大学精品课件：诊断学第八版.ppt

1、,诊断学(Diagnostics) 第八版,广西医科大学第一附属医院检验科,第八章 临床常用免疫学检测 （common items of clinical immunological）,广西医科大学第一附属医院检验科,内容摘要,1.体液免疫检测( examination of humoral immunity ) 2.细胞免疫检测（examination of cellular immunity） 3.肿瘤标志物检测 (examination of tumor marker) 4.自身抗体检测(examination of autoantibody ) 5.感染免疫检测(examination

2、 of infectious disease ) 6.移植免疫检测(examination of transplantation) 7.其他免疫检测,广西医科大学第一附属医院检验科,第一节 体液免疫检测 (examination of humoral immunity ) 一 免疫球蛋白,广西医科大学第一附属医院检验科,一 血清免疫球蛋白检测,免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)特点： 具有抗体活性和（或）抗体样结构的球蛋白， 由浆细胞产生 存在于机体的血液、体液、外分泌液和某些 细胞（如淋巴细胞）的膜上。 有特异性识别抗原的功能，但抗体必须与抗 原结合形成免疫复合物后才能启动效应

3、功能,广西医科大学第一附属医院检验科,可分为 （ IgD的血清水平，一般没有临床意义）,各类免疫球蛋白由四条肽链组成。 重链结构不同抗原性也不同。 IgG r 链； IgM链。,IgG IgM IgA IgE IgD,广西医科大学第一附属医院检验科,广西医科大学第一附属医院检验科,广西医科大学第一附属医院检验科,（一）免疫球蛋白G检测,免疫球蛋白G (immunoglobulinG，IgG) 为人体含量最多和最主要的Ig，占免疫球蛋白的7080。它对病毒、细菌和寄生虫等都有抗体活性,是唯一能够通过胎盘的Ig。 参考值：7.016.6g/L。,广西医科大学第一附属医院检验科,1 生理性变化 在孕

4、期22-28周，胎儿血IgG浓度与母体血IgG浓度相等 出生后逐渐减少，到3-4个月最低 随后，婴儿逐渐开始合成IgG，16岁前达到成人水平,广西医科大学第一附属医院检验科,2. 病理性变化 （1）IgG增高：,临床意义：,各种慢性感染 慢性肝病 胶原血管病 淋巴瘤 自身免疫性疾病,单克隆性增高：主要见于免疫增殖性疾病，(MM)。,多克隆性增高：,广西医科大学第一附属医院检验科,临床意义：,先天性和获得性体液免疫缺陷病 联合免疫缺陷病 重链病、轻链病 肾病综合征 病毒感染 应用免疫抑制剂患者。,（2） IgG降低,广西医科大学第一附属医院检验科,（二）免疫球蛋白A检测,（参考值 ：血清IgA为

5、0.7 3.5 g/L）,血清型IgA 10% 15%,分泌型IgA (SIgA) 外分泌系统,IgA,IgA型MM SLE 类风湿关节炎 肝硬化 湿疹 肾脏疾病等；,临床意义,反复呼吸道感染 非IgA型MM 重链病 轻链病 原发性和继发性免疫缺陷病 自身免疫性疾病等。,增高,降低,免疫球蛋白A(immunoglobulinA，IgA),广西医科大学第一附属医院检验科,（三）免疫球蛋白M检测,免疫球蛋白M(immunoglobulinM，IgM) 是相对分子质量最大的Ig，约占Ig的510。IgM是有效的凝聚和溶解细胞的因子，天然同族凝聚素（抗A、抗B）、冷凝集素及伤寒沙门菌的抗体均属此类。

6、当机体受到抗原刺激后,IgM是最早出现的抗体早期免疫防御 从孕20周起，胎儿自身可合成大量IgM 参考值 0.52.6g/L。,广西医科大学第一附属医院检验科,IgM增高,临床意义,IgM降低,初期病毒性肝炎 肝硬化 类风湿关节炎 SLE 宫内感染（0.2g/L) 巨球蛋白血症,IgG型重链病 IgA型MM 先天性免疫缺陷症 免疫抑制疗法后 淋巴系统肿瘤 肾病综合征等。,2 病理性变化,广西医科大学第一附属医院检验科,（四）免疫球蛋白E检测,免疫球蛋白E(immunoglobulinE，IgE)为血清中最少的一种Ig，约占血清总Ig的0.002;它是一种亲细胞性抗体,与变态反应、寄生虫感染及皮

7、肤过敏等有关。 参考值 ELISA法为0.10.9mg/L,广西医科大学第一附属医院检验科,IgE增高,临床意义,IgE降低,IgE型MM 重链病 肝脏病 结节病 类风湿关节炎 各种过敏疾病,先天性或获得性丙种缺乏症 恶性肿瘤 免疫抑制疗法后 共济失调性毛细血管扩张症,2 病理性变化,广西医科大学第一附属医院检验科,（五） 血清M蛋白检测 M蛋白(M protein,单克隆免疫球蛋白):是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的,具有相同结构和电泳迁移率的Ig分子或分子片段(如轻链,重链等),一般不具有抗体活性。 参考值 正常人为阴性,广西医科大学第一附属医院检验科,广西医科大学第一附属医院检验科

8、,临床意义： 1 、多发性骨髓瘤占M蛋白血症的35%65%， 其中IgG型占60%左右 IgA型占20%左右； IgD和IgE型罕见。,广西医科大学第一附属医院检验科,2、巨球蛋白血症占M蛋白血症的9%14%， 血液中存在大量的单克隆IgM， 80%的 M蛋白为轻链，20%的M蛋白为轻链。 3、重链病 4、轻链病 5、半分子病 6、恶性淋巴瘤 7、良性M 蛋白血症,广西医科大学第一附属医院检验科,二 补体系统,补体(Complement，C)是一组具有酶原活性的糖蛋白 由传统途径的9种成分C1（C1q、C1r、 C1s）C9，旁路途径的3种成分及其衍生物B、D、P、H、I等因子组成 补体、体液

9、因子或免疫细胞共同参与灭活病原体的免疫反应，也参与破坏自身组织或自身细胞而造成的免疫损伤。,广西医科大学第一附属医院检验科,总补体溶血活性（CH50）测定:反映的主要是经典途径补体的综合水平。 参考值 试管法为50100kU/L 临床意义 1、CH50活性增高 常见于急性炎症、急性组织损伤、恶性肿瘤及妊娠等。,（一）总补体溶血活性检测,广西医科大学第一附属医院检验科,2、CH50活性降低 常见于肾小球肾炎、自身免疫性疾病、感染性心内膜炎、病毒性肝炎和慢性肝病、艾滋病、严重烧伤、冷球蛋白血症。,广西医科大学第一附属医院检验科,（二）补体C1q检测,是构成补体C1的重要组分。 参考值 0.18-0

10、.19g/L 临床意义 1、增高： 骨髓炎 Osteomyelitis 类风湿关节炎 Rheumatoid arthritis 痛风 Uarthritis 过敏性紫癜 Allergic purpura 2、降低： SLE 混合性结缔组织病 重度营养不良 肾病综合征 重症联合免疫缺陷,广西医科大学第一附属医院检验科,（三）补体C3检测,补体C3(ComplementC3，C3)一种由肝脏合成的2球蛋白，由和两条多肽链组成。C3在补体系统各成分中含量最多，是传统途径和旁路途径被激活的关键物质。 参考值 0.81.5g/L。,广西医科大学第一附属医院检验科,临床意义,1 生理性变化 胎儿出生后随着年

11、龄的增长，其血清C3水平逐渐增加，到12岁左右达成人水平。,广西医科大学第一附属医院检验科,临床意义,减低,增高,急性炎症 传染病早期 肿瘤 排异反应等,SLE 类风湿关节炎活动期 70以上的肾小球肾炎 慢性活动性肝炎 慢性肝病 先天性补体缺乏,2.病理性变化,广西医科大学第一附属医院检验科,（四）补体C4检测,补体C4(ComplementC4，C4)一种多功能1球蛋白，存在于血浆中。在补体经典途径活化中， C4被C1s水解为C4a、C4b，它们在补体活化、促进吞噬、防止免疫复合物沉着和中和病毒等方面发挥作用。 C4的降低常早于其他补体成分，且缓解时较其他成分回升迟。 参考值 0.200.6

12、g/L。,广西医科大学第一附属医院检验科,临床意义,1 生理性变化 胎儿出生后随着年龄的增长，其血清C4水平逐渐增加，到12岁左右达成人水平。,广西医科大学第一附属医院检验科,临床意义,升高,降低,各种传染病 急性风湿热 结节性动脉周围炎 皮肌炎 关节炎和组织损伤等。,自身免疫性肝炎 狼疮性肾炎 SLE 1型糖尿病 胰腺癌 多发性硬化症 类风湿关节炎 IgA性肾病 遗传性IgA缺乏症。,2.病理性变化,广西医科大学第一附属医院检验科,（五）补体旁路B因子检测,是一种不耐热的球蛋白，是补体旁路活化途径中的一个重要成分，与C3b结合形成C3转化酶。 临床意义： 1.增高：自身免疫性疾病，恶性肿瘤等

13、 2.降低：见于肝病，急性肾小球肾炎等,广西医科大学第一附属医院检验科,第二节 细胞免疫检测 （examination of cell immunologic function） 一、T细胞亚群检测 （一）细胞花结形成试验 （二）T细胞转化试验 （三）T细胞分化抗原测定 二、B细胞分化抗原检测 三、自然杀伤细胞免疫检测 四、细胞因子检测,广西医科大学第一附属医院检验科,第二节 细胞免疫检测,淋巴细胞T、B和NK等细胞群若干亚群，各有其特异的表面标志和功能。临床上各种免疫病均可出现不同群淋巴细胞数量和功能的变化细胞免疫功能。,广西医科大学第一附属医院检验科,一、T细胞亚群检测,（一）细胞花结形成

14、试验 细胞表面有绵羊红细胞(SRBC)受体，可与SRBC结合形成花结样细胞，称为红细胞玫瑰花结形成试验或E玫瑰花结形成试验(ERFT)。检测T细胞的数量。显微镜下计数花结形成细胞占淋巴细胞的比例，以每个淋巴细胞粘附3个或3个以上羊红细胞者为花结形成细胞。 参考值 ERFT为64.46.7%,广西医科大学第一附属医院检验科,降低：免疫缺陷性疾病，如恶性肿瘤、免疫性疾病、某些病毒感染、大面积烧伤、多发性神经炎、淋巴增殖性疾病 升高：甲亢、甲状腺炎、重症肌无力、慢活肝、SLE活动期及器官移植排斥反应等。,临床意义,广西医科大学第一附属医院检验科,体外培养时，T淋巴细胞被PHA或ConA刺激为母细胞，

15、部分细胞发生有丝分裂。计数淋巴细胞及转化的母细胞数，求出转化的百分率。 临床意义：同T淋巴细胞花结形成试验。,二（二）T细胞转化试验,广西医科大学第一附属医院检验科,白细胞分化抗原（CD）CD3总T细胞，CD4TH，CD8TS等。 参考值： 流式细胞术： CD3 为61%85% CD4为28%58% CD8为19%48% CD4/CD8为0.92.0/1。,（三）T细胞分化抗原测定,广西医科大学第一附属医院检验科,1 CD3+降低：自身免疫性疾病，SLE、类风湿性关节炎等。 2 CD3+/CD4+降低：恶性肿瘤，遗传性免疫缺陷性、艾滋病、应用免疫抑制剂者。 3 CD3+/CD8+减低：自身免疫

16、性疾病或变态反应性疾病。 4 CD4+CD8+增高：自身免疫性疾病、病毒性感染、变态反应等； 5 CD4+CD8+减低：艾滋病（常0.5)。 6 监测器官移植排斥反应时CD4+CD8+增高预示可能发生排斥反应。 7 CD3+、CD4+、CD8+较高且有CD1+、CD2+、CD5+、CD7+增高则可能为T细胞型急性淋巴细胞白血病。,临床意义,广西医科大学第一附属医院检验科,B淋巴细胞，是体内唯一能产生抗体的细胞。 临床意义 CD19为全部B细胞共有的表面标志，B细胞活化后不消失，是最重要的B细胞标记分子，CD19+细胞升高见于B细胞系统的恶性肿瘤；降低见于体液免疫缺陷病。 CD20在B细胞激活后

17、逐渐丢失。 CD22分子只存在于成熟的B细胞。,二 B细胞分化抗原测定,广西医科大学第一附属医院检验科,三、自然杀伤细胞免疫检测,(一)自然杀伤细胞(NK)活性测定 NK细胞介导天然免疫应答，不依赖抗体和补体，即能直接杀伤靶细胞，如肿瘤细胞或受病毒感染的细胞等；此外，尚有免疫调节功能，也参与移植排斥反应和某些自身免疫病的发生发展。 参考值 流式细胞术法为13.8% 5.9%。 临床意义 判断机体抗肿瘤和抗病毒感染的指标之一。在血液系统肿瘤、实体瘤、免疫缺陷等、艾滋病和某些病毒感染患者，NK活性减低；宿主抗移植物反应者，NK活性升高。 (二)抗体依赖性细胞介导的细胞毒测定 临床意义 基本同上。,

18、广西医科大学第一附属医院检验科,四 细胞因子检测 细胞因子(cytokine,CK)是由免疫细胞和相关细胞产生的调节细胞功能的高活性、多功能、低分子蛋白质。根据其主要功能，可将它们分为：白细胞介素(interleukin,IL)、肿瘤坏死因子(TNF)、干扰素(IFN)、集落刺激因子、转化生长因子、趋化因子等。,广西医科大学第一附属医院检验科,四 细胞因子检测 (一）白细胞介素2活性和白细胞介素2受体测定 主要由活化T细胞产生，具有多向性作用的细胞因子（主要促进淋巴细胞生长，增值，分化），它对机体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用。 【临床意义】 1.IL-2： （1）增高见于自身免疫性疾病，

19、再障，MM,排斥反应。 （2）降低见于免疫缺陷病，恶性肿瘤等。 2.IL-2R 对急性排斥反应和免疫性疾病有诊断意义。,广西医科大学第一附属医院检验科,四 细胞因子检测 (二）肿瘤坏死因子测定 TNFa单核细胞，吞噬细胞 TNFB T淋巴细胞。 都有引起肿瘤组织出血，坏死和杀伤作用。 【临床意义】1.有炎症介质作用： 2.有抗感染效应： 3.有抗肿瘤作用：,广西医科大学第一附属医院检验科,四 细胞因子检测 (三）干扰素测定 是宿主细胞受病毒感染后产生的一种非特异性防御因子，具有抗病毒，抗肿瘤，免疫调节，控制细胞增殖作用。 【临床意义】1.增高：见于SLE，非活动性RA,恶性肿瘤早期，急性病毒感

20、染，再障性贫血。 2.减低：见于乙肝及携带者，哮喘，活动性RA等。,广西医科大学第一附属医院检验科,第三节 肿瘤标志物检测 (examination of tumor marker) 一、什么是肿瘤标志物 二、临床价值 三、主要的肿瘤标志物,广西医科大学第一附属医院检验科,常见的恶性肿瘤死亡原因,广西医科大学第一附属医院检验科,肿瘤标志物（ Tumor Markers ，TM） 是指在恶性肿瘤发生和发展过程中，由肿瘤细胞合成、分泌或是由机体对肿瘤细胞反应而产生或升高的明显异常的预示肿瘤存在的一类物质，存在于血液、体液、细胞或组织中。,什么是肿瘤标志物,广西医科大学第一附属医院检验科,肿瘤的早期

21、诊断是有可能的，因为肿瘤潜伏期可长达数月至数年，但肿瘤的早期诊断又是困难的，因为目前大多数的诊断技术都不适合肿瘤的早期诊断。 用生物物理方法，如X线，CT和超声等检查，只有当肿瘤大小至少到12cm时才能发现，而此时肿瘤细胞已达10亿（109）甚至更多。,广西医科大学第一附属医院检验科,用免疫学方法检测时，肿瘤细胞需达到1百万个（106）才可检出，但此时可能已经发生肿瘤转移，而且也不是所有肿瘤在此时都能被检出。因此，长期以来人们致力于寻找一种能够尽早检出恶性肿瘤的指标，并将已经发现的一些物质称之为肿瘤标志物（Tumor Marker,TM）。,广西医科大学第一附属医院检验科,主要的肿瘤标志物,蛋

22、白质类肿瘤标志物 甲胎蛋白 - AFP 癌胚抗原 CEA 组织多肽抗原-TPA 前列腺特异抗原 - PSA 鳞状上皮细胞癌抗原 -SCC 糖脂类肿瘤标志物 癌抗原50 CA50 癌抗原72-4 CA724 糖链抗原19-9 CA199 癌抗原125 CA125 癌抗原242 CA242 癌抗原15-3 CA153,广西医科大学第一附属医院检验科,酶类肿瘤标志物 前列腺酸性磷酸酶PAP 神经元特异性烯醇化酶- NSE -L-岩藻糖苷酶测定- AFU,广西医科大学第一附属医院检验科,(一)AFP 临床意义 1、原发性肝细胞癌患者血清中AFP明显升高，约有77.1%的患者AFP300g/L,但也有1

23、8%病人可无AFP升高,值得注意。 2、生殖腺胚胎性肿瘤患者血清中AFP可见升高，如睾丸癌、畸胎瘤等。 3、病毒性肝炎、肝硬化患者AFP有不同程度的升高，但其水平300g/L。,一 蛋白质类肿瘤标志物检测,广西医科大学第一附属医院检验科,4、妇女妊娠3个月后，血清AFP开始升高，78个月时达到高峰，一般在400g/L以下，分娩后3周恢复正常。孕妇血清中AFP异常升高，应考虑有胎儿神经管缺损畸形的可能性。,广西医科大学第一附属医院检验科,(二)癌胚抗原测定 CEA是一种广谱肿瘤标志物，虽然不能作为诊断某种恶性肿瘤的特异性指标，但在恶性肿瘤的鉴别诊断，病情监测，疗效评价等方面，仍有重要临床价值。

24、临床意义 1、血清CEA升高主要见于结肠癌，直肠癌，乳腺癌，胃癌，肺癌，胰腺癌等。 2、动态观察血清CEA。 3、结肠炎，胰腺炎，肝硬化，肝炎和肺部疾病也有不同程度的升高。 4、胃液和唾液中CEA检测对胃癌诊断有一定价值。,广西医科大学第一附属医院检验科,(三)组织多肽抗原测定 TPA是一种非特异性肿瘤标志物，血液内TPA水平与细胞分裂增殖程度密切相关，恶性肿瘤细胞分裂，增殖活跃，所以血清中TPA水平增高，临床上常用于辅助诊断迅速增殖的恶性肿瘤，特别是已知肿瘤的疗效监测。 临床意义 1、恶性肿瘤患者血清TPA水平可显著升高。 2 、经治疗好转后，TPA的水平降低；若TPA水平再次升高，提示肿瘤

25、复发。 3、TPA和CEA同时检测有利恶性与非恶性乳腺病的鉴别。 4、急性肝炎，胰腺炎，肺炎和妊娠后3个月也可见到血清中TPA升高。,广西医科大学第一附属医院检验科,(四)前列腺特异性抗原测定 临床意义 1、前列腺癌患者可见血清PSA升高，以血清T-PSA4.0g/L判断为阳性,则其阳性率在60%90%。 2、若前列腺癌切除术后，T-PSA浓度无明显降低或再次升高，提示肿瘤转移或复发。 3、前列腺增生，前列腺炎，肾脏和泌尿生殖系统的疾病，也可见血清T-PSA和F-PSA水平轻度升高，必须结合其他检查进行鉴别。,广西医科大学第一附属医院检验科,4、单独使用T-PSA或F-PSA诊断前列腺癌时并不

26、能排除前列腺肥大对前列腺癌诊断的影响，特别是当T-PSA在4.010.0g/L时，应用血清中F-PSA/T-PSA比值测定显得更有价值，若F-PSA/T-PSA比值0.1提示前列腺癌。 5、约有5%的前列腺癌患者，T-PSA在正常范围，但前列腺酸性磷酸酶(PAP)升高。因此两者同时测定，可提高前列腺癌的阳性检出率。,广西医科大学第一附属医院检验科,关于F-PSA： 1、比例大于25%提示良性 2、比例在10%25%，临床上有良性与 恶性的重叠（需 结合临床作出综合判断） 3、比例小于10%，提示恶性肿瘤,广西医科大学第一附属医院检验科,(五)鳞状上皮细胞癌抗原测定（ SCC） 1、SCC是最早

27、用于诊断鳞癌的肿瘤标志物，肺鳞状细胞癌，食管癌，子宫颈癌，肺癌，头颈部癌时，血清中SCC升高，其浓度随病期的加重而增高。 2、肝炎、肝硬化、肺炎、肾功能不全、结核等疾病，SCC也有一定程度的升高。 3、存在假阳性。,广西医科大学第一附属医院检验科,二.糖脂肿瘤标志物的检测,(一)癌抗原-50测定（CA50）： 它对肿瘤的诊断无器官特异性。,广西医科大学第一附属医院检验科,(二)癌抗原72-4测定：它是胃肠道和卵巢肿瘤的标志物。 临床意义 1、增高见于67%的卵巢癌，47%的大肠癌，45%的胃癌，40%的乳腺癌，42%的胰腺癌。 2、为了提高卵巢癌的检出率，应考虑CA72-4和CA125组合应用

28、。 3、CA72-4与CEA联合检测，可以提高胃癌的敏感性和特异性。,广西医科大学第一附属医院检验科,(三)糖链抗原19-9测定 CA19-9是一种与胰腺癌，胆囊癌，结肠癌和胃癌相关的肿瘤标志物，又称胃肠癌相关抗原。 临床意义 1、胰腺癌，胆襄癌，胆管壶腹癌时，血清CA 19-9水平明为升高， 尤其是诊断胰腺癌其敏感性为80%90%，特异性为72%90%，是重要的辅助诊断指标。 2、约有5% 10%的胰腺癌病人CA 19-9的血清浓度不升高。 3、连续检测监测病情。 4、急性胰腺炎、胆襄炎、胆汁淤积性胆管炎，肝硬化，肝炎等疾病，CA 19-9也有不同程度的升高，注意与恶性肿瘤的鉴别。 5、若结

29、合CEA检测,对胃癌诊断符合率为85% 。,广西医科大学第一附属医院检验科,(四)癌抗原125测定 CA125是很重要的卵巢相关抗原，同时也是卵巢癌手术和化疗后疗效观察的指标，有较大的临床价值。 临床意义 1、卵巢癌病人血清CA 125水平明显升高，敏感性可达50%90%.手术化疗有效者CA 125水平很快下降,若有复发时,CA 125升高可先于临床症状出现之前。,广西医科大学第一附属医院检验科,2、盆腔肿瘤的鉴别。 3、其他非卵巢恶性肿瘤也有一定阳性率。 4、非恶性肿瘤，如子宫内膜异位症，盆腔炎，卵巢襄肿，胰腺炎，肝炎，肝硬化等疾病也有不同程度升高，但阳性率较低，诊断时应注意鉴别。 5、肝硬

30、化失代偿期血清CA125明显升高。 6、生理状态下，如早孕期CA125也可升高。,广西医科大学第一附属医院检验科,(五)癌抗原242测定：与CA50来自相同的大分子。 临床意义 1.见于胰腺癌,结肠癌,胃癌. 2.非恶性肿瘤. 3.见于其它肿瘤.,广西医科大学第一附属医院检验科,(六)癌抗原15-3测定 CA 15-3是一种乳腺癌相关抗原，对乳腺癌的诊断和术后随访监测有一定价值。 临床意义 1、乳腺癌患者常有CA 15-3升高，但在乳腺癌的初期，敏感性较低约为20%-30%，转移性乳腺癌阳性率可达80%。,广西医科大学第一附属医院检验科,2、其他恶性肿瘤，如肺癌，肾癌，结肠癌，胰腺癌，卵巢癌，

31、子宫颈癌，原发性肝癌等，也有不同程度的阳性率。 3、肝脏、胃肠道、肺、乳腺、卵巢等非恶性肿瘤疾病，阳性率一般低于10%。 4、连续检测监测病情。,广西医科大学第一附属医院检验科,(一)前列腺酸性磷酸酶测定 PAP是前列腺分泌的一种酶，PAP和PSA一样是诊断前列腺癌，监测前列腺癌疗效以及前列腺癌术后是否复发转移的辅助指标。 临床意义 1、前列腺癌时，可见血清PAP浓度升高，为提高前列腺癌诊断的阳性率，PAP和PSA两者可联合检测。 2、前列腺肥大，前列腺炎和泌尿生殖系统疾病，也可见到PAP升高。,三.酶类肿瘤标志物检测,广西医科大学第一附属医院检验科,(二)神经元特异性烯醇化酶测定 NSE是烯

32、醇化酶的一种同工酶，目前认为它是小细胞肺癌(SCLC)和神经母细胞瘤的肿瘤标志物。 临床意义 1、小细胞肺癌(SCLC)患者NSE水平明显高于肺腺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌等非小细胞肺癌(NSCLC)，可用于鉴别诊断和监测小细胞肺癌放疗、化疗后的治疗效果。 2、神经母细胞瘤患者NSE水平异常增高。 3、神经内分泌细胞肿瘤。 4、NSE也存在于正常红细胞中，标本溶血会影响测定结果。,广西医科大学第一附属医院检验科,(三)异常凝集酶原测定,(三)A-L-岩藻糖苷酶测定（AFU）： 1.是原发性肝癌的标志物之一，与AFP联合检测肝癌可提高诊断率。 2.动态观察疗效，预后及复发。 3.在其它肿瘤也可增高；

33、在肝硬化，慢性肝炎，消化道出血也有轻度增高。,广西医科大学第一附属医院检验科,(三)异常凝集酶原测定,四.肿瘤标志物的选用 同一种肿瘤可含多种标志物，而一种标志物可出现在多种肿瘤。 选择特异性标志物或最佳组合有利于提高肿瘤诊断的阳性率，见表4-8-3。,广西医科大学第一附属医院检验科,第四节 自身抗体检测 (examination of autoantibodies ) 一、类风湿因子的检测 二、抗核抗体检测 （一）抗核抗体检测 （二）抗DNA抗体检测 （三）可提取性核抗原性多肽抗体谱测定 （四）抗胞浆抗体检测 三、抗组织细胞抗体检测 四、其他抗体检测,广西医科大学第一附属医院检验科,一、类风

34、湿因子,一.类风湿因子（RF）是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液内。它有IgM型，也有IgG、IgA、IgD和IgE型。用胶乳凝集法测出的主要是IgM型；用ELISA法可检出IgG、IgM型或复合物型（变性IgG与其抗体的复合物）。 参考值 胶乳凝集法、浊度分享法或ELISA法为阴性。,广西医科大学第一附属医院检验科,临床意义：类风湿性疾病时，RF的阳性率可高达70%90%，类风湿关节炎的阳性率为70。其他自身免疫性疾病，如多发性肌炎、硬皮病、干燥综合征、SLE、自身免疫性溶血性贫血、慢性活动性肝炎等也见RF阳性。某些感染性疾病，如传染性单核细胞

35、增多症、结核病、感染性心内膜炎等也多呈现阳性反应。故本试验的特异性不高，应予鉴别。,RF测定,广西医科大学第一附属医院检验科,二、抗核抗体检测,（一）抗核抗体检测 抗核抗体（ANA）：它是血清中存在的一类和自身组织细胞的细胞核发生反应的自身抗体的总称。ANA的性质主要是IgG，也有IgM、IgA。这种抗体无器官和种族的特异性。间接免疫荧光法以Hep-2和鼠肝细胞核作抗原时，根据细胞核着染荧光的图像可分为均质型、核膜型、核点型、颗粒型、着丝点和核仁型等类型。,广西医科大学第一附属医院检验科,参考值：IFA法为阴性，血清滴度1:100为阳性。 临床意义：ANA阳性：未治疗的SLE，阳性率达80%1

36、00%；活动期SLE几乎100阳性。经皮质激素治疗后，阳性率可降低。也可见于药物性狼疮(100%)、混合性结缔组织病(100%)、全身性硬皮病(85%95%)、多发性肌炎(30%90%)、狼疮性肝炎(95%100%)、原发性胆汁性肝硬化(95%100%)。,广西医科大学第一附属医院检验科,广西医科大学第一附属医院检验科,广西医科大学第一附属医院检验科,广西医科大学第一附属医院检验科,广西医科大学第一附属医院检验科,（二）可提取性核抗原抗体谱测定 可提取的核抗原（ENA）由多种相对分子质量不同的多肽构成，即抗ds-DNA抗体、 Sm、核糖体、Scl-70、Jo-1、SS-B、SS-A、和RNP等

37、。利用免疫印迹试验检测。,广西医科大学第一附属医院检验科,（三）抗DNA抗体检测 抗DNA抗体分为抗ds-DNA抗体、抗ss-DNA抗体和抗Z-DNA抗体。抗ds-DNA抗体的靶抗原是细胞核中DNA的双螺旋结构，它的检测有临床重要性。 临床意义 1、抗ds-DNA抗体阳性 见于活动期SLE，阳性率7090。本试验特异性高，但敏感性较低。能结合补体的抗ds-DNA，在SLE特别是并发狼疮性肾炎的发病机制中起重要作用。 2、抗ss-DNA抗体阳性见于SLE（阳性率7095），尤其是合并有狼疮性肾炎。但不具特异性。,广西医科大学第一附属医院检验科,广西医科大学第一附属医院检验科,（四）抗胞质抗体检测

38、 1、抗线粒体抗体（AMA） 可作为原发性胆汁性肝硬化和肝外胆道阻塞性肝硬化的鉴别诊断。 2、抗肌动蛋白抗体 见于各种慢性肝脏疾病、肝硬化 、原发性胆汁性肝硬化、1型自身免疫性肝炎，也可见于重症肌无力等 。 3、抗Jo-1抗体 对肌炎伴间质性肺纤维化有高度特异性，抗体的效价与疾病的活动性相关。,广西医科大学第一附属医院检验科,胞浆颗粒型（3）：Jo-1抗体,EUROIMMUN,广西医科大学第一附属医院检验科,(一)抗肾小球基底膜抗体测定 (二)抗胃壁细胞抗体测定 (三)抗甲状腺抗体测定 (四)抗平滑肌抗体测定 (五)抗心肌抗体测定 （六）肝脏相关自身抗体测定,三、抗组织细胞抗体检测,广西医科大

39、学第一附属医院检验科,(一)抗肾小球基底膜抗体测定 临床意义 抗肾小球基底膜抗体是抗基底膜抗体型肾小球肾炎特异性抗体，包括Good-Pastue综合症，急进性肾小球肾炎及免疫复合物型肾小球肾炎。,三、抗组织和细胞抗体检测,广西医科大学第一附属医院检验科,(二)抗胃壁细胞抗体测定 临床意义 恶性贫血患者90%阳性，慢性萎缩性胃炎患者100%阳性。它的阳性率与胃粘膜病变的进展程度相关，但抗体效价与病变的进展程度不相关，也不与疗效平行。,三、抗组织和细胞抗体检测,广西医科大学第一附属医院检验科,(三)抗甲状腺抗体测定 临床意义 1 抗甲状腺球蛋白抗体：见于桥本甲状腺炎，甲亢，甲状腺癌等。 2 抗甲状

40、腺微粒体抗体： 见于桥本甲状腺炎，甲减，甲状腺肿瘤等。,三、抗组织和细胞抗体检测,广西医科大学第一附属医院检验科,(四)抗平滑肌抗体测定 临床意义 主要见于自身免疫性肝炎，原发性胆汁性肝硬化，急性病毒性肝炎。,三、抗组织和细胞抗体检测,广西医科大学第一附属医院检验科,广西医科大学第一附属医院检验科,(五)抗心肌抗体测定 临床意义 见于心肌炎，心肌衰竭，风湿热，重症肌无力，心 疾病和心脏手术后患者。,三、抗组织和细胞抗体检测,广西医科大学第一附属医院检验科,（六）肝脏相关自身抗体测定 临床意义 1 抗肝肾微粒体抗体检测 主要见于自身免疫性肝炎。 2 抗可溶性肝抗原抗体检测 对型自身免疫性肝炎的诊

41、断和鉴别诊断具有重要价值。,三、抗组织和细胞抗体检测,广西医科大学第一附属医院检验科,(一)抗中性粒细胞胞浆抗体测定：cANCA主要见于韦格纳肉芽肿； pANCA主要见于多发性微动脉炎。 (二)抗心磷脂抗体测定：临床上表现为神经系统血栓形成，自发性流产和宫内死胎。 (三)抗乙酰胆碱受体抗体测定：对诊断重症肌无力有意义。,四、其他抗体检测,广西医科大学第一附属医院检验科,广西医科大学第一附属医院检验科,广西医科大学第一附属医院检验科,自身抗体检查项目的选择和应用 对疑有器官特异性自身免疫性疾病者，应同时作抗核抗体和器官特异性自身抗体检测；对非器官特异性自身免疫性疾病，应作抗核抗体和抗胞浆抗体检测

42、； 自身抗体阳性标本，应继续作滴度或定量检测，有助于对疾病进程和疗效观察； 正常人也可出现自身抗体，并随年龄增大而阳性率增高，但自身抗体的滴度和亲和力较低。,广西医科大学第一附属医院检验科,第五节 感染免疫检测 (immunodiagnostic tests of infectious disease) 一、细菌感染免疫检测 二、病毒感染免疫检测 三、寄生虫感染免疫检测 四、性传播疾病免疫检测,广西医科大学第一附属医院检验科,一、细菌感染免疫检测,1.血清抗链球菌溶血素“O”试验（ASO） 2.伤寒和副伤寒沙门菌免疫测定（肥达反应；IgM;可溶性抗原测定) 3.流行性脑脊髓膜炎免疫测定（略）

43、4.布氏杆菌病凝集试验（略） 5.结核分支杆菌抗体和DNA测定 （略) 6.幽门螺杆菌抗体测定（略）,广西医科大学第一附属医院检验科,（一）ASO试验 溶血素“O”是一种A群溶血性链球菌的毒素，属蛋白质，能溶解红细胞、杀伤白细胞和血小板。溶血素“O”有抗原性抗体，称抗链球菌溶血素“O”（抗O或ASO）。受A群溶血性链球菌感染后23周，血清中即出现ASO抗体滴度直至病愈后数月到半年才下降至正常水平。 （参考值：胶乳凝集法为阴性）,广西医科大学第一附属医院检验科,升高（滴度大于1:400）表示病人近期内有A群溶血型链球菌感染，活动性风湿热、风湿性关节炎、急性肾小球肾炎、急性上呼吸道感染、皮肤和软组

44、织感染等。抗体由高滴度逐步下降时，可认为疾病缓解；抗体恒定在高水平时，多为活动期。,临床意义,广西医科大学第一附属医院检验科,（二）伤寒和副伤寒沙门菌免疫测定 人体被伤寒沙门菌感染后，该菌菌体“O”抗原和鞭毛“H”抗原抗体。副伤寒杆菌分甲（A）、乙（B）和丙（C）三型，它们均有各自的菌体抗原和鞭毛抗原，这些抗原在人体内也可产生各自相应的抗体。 肥达反应（WR），利用伤寒和副伤寒沙门菌菌液为抗原，检测病人血清中有无相应抗体的一种凝集试验。,参考值： H1:160 O1:80 A1:80 B1:80 C1:80,广西医科大学第一附属医院检验科,单份血清抗体效价“O”1:80及“H”1:160者有诊

45、断意义；若动态观察，WR持续超过参考值或较原效价升高4倍以上更有价值。（1） O 、 H均升高：提示伤寒可能性大； （2） O 不高、 H升高： 可能是预防接种或是非特异性回忆反应；（3） O 升高、 H不高：可能是感染早期或是交叉感染。,肥达反应临床意义,广西医科大学第一附属医院检验科,二、病毒感染免疫检测,1.TORCH感染免疫检测 2.汉坦病毒抗体IgM测定 3.流行性乙型脑炎病毒抗体IgM测定 4.柯萨奇病毒抗体和RNA测定 5.轮状病毒抗体和RNA测定 6.嗜异性凝集试验及吸收试验 7.严重急性呼吸综合症病毒抗体和RNA测定,广西医科大学第一附属医院检验科,TORCH感染免疫检测 T

46、ORCH是指一组病原微生物的英文名称缩写。这组病原体常可通过胎盘传给胎儿，引起围生期感染，导致流产、死胎、早产、先天畸形和智力障碍等各种异常结果，TORCH感染的抗体检查在许多地区已作为孕期检查的常规项目。,广西医科大学第一附属医院检验科,包括：（一）弓形虫抗体测定 （二）风疹病毒抗体测定 (三)巨细胞病毒抗体测定 (四)单纯疱疹病毒抗体测定 临床意义 主要造成胎儿神经系统及智力的障碍。,广西医科大学第一附属医院检验科,三、寄生虫感染免疫检测,（一）.日本血吸虫抗体测定 （二）.囊虫抗体测定 （三）.疟原虫抗体和抗原测定,广西医科大学第一附属医院检验科,四、性传播疾病免疫检测,（一）衣原体抗体

47、测定（略） （二）支原体的血清学检测（略） （三）梅毒螺旋体抗体测定 （四）淋球菌血清学测定及RNA测定（略） （五）人获得性免疫缺陷病毒抗体及RNA 测定,广西医科大学第一附属医院检验科,（二）梅毒螺旋体抗体测定 特异性抗体、非特异性抗体（反应素）。 1. 定性试验 检测非特异性抗体（反应素）的试验。本试验的抗原成分为心磷脂、磷脂酰胆碱和胆固醇的混悬液，可用其来检测抗心磷脂抗体。 参考值 快速血浆反应素试验（RPR） 不加热血清反应素试验（USR） 美国性病研究实验室试验（VDRL） 均为阴性。,广西医科大学第一附属医院检验科,临床意义：定性试验梅毒的筛选。感染梅毒螺旋体后12周为76，二期

48、梅毒为95100%，晚期梅毒为70%80。定性试验可出现假阳性反应，见于瘤型麻风病、疟疾、SLE、硬皮病、雅司热、回归热、血吸虫病、包虫病、支原体肺炎、传染性单核细胞增多症、结核病等。,广西医科大学第一附属医院检验科,2. 确诊试验 是检测梅毒螺旋体的特异性抗体的试验。 参考值：梅毒螺旋体血凝试验(TPTA)和荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA_ABS)均为阴性。,广西医科大学第一附属医院检验科,临床意义：在梅毒螺旋体定性试验阳性的情况下，必须进行确诊试验，若阳性可肯定梅毒的诊断。确诊试验灵敏度不高，特异性强，不受药物治疗的影响。特异性抗体可持续数年甚至终生。,广西医科大学第一附属医院检验科,HIV是艾滋病（AIDS）的病原体，一种逆转录病毒，单链RNA，分为HIV1型和HIV2型。当机体感染HIV数周到半年后，绝大多数患者体内可出现抗HIV抗体。 参考值： 筛选试验：ELISA法和快速蛋白印迹法（RWB）均为阴性； 确诊试验：蛋白印迹试验（WB）和RTPCR法检测HIVRNA均为阴性。,（三）人获得性免疫缺陷病毒抗体及RNA测定,广西医科大学第一附属医院检验科,临床意义： 筛选试验敏感性高，但特异性不高，故有假阳性；所以筛选试验阳性时需用确诊试验证实。确诊试验阳性，特别是RT