幽门螺旋杆菌检测方法和治疗课件.ppt
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1、幽门螺旋杆菌检测与治疗幽门螺旋杆菌检测与治疗1ppt课件 幽门螺旋杆菌的发现实际上,怀疑胃、十二指肠疾患的发生与某种细菌的感染有联系却已经有100多年的历史了。1875年,德国的解剖学家发现了胃黏膜有螺旋样细菌存在。1893年,意大利的Giulio Bizzozero博士也观察到胃黏膜表面有一种螺旋状的细菌存在。1979年,澳大利亚年,澳大利亚42岁的病理学家岁的病理学家Robin Warren发现发现50%左右的病人的胃腔下半部分附左右的病人的胃腔下半部分附生着许多微小的弯曲的细菌。生着许多微小的弯曲的细菌。1981年,他邀请当年只有年,他邀请当年只有30岁的年轻的澳大利亚内科医生岁的年轻的
2、澳大利亚内科医生Barry Marshall合作。合作。幽门螺杆菌是幽门螺杆菌是1982年由澳大利亚医师年由澳大利亚医师B Marshall在一个带有偶然性的机会下分离培养出在一个带有偶然性的机会下分离培养出来的,至今已来的,至今已35年了。年了。2ppt课件1984年,Marshall和Warren在柳叶刀发表了那篇石破天惊的论文“胃炎和消化性溃疡患者胃部发现的不明弯曲杆菌”。同年,Marshall又一次参加学会,发表幽门螺杆菌学说。午餐时间,他听到周围一群各国消化科医生均嘲笑讽刺,说一个澳大利亚医生荒谬的认为有细菌可以在胃液存活且导致胃溃疡,真可笑。Marshall一怒之下,回到澳洲,拿起
3、一大杯含大量幽螺菌的培养液就喝。几天后,他开始腹痛呕吐。5天后,他清晨被痛醒。10天后胃镜证实了胃炎和大量幽门螺杆菌的存在。他此时才告诉他被吓坏了的妻子,他在自己身上做了实验。1985年,他俩将这一勇敢行为发表在澳大利亚医学杂志上。不可思议的是,仍然没有得到应得的重视。这篇文章沉默了近10年。在这沉默的十年间,Marshall于1986年移民到了美国。美国媒体,如读者文摘,开始以“豚鼠医生用自己做实验,治愈了溃疡“做题目开始报道。Marshall的知名度开始上升,受到越来越多的关注。1989年,这个细菌被正式命名为幽门螺杆菌。终于,NIH和美国FDA开始接受并宣传这种新的观点。到了1993至1
4、996年间,全美的医学界开始转变观念。Marshall和Warren的名字开始见诸世界媒体。1994年,美国NIH发表了新的指南,承认大多数再发性消化性溃疡可能因幽门螺杆菌所致,建议使用抗菌素治疗。2005年,Marshall和Warren因为这一发现获得了诺贝尔医学奖。幽门螺旋杆菌的发现的故事3ppt课件2005年10月3月,瑞典卡罗林斯卡医院宣布,把2005年诺贝尔生理学或医学奖授予澳大利亚科学家Barry JMarshall和和JRobin Warren,表彰发现了导致胃炎和胃溃疡的细菌幽门螺旋杆菌。诺贝尔奖委员会在授奖词中说,由于Barry JMarshall和和 JRobin War
5、ren的发现使得原本慢性的、经常无药可救的胃溃疡变成使得原本慢性的、经常无药可救的胃溃疡变成了只需了只需抗生素和一些其他药物短期就可治愈的疾病抗生素和一些其他药物短期就可治愈的疾病20052005年获得了诺贝尔医学奖年获得了诺贝尔医学奖4ppt课件 幽 门 螺 旋 杆幽 门 螺 旋 杆 菌菌是一种革兰氏阴性杆菌是一种革兰氏阴性杆菌螺旋形螺旋形微需氧微需氧其丝状的鞭毛宛如螺旋推进器其丝状的鞭毛宛如螺旋推进器能够分泌多种酶类(尿素酶、过氧化物歧化酶和过氧化氢酶)能够分泌多种酶类(尿素酶、过氧化物歧化酶和过氧化氢酶)常见于人的胃窦和幽门部位常见于人的胃窦和幽门部位幽门螺杆菌快速识别和定植胃部轻微受伤
6、的部位,幽门螺杆菌快速识别和定植胃部轻微受伤的部位,在那些受伤部位几乎立即就可以干扰愈合,在那些受伤部位几乎立即就可以干扰愈合,因此推动了胃部持续损害。因此推动了胃部持续损害。幽门螺旋杆菌对生长条件要求十分苛刻,是目前所知能够在人胃中生存的唯一微生物幽门螺旋杆菌对生长条件要求十分苛刻,是目前所知能够在人胃中生存的唯一微生物种类。种类。5ppt课件LOGOHPylori的致病机制的致病机制 HPylori定植运动 毒素(毒力因子)引起的粘膜损害 宿主的免疫介导的粘膜损害 HPylori感染后胃泌素和生长抑素调节失衡所致胃酸分泌异常6ppt课件 鞭毛和螺旋状运动 粘附因子 血凝素 内皮素样蛋白、L
7、ewis血型抗原连接粘附素 粘附素质蛋白 胃酸抑制蛋白、热休克蛋白 避免免疫反应 紧密附着 表面抗原表达 紧密附着 表面抗原表达 7ppt课件定植方式选择性定植 幽门螺杆菌优先在损伤的溃疡部位定植胃部组织,同时干扰损伤组织的愈合。选择性定植需要细菌运动性和趋化性,“就像是一个竞技比赛,趋化机械引导幽门螺旋杆菌进入损伤部位进行定植,然后由其它致病因素接管,以保证该部位长期因任何损伤缓慢修复只是一直保持原状。幽门部幽门部 十二指肠:十二指肠冠部上皮中十二指肠:十二指肠冠部上皮中 胃部胃部 :体下部小弯、上部大弯:体下部小弯、上部大弯 胃腺化生的食管上皮胃腺化生的食管上皮(Barrertt食管)和胃
8、腺化生的,但不存在于肠腺化生上皮中。食管)和胃腺化生的,但不存在于肠腺化生上皮中。口腔口腔分布部位分布部位存在于较深层的碱性粘液中1聚集在胃上皮细胞表层的一些特殊部位周围2分胃粘膜中胃粘膜中两种两种分布形式分布形式8ppt课件(一)HP 的 微 生 物 及 免 疫 学 特 征幽门螺旋杆菌特异地定植在胃型上皮表面。胃黏膜胃黏膜胃型上皮 有胃化生的十二指肠黏膜有胃化生的十二指肠黏膜定植定植消失消失HP 在胃内的定植分布9ppt课件抗幽门螺杆菌、质抗幽门螺杆菌、质子泵抑制剂治疗后子泵抑制剂治疗后细菌可发生位移细菌可发生位移细菌密度细菌密度胃窦胃体细菌密度细菌密度胃体胃窦10ppt课件 HP诱发抗体产
9、生血清抗体检测,血清抗体检测,用于诊断幽门螺用于诊断幽门螺旋杆菌感染旋杆菌感染11ppt课件LOGO粪便幽门螺旋杆菌抗原检测粪便幽门螺旋杆菌抗原检测12ppt课件LOGO HP 含有丰富的尿素酶 快速尿素酶试验快速尿素酶试验基于尿素酶基于尿素酶 的检测方法的检测方法 尿素呼气试验尿素呼气试验 13ppt课件幽门螺旋杆菌幽门螺旋杆菌在牙菌斑上在牙菌斑上-附着寄生附着寄生布满牙菌斑的牙齿此时幽门螺旋杆菌此时幽门螺旋杆菌有机可乘附着并寄生有机可乘附着并寄生健康的牙齿出现牙菌斑14ppt课件幽门螺旋杆菌幽门螺旋杆菌在牙菌斑上在牙菌斑上-附着寄生附着寄生为了我们的身体健康保持口腔卫生养成良好的刷牙习惯发
10、现幽门螺旋杆菌应尽快根除避免交叉感染15ppt课件 幽门螺旋杆菌的传播途径幽门螺旋杆菌的传播途径 共餐共餐-是得幽门螺旋杆菌的重要途径之一。是得幽门螺旋杆菌的重要途径之一。幽门螺旋杆菌可在牙菌斑和龋齿上生长繁殖。幽门螺旋杆菌可在牙菌斑和龋齿上生长繁殖。幽门螺旋杆菌是胃病的高发因素幽门螺旋杆菌是胃病的高发因素-生吃膳食。生吃膳食。刺刺 激激 性食物容易刺激胃粘膜,致使胃的抵抗性食物容易刺激胃粘膜,致使胃的抵抗 力低下力低下-幽门螺旋杆菌的入侵。幽门螺旋杆菌的入侵。接吻研究表明,唾液中也可以显示到幽门螺杆菌.如果情侣深度接吻,幽门螺旋杆菌的传播将自然畅通无阻,所以接吻是感染幽门螺旋杆菌最直接的途径
11、望情侣们慎重 就像感冒一样就像感冒一样“一人一人生病全家吃药生病全家吃药”的现象的现象十分普遍十分普遍很多人早上刷牙很多人早上刷牙都是草草了事都是草草了事16ppt课件(1)基于检测原理分类)基于检测原理分类微生物学方法-细菌分离培养形态学方法-组织病理染色尿素酶依赖的方法-UBT和RUT血清学方法-ELISA等分子检测方法-胃黏膜、胃液、粪便等17ppt课件(2)基于有无侵入性的分类法基于有无侵入性的分类法 非侵入性检测方法非侵入性检测方法13/14C-尿素呼气实验(尿素呼气实验(UBT)血清学方法(血清学方法(lg gG,lg gA A)唾液或粪便的唾液或粪便的PCR检测、抗检测、抗原检测
12、原检测 侵入性检测方法侵入性检测方法直镜检查快速尿素酶试验RUT组织学检查细菌培养/药敏试验DNA探针检测/平常人/芯片/测序18ppt课件 侵侵 入入 性性 检检 测测 方方 法法19ppt课件内镜方法内镜方法内镜特征内镜特征敏感性敏感性特异性特异性局限性局限性标准内镜胃窦结节状32.0%96.0%敏感性低放大镜胃小凹汇集静脉63.9%-93.2%96.2%-100%缺乏统一诊断标准NBI上皮下毛细血管网95.2%82.2%光强度低,需放大A 内镜下观察内镜下观察 诊断准确率欠高诊断准确率欠高 需要专门训练需要专门训练 需要相应设备需要相应设备 检测费时长检测费时长不宜作为常不宜作为常规检测
13、方法规检测方法20ppt课件B快速尿素酶试验 Hp有丰富的尿素酶有丰富的尿素酶 特异性相对较高特异性相对较高尿素尿素pH指示剂指示剂pH缓冲剂缓冲剂尿素尿素 氨氨 pH上升上升 pH指示剂指示剂 颜色改变颜色改变21ppt课件室温下观察;显著阳性者5-10分钟就能作出判断;30分钟才能作出阴性初步判断;阴性者尽可能观察至24小时.数分钟至数分钟至24小时变红色,均为阳性小时变红色,均为阳性1224小时直至20小时不变色,才可判断为阴性。24小时阳性的是假阳性22ppt课件 严重萎缩严重萎缩/肠化生:不利细菌定植肠化生:不利细菌定植 胆汁、血液抑制细菌,干扰检测胆汁、血液抑制细菌,干扰检测 抗生
14、素、铋剂或抗生素、铋剂或PPI等抑制细菌等抑制细菌12 活检部位 活检块数 活检大小 观察时温度:低 观察时间:不够105细菌3 RUT假阴性原因及对策23ppt课件 尿素尿素 pH指示剂指示剂 pH缓冲剂缓冲剂 RUT假阳性原因及对策影响试剂质量的因素:影响试剂质量的因素:未含抗菌素未含抗菌素 pH缓冲强度不合适缓冲强度不合适 pH指示剂浓度过高指示剂浓度过高24ppt课件 RUT适用范围及要求Maastricht-5 共共 识识 观观 点点若无活检禁忌,应将作为若无活检禁忌,应将作为诊断诊断HP感染的首先感染的首先检查检查,以便立即进行治疗。,以便立即进行治疗。不推荐不推荐用于治疗后用于治
15、疗后评估评估HP是否根除是否根除。推荐胃窦和胃体各取推荐胃窦和胃体各取1块,可放入同一孔中。块,可放入同一孔中。25ppt课件C 组织学方法检测组织学方法检测(1)H&EGiemsaWarthin-Starry免疫组化免疫组化敏感性(敏感性(%)83626297-100特异性特异性(%)100979810026ppt课件多数情况下常规HE染色切片诊断HP胃炎已足够HE染色检出HP依赖个人经验可同时观察组织结构,作用相应病理诊断胃黏膜病理显示慢性活动性炎症,常规HE染色术观察到HP,推荐联合检测胃窦和胃体同时活检可提高HP检出率C 组织学方法检测组织学方法检测(2)27ppt课件 D.HP 培养
16、 培养的作用培养的作用诊断幽门螺杆菌诊断幽门螺杆菌药敏实验药敏实验细菌学研究细菌学研究 幽门螺杆菌培养诊断幽门螺杆菌有一定的技术幽门螺杆菌培养诊断幽门螺杆菌有一定的技术要求,敏感性低(特异性高)。不推荐单纯用于幽要求,敏感性低(特异性高)。不推荐单纯用于幽门螺杆菌感染的诊断。门螺杆菌感染的诊断。28ppt课件E.HP的分子生物学方法检测 诊断感染诊断感染 耐药基因检测耐药基因检测 细菌学研究细菌学研究 毒力基因检测毒力基因检测 判断再感染判断再感染 29ppt课件 侵入性诊断方法比较侵入性诊断方法比较方法方法初查初查复查复查敏感性敏感性/特异性特异性优点优点局限性局限性组织学组织学60-86%
17、/98%可同时行组织学检查可同时行组织学检查检查者间判断检查者间判断差异大、费时差异大、费时免疫组化免疫组化()()()()97%/100%敏感性和特异性均高敏感性和特异性均高费用高、费时费用高、费时快速尿素酶快速尿素酶()()80-95%/97-99%廉价、简单、快速廉价、简单、快速检测需要的菌检测需要的菌量高量高培养培养60%/100%可行药敏、细菌学研究可行药敏、细菌学研究技术要求高技术要求高PCR()()()()可达可达100%可达可达100%可行耐药、细菌学研究可行耐药、细菌学研究易污染、费用易污染、费用高、获得性低高、获得性低有括弧者:少用;有括弧者:少用;代表准确性代表准确性30
18、ppt课件非侵入性的检测方法非侵入性的检测方法31ppt课件A.HP粪便抗原检测试验经过验证的单克隆抗体检测试剂具有较好的敏感性和特异性操作安全、简便快速不需要口服任何试剂,适用于所有年龄和类型患者32ppt课件B.HP血清学试验(1)用幽门螺杆菌抗原检测血清抗体 IgGgG单份检测单份检测 多份检测多份检测33ppt课件 不同试剂盒检测准确度差异较大不同试剂盒检测准确度差异较大 HP根除或消失后抗体可维持几个月或者几年,一般根除或消失后抗体可维持几个月或者几年,一般不作为现症感染证据,不能用于治疗否复查。不作为现症感染证据,不能用于治疗否复查。主要用于流行病学调查主要用于流行病学调查优点:优
19、点:检测结果不受近期用药和胃内局部病变影响检测结果不受近期用药和胃内局部病变影响消化性溃疡出血消化性溃疡出血胃胃MALT淋巴瘤淋巴瘤胃严重肠生化胃严重肠生化/萎缩萎缩其他方法其他方法检测检测阴性阴性血清学检测血清学检测 阳阳 性性现症感染B.HP血清学试验(2)34ppt课件C.毒力基因毒力基因 cag gA A最主要毒力基因最主要毒力基因“西方型菌株西方型菌株”部分缺乏部分缺乏cagAgA基因基因“东方型菌东方型菌株株”多有多有cagAgA基因基因cagAgA:cytotoxin associated genecytotoxin associated gene A A 细胞毒相关基因细胞毒相
20、关基因Suerbaum S.et al N Eng gl J Med 2002,347;1175-1186fettelra RM etal.Bett Pes Clin Gattroenterol 2014;28:1003-15H.pylori strain 26695 genome(1,667,867 bp)幽门螺旋杆菌全基因组幽门螺旋杆菌全基因组cacag g 致病岛致病岛cacag pathologenecityisolandg pathologenecityisoland(37,000 bp)(37,000 bp)含有含有30多个与毒力相关的因素多个与毒力相关的因素HP0528(VIRB
21、9)HP0528(VIRB11)HP0524(VIRD4)HP0527(VIRB10)HP0544(VIRB4)cag435ppt课件C.毒力基因毒力基因 cag gA A东方型东方型cagAgA毒力强毒力强 西方型西方型CagAgA毒力弱毒力弱fettelra RM etal.Bett Pes Clin Gattroenterol 2014;28:1003-15HP0528(VIRB9)HP0528(VIRB11)HP0524(VIRD4)HP0527(VIRB10)HP0544(VIRB4)cag4 西方型西方型CagAgA 东亚型东亚型CagAgAA B DA B DA BABCABCC
22、ABCCC36ppt课件 C.毒力基因毒力基因 vacA Afettelra RM etal.Bett Pes Clin Gattroenterol 2014;28:1003-15 vacAcA基因多态性基因多态性 空泡毒素空泡毒素A 所有幽门螺旋杆菌均有所有幽门螺旋杆菌均有vacA基因,但表达强度受基基因,但表达强度受基因多态性影响。因多态性影响。表达空泡毒素:强表达空泡毒素:强表达空泡毒素:次强表达空泡毒素:次强表达空泡毒素:表达空泡毒素:信号序列信号序列中间区域中间区域s1mls1m2s2m237ppt课件 HP 临床分型临床分型型菌株:均表达型菌株:均表达Cag gA A和和V Vac
23、 cA A蛋白蛋白,56%56%型菌株:均不表达型菌株:均不表达Cag gA A和和V Vac cA A蛋白蛋白,16%16%中间表达型:仅表达一种毒力因子中间表达型:仅表达一种毒力因子 Cag gA A阳性菌阳性菌株发展为萎缩性胃炎、消化性溃疡、株发展为萎缩性胃炎、消化性溃疡、胃癌的风险更高;胃癌的风险更高;s1/m1/i1 VacAs1/m1/i1 VacA型型菌株发生胃溃菌株发生胃溃疡及胃癌的风险更高疡及胃癌的风险更高38ppt课件 结果判定 型型 Cag gA A、V Vac cA A带中人一条带胃阳性带中人一条带胃阳性 型型 尿素内尿素内A、尿素酶、尿素酶B 带中任意阳性带中任意阳性
24、 Cag gA A、V Vac cA A带全部阴性带全部阴性无无HP感染:感染:无阳性区带显示无阳性区带显示无效无效 实验:实验:质控带未出现质控带未出现39ppt课件 HP分型检测法是采用分型检测法是采用免疫印迹免疫印迹方法检测方法检测Cag gA A、V Vac cA lgGA lgG抗体抗体的一种的一种非侵入、血清学检测非侵入、血清学检测方法方法 在一定程度上可协助了解细菌的毒力在一定程度上可协助了解细菌的毒力 任何指南和公式均未指出任何指南和公式均未指出“型治疗,型治疗,型不治疗型不治疗”40ppt课件 尿尿 素素 呼呼 气气 试试 验验检检 测测13/14C-尿素尿素13/14CO2
25、13/14C-尿素尿素13/14CO2+NH341ppt课件尿素尿素13C/14C呼气试验准确性均能满足临床的要求。由于两者都是呼气试验准确性均能满足临床的要求。由于两者都是通过同位素示踪原理进行诊断,理论上具有相同的准确性通过同位素示踪原理进行诊断,理论上具有相同的准确性尿尿 素素 呼呼 气气 试试 验验检测仪器:检测仪器:13C:质谱仪:质谱仪/红外能谱仪红外能谱仪14C:液闪计数仪:液闪计数仪42ppt课件 尿尿 素素 呼呼 气气 试试 验验 优优 点点准确率高,易于操作准确率高,易于操作可反映全胃幽门螺旋杆菌情况,克服细菌可反映全胃幽门螺旋杆菌情况,克服细菌“病灶病灶”分布差异、活检取
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