大学精品课件：微生物学超敏反应.ppt

1、,概念：是指机体对某些抗原初次应答后，再次接受相同抗原刺激时，发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。,本质：异常的或病理性的免疫应答,超 敏 反 应 （hypersensitivity）,超敏反应分型（1963年Gell和Coombs）,一、主要特征 反应发生快，无明显的组织损伤，消退也快速发型。 参与细胞为肥大细胞和嗜碱性细胞。 有个体差异，具遗传倾向。 主要为IgE 抗体介导。 再次接触相同的变应原到发病时间短。, 型超敏反应 速发型超敏反应（过敏反应）,二、参与成分：,变应原 （是指能够选择性地激活CD4+ Th2细胞及B细胞，诱导产生特异性IgE抗体应答，引起

2、变态反应的抗原物质） 1、动植物蛋白：食物中的鱼虾、海鲜；植物 的花粉；真菌孢子等； 2、某些药物或化学物质。 3、天然变应原多为小分子可溶性蛋白质,肥大细胞和嗜碱性粒细胞（表面具有高亲和性IgE的Fc受体 ，胞质内含有类似的嗜碱性颗粒，被激活后可释放生物活性介质 ）,IgE （亲细胞抗体，主要由鼻咽部、扁桃体、气管和胃肠道黏膜下固有层淋巴组织中的B细胞产生， IL-4等细胞因子可诱导，IL-12是抑制剂）,三、发生过程,致敏阶段变应原机体IgEIgE-细胞,发敏阶段相同变应原致敏机体Ag-IgE-细胞细胞膜稳定性下降，通透性增加，细胞内颗粒脱出。,效应阶段释放多种生物活性介质引起血管扩张、通

3、透性增加，平滑肌痉挛，腺体分泌增加。,三、临床常见的I型超敏反应性疾病,（一） 过敏性休克 最迅速，最严重-甚至导致死亡 1、药物过敏性休克 以青霉素引发最为常见，此外头孢菌素、链霉素、普鲁卡因等也可引起。 2、 血清过敏性休克 再次使用动物免疫血清如破伤风抗毒素、白喉抗毒素进行治疗或紧急预防时，可发生过敏性休克。,（二） 呼吸道过敏反应 吸入花粉、尘螨、真菌和毛屑等变应原引起， 过敏性鼻炎和过敏性哮喘是临床常见的呼吸道过敏反应,（三） 消化道过敏反应 进食鱼、虾、蟹、蛋、奶等食物后可发生过敏性胃肠炎，出现恶心、呕吐、腹痛和腹泻等症状。,（三） 皮肤过敏反应 荨麻疹、湿疹,药物过敏性休克（以青

4、霉素为例）,青霉素（半抗原）,青霉素噻唑酸或青霉烯酸,IgE,血容量下降 循环衰竭,体内组织蛋白,完全抗原,四、I型超敏反应防治原则,寻找变应原，避免再接触。 脱敏治疗小剂量，短间隔（20-30min），连续多次注射。 减敏治疗能检出但难以避免的变应原（花粉，尘螨），小量、多次、长时间间隔皮下注射抗原 药物治疗青霉素过敏可注射11000肾上腺素，使cAMP升高，防止生物活性介质的释放。,型超敏反应是由IgG或IgM类抗体与靶细胞表面相应抗原结合后，在补体、吞噬细胞和NK细胞参与作用下，引起的以细胞溶解或组织损伤为主的病理性免疫反应。, 型超敏反应 细胞毒型或细胞溶解型超敏反应,诱发II型超敏反

5、应的抗原及相应疾病,同种异型抗原,自身修饰的抗原,共同抗原,吸附于细胞表面的抗原或半抗原,血型、HLA,理化、生物因素,异嗜性抗原,细胞上原有的抗原,Eg. 药物过敏性血细胞减少症,Eg.急性风湿热、抗肾小球基底膜肾炎,Eg.输血反应、新生儿溶血、移植排斥反应,Eg.自身免疫性溶血性贫血,免疫学的实际应用,第一节 免疫学防治 （1）特异性免疫的获得： 1.自然免疫 (1)自然主动免疫：通过感染（显性或隐性） (2)自然被动免疫：通过胎盘、初乳从母体 获得抗体 2.人工免疫 (1)人工主动免疫接种抗原（预防） (2)人工被动免疫注入特异性抗体（治疗）,人工主动免疫：用疫苗接种机体，刺激机体产生特

6、异性免疫应答，预防感染。 疫苗(vaccine)：细菌性、病毒性制剂、类毒素 1.死疫苗： 伤寒、霍乱、百日咳、流脑、乙脑 优点：易制备，易保存，较稳定,可以联合应用 缺点：接种后效果较差, 剂量大，需多次注射才能 获得持久免疫力，局部、全身反应明显,2.减毒活疫苗 用减毒或无毒的活病原微生物制成的预防制剂。 牛痘疫苗、卡介苗、麻疹、脊髓灰质炎疫苗等 优点：毒性较低，免疫效果较好，只需接种一次 就可获得较长时间的免疫力持续时间长 缺点：难保存，易失效,有突变危险 3.类毒素(toxoid)：将细菌的外毒素经0.3-0.4%甲醛处理，失去毒性，保留免疫原性，接种后诱导机体产生抗毒素。 4.新型疫

7、苗的发展,人工被动免疫：给机体注射含特异性抗体的免疫血清或细胞因子等制剂，使机体获得免疫力，以治疗或紧急预防感染的措施。 1.抗毒素(antitoxin)用细菌类毒素或外毒素免疫动物制备的免疫血清，具有中和外毒素毒性的作用。 2.人免疫球蛋白制剂：从正常人血浆或胎盘 血中分离获得，含有正常人群流行的传染病病原微生物的抗体。 3.细胞因子制剂,人工主动免疫与人工被动免疫,区别点,人工主动免疫,人工被动免疫,接种物,抗原,抗体,免疫力出现时间,慢，要经过1-4周 诱导期,快，即刻产生,免疫力维持时间,长（数月-数年）,较短（2周-数周）,用途,预防,治疗或紧急预防,1、高度特异性,2、结合是分子表

8、面的结合,4、反应的阶段性,3、合适的分子比例,（一）抗原抗体反应的一般特性,第二节 免疫学诊断（了解）,一、体液免疫测定法,（二）影响抗原抗体反应的主要因素,电解质 0.85氯化钠 消除抗体与抗原上的电荷，促进互相凝聚，而出现明显的凝集或沉淀现象 温度 37 由于抗原与抗体或抗原抗体复合物间碰撞机会增多，反应速度加快 酸碱度 溶液pH值68 pH过高或过低都将直接影响抗原或抗体的理化性质,二、抗原抗体的检测方法,(一)凝集反应(agglutination) ：颗粒性抗原(如细菌、红细胞等)在一定条件下与相应抗体结合后形成凝集物的现象。,(二)沉淀反应( precipitation)：可溶性抗

9、原(如血清蛋白质、细胞裂解液、组织浸液等)与相应抗体在一定条件下出现沉淀物的现象. 1.单项琼脂扩散单扩（定量检测） 用于IgG、IgM、IgA、C3等检测 2.双向免疫扩散双扩（定性检测） 抗原抗体的定性检测、组成、两种抗原的相关性分析 3.对流免疫电泳（定性检测） 4.火箭电泳（定量检测）,5.免疫电泳 用于血清蛋白种类分析 6.免疫比浊 测定血清中Ig含量,(三)免疫标记技术 标记物：荧光素、酶、放射性核素,1.免疫荧光法 用荧光素与抗体连接成荧光抗体，再与待检标本中的抗原反应。 荧光素：FITC（异硫氰酸荧光素）绿色荧光 PE（藻红蛋白）红色荧光 方法：直接荧光法、间接荧光法 应用：检

10、测细菌、病毒、螺旋体等的Ag或Ab等,2.酶免疫测定 常用酶：辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(AP) （1）ELISA：酶联免疫吸附实验 双抗夹心法: 测Ag 间接法: 测Ab BAS-ELISA(生物素、亲和素ELISA） 包被已知Ab 待测Ag S标记特异Ab 酶标记A 底物显色 酶联免疫斑点试验（ELISPOT):单一效应细胞分泌的某种细胞因子的检测,ELISA应用定性或定量 检测多种病原体的抗原或抗体、血液微量 蛋白、细胞因子等 优点：灵敏度高，操作简单，操作易规范、 稳定 （2）酶免疫组化： 测定组织或细胞中抗原,3.放射免疫测定：用放射性核素标记抗原或抗体 进行免疫学检测 优

11、点：灵敏度极高，(检测范围pg-ng) 缺点：放射性污染，设备昂贵 用于某些激素、药物的检测 4.化学发光免疫分析：用发光物质标记抗原或 抗体进行反应,灵敏度高于放射免疫测定， 检测血清超微量活性物质的测定,5.免疫印迹法（western blotting): 将电泳分区的蛋白质转移至固相载体，再用酶 免疫、放射免疫等技术测定。 6.免疫PCR（immuno-PCR, IM-PCR):,Western blot SDS裂解病毒蛋白 SDS-PAGE（聚丙烯酰胺 凝胶电泳） 电转印至硝酸纤维素膜 浸于待检血清 加如酶标二抗 加底物显色 结果：待检血清中有针对HIV 120kDa、41kDa、 24kDa蛋白的抗体,本章重点,掌握：I型、II型超敏反应； 人工主动免疫和人工被动免疫。 了解：常用的生物制品； 体液免疫和细胞免疫测定方法。,