《兽医药理学》兽医毒理学基本概念课件.ppt

1、兽医毒理学基本概念兽医毒理学基本概念Toxicology由由”toxikon”与与”logols”两个希腊文组合而两个希腊文组合而成。成。定义：研究化学物质对生物机体的损害作用定义：研究化学物质对生物机体的损害作用及其作用机理的科学及其作用机理的科学 兽医毒理学主要研究任务兽医毒理学主要研究任务 兽药、添加剂、饲料中有毒有害物质的兽药、添加剂、饲料中有毒有害物质的检测及安全性评价检测及安全性评价 动物性食品中药物残留检测动物性食品中药物残留检测一、毒物及其毒性一、毒物及其毒性 p6 毒物（毒物（poison or toxicant)毒素（毒素（toxin)由活的机体产生的由活的机体产生的 毒性

2、（毒性（toxicity)危险性（危险性（risk)染毒剂量、时间、途经、接触频率有关染毒剂量、时间、途经、接触频率有关 具有选择性（选择毒性）具有选择性（选择毒性）安全性（安全性（safety)毒性参数毒性参数 p10 阈剂量阈剂量/观察到损害作用的最低剂量（观察到损害作用的最低剂量（LOAEL）无作用剂量无作用剂量NOEL/未观察到损害作用剂量未观察到损害作用剂量NOAEL 致死剂量致死剂量/浓度（浓度（LD/LC）绝对致死剂量绝对致死剂量LD100 最小致死量最小致死量LD01/MLD 最大耐受量最大耐受量LD0/MTD 半数致死量半数致死量LD50 (mg/kgbw)半数耐受量半数耐受

3、量TLm (mg/L)日许量日许量ADI毒毒 性性 作作 用用p66 对生物膜的损害作用对生物膜的损害作用 自由基对膜蛋白自由基对膜蛋白脂质的氧化；膜通透性、脂质的氧化；膜通透性、流动性、膜电荷的影响等流动性、膜电荷的影响等 与生物大分子的共价结合与生物大分子的共价结合 与核酸与核酸/蛋白蛋白/脂质的共价结合脂质的共价结合 影响细胞内钙稳态影响细胞内钙稳态 对酶系统的干扰对酶系统的干扰二、毒物的毒性作用评价二、毒物的毒性作用评价 p83一般毒性（一般毒性（general toxicity)特殊毒性（特殊毒性（special toxicity)致突变作用致突变作用 致癌作用致癌作用生殖发育毒性生

4、殖发育毒性 致敏作用致敏作用神经毒性神经毒性免疫毒性免疫毒性急性毒性急性毒性蓄积毒性蓄积毒性亚慢性毒性亚慢性毒性慢性毒性慢性毒性（一）一般毒性试验（一）一般毒性试验 定义：在一定剂量、一定接触时间、一定义：在一定剂量、一定接触时间、一定接触方式下，总体毒效应。定接触方式下，总体毒效应。急性毒性（急性毒性（acute toxicity)：一次或于一次或于24h内多次接触外源化学物后，内多次接触外源化学物后，在短期内发生的毒性效应。在短期内发生的毒性效应。1、急性毒性试验目的、急性毒性试验目的 了解毒性强度（了解毒性强度（LD01、LD50、LD100、LD0/MTD）；）；毒性作用及靶位，初步评

5、价其危险性；毒性作用及靶位，初步评价其危险性；剂量剂量-效应关系，为其他毒性试验的剂量设计、效应关系，为其他毒性试验的剂量设计、观察指标作参考；观察指标作参考；了解致死原因。了解致死原因。2、急性毒性试验、急性毒性试验半数致死量测定的试验设计半数致死量测定的试验设计 1）实验动物实验动物 啮齿类：大、小鼠、豚鼠、家兔啮齿类：大、小鼠、豚鼠、家兔 非啮齿类：犬、猫非啮齿类：犬、猫 常用实验动物体重常用实验动物体重大鼠大鼠小鼠小鼠家兔家兔180-200g 18-22g2-2.5kg动物数量：小鼠动物数量：小鼠 10只只/组组 大鼠大鼠 5只只/组组 雌雄各半雌雄各半2）染毒途经：经口）染毒途经：经

6、口/经呼吸道经呼吸道/经皮肤经皮肤/注射染毒注射染毒注射方式注射方式小鼠小鼠大鼠大鼠家兔家兔犬犬iv0.2-0.5 1.0-2.0 3.0-10.035.0-50.0im0.1-0.2 0.2-0.5 0.5-1.02.0-5.0sc0.1-0.5 0.5-1.0 1.0-3.03.0-10.0ip0.2-1.0 1.0-3.0 5.0-10.05.0-15.0常用实验动物注射量常用实验动物注射量3）剂量设计）剂量设计 预试验预试验LD0，LD100 分组：改良寇氏法（分组：改良寇氏法（Kaber)各组动物数相等，按等比级数设计剂量各组动物数相等，按等比级数设计剂量 公比公比 r=(b/a)(

7、1/n-1)r在在1.21.5 一般分为一般分为4 6组，各组剂量分别为：组，各组剂量分别为：a ；ar；ar2；ar3；ar(n-1)=b4）试验期限及观察指标）试验期限及观察指标 试验期限：一般为一周试验期限：一般为一周 中中 毒毒 部部 位位 毒毒 性性 症症 状状 表表 现现中枢神经系统中枢神经系统 呆滞呆滞:对刺激反应迟缓、减弱、消失；不安：对刺激反应对刺激反应迟缓、减弱、消失；不安：对刺激反应 过敏、过敏、兴奋；强直：行动姿势改变、叫声异常、震颤、兴奋；强直：行动姿势改变、叫声异常、震颤、共济失调共济失调 植物神经系统瞳孔缩小、放大植物神经系统瞳孔缩小、放大;分泌增多，如流涎、流泪

8、分泌增多，如流涎、流泪 呼呼 吸吸 系系 统统 鼻孔流鼻涕、呼吸缓慢、困难、潮式呼吸、速率加快等鼻孔流鼻涕、呼吸缓慢、困难、潮式呼吸、速率加快等心血管心血管 系统系统 心动过速、缓慢、心律不齐、心跳过强、微弱心动过速、缓慢、心律不齐、心跳过强、微弱胃胃 肠肠 系系 统统 气胀、腹泻、便秘、粪便不成形、粪便黑色气胀、腹泻、便秘、粪便不成形、粪便黑色生生 殖殖 系系 统统 乳腺膨胀、会阴部污浊、阴囊下垂等乳腺膨胀、会阴部污浊、阴囊下垂等皮肤、皮肤、毛毛 皮肤发红、松弛、皮疹、毛竖起皮肤发红、松弛、皮疹、毛竖起粘粘 膜膜 口腔流粘液、充血、溃疡、出血性紫绀口腔流粘液、充血、溃疡、出血性紫绀眼眼 睛睛

9、 上睑下垂、眼球突出混浊上睑下垂、眼球突出混浊其其 他他 直肠温度升高、降低；消瘦；拒食等直肠温度升高、降低；消瘦；拒食等 观察指标观察指标5）LD50的计算的计算 LD50=lg-1Xm i(p 0.5)Xm：最大剂量的对数（：最大剂量的对数（lgb)i:相邻两组对数剂量之差（相邻两组对数剂量之差（lgr)p:死亡率总和（以小数表示）死亡率总和（以小数表示）3、急性毒性试验评价、急性毒性试验评价 表表.化学物质的急性毒性分级标准化学物质的急性毒性分级标准(WHO,1977)毒性分级毒性分级 ig大、小鼠大、小鼠LD50 吸入大、小鼠吸入大、小鼠LC50 经皮兔经皮兔LD50 人口服可能的人口

10、服可能的 (mg/kg)(ppm)(mg/kg)致死量致死量(g/60kg)极极 毒毒 1 10 5000 10000 2180 1200 *吸入毒性吸入毒性LC50指中毒栏中的浓度指中毒栏中的浓度,一次中毒一次中毒2-4小时小时,观察观察24天天（二）特殊毒性（二）特殊毒性1、致突变作用（、致突变作用（mutagenesis)基因突变：碱基置换、移码、片断改变基因突变：碱基置换、移码、片断改变 染色体畸变：断裂、缺失（微小体）、染色体畸变：断裂、缺失（微小体）、成环状、易位等成环状、易位等 致突变检测方法：致突变检测方法：体外：体外：Ames试验试验 体内：微核试验，显性致死试验体内：微核试

11、验，显性致死试验2、生殖发育毒性作用、生殖发育毒性作用生殖毒性生殖毒性 主要研究外来化合物对生殖细胞发生、主要研究外来化合物对生殖细胞发生、卵细胞受精、胚胎形成、妊娠、分娩和哺卵细胞受精、胚胎形成、妊娠、分娩和哺乳过程的损害作用及其评定乳过程的损害作用及其评定 发育毒性发育毒性 对子代在胚胎期、胎儿期和幼仔发育的对子代在胚胎期、胎儿期和幼仔发育的影响及其评定影响及其评定生殖发育毒性评价方法生殖发育毒性评价方法（1）三段生殖毒性试验）三段生殖毒性试验 阶段阶段给药时间给药时间 观察指标观察指标一般生殖毒性一般生殖毒性 妊娠前期妊娠前期（14d,60d)孕后孕后20d剖检，受精率、妊娠率、剖检，受

12、精率、妊娠率、活胎数、死胎数、畸胎数、着床活胎数、死胎数、畸胎数、着床数等数等致畸试验致畸试验器官形成期器官形成期(检检栓后栓后716d)畸胎总数、畸形总数畸胎总数、畸形总数围产期毒性试围产期毒性试验验孕后孕后6d至产后至产后20d受孕率、产仔数、死亡率、存活受孕率、产仔数、死亡率、存活率、外观畸形、生长指数率、外观畸形、生长指数（2）繁殖试验）繁殖试验 评价对亲代生殖和子代的发育、生殖评价对亲代生殖和子代的发育、生殖影响。影响。分一代和多代系列试验分一代和多代系列试验 多代繁殖试验可观察对子代的生殖毒性。多代繁殖试验可观察对子代的生殖毒性。三、兽药的安全性毒理学评价三、兽药的安全性毒理学评价特殊毒性：特殊毒性：致突变致突变致畸致畸体外：体外：Ames试验（必做）试验（必做）染色体畸变试验（选做）染色体畸变试验（选做）体内：微核试验（必做）体内：微核试验（必做）精子畸形试验精子畸形试验/小鼠睾丸精原细胞染色体畸变小鼠睾丸精原细胞染色体畸变 显性致死试验显性致死试验 致畸试验致畸试验 传统致畸试验（必做）传统致畸试验（必做）喂养系列毒性试验喂养系列毒性试验 喂养致畸试验喂养致畸试验饲料添加剂须饲料添加剂须增加此两项增加此两项兽药临床前安全性评价兽药临床前安全性评价一般药理试验一般药理试验急性毒性试验急性毒性试验长期毒性试验长期毒性试验特殊毒性试验特殊毒性试验其它毒性试验其它毒性试验