全国高等学校医学规划教材临床基础检验学：第三章-血液分析仪课件.ppt

1、全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章血液分析仪血液分析仪全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 KEY POINTS1.Basic content of hematology analyzers.2.Principles of hematology analyzer based on one or two classic methods,electrical impedance and(or)optical detection.3.Parameters from hematology analyzers and their clinical values.4.Characterist

2、ics and significances of blood cell histograms and scattergram.5.Function assessment of hematology analyzer.6.Case studies with application of parameters and histogram.全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验 血液分析仪（hematology analyzer,HA）：临床血液一般检查最常用仪器。50年代，美国库尔特（W.H.Coulter）发明电子血细胞计数仪并申请专利。血液分析仪优势：检测项目多 速度快

3、 精度高 易操作全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验第一节第一节 检测原理检测原理 一、仪器基本结构一、仪器基本结构（一）机械系统（一）机械系统 （二）电学系统（二）电学系统 （三）光学系统（三）光学系统 全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验 二、电阻抗法（一）电阻抗原理(principle of electrical impedance)，又称库尔特原理（Coulter principle）全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（二）白细胞计数和分类计数原理仪器将体积为35450fL的血细胞，分为256个通道（cha

4、nnel）。每个通道：1.64fl。根据细胞大小，分别置于不同的通道中，显示血细胞体积分布直方图（Histogram）。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验经溶血素处理脱水后，血细胞体积大小发生了变化第一群（3590fl）小细胞区：淋巴细胞（体积最小）：一般在3590fl。第二群（90160fl）是单个核细胞区，（中间细胞）：单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等第三群（160fl）大细胞区：嗜中性粒细胞（体积最大）：一般在135-350fl全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验三分群血液分析仪正常白细胞分类模式图（直

5、方图）%35 90 160 300 400 450(fl)全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（三）电阻抗法红细胞检测原理 红细胞计数和血细胞比容测定与白细胞计数相似。100 200 300 400(fl)%全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（四）电阻抗法血小板检测原理 血小板计数（platelet,PLT）：随红细胞在一个系统中进行检测。直方图在228fl（不同仪器不一）。血小板平均体积（mean platelet volume,MPV）。10 20 30(fl)10 20 30(fl)%全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血

6、液分析仪检验（二）光散射法血液分析仪检测原理 组合应用 电学 光学 细胞化学等全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验细胞流电学和光学检测图（AcT 5diff）全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（一）白细胞检测 1.容量、电导、光散射（volume，conductivity，scatter,VCS）法：VCS法检测原理法检测原理细胞体积技术细胞体积技术（测量细胞大小）（测量细胞大小）电导性技术电导性技术（测量细胞内部结（测量细胞内部结构）构）光散射技术光散射技术（测量细胞形态、（测量细胞形态、细胞核和细胞颗粒）。细胞核和细胞颗粒）。全国高等学

7、校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验 体积 电导 光散射全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验VCS可显示3种细胞散点图DF1（体积值和散射光值）DF2（体积值和电导值）DF3（体积值和电导值）：只显示basophil 全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验2.电阻抗与射频法（能透入细胞内，测量核的大小及颗粒的多少）：RF:射频电流射频电流 细胞内部结构信息细胞内部结构信息DC:直流电直流电 细胞大小的信息细胞大小的信息 全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验嗜酸性粒细胞检测系统嗜碱性粒细胞检测系统5种白细

8、胞分类检测系统：直流电（direct current，DC）为横坐标，以射频（radio frequency，RF）为纵坐标。幼稚细胞检测系统：全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验 3.激光与细胞化学法 1）过氧化物酶检测通道；2）嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验4.多角度偏振光散射（multi-angle polarized scatter separation of white cell,MAPSS）法0：前角光散射（13），可粗略测定细胞大小。10：狭角光散射（711），可测定细胞内部结构相对特征。90

9、：垂直光散射（70110），测定细胞核分叶情况。90：消偏振光散射（70110），区分嗜酸性粒细胞与其他细胞。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验(二）光散射法红细胞检测原理 低角度(23)：测量红细胞体积高角度(515)：测定红细胞血红蛋白浓度得到MCV、MCH、MCHC测定值，计算出RDW、红细胞血红蛋白分布宽度（red blood cell hemoglobin distribution width，HDW）全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（三）光散射法血小板检测原理 M

10、ie理论（Mie theory of light scatter for homogeneous spheres）：当球形化的血小板一个一个通过激光照射区时：全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验高角度（515）：检测细胞折射指数（reactive index，RI）；低角度（23）：测量细胞大小。大血小板与各种碎片如果体积相似，但由于内容物不同，RI相差较大，故能鉴别。折射系数:血小板 1.351.40RBC含高浓度Hb 1.351.44 全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验 四、血红蛋白检测原理四、血红蛋白检测原理 比色法比色法全国高等学校

11、医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验五.网织红细胞计数（reticulocyte，RET）原理 20世纪90年代起，有多种检测原理相似网织红细胞分析仪。血液分析仪检测原理：用新亚甲蓝染色使红细胞RNA着色或用荧光染料对RNA进行染色。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验检测参数：网织红细胞绝对值（RET#）网织红细胞百分数（RET%）网织红细胞平均体积（MCVr）网织红细胞成熟指数（RMI）网织红细胞分布宽度（reticulocyte distribution width,RDWr）全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验 新亚甲蓝

12、网织红细胞染色全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验光散射法网织红细胞检测散点图 全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验第二节 血细胞分析仪检验参数（一）检测参数 中高档仪器检测参数：20项左右或超过40多项（二）相关参数的临床应用全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验第三节第三节 血细胞分析仪检验图形血细胞分析仪检验图形一、血细胞直方图 横坐标为血细胞体积大小纵坐标为不同体积细胞的相对频率。（一）白细胞直方图（一）白细胞直方图 1.正常白细胞直方图正常白细胞直

13、方图 全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验 2异常白细胞直方图异常白细胞直方图 全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（二）红细胞直方图1.正常红细胞分布：50200fl 2.异常红细胞直方图全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（三）血小板直方图1.正常血小板直方图呈左偏态分布：230fl分布，主要在215fl。2.异常血小板直方图全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验第四节 仪器质量保证 仪器性能评价（ICSH）1.可比性(comparability)指血液分析仪测定结果，与常规方法所测结果相

14、比较。显微镜法是血细胞检验基础。P0.05有可比性。P0.05无可比性结论：计数细胞越多、选用吸管、计数盘越多，计数结果越接近真值。实际工作中，镜检法很难达到此要求。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验经严格校正的血液分析仪：计数细胞多操作步骤标准化精确性高（CV可2%）准确性较高全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验2.准确性(accuracy)准确性是指测定结果与真值一致性的程度。3.总重复性(overall precision)指同一份标本多次测量的结果接近的程度。重复测定1份抗凝静脉血10次，计算CV值。全国高等学校医学规划教材临床基础

15、检验学 第三章 血液分析仪检验4.精密度(precision)批内（within-batch）精密度：同一批样本重复测定结果的评价。批间(between-batch)精密度：对两批或两批以上样本重复测定结果的评价。精确度和准确度精确度和准确度:全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验5.携带污染率(carry over)：连续测定1份高值样本3次（i1、i2、i3）再测定1份低值样本3次（j1、j2、j3）携带污染率（%）（j1-j3）/（i3-J3）全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验6.稀释效果 指测定值与稀释倍数是否呈比例关系。线性关系范围越宽越理想。P 0.01,非线性相关。P 0.05，未偏离线性。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验稀释效果稀释效果 MCH MCV MCHC RBC全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验The end