茶叶中主要成分含量的测定课件.ppt

1、报告人：袁培培 03081132引言茶叶的神奇功效：利尿排毒；除脂解腻，促进消化；消除疲劳；增强记忆力；消炎抑菌；预防龋齿；抗癌、抗辐射、抗衰老；防止高血压等分类分类含量（在干重中）含量（在干重中）具体成分具体成分生理作用生理作用蛋白质蛋白质20203030各种蛋白质各种蛋白质氨基酸氨基酸1 14 4茶氨酸、谷氨酸、天门茶氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸和异亮氨酸等冬氨酸和异亮氨酸等2525种以上种以上是人体必须的营养成分；降是人体必须的营养成分；降低血氨，治疗肝昏迷；调整低血氨，治疗肝昏迷；调整脂肪代谢脂肪代谢生物碱生物碱2 25 5以咖啡碱的含量最多以咖啡碱的含量最多提神；利尿；促进血液循环；提神

2、；利尿；促进血液循环；降胆固醇；防止动脉粥样硬降胆固醇；防止动脉粥样硬化等化等茶多酚茶多酚20203535儿茶素、黄酮类、花青儿茶素、黄酮类、花青素和酚酸等四大类物质素和酚酸等四大类物质降血脂；消炎抑菌；防辐射；降血脂；消炎抑菌；防辐射；抗癌、抗突变等抗癌、抗突变等糖类糖类20202525淀粉、纤维素、半纤维淀粉、纤维素、半纤维素、木质素素、木质素类脂类类脂类8 8脂肪、磷脂、甘油脂、脂肪、磷脂、甘油脂、糖酯和硫酯糖酯和硫酯调节人细胞的渗透压调节人细胞的渗透压 维生素维生素 0 06 61 1维生素维生素A A、维生素、维生素D D、维、维生素生素C C、维生素、维生素B B族族保护视力；增加

3、抵抗力；抗保护视力；增加抵抗力；抗坏血病，抗氧化、抗衰老等坏血病，抗氧化、抗衰老等矿质元素矿质元素3 35 57 70 0CaCa、K K、P P、MgMg、MnMn、F F、CuCu、ZnZn、I I、SeSe等等防止味觉异样；防止皮肤过防止味觉异样；防止皮肤过敏；抗氧化；增强免疫力；敏；抗氧化；增强免疫力；预防蛀牙等预防蛀牙等茶叶中主要成分含量的测定 蛋白质的测定蛋白质的测定茶多酚的测定茶多酚的测定咖啡碱的测定咖啡碱的测定金属元素的测定金属元素的测定结束语本文所述的对 茶叶中主要成分含量的测定 各有优缺点。但只要我们能 够根据具体 情况选取合适 的方法，都会为研究茶叶作为药用及保健品的进一

4、步开发利用提供参考依据。参考文献贾林艳，宋伟新，庄志萍，周靖，宿艳华 高效液相色谱法测定茶叶中水溶性维生素的含量中国农林 副产品 2003年5月2.张国文刘永华杨振华朱志怀赣南信丰茶叶中蛋白质、茶多酚、咖啡碱的测定南昌大学学报(工科版)1996年12月 杨明索南 微波加热快速测定茶叶中的茶多酚青海大学学报(自然科学版)1998年 第4期3.1.6.谢立群 火焰原子吸收法测定茶叶中的金属元素 4.林郑和严兰芳 紫外分光光度法测定茶叶中的咖啡碱 茶叶科学技术 2001年 第4期5.曾建民 伍炳华 杨亚军茶叶可溶性蛋白质的SDS-PAGE电泳分析法中国茶叶 1998年6月北华大学学报(自然科学版)2

5、000年12月谢谢大家!蛋白质的测定1）凯氏定氮法 2）SDSPAGE 电泳分析法 3）色谱法十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法试剂及主要仪器 1)浓硫酸(A.R)2)硫酸钾(A.R)3)硫酸铜(A.R)4)3.0%NaOH溶液 5)2%硼酸溶液 6)0.05mol/L的标准HCl溶液 7)0.1%混合指示剂:0.1%甲基红酒精溶液和0.1%甲基蓝酒精溶液按1：1混合8)微量凯氏定氮仪处理样品准确称取样品2g,小心移入烧瓶中,再CuSO4 1g,K2SO4 10 g和浓H2SO4 50mL。用电炉加热消化至液体变成蓝绿透明后,冷却,定容至100 mL。测定先用蒸汽洗涤微量凯氏定氮装置后,精确移

6、取消化液10.00 mL,量取NaOH 25mL,加至反应室中,蒸气蒸馏直至硼酸溶液由葡萄紫色变成绿色,最后再用0.05 molL HCl溶液滴定至淡葡萄紫色。处理样品测定粗蛋白百分含量=12(V-V)C0.0146.25100%10100W式中:V1 样品消耗盐酸标准液的毫升数;V2 试剂空白消耗盐酸标准液的毫升数;C 盐酸标准液的浓度;0.014 1molL HCl标准液1mL相当于氮 的克数;6.25 氮换算成蛋白质的因数。返回茶多酚的测定1)高锰酸钾容量法2)微波加热法 3)分光光度法4)原子吸收法 试剂及主要仪器1)微波炉 2)724型分光光度计 3)酒石酸亚铁溶液:称取1000g硫

7、酸亚 铁和5000g酒石酸钾钠,用水溶解并定容至1L,pH=7.51151154)磷酸盐缓冲液:取molL的molL磷酸二氢钾溶液850ml和磷酸二氢钾溶液150ml混合均匀 称取磨碎茶叶试样0.3g(准确至0.0001g)于100mL容量瓶中,加蒸馏水40mL,用密封带密封瓶口,橡皮筋系紧,置于微波炉内,于中档功率微波加热5min,端出转盘,取下密封带,过滤至50mL容量瓶中,定容。准确吸取上述试液1.00mL,注入25mL的容量瓶中,加水4mL和酒石酸亚铁溶液5mL,充分混合再加pH=7.5的缓冲液至刻度,用10mm比色杯,在波长540nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)茶多酚(

8、%)=12A1.9572L1001000LMm式中:L1 试样的总量(ml);L2 测定时的用液量(ml);M 试样的质量(g);m 试样干物质含量的百分率(%);1.957 用10mm比色杯,当吸光度等于0.50 时,每毫升茶汤中含茶多酚相当于1.957mg。返回咖啡碱的测定 碘量法重量法紫外分光光度法薄层扫描法 为什么？利用咖啡碱结构上的嘌呤环具有共轭双键体系，因而具有独特的吸收光谱，在 波长272274nm处具有最大吸收值，其消光度与咖啡碱含量呈线性关系。故可通过消光度求其含量试剂及主要仪器 8)0.01N HCl溶液:取比重 1.19的浓HCl 0.831)电子分析天平2)752分光光

9、度计3)恒温水浴锅4)吸滤装置5)移液管6)锥形瓶7)碱性乙酸铅溶液:称取50g碱性乙酸铅,加水100mL,静置过夜；L,稀释至升。9)咖啡碱标液:准确称取100mg咖啡碱（纯度不低于99）溶于100mL水中，作为母液。准确吸取5.00mL加水至100mL作为工作液。（每毫升含0.05mg）准确称取 3.0000g均匀地磨碎茶样于500mL 锥形瓶中,加沸蒸镏水 450mL,立即移入沸水浴中，浸提完毕立即趁热减压过滤。滤液移入500mL容量瓶中，残渣用少量热蒸镏水洗涤 23次，并将滤液拼入上述容量瓶中，用水稀释至刻度。用移液管准确吸取试液 10.00mL，移入100mL容量瓶,加入 5mL0.

10、01N 盐酸和1mL碱性乙酸铅溶液，用水稀释至刻度，充分混匀，静置过滤。准确吸取 25.00mL 滤液注入50mL容量瓶中，加入3滴6N硫酸溶液，加水稀释至刻度、混匀、静置过滤。用10mm比色杯，在波长274nm 处，以试剂空白为溶液参比，测定其吸光度（）。准确称取均匀磨碎的茶样3.0000g于500mL 锥形瓶中,加沸蒸镏水 450mL,立即移入沸水浴中，浸提完毕立即趁热减压过滤。滤液移入500mL容量瓶中，残渣用少量热蒸镏水洗涤 23次，并将滤液倒入上述容量瓶中，用水稀释至刻度。返回金属元素的测定 1)火焰原子吸收法 2)离子色谱法 3)电感耦合等离子体质谱法 试剂与主要仪器 1)WFX1

11、 F2B2原子吸收分光光度计;2)Ca,Mg,Mn,Fe,Zn,Cu,Ni,Co3)二氯化锶：5%分析纯;的标准贮备液：1g/(北京国家标准物质研究中心);4)硝酸、盐酸、高氯酸：分析纯。样品来源及样品的制备 准确称取茶叶5.0于烧瓶中,加20 mL HNO3,静置消化12min,次日加入5mL高氯酸,于小火加热至无色透明近干为止,冷却后转移到25mL容量瓶中,用3%HNO3定容,摇匀备用。标准工作曲线绘制配制各元素标准工作使用液,按仪器工作参数表测定溶液的吸光度,绘制工作曲线,并计算回归方程和相关系数。样品测定按仪器工作参数表上所列仪器的工作条件,分别测定样品液中Ca,Mg,Mn,Fe,Zn,Cu,Ni 和Co的质量分数,测定5次,将测得值乘以稀释倍数即为样品中上述七种离子的质量分数。讨论 酸度磷酸根的干扰HNO3返回其中为光谱通带宽度,为燃烧器高度。返回仪器工作参数表