尿液一般检验-尿液化学检验课件.ppt
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- 尿液 一般 检验 化学 课件
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1、第五章 尿液一般检验第二节第二节 尿液化学检验尿液化学检验 一、尿酸碱度一、尿酸碱度二、尿蛋白二、尿蛋白三、尿糖三、尿糖四、尿酮体四、尿酮体五、尿胆红素五、尿胆红素 尿胆原尿胆原 尿胆素尿胆素六、尿本周蛋白六、尿本周蛋白七、微量白蛋白七、微量白蛋白八、八、1/1/2 2微球蛋白微球蛋白 本本 节节 内内 容容 九、血红蛋白九、血红蛋白/肌红蛋白肌红蛋白十、尿淀粉酶十、尿淀粉酶十一、十一、T-HT-H糖蛋白糖蛋白十二、白细胞酯酶十二、白细胞酯酶十三、亚硝酸盐十三、亚硝酸盐十四、维生素十四、维生素C C十五、十五、HCGHCG 一、一、尿酸碱度(尿酸碱度(pHpH)尿酸碱度尿酸碱度 简称尿酸度,通
2、常用氢离子浓度的负对数简称尿酸度,通常用氢离子浓度的负对数(pHpH)来表示)来表示【检测原理检测原理】1.1.试带法试带法 双指示剂法(酸碱指示剂原理)双指示剂法(酸碱指示剂原理)2.2.pHpH试纸法酸碱指示剂原理试纸法酸碱指示剂原理3.3.指示剂法指示剂法4.4.其他方法其他方法【方法评价方法评价】1.1.试带法试带法 配套应用于尿液分析仪配套应用于尿液分析仪,是目前临床尿是目前临床尿pHpH检查最广泛应用的筛检方法。检查最广泛应用的筛检方法。2.2.pHpH试纸法试纸法简便,试纸易吸潮失效简便,试纸易吸潮失效3.3.指示剂法指示剂法变色范围有限制;受深颜色尿液有影响变色范围有限制;受深
3、颜色尿液有影响4.4.滴定法滴定法 操作复杂,不宜快速检测操作复杂,不宜快速检测5.5.pHpH计法计法 结果精确可靠,可用于结果精确可靠,可用于pHpH精确测定,需精确测定,需特殊仪器,特殊仪器,操作繁琐操作繁琐第五章第五章 尿液一般检验尿液一般检验【质量控制质量控制】检测前检测前 标本新鲜、容器未被污染标本新鲜、容器未被污染检测中检测中 1.1.试纸法或试带法:试纸法或试带法:(1)(1)尿液尿液pHpH变化范围要满足临床需要变化范围要满足临床需要 (2)(2)定期检查试带灵敏度定期检查试带灵敏度 (3)(3)试纸或试带未被污染,未吸潮变质试纸或试带未被污染,未吸潮变质 2.2.指示剂法指
4、示剂法:注意颜色变化范围应符要求注意颜色变化范围应符要求检测后检测后 尿液尿液pHpH大于大于8.08.0可见于:可见于:(1)(1)标本防腐或保存不当,细菌大量繁殖并分解尿素产生氨标本防腐或保存不当,细菌大量繁殖并分解尿素产生氨(2)(2)患者服用大量碱性制剂患者服用大量碱性制剂第五章第五章 尿液一般检验尿液一般检验【参考区间参考区间】正常饮食条件下,正常饮食条件下,晨尿晨尿 多偏弱酸性,多偏弱酸性,pH 5.5pH 5.56.56.5,平均,平均pH 6.0pH 6.0随机尿随机尿pH 4.5pH 4.58.08.0第五章第五章 尿液一般检验尿液一般检验【临床意义临床意义】尿酸度检测主要用
5、于了解机体酸碱平衡和电解质尿酸度检测主要用于了解机体酸碱平衡和电解质平衡情况,平衡情况,是临床上诊断呼吸性或代谢性酸是临床上诊断呼吸性或代谢性酸/碱中碱中毒的重要指标毒的重要指标。第五章第五章 尿液一般检验尿液一般检验【临床应用临床应用】生理性变化生理性变化 碱潮碱潮 进餐后,因胃黏膜分泌盐酸以助消化、通过神经体液调节使肾小管的泌H作用减低和Cl重吸收作用增高,尿pH值呈一过性增高,即为碱碱潮(潮(alkaline tide)。病理性增高病理性增高碱中毒,如呼吸性碱中毒碱中毒,如呼吸性碱中毒肾小管性酸中毒肾小管性酸中毒尿路感染,如膀胱炎、肾盂肾炎等尿路感染,如膀胱炎、肾盂肾炎等 病理性减低病理
6、性减低酸中毒、发热、慢性肾小球肾炎等酸中毒、发热、慢性肾小球肾炎等代谢性疾病,如糖尿病、痛风等代谢性疾病,如糖尿病、痛风等 第五章第五章 尿液一般检验尿液一般检验 用药监测用药监测 如溶血反应时,口服如溶血反应时,口服NaHCONaHCO3 3碱化尿液,促进溶解及碱化尿液,促进溶解及排泄血红蛋白;排泄血红蛋白;尿路感染时,使用多种抗生素,需碱化尿液以加强尿路感染时,使用多种抗生素,需碱化尿液以加强疗效。疗效。或通过或通过酸化或碱化尿液酸化或碱化尿液增加某些结晶的排泄率,可增加某些结晶的排泄率,可用于泌尿系统结石的预防。用于泌尿系统结石的预防。二、二、尿蛋白(尿蛋白(proteinprotein
7、)蛋白尿蛋白尿(proteinuria)(proteinuria):尿蛋白超过尿蛋白超过150mg/24h150mg/24h或超过或超过100mg/L,100mg/L,尿尿蛋白定性试验呈阳蛋白定性试验呈阳性性的尿液。的尿液。终尿蛋白含量极少:终尿蛋白含量极少:(1 1)肾小球滤过膜的孔径屏障和电荷屏障作用)肾小球滤过膜的孔径屏障和电荷屏障作用(2 2)肾小管的重吸收功能作用)肾小管的重吸收功能作用【检测原理检测原理】1.1.试带法试带法 pHpH指示剂蛋白质误差原理:指示剂蛋白质误差原理:在在pH 3.2pH 3.2条件下,酸碱指示剂(溴酚蓝)产生条件下,酸碱指示剂(溴酚蓝)产生阴离子与带阳离
8、子的蛋白质结合生成复合物,引起阴离子与带阳离子的蛋白质结合生成复合物,引起指示剂进一步电离,当超越缓冲范围时,指示剂发指示剂进一步电离,当超越缓冲范围时,指示剂发生颜色改变,颜色的深浅与蛋白质含量成正比。生颜色改变,颜色的深浅与蛋白质含量成正比。第五章第五章 尿液一般检验尿液一般检验【检测原理检测原理】2.2.磺基水杨酸法磺基水杨酸法磺柳酸又为生物碱试剂磺柳酸又为生物碱试剂在略低于蛋白质等电点的酸性环境下,磺基水杨酸根离子与在略低于蛋白质等电点的酸性环境下,磺基水杨酸根离子与蛋白质氨基酸阳离子结合,蛋白质氨基酸阳离子结合,形成不溶性蛋白盐而沉淀形成不溶性蛋白盐而沉淀.3.3.加热乙酸法加热乙酸
9、法 蛋白质变性沉淀蛋白质变性沉淀:蛋白质遇热变性凝固,加稀酸使尿液蛋白质遇热变性凝固,加稀酸使尿液pHpH降低并近等电点处沉淀降低并近等电点处沉淀第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【方法评价方法评价】1.1.试带法试带法 优点优点:操作简便、快速、易于标准化,:操作简便、快速、易于标准化,适于健康普查或临适于健康普查或临床筛检床筛检灵敏度和特异性灵敏度和特异性:对清蛋白灵敏,对球蛋白不敏感,不适对清蛋白灵敏,对球蛋白不敏感,不适用于肾病患者的蛋白检测用于肾病患者的蛋白检测干扰因素干扰因素:尿:尿pH9.0pH9.0,如服用某些药物,或尿中含磷酸盐、,如服用某些药物,或尿中含磷酸盐、季胺盐季
10、胺盐 消毒剂等所致消毒剂等所致:大剂量滴注青霉素或用庆大霉素、磺胺、含碘造:大剂量滴注青霉素或用庆大霉素、磺胺、含碘造影剂等影剂等第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【方法评价方法评价】2.2.磺基水杨酸法磺基水杨酸法(1 1)操作简便、反应灵敏、结果显示快,)操作简便、反应灵敏、结果显示快,与清蛋白、与清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白均能发生反应球蛋白、糖蛋白和本周蛋白均能发生反应(2 2)检测灵敏度达)检测灵敏度达50mg/L50mg/L,有一定的假阳性,有一定的假阳性(3 3)CLSICLSI指定的干化学法检查尿蛋白的指定的干化学法检查尿蛋白的参考方法参考方法,并推荐为并推荐为确证试验
11、确证试验第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【方法评价方法评价】3.3.加热乙酸法加热乙酸法 (1 1)方法经典而准确,但操作繁琐复杂)方法经典而准确,但操作繁琐复杂 (2 2)检测尿蛋白特异性强、干扰因素少检测尿蛋白特异性强、干扰因素少,与清蛋白,与清蛋白和球蛋白和球蛋白 均能反应,灵敏度为均能反应,灵敏度为150mg/L150mg/L第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【质量控制质量控制】第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【参考区间参考区间】尿蛋白尿蛋白阴性阴性第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【临床应用临床应用】1生理性蛋白尿生理性蛋白尿 因机体内、外环境因素的变因机体内、外
12、环境因素的变化所产生的蛋白尿,称生理性蛋白尿。化所产生的蛋白尿,称生理性蛋白尿。生理性蛋白尿及临床意义生理性蛋白尿及临床意义 2病理性蛋白尿病理性蛋白尿 (1)肾小球性蛋白尿肾小球性蛋白尿:肾小球性蛋白尿是最常见:肾小球性蛋白尿是最常见的蛋白尿。根据滤过膜损伤程度及尿蛋白的组分,的蛋白尿。根据滤过膜损伤程度及尿蛋白的组分,可将其分为可将其分为选择性蛋白尿选择性蛋白尿和和非选择性蛋白尿非选择性蛋白尿。选择性与非选择性蛋白尿鉴别要点选择性与非选择性蛋白尿鉴别要点 (2)肾小管性蛋白尿:肾小管性蛋白尿:是指肾小管受到感染、中毒损伤或继发于肾小球疾病时,重吸收能力降低或抑制,而出现的以相对分子质量较小
13、的蛋白为主的蛋白尿。常见于肾小管损伤性疾病。(3)混合性蛋白尿:混合性蛋白尿:病变同时或相继累及肾小球和肾小管而产生的蛋白尿,称为混合性蛋白尿。(4)溢出性蛋白尿:溢出性蛋白尿:肾小球滤过功能和肾小管重吸收功能均正常,因血浆中相对分子质量较小或阳性电荷蛋白异常增多,经肾小球滤过,超过肾小管重吸收能力所形成的蛋白尿,称为溢出性蛋白尿)。(5)组织性蛋白尿:组织性蛋白尿:组织性蛋白尿是指来源于肾小管代谢产生的、组织破坏分解的、炎症或药物刺激泌尿系统分泌的蛋白质,进入尿液而形成的蛋白尿。根据根据蛋白尿发生的部位蛋白尿发生的部位又可将病理性蛋白又可将病理性蛋白尿分为尿分为肾前性、肾性和肾后性蛋白尿肾前
14、性、肾性和肾后性蛋白尿。肾前性蛋白尿。肾性蛋白尿主要是肾小球性、肾小管性和混合性蛋白尿。肾后性蛋白尿:最主要见于膀胱以下尿道的炎症、结石、结核、肿瘤,泌尿系统邻近器官疾病,生殖系统炎症等。病理性蛋白尿发生机制及常见原因病理性蛋白尿发生机制及常见原因肾前性蛋白尿临床意义及特征肾前性蛋白尿临床意义及特征三三、尿尿 糖(糖(glucoseglucose)糖糖 尿尿(glucosuria)(glucosuria)尿糖定性试验呈阳性尿糖定性试验呈阳性的尿液。的尿液。1.1.当血糖浓度超过当血糖浓度超过8.88mmol/L8.88mmol/L(1.6g/L1.6g/L)时,尿中时,尿中 开始出现葡萄糖;开
15、始出现葡萄糖;2.2.正常人尿中可有微量葡萄糖(正常人尿中可有微量葡萄糖(2.8mmol/24h2.8mmol/24h),),用普通方法检测为阴性;用普通方法检测为阴性;3.3.尿糖主要指尿糖主要指葡萄糖葡萄糖,也有微量乳糖、半乳糖、果,也有微量乳糖、半乳糖、果糖、蔗糖等。糖、蔗糖等。【检测原理检测原理】1.1.试带法试带法 (葡萄糖氧化酶(葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法)过氧化物酶法)膜块中含葡萄糖氧化酶(膜块中含葡萄糖氧化酶(GODGOD)、过氧化物酶、色素原等:)、过氧化物酶、色素原等:GODGOD使尿中葡萄糖与使尿中葡萄糖与O O2 2作用生成葡萄糖酸内酯及作用生成葡萄糖酸内酯及H H2
16、2O O2 2,过氧化物,过氧化物酶催化酶催化H H2 2O O2 2氧化色素原而呈现色泽变化,色泽深浅与葡萄糖含氧化色素原而呈现色泽变化,色泽深浅与葡萄糖含量成正比,不同色素原反应后的呈色色泽不同。量成正比,不同色素原反应后的呈色色泽不同。第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【检测原理检测原理】2.2.班氏法班氏法在在高热高热和和强碱强碱溶液中,葡萄糖或其他还原性糖,能将溶溶液中,葡萄糖或其他还原性糖,能将溶液中液中蓝色的硫酸铜蓝色的硫酸铜还原为还原为黄色的氢氧化亚铜沉淀黄色的氢氧化亚铜沉淀,进而形,进而形成红色的氧化亚铜沉淀。成红色的氧化亚铜沉淀。根据根据沉淀有无沉淀有无和和色泽变化色泽
17、变化判断含量。判断含量。第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【方法评价方法评价】第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验 1试带法试带法 (1)灵敏度和特异性灵敏度和特异性:虽然色素原不同,但大:虽然色素原不同,但大多不与非葡萄糖还原物质发生反应,故试带法多不与非葡萄糖还原物质发生反应,故试带法特特异性强,灵敏度高异性强,灵敏度高(1.672.78mmol/L),),简便快简便快速,适用于自动化分析速,适用于自动化分析。(2)干扰因素)干扰因素试带法检测干扰因素试带法检测干扰因素【方法评价方法评价】第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验 2班氏法班氏法 本法稳定,试验要求和成本较低,本法稳定,
18、试验要求和成本较低,为非特异性方为非特异性方法法,可测定尿液中所有还原性物质可测定尿液中所有还原性物质。班氏法的灵敏度低于试带法,当葡萄糖浓度达班氏法的灵敏度低于试带法,当葡萄糖浓度达8.33mmol/L 时才呈现弱阳性。多种抗生素对班氏法时才呈现弱阳性。多种抗生素对班氏法也有不同程度的影响,可能与班氏试剂中铜离子发也有不同程度的影响,可能与班氏试剂中铜离子发生反应有关。生反应有关。【质量控制质量控制】检测前检测前 (1 1)容器要清洁,不能含有氧化性物质)容器要清洁,不能含有氧化性物质(2 2)新鲜尿标本,久置后,细菌繁殖将消耗葡萄糖新鲜尿标本,久置后,细菌繁殖将消耗葡萄糖,假阴性假阴性(3
19、 3)消除维生素消除维生素C C干扰干扰 检测中检测中(1 1)阳性和阴性)阳性和阴性2 2种浓度水平室内质控种浓度水平室内质控(2 2)试带法应严格尿液和试剂膜块的反应时间与温度)试带法应严格尿液和试剂膜块的反应时间与温度(3 3)班氏法强调严格操作和判读结果时间)班氏法强调严格操作和判读结果时间(4 4)试带应阴凉、干燥处保存,注意有效期)试带应阴凉、干燥处保存,注意有效期第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【参考区间参考区间】尿糖阴性尿糖阴性第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【临床意义临床意义】尿糖检测主要用于尿糖检测主要用于内分泌性疾病内分泌性疾病,如糖尿病及,如糖尿病及其他相关
20、疾病的诊断、治疗监测、疗效观察等,其他相关疾病的诊断、治疗监测、疗效观察等,尿糖尿糖检测时应同时检测血糖,以提高诊断的准确性检测时应同时检测血糖,以提高诊断的准确性。1血糖增高性糖尿血糖增高性糖尿 血糖增高性糖尿是由于血血糖增高性糖尿是由于血糖浓度增高所导致的糖尿。糖浓度增高所导致的糖尿。(1)代谢性糖尿代谢性糖尿:由于内分泌激素分泌失常,:由于内分泌激素分泌失常,糖代谢发生紊乱引起的高血糖所致。典型的代谢性糖代谢发生紊乱引起的高血糖所致。典型的代谢性疾病是疾病是糖尿病糖尿病。(2)内分泌性糖尿内分泌性糖尿:内分泌性糖尿常见的原因:内分泌性糖尿常见的原因及检查结果见表。及检查结果见表。【临床意
21、义临床意义】内分泌性糖尿常见原因及检测结果内分泌性糖尿常见原因及检测结果2血糖正常性糖尿血糖正常性糖尿 又称肾性糖尿,因肾小管又称肾性糖尿,因肾小管重吸收葡萄糖的能力及肾糖阈降低所致重吸收葡萄糖的能力及肾糖阈降低所致。血糖正。血糖正常性糖尿常见的原因及检查结果见表。常性糖尿常见的原因及检查结果见表。血糖正常性糖尿常见原因及检测结血糖正常性糖尿常见原因及检测结果果 3暂时性糖尿暂时性糖尿 进食大量碳水化合物:如进食含糖食品、饮料或静脉注射大量高渗葡萄糖溶液后,血糖可短暂一过性增高,超过肾糖阈而导致糖尿。应激性糖尿:情绪激动、脑血管意外、颅脑外伤、急性心肌梗死时,延脑血糖中枢受刺激或肾上腺素、胰高
22、血糖素分泌过多,呈暂时性高血糖和一过性糖尿。4其他糖尿其他糖尿 原尿中乳糖、半乳糖、果糖、戊糖、蔗糖的重吸收率虽低于葡萄糖,当进食过多或受遗传因素影响时,糖代谢紊乱,这些糖的血液浓度增高而出现相应的糖尿。四四、尿酮体(尿酮体(ketone bodyketone body)酮酮 体体 是乙酰乙酸乙酰乙酸(占20%)、-羟丁酸羟丁酸(占78%)及丙酮丙酮(占2%)的总称,是机体脂肪氧化是机体脂肪氧化代谢产生的中间产物。代谢产生的中间产物。当糖代谢发生障碍、脂肪分解增多、酮体产生速度超当糖代谢发生障碍、脂肪分解增多、酮体产生速度超过机体组织利用速度时,可出现过机体组织利用速度时,可出现酮血症酮血症,
23、酮体血浓度一旦,酮体血浓度一旦超越肾阈值,就可产生超越肾阈值,就可产生酮尿(酮尿(ketonuria)。)。-羟丁酸羟丁酸78%乙酰乙酸乙酰乙酸20%丙酮丙酮2%【检测原理检测原理】1.1.亚硝基铁氰化钠法(改良亚硝基铁氰化钠法(改良RotheraRothera法)法)(1 1)在)在碱性碱性条件下,丙酮或乙酰乙酸与亚硝条件下,丙酮或乙酰乙酸与亚硝 基铁氰化钠和硫酸铵作用,生成基铁氰化钠和硫酸铵作用,生成紫色化合物紫色化合物 (2 2)本法不与酮体中本法不与酮体中-羟丁酸成分发生反应羟丁酸成分发生反应2.2.干化学法干化学法同亚硝基铁氰化钠法同亚硝基铁氰化钠法第六章第六章 尿液一般检验尿液一般
24、检验【方法评价方法评价】干扰因素干扰因素 尿中含较多量肌酐、肌酸,高色素尿尿中含较多量肌酐、肌酸,高色素尿,尿中含酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物等,尿中含酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物等 1.1.标本收集和保存不当标本收集和保存不当 2.2.湿度、热度或光线使亚硝基铁氰化钠反应灵敏度减低湿度、热度或光线使亚硝基铁氰化钠反应灵敏度减低 3.3.试带受潮失活试带受潮失活 第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【质量控制质量控制】检测前检测前 新鲜尿标本,避免新鲜尿标本,避免丙酮在室温下快速挥发丙酮在室温下快速挥发,避免,避免乙酰乙乙酰乙酸在菌尿中被细菌降解酸在菌尿中被细菌降解 检测中检测中 -阳性和阴性阳
25、性和阴性2 2种浓度水平室内质控种浓度水平室内质控 -为防止肌酐、肌酸过多引起假阳性,可加少许冰乙酸为防止肌酐、肌酸过多引起假阳性,可加少许冰乙酸 -试带应阴凉、干燥处保存,注意有效期试带应阴凉、干燥处保存,注意有效期第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【参考区间参考区间】尿酮体尿酮体 定性定性:阴性:阴性 定量定量:酮体(以丙酮计):酮体(以丙酮计)170170420 mg/L420 mg/L 乙酰乙酸乙酰乙酸20 mg/L20 mg/L 第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【临床应用临床应用】酮体阳性见于:酮体阳性见于:-不能有效利用碳水化合物不能有效利用碳水化合物:如如糖尿病酮症酸中
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