F-7000荧光分光光度计使用操作步骤解析课件.ppt

1、F-7000荧光分光光度计使用操作步骤1、开机：（1）开启计算机。（2）开启仪器主机电源。按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）。同时，观察主机正面面板右侧的Xe LAMP 和RUN指示灯依次亮起来，都显示绿色。2、计算机进入Windows XP视窗后，打开运行软件（如图1）。（1）双击桌面图标（FL Solution 2.1 for F-7000）。主机自行初始化，扫描界面自动进入。（2）初始化结束后，须预热15-20分钟，按界面提示选择操作方式。图1 FL Solution 2.1扫描界面3、测试模式的选择：波长扫描（wavelength scan）(1)点击扫描界面右侧“Met

2、hod”。(2)在“General”选项中的“Measurement”选择“wavelength scan”测量模式，如图2。图2 Method-“General”选项的界面(3)在“Instrument”选项中设置仪器参数和扫描参数，如图3。图3 Method-“Instrument”选项设置界面主要参数选项包括：选择扫描模式“Scan Mode”：Emission/Excitation/Synchronous（发射光谱、激发光谱和同步荧光）。选择数据模式“Data Mode”：Fluorescence/Phosphprescence/Luminescence(荧光测量、磷光测量、化学发光)

3、。设定波长扫描范围。扫描荧光激发光谱(Excitation)：需设定激发光的起始/终止波长（EX Start/End WL）和荧光发射波长（EM WL）;扫描荧光发射光谱(Emission)：需设定发射光的起始/终止波长（EM Start/End WL）和荧光激发波长（EX WL）;扫描同步荧光（Synchronous）：需设定激发光的起始/终止波长（EX Start/End WL）和荧光发射波长（EM WL）。！Attention：激发光终止与起始波长差不小于10nm。选择扫描速度“Scan Speed”（通常选240nm/min）。选择激发/发射狭缝（EX/EM Slit）。选择光电倍增管

4、负高压“PMT Voltage”（一般选700V）。选择仪器响应时间“Response”（一般选Auto）。选择光闸控制“Shutter Control”打，以使仪器在光谱扫描时自动开启，而其他时间关闭。选择“Report”设定输出数据信息、仪器采集数据的步长（通常选0.2nm）及输出数据的起始和终止波长（Data Start/End）。！Attention：Data Start/End需与“Instrument”选项中设置一致，否则所得到的数据点会逐渐减少，而无法作图。（4）参数设置好后，点击“确定”。4、设置文件存储路径（1）点击扫描界面右侧“Sample”，如图4。图4 Sample选项

5、的界面（2）样品命名“Sample name”。（3）选中“Auto File”，打。可以自动保存原始文件和TXT格式文本文档数据。（4）参数设置好后，点击“OK”。5、扫描测试（1）打开盖子，放入待测样品后，盖上盖子。（请勿用力）。（2）点击扫描界面右侧“Measure”（或快捷键F4），窗口在线出现扫描谱图。6、数据处理（1）选中自动弹出的数据窗口，如图5。（2）选择“Trace”，进行读数并寻峰等操作。（3）上传数据。图5 扫描谱图窗口3、关机顺序（逆开机顺序实施操作）：（1）关闭运行软件FL Solution 2.1 for F-7000，弹出窗口，如图6。（2）选中“Close th

6、e lamp，then close the monitor windows？”，打“”。（3）点击“Yes”。窗口自动关闭。同时，观察主机正面面板右侧的Xe LAMP指示灯暗下来，而RUN指示灯仍显示绿色。图6 关闭运行软件（2）约十分钟后，关闭仪器主机电源，即按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）。（目的是仅让风扇工作，使Xe灯室散热）。（3）关闭计算机。寻找激发波长的方法测试前，激发波长未知，可以按照以下步骤寻找激发波长。1.首先在发射光谱设置中输入一个激发光波长数值，如300 nm，设置发射光谱范围，通常起始值大于激发波长，小于激发波长的二倍，得到一个发射光谱，得到一个或几个发射波长的峰值 2.重新在激发光谱中设置，输入步骤一中得到的发射波长，设置激发光谱范围，通常起始值大于发射波长的一半，小于发射波长，得到激发波长的峰值 3.按照步骤二的过程，将几个发射波长都输入，得到几个激发波长 4.重复步骤一的过程，输入步骤二，三中得到的激发波长，观察发射光谱的峰形，确定发射光谱。