紫外可见分光光度计的使用课件.ppt
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- 关 键 词:
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1、紫外可见分光光度计主要内容主要内容1、工作原理及仪器组成2、分光光度计的使用波长扫描定量测定3、注意事项物质的颜色与吸收光的关系:当白光照射到物质上时,如果物质对白光中某种颜色的光产生了选择性的吸收,则物质就会显示出一定的颜色。物质所显示的颜色是吸收光的互补色。一、工作原理及仪器组成一、工作原理及仪器组成互互补补色色原原理理植物叶子呈现绿色是植物叶子呈现绿色是因为植物中存在一种因为植物中存在一种吸收蓝紫光和红光的吸收蓝紫光和红光的载体载体叶绿素叶绿素颜颜色色的的产产生生完全吸收完全吸收完全透过完全透过吸收黄色光吸收黄色光光谱示意光谱示意表观现象示意表观现象示意复合光复合光 利用一定频率的紫外-
2、可见光照射分析物,它将有选择地被吸收。吸收光谱可以反映出物质的特征。溶液对光的作用示意图物质对光的选择性吸收溶液对光的作用物质对光的选择性吸收溶液对光的作用 bcIITA0lglgI0 入射光辐射强度I 透射光辐射强度T 透射比a 吸光系数 摩尔吸光系数光吸收遵循朗伯-比尔定律:溶液对光吸收过程0.575光源光源单色器单色器吸收池吸收池检测器检测器显示显示仪器组成-单光束分光光度计单光束分光光度计双光束分光光度计双光束分光光度计比比值值光源光源单色单色器器吸收池吸收池检测器检测器显显示示光束分裂器光束分裂器组成:光源、单色器、样品池、检测器光源、单色器、样品池、检测器1光源:能提供连续的辐射;
3、光强度足够大;在整个光谱区内光谱强度不随波长有明显变化;光谱范围宽;使用寿命长,价格低。钨灯可见光区 3202500nm 氢灯或氘灯紫外光区 195375nmU3010(碘钨灯、氘灯)波长范围(碘钨灯、氘灯)波长范围190-900nm 2 2单色器:包括狭缝、准直镜、色散元件单色器:包括狭缝、准直镜、色散元件单色器是分光光度计的心脏部分,它的作用是把来自光源的混合光分解为单色光并能随意改变波长。它的主要组成部件和作用是:入射狭缝限制杂散光进入。色散元件即棱镜或光栅,是核心部件,可将混合光分解为单色光。准直镜把来自入射狭缝的光束转化为平等光,并把来自色散元件的平等光聚焦于出射狭缝上。出射狭缝只让
4、特定波长的光射出单色器。3.3.吸收池吸收池 玻璃由于吸收紫外UV光,仅适用于可见光区;石英适用于紫外和可见光区4 4检测器:将光信号转变为电信号的装置检测器:将光信号转变为电信号的装置 光电管 光电倍增管 二极管阵列检测器5 5记录装置:讯号处理和显示系统记录装置:讯号处理和显示系统 Slit 1不存在,Mirror取代了光栅grating 1 Grating2 variable-pitch aberration-corrected diffraction grating 旋转镜将光分成两束,分别通过参比池和样品池,然后聚集在PMT开始方法设定样品名输入将空白样品分别放入参比池和样品池进行用
5、户基线校正将样品放入样品池开始测量开始测量打印数据二 分光光度计的使用-波长扫描启动启动UV Solution软件软件1.打开仪器主机电源。用鼠标点击Windows开始菜单中的Hitachi Applications选项中的UV Solutions 2.0 选项。或者直接在桌面上双击UV Solution图标。2运行UV Solution软件。软件将自动配置计算机的串行口(RS 232 Port)见图仪器在初始化过程中进行如下自检工作:仪器在初始化过程中进行如下自检工作:ROM检测 RAM检测 波长步进电机运转检测 氘灯点亮检测 钨灯点亮检测 仪器波长校正3 仪器主机开始初始化。见图4 仪器主
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