作用使盐颗粒沉淀下来，通常，阀A接水相/盐溶液，D接有机溶剂，此法连接可有效使盐回落到盐溶液中，并被溶解。若颠倒过来，盐可能落在有机溶剂中，出现问题。8.6.2 当使用缓冲盐溶液和有机溶剂时，推荐将缓冲盐通道接在A通道上，有机溶剂通道直接接在A通道的上方D通道上；定期用水冲洗所有的通道，以除去阀口上可能出现的盐沉淀。Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明*8.7 在线真空脱气机使用注意事项：8.7.1 第一次使用，要用随仪器附带的注射器抽满脱气机腔体；更换不同类型的溶剂时，要先抽空，再抽满。8.7.2 不用的

9、通道要充满溶剂或密闭起来。8.8 更换色谱柱时要注意事项：Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明*在使用HPLC时，应特别注意“柱外效应”对分析结果的影响，由于样品分子在液体流动相中的扩散系数比在气体中小45个数量级，液体流动相的流速也比气相慢1-2个数量级。因此，样品进入色谱柱后，在柱子以外的任何死体积（进样器、柱接头、连接管、检测器）中，样品分子的扩散和滞留，都会引起色谱峰的展宽，而使柱效降低。为使柱外效应减之最小，获得理想的分析结果，Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明*仪器的流动相管路连接非常重要，一般Agilent 1200LC 在第一次安装时，均有受过专业培训的安装工程师负责安装，各种接头会处理的非常完美。客户只需在更换色谱柱时注意接头处理就可以了，一般柱子入口接头为不锈钢卡套接头，柱子出口为不锈钢卡套接头或PEEK管线手拧街头，当完成第一次安装后，不锈钢卡套已固定死，当接不同的柱子时，要注意柱子接头处的形状和长度，否则会产生一个非常大的死体积。Agilent-1200型高效液相色谱仪操作说明