幽门螺杆菌检测课件.ppt
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1、幽门螺杆菌检测讲课内容讲课内容第一节第一节 幽门螺杆菌特点幽门螺杆菌特点 第二节第二节 幽门螺杆菌感染的检测方法幽门螺杆菌感染的检测方法第三节第三节 幽门螺杆菌检测方法的临床应用幽门螺杆菌检测方法的临床应用123第一节第一节 幽门螺杆菌特点幽门螺杆菌特点 幽门螺杆菌(幽门螺杆菌(Helicobacter pylori Helicobacter pylori 简称简称HPHP),呈),呈弧形或弧形或S S形,有形,有1212个微小弯曲,属个微小弯曲,属微需氧菌微需氧菌,在在pHpH值值为为6868时繁殖时繁殖最为活跃,该菌具有丰富的最为活跃,该菌具有丰富的尿素酶尿素酶,可,可分解食物中的尿素产生
2、氨,该菌生长于胃粘液深层,分解食物中的尿素产生氨,该菌生长于胃粘液深层,胃粘膜表面,多在胃窦部以胃小凹、上皮皱褶的内折胃粘膜表面,多在胃窦部以胃小凹、上皮皱褶的内折及腺腔内为多。及腺腔内为多。H.Pylori感染和十二指肠溃疡感染和十二指肠溃疡H.Pylori感染感染 D/G细胞功能改变细胞功能改变遗传易感性遗传易感性壁细胞总体增加壁细胞总体增加B型慢性胃窦炎型慢性胃窦炎 胃泌素胃泌素 胃酸分泌量胃酸分泌量H.Pylori的迁移的迁移十二指肠粘膜胃上皮化生十二指肠粘膜胃上皮化生十二指肠球炎十二指肠球炎十二指肠球溃疡十二指肠球溃疡H.Pylori感染和胃癌的关系感染和胃癌的关系浅表性胃炎浅表性胃
3、炎正常胃粘膜正常胃粘膜基因损伤基因损伤H.Pylori感染感染弥漫性胃癌弥漫性胃癌萎缩性胃炎萎缩性胃炎环境因素环境因素胃粘膜肠上皮化生胃粘膜肠上皮化生 高高CagA+-HP滴度滴度宿主因素宿主因素 的的H.pylori菌株菌株感染感染肠型早期胃癌肠型早期胃癌进展期胃癌进展期胃癌3.HP的毒力作用的毒力作用取决于取决于 定植能力定植能力 菌株的基因型菌株的基因型 细菌的圆球体样型态细菌的圆球体样型态 对抗菌药物的敏感性对抗菌药物的敏感性第二节第二节 幽门螺杆菌感染的检测幽门螺杆菌感染的检测侵入性检测方法非侵入性检测方法l 快速尿素酶试验l 病理切片染色l 培养l 黏膜涂片革兰氏染色l 基因方法:
4、PCR等l13C-或14C-尿素呼气试验l Hp粪便抗原试验l Hp血清抗体试验试验原理试验原理HP能产生丰富能产生丰富尿素酶,将尿素尿素酶,将尿素分解、产生分解、产生2个个分子的氨,使培分子的氨,使培养基变为碱性,养基变为碱性,酚红呈粉红色。酚红呈粉红色。操作过程操作过程活检同时取活检同时取2块块组织进行检测组织进行检测(胃窦和胃体各(胃窦和胃体各1块),标本放块),标本放置于试剂后观察置于试剂后观察颜色变化。颜色变化。注意事项注意事项检测结果受试剂检测结果受试剂pH值、取材部值、取材部位、组织大小、位、组织大小、细菌量、观察时细菌量、观察时间、环境温度等间、环境温度等因素影响因素影响(一)
5、快速尿素酶试验(一)快速尿素酶试验RUTRUT一一、创伤性检查、创伤性检查 胃镜检查胃黏膜取材胃镜检查胃黏膜取材,直接涂片革兰氏染色,直接涂片革兰氏染色,也可包埋切片,常规也可包埋切片,常规HEHE染色或银染,直接镜检染色或银染,直接镜检观察观察HpHp。直接镜检直接镜检(二)组织学检查(二)组织学检查1.1.免疫组化染色特异性免疫组化染色特异性高。高。2.HE2.HE染色可同时作病理染色可同时作病理诊断;诊断;3.3.荧光原位杂交(荧光原位杂交(FISHFISH)具有较高敏感性具有较高敏感性1.1.在胃镜取胃粘膜放在转在胃镜取胃粘膜放在转运培养基中。运培养基中。2.2.接种于接种于HpHp牛
6、脑浸液培牛脑浸液培养基,分区划线。养基,分区划线。3.3.置置5-125-12CO2CO2培养箱培养箱35-3735-37,3-5d3-5d形成小的形成小的半透明灰色菌落,有微弱半透明灰色菌落,有微弱的溶血环。的溶血环。培养过程培养过程诊断诊断HpHp最可靠的方法,可最可靠的方法,可作为验证其他诊断性试验作为验证其他诊断性试验的的“金标准金标准”。一般用于药敏试验和科研。一般用于药敏试验和科研。(三)细菌培养(三)细菌培养 幽门螺杆菌的尿素酶幽门螺杆菌的尿素酶(A(A、B B、C C、D)D)基因、基因、16S-rDNA16S-rDNA基因、基因、VacAVacA及及CagACagA基因均已克
7、隆成功,基因均已克隆成功,根据幽门螺杆菌不同的耙基因,根据幽门螺杆菌不同的耙基因,设计不同的引物,从而建立不设计不同的引物,从而建立不同的同的PCRPCR系统,扩增产物可经系统,扩增产物可经凝胶电泳分析凝胶电泳分析.原理与方法原理与方法(四)(四)聚合酶链反应试验聚合酶链反应试验(PCR(PCR检测技术检测技术)1.1.与细菌培养和组织学染色镜检比较与细菌培养和组织学染色镜检比较无明显优越性。无明显优越性。2.2.现在可收集胃液现在可收集胃液PCRPCR检测幽门螺杆菌检测幽门螺杆菌敏感性高,但可能与口腔和胃内其它敏感性高,但可能与口腔和胃内其它尿素酶阳性菌丛起交叉反应尿素酶阳性菌丛起交叉反应教
8、学过程:销售经理会管理好销售人员的销售进度一看,二闻,三摸摸,颜色不对,气味不正,出现霉点,食物软化,立刻丢掉不为错。_使学生知道课间活动守秩序应该怎样做。(2)说说你在出行中,看到人们是怎样遵守交通法规的?1客户意向级别的设定询问接待员对某应聘者的印象,他们的意见有助于你对应聘者的性格及是否适合该工作做出全面的评价。出差:是否要求定期长时间出差。学生汇报研究结果,师总结板书。1.1.8考虑岗位现状注:注:HPHP的基因分型(的基因分型(HPHP菌属亚群)及致病性菌属亚群)及致病性分布比例分布比例VacAVacA基因基因CacACacA基因基因致病性致病性型型56%56%+胃炎、十二指肠溃疡、
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