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类型尿液一般检验-尿液化学检验课件.ppt

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    尿液 一般 检验 化学 课件
    资源描述:

    1、第五章 尿液一般检验第二节第二节 尿液化学检验尿液化学检验 一、尿酸碱度一、尿酸碱度二、尿蛋白二、尿蛋白三、尿糖三、尿糖四、尿酮体四、尿酮体五、尿胆红素五、尿胆红素 尿胆原尿胆原 尿胆素尿胆素六、尿本周蛋白六、尿本周蛋白七、微量白蛋白七、微量白蛋白八、八、1/1/2 2微球蛋白微球蛋白 本本 节节 内内 容容 九、血红蛋白九、血红蛋白/肌红蛋白肌红蛋白十、尿淀粉酶十、尿淀粉酶十一、十一、T-HT-H糖蛋白糖蛋白十二、白细胞酯酶十二、白细胞酯酶十三、亚硝酸盐十三、亚硝酸盐十四、维生素十四、维生素C C十五、十五、HCGHCG 一、一、尿酸碱度(尿酸碱度(pHpH)尿酸碱度尿酸碱度 简称尿酸度,通

    2、常用氢离子浓度的负对数简称尿酸度,通常用氢离子浓度的负对数(pHpH)来表示)来表示【检测原理检测原理】1.1.试带法试带法 双指示剂法(酸碱指示剂原理)双指示剂法(酸碱指示剂原理)2.2.pHpH试纸法酸碱指示剂原理试纸法酸碱指示剂原理3.3.指示剂法指示剂法4.4.其他方法其他方法【方法评价方法评价】1.1.试带法试带法 配套应用于尿液分析仪配套应用于尿液分析仪,是目前临床尿是目前临床尿pHpH检查最广泛应用的筛检方法。检查最广泛应用的筛检方法。2.2.pHpH试纸法试纸法简便,试纸易吸潮失效简便,试纸易吸潮失效3.3.指示剂法指示剂法变色范围有限制;受深颜色尿液有影响变色范围有限制;受深

    3、颜色尿液有影响4.4.滴定法滴定法 操作复杂,不宜快速检测操作复杂,不宜快速检测5.5.pHpH计法计法 结果精确可靠,可用于结果精确可靠,可用于pHpH精确测定,需精确测定,需特殊仪器,特殊仪器,操作繁琐操作繁琐第五章第五章 尿液一般检验尿液一般检验【质量控制质量控制】检测前检测前 标本新鲜、容器未被污染标本新鲜、容器未被污染检测中检测中 1.1.试纸法或试带法:试纸法或试带法:(1)(1)尿液尿液pHpH变化范围要满足临床需要变化范围要满足临床需要 (2)(2)定期检查试带灵敏度定期检查试带灵敏度 (3)(3)试纸或试带未被污染,未吸潮变质试纸或试带未被污染,未吸潮变质 2.2.指示剂法指

    4、示剂法:注意颜色变化范围应符要求注意颜色变化范围应符要求检测后检测后 尿液尿液pHpH大于大于8.08.0可见于:可见于:(1)(1)标本防腐或保存不当,细菌大量繁殖并分解尿素产生氨标本防腐或保存不当,细菌大量繁殖并分解尿素产生氨(2)(2)患者服用大量碱性制剂患者服用大量碱性制剂第五章第五章 尿液一般检验尿液一般检验【参考区间参考区间】正常饮食条件下,正常饮食条件下,晨尿晨尿 多偏弱酸性,多偏弱酸性,pH 5.5pH 5.56.56.5,平均,平均pH 6.0pH 6.0随机尿随机尿pH 4.5pH 4.58.08.0第五章第五章 尿液一般检验尿液一般检验【临床意义临床意义】尿酸度检测主要用

    5、于了解机体酸碱平衡和电解质尿酸度检测主要用于了解机体酸碱平衡和电解质平衡情况,平衡情况,是临床上诊断呼吸性或代谢性酸是临床上诊断呼吸性或代谢性酸/碱中碱中毒的重要指标毒的重要指标。第五章第五章 尿液一般检验尿液一般检验【临床应用临床应用】生理性变化生理性变化 碱潮碱潮 进餐后,因胃黏膜分泌盐酸以助消化、通过神经体液调节使肾小管的泌H作用减低和Cl重吸收作用增高,尿pH值呈一过性增高,即为碱碱潮(潮(alkaline tide)。病理性增高病理性增高碱中毒,如呼吸性碱中毒碱中毒,如呼吸性碱中毒肾小管性酸中毒肾小管性酸中毒尿路感染,如膀胱炎、肾盂肾炎等尿路感染,如膀胱炎、肾盂肾炎等 病理性减低病理

    6、性减低酸中毒、发热、慢性肾小球肾炎等酸中毒、发热、慢性肾小球肾炎等代谢性疾病,如糖尿病、痛风等代谢性疾病,如糖尿病、痛风等 第五章第五章 尿液一般检验尿液一般检验 用药监测用药监测 如溶血反应时,口服如溶血反应时,口服NaHCONaHCO3 3碱化尿液,促进溶解及碱化尿液,促进溶解及排泄血红蛋白;排泄血红蛋白;尿路感染时,使用多种抗生素,需碱化尿液以加强尿路感染时,使用多种抗生素,需碱化尿液以加强疗效。疗效。或通过或通过酸化或碱化尿液酸化或碱化尿液增加某些结晶的排泄率,可增加某些结晶的排泄率,可用于泌尿系统结石的预防。用于泌尿系统结石的预防。二、二、尿蛋白(尿蛋白(proteinprotein

    7、)蛋白尿蛋白尿(proteinuria)(proteinuria):尿蛋白超过尿蛋白超过150mg/24h150mg/24h或超过或超过100mg/L,100mg/L,尿尿蛋白定性试验呈阳蛋白定性试验呈阳性性的尿液。的尿液。终尿蛋白含量极少:终尿蛋白含量极少:(1 1)肾小球滤过膜的孔径屏障和电荷屏障作用)肾小球滤过膜的孔径屏障和电荷屏障作用(2 2)肾小管的重吸收功能作用)肾小管的重吸收功能作用【检测原理检测原理】1.1.试带法试带法 pHpH指示剂蛋白质误差原理:指示剂蛋白质误差原理:在在pH 3.2pH 3.2条件下,酸碱指示剂(溴酚蓝)产生条件下,酸碱指示剂(溴酚蓝)产生阴离子与带阳离

    8、子的蛋白质结合生成复合物,引起阴离子与带阳离子的蛋白质结合生成复合物,引起指示剂进一步电离,当超越缓冲范围时,指示剂发指示剂进一步电离,当超越缓冲范围时,指示剂发生颜色改变,颜色的深浅与蛋白质含量成正比。生颜色改变,颜色的深浅与蛋白质含量成正比。第五章第五章 尿液一般检验尿液一般检验【检测原理检测原理】2.2.磺基水杨酸法磺基水杨酸法磺柳酸又为生物碱试剂磺柳酸又为生物碱试剂在略低于蛋白质等电点的酸性环境下,磺基水杨酸根离子与在略低于蛋白质等电点的酸性环境下,磺基水杨酸根离子与蛋白质氨基酸阳离子结合,蛋白质氨基酸阳离子结合,形成不溶性蛋白盐而沉淀形成不溶性蛋白盐而沉淀.3.3.加热乙酸法加热乙酸

    9、法 蛋白质变性沉淀蛋白质变性沉淀:蛋白质遇热变性凝固,加稀酸使尿液蛋白质遇热变性凝固,加稀酸使尿液pHpH降低并近等电点处沉淀降低并近等电点处沉淀第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【方法评价方法评价】1.1.试带法试带法 优点优点:操作简便、快速、易于标准化,:操作简便、快速、易于标准化,适于健康普查或临适于健康普查或临床筛检床筛检灵敏度和特异性灵敏度和特异性:对清蛋白灵敏,对球蛋白不敏感,不适对清蛋白灵敏,对球蛋白不敏感,不适用于肾病患者的蛋白检测用于肾病患者的蛋白检测干扰因素干扰因素:尿:尿pH9.0pH9.0,如服用某些药物,或尿中含磷酸盐、,如服用某些药物,或尿中含磷酸盐、季胺盐季

    10、胺盐 消毒剂等所致消毒剂等所致:大剂量滴注青霉素或用庆大霉素、磺胺、含碘造:大剂量滴注青霉素或用庆大霉素、磺胺、含碘造影剂等影剂等第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【方法评价方法评价】2.2.磺基水杨酸法磺基水杨酸法(1 1)操作简便、反应灵敏、结果显示快,)操作简便、反应灵敏、结果显示快,与清蛋白、与清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白均能发生反应球蛋白、糖蛋白和本周蛋白均能发生反应(2 2)检测灵敏度达)检测灵敏度达50mg/L50mg/L,有一定的假阳性,有一定的假阳性(3 3)CLSICLSI指定的干化学法检查尿蛋白的指定的干化学法检查尿蛋白的参考方法参考方法,并推荐为并推荐为确证试验

    11、确证试验第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【方法评价方法评价】3.3.加热乙酸法加热乙酸法 (1 1)方法经典而准确,但操作繁琐复杂)方法经典而准确,但操作繁琐复杂 (2 2)检测尿蛋白特异性强、干扰因素少检测尿蛋白特异性强、干扰因素少,与清蛋白,与清蛋白和球蛋白和球蛋白 均能反应,灵敏度为均能反应,灵敏度为150mg/L150mg/L第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【质量控制质量控制】第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【参考区间参考区间】尿蛋白尿蛋白阴性阴性第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【临床应用临床应用】1生理性蛋白尿生理性蛋白尿 因机体内、外环境因素的变因机体内、外

    12、环境因素的变化所产生的蛋白尿,称生理性蛋白尿。化所产生的蛋白尿,称生理性蛋白尿。生理性蛋白尿及临床意义生理性蛋白尿及临床意义 2病理性蛋白尿病理性蛋白尿 (1)肾小球性蛋白尿肾小球性蛋白尿:肾小球性蛋白尿是最常见:肾小球性蛋白尿是最常见的蛋白尿。根据滤过膜损伤程度及尿蛋白的组分,的蛋白尿。根据滤过膜损伤程度及尿蛋白的组分,可将其分为可将其分为选择性蛋白尿选择性蛋白尿和和非选择性蛋白尿非选择性蛋白尿。选择性与非选择性蛋白尿鉴别要点选择性与非选择性蛋白尿鉴别要点 (2)肾小管性蛋白尿:肾小管性蛋白尿:是指肾小管受到感染、中毒损伤或继发于肾小球疾病时,重吸收能力降低或抑制,而出现的以相对分子质量较小

    13、的蛋白为主的蛋白尿。常见于肾小管损伤性疾病。(3)混合性蛋白尿:混合性蛋白尿:病变同时或相继累及肾小球和肾小管而产生的蛋白尿,称为混合性蛋白尿。(4)溢出性蛋白尿:溢出性蛋白尿:肾小球滤过功能和肾小管重吸收功能均正常,因血浆中相对分子质量较小或阳性电荷蛋白异常增多,经肾小球滤过,超过肾小管重吸收能力所形成的蛋白尿,称为溢出性蛋白尿)。(5)组织性蛋白尿:组织性蛋白尿:组织性蛋白尿是指来源于肾小管代谢产生的、组织破坏分解的、炎症或药物刺激泌尿系统分泌的蛋白质,进入尿液而形成的蛋白尿。根据根据蛋白尿发生的部位蛋白尿发生的部位又可将病理性蛋白又可将病理性蛋白尿分为尿分为肾前性、肾性和肾后性蛋白尿肾前

    14、性、肾性和肾后性蛋白尿。肾前性蛋白尿。肾性蛋白尿主要是肾小球性、肾小管性和混合性蛋白尿。肾后性蛋白尿:最主要见于膀胱以下尿道的炎症、结石、结核、肿瘤,泌尿系统邻近器官疾病,生殖系统炎症等。病理性蛋白尿发生机制及常见原因病理性蛋白尿发生机制及常见原因肾前性蛋白尿临床意义及特征肾前性蛋白尿临床意义及特征三三、尿尿 糖(糖(glucoseglucose)糖糖 尿尿(glucosuria)(glucosuria)尿糖定性试验呈阳性尿糖定性试验呈阳性的尿液。的尿液。1.1.当血糖浓度超过当血糖浓度超过8.88mmol/L8.88mmol/L(1.6g/L1.6g/L)时,尿中时,尿中 开始出现葡萄糖;开

    15、始出现葡萄糖;2.2.正常人尿中可有微量葡萄糖(正常人尿中可有微量葡萄糖(2.8mmol/24h2.8mmol/24h),),用普通方法检测为阴性;用普通方法检测为阴性;3.3.尿糖主要指尿糖主要指葡萄糖葡萄糖,也有微量乳糖、半乳糖、果,也有微量乳糖、半乳糖、果糖、蔗糖等。糖、蔗糖等。【检测原理检测原理】1.1.试带法试带法 (葡萄糖氧化酶(葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法)过氧化物酶法)膜块中含葡萄糖氧化酶(膜块中含葡萄糖氧化酶(GODGOD)、过氧化物酶、色素原等:)、过氧化物酶、色素原等:GODGOD使尿中葡萄糖与使尿中葡萄糖与O O2 2作用生成葡萄糖酸内酯及作用生成葡萄糖酸内酯及H H2

    16、2O O2 2,过氧化物,过氧化物酶催化酶催化H H2 2O O2 2氧化色素原而呈现色泽变化,色泽深浅与葡萄糖含氧化色素原而呈现色泽变化,色泽深浅与葡萄糖含量成正比,不同色素原反应后的呈色色泽不同。量成正比,不同色素原反应后的呈色色泽不同。第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【检测原理检测原理】2.2.班氏法班氏法在在高热高热和和强碱强碱溶液中,葡萄糖或其他还原性糖,能将溶溶液中,葡萄糖或其他还原性糖,能将溶液中液中蓝色的硫酸铜蓝色的硫酸铜还原为还原为黄色的氢氧化亚铜沉淀黄色的氢氧化亚铜沉淀,进而形,进而形成红色的氧化亚铜沉淀。成红色的氧化亚铜沉淀。根据根据沉淀有无沉淀有无和和色泽变化色泽

    17、变化判断含量。判断含量。第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【方法评价方法评价】第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验 1试带法试带法 (1)灵敏度和特异性灵敏度和特异性:虽然色素原不同,但大:虽然色素原不同,但大多不与非葡萄糖还原物质发生反应,故试带法多不与非葡萄糖还原物质发生反应,故试带法特特异性强,灵敏度高异性强,灵敏度高(1.672.78mmol/L),),简便快简便快速,适用于自动化分析速,适用于自动化分析。(2)干扰因素)干扰因素试带法检测干扰因素试带法检测干扰因素【方法评价方法评价】第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验 2班氏法班氏法 本法稳定,试验要求和成本较低,本法稳定,

    18、试验要求和成本较低,为非特异性方为非特异性方法法,可测定尿液中所有还原性物质可测定尿液中所有还原性物质。班氏法的灵敏度低于试带法,当葡萄糖浓度达班氏法的灵敏度低于试带法,当葡萄糖浓度达8.33mmol/L 时才呈现弱阳性。多种抗生素对班氏法时才呈现弱阳性。多种抗生素对班氏法也有不同程度的影响,可能与班氏试剂中铜离子发也有不同程度的影响,可能与班氏试剂中铜离子发生反应有关。生反应有关。【质量控制质量控制】检测前检测前 (1 1)容器要清洁,不能含有氧化性物质)容器要清洁,不能含有氧化性物质(2 2)新鲜尿标本,久置后,细菌繁殖将消耗葡萄糖新鲜尿标本,久置后,细菌繁殖将消耗葡萄糖,假阴性假阴性(3

    19、 3)消除维生素消除维生素C C干扰干扰 检测中检测中(1 1)阳性和阴性)阳性和阴性2 2种浓度水平室内质控种浓度水平室内质控(2 2)试带法应严格尿液和试剂膜块的反应时间与温度)试带法应严格尿液和试剂膜块的反应时间与温度(3 3)班氏法强调严格操作和判读结果时间)班氏法强调严格操作和判读结果时间(4 4)试带应阴凉、干燥处保存,注意有效期)试带应阴凉、干燥处保存,注意有效期第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【参考区间参考区间】尿糖阴性尿糖阴性第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【临床意义临床意义】尿糖检测主要用于尿糖检测主要用于内分泌性疾病内分泌性疾病,如糖尿病及,如糖尿病及其他相关

    20、疾病的诊断、治疗监测、疗效观察等,其他相关疾病的诊断、治疗监测、疗效观察等,尿糖尿糖检测时应同时检测血糖,以提高诊断的准确性检测时应同时检测血糖,以提高诊断的准确性。1血糖增高性糖尿血糖增高性糖尿 血糖增高性糖尿是由于血血糖增高性糖尿是由于血糖浓度增高所导致的糖尿。糖浓度增高所导致的糖尿。(1)代谢性糖尿代谢性糖尿:由于内分泌激素分泌失常,:由于内分泌激素分泌失常,糖代谢发生紊乱引起的高血糖所致。典型的代谢性糖代谢发生紊乱引起的高血糖所致。典型的代谢性疾病是疾病是糖尿病糖尿病。(2)内分泌性糖尿内分泌性糖尿:内分泌性糖尿常见的原因:内分泌性糖尿常见的原因及检查结果见表。及检查结果见表。【临床意

    21、义临床意义】内分泌性糖尿常见原因及检测结果内分泌性糖尿常见原因及检测结果2血糖正常性糖尿血糖正常性糖尿 又称肾性糖尿,因肾小管又称肾性糖尿,因肾小管重吸收葡萄糖的能力及肾糖阈降低所致重吸收葡萄糖的能力及肾糖阈降低所致。血糖正。血糖正常性糖尿常见的原因及检查结果见表。常性糖尿常见的原因及检查结果见表。血糖正常性糖尿常见原因及检测结血糖正常性糖尿常见原因及检测结果果 3暂时性糖尿暂时性糖尿 进食大量碳水化合物:如进食含糖食品、饮料或静脉注射大量高渗葡萄糖溶液后,血糖可短暂一过性增高,超过肾糖阈而导致糖尿。应激性糖尿:情绪激动、脑血管意外、颅脑外伤、急性心肌梗死时,延脑血糖中枢受刺激或肾上腺素、胰高

    22、血糖素分泌过多,呈暂时性高血糖和一过性糖尿。4其他糖尿其他糖尿 原尿中乳糖、半乳糖、果糖、戊糖、蔗糖的重吸收率虽低于葡萄糖,当进食过多或受遗传因素影响时,糖代谢紊乱,这些糖的血液浓度增高而出现相应的糖尿。四四、尿酮体(尿酮体(ketone bodyketone body)酮酮 体体 是乙酰乙酸乙酰乙酸(占20%)、-羟丁酸羟丁酸(占78%)及丙酮丙酮(占2%)的总称,是机体脂肪氧化是机体脂肪氧化代谢产生的中间产物。代谢产生的中间产物。当糖代谢发生障碍、脂肪分解增多、酮体产生速度超当糖代谢发生障碍、脂肪分解增多、酮体产生速度超过机体组织利用速度时,可出现过机体组织利用速度时,可出现酮血症酮血症,

    23、酮体血浓度一旦,酮体血浓度一旦超越肾阈值,就可产生超越肾阈值,就可产生酮尿(酮尿(ketonuria)。)。-羟丁酸羟丁酸78%乙酰乙酸乙酰乙酸20%丙酮丙酮2%【检测原理检测原理】1.1.亚硝基铁氰化钠法(改良亚硝基铁氰化钠法(改良RotheraRothera法)法)(1 1)在)在碱性碱性条件下,丙酮或乙酰乙酸与亚硝条件下,丙酮或乙酰乙酸与亚硝 基铁氰化钠和硫酸铵作用,生成基铁氰化钠和硫酸铵作用,生成紫色化合物紫色化合物 (2 2)本法不与酮体中本法不与酮体中-羟丁酸成分发生反应羟丁酸成分发生反应2.2.干化学法干化学法同亚硝基铁氰化钠法同亚硝基铁氰化钠法第六章第六章 尿液一般检验尿液一般

    24、检验【方法评价方法评价】干扰因素干扰因素 尿中含较多量肌酐、肌酸,高色素尿尿中含较多量肌酐、肌酸,高色素尿,尿中含酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物等,尿中含酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物等 1.1.标本收集和保存不当标本收集和保存不当 2.2.湿度、热度或光线使亚硝基铁氰化钠反应灵敏度减低湿度、热度或光线使亚硝基铁氰化钠反应灵敏度减低 3.3.试带受潮失活试带受潮失活 第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【质量控制质量控制】检测前检测前 新鲜尿标本,避免新鲜尿标本,避免丙酮在室温下快速挥发丙酮在室温下快速挥发,避免,避免乙酰乙乙酰乙酸在菌尿中被细菌降解酸在菌尿中被细菌降解 检测中检测中 -阳性和阴性阳

    25、性和阴性2 2种浓度水平室内质控种浓度水平室内质控 -为防止肌酐、肌酸过多引起假阳性,可加少许冰乙酸为防止肌酐、肌酸过多引起假阳性,可加少许冰乙酸 -试带应阴凉、干燥处保存,注意有效期试带应阴凉、干燥处保存,注意有效期第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【参考区间参考区间】尿酮体尿酮体 定性定性:阴性:阴性 定量定量:酮体(以丙酮计):酮体(以丙酮计)170170420 mg/L420 mg/L 乙酰乙酸乙酰乙酸20 mg/L20 mg/L 第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【临床应用临床应用】酮体阳性见于:酮体阳性见于:-不能有效利用碳水化合物不能有效利用碳水化合物:如如糖尿病酮症酸中

    26、毒糖尿病酮症酸中毒-碳水化合物摄入不足碳水化合物摄入不足:如饥饿、饮食疗法、剧烈运动、寒冷如饥饿、饮食疗法、剧烈运动、寒冷等等 -碳水化合物丢失碳水化合物丢失:如频繁呕吐(怀孕、疾病)、肾脏重吸收如频繁呕吐(怀孕、疾病)、肾脏重吸收功能障碍、消化系统疾病等功能障碍、消化系统疾病等第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【临床应用临床应用】糖尿病酮症酸中毒糖尿病酮症酸中毒早期的主要酮体成分是早期的主要酮体成分是-羟丁羟丁酸酸,而乙酰乙酸很少或缺乏,此时测得结果可导,而乙酰乙酸很少或缺乏,此时测得结果可导致对总酮体量估计不足致对总酮体量估计不足 当糖尿病酮症酸中毒症状缓解之后,当糖尿病酮症酸中毒症状

    27、缓解之后,-羟丁酸转羟丁酸转变为乙酰乙酸,反而使乙酰乙酸含量比急性期早变为乙酰乙酸,反而使乙酰乙酸含量比急性期早期增高,此时易造成对病情估计过重期增高,此时易造成对病情估计过重 第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验五、五、尿胆红素尿胆红素(bilirubin)(bilirubin)尿胆原尿胆原(urobilinogen)(urobilinogen)尿胆素尿胆素(urobilin)(urobilin)尿胆红素、尿胆原及尿胆素,俗称尿胆红素、尿胆原及尿胆素,俗称尿三胆尿三胆。53通过肾脏滤过称尿胆红素不能通过肾脏滤过 黄疸(黄疸(JaundiceJaundice):):由于血清中胆红素升高由于血

    28、清中胆红素升高(34.2 34.2 mol/L mol/L)致使皮肤、粘膜、巩膜以及其他)致使皮肤、粘膜、巩膜以及其他组织和体液发生黄染的症状和体征。组织和体液发生黄染的症状和体征。溶血性黄疸溶血性黄疸肝细胞性黄疸肝细胞性黄疸胆汁淤积性黄疸胆汁淤积性黄疸病因和发病机制病因和发病机制5556 57 胆红素有胆红素有3 3种种 未结合胆红素(未结合胆红素(UCBUCB)结合胆红素(结合胆红素(CBCB)-胆红素(极少)胆红素(极少)正常人血正常人血CBCB含量很低(含量很低(小于小于4mol/L4mol/L),尿中不能),尿中不能检出,检出,当血当血CBCB增高,超过肾阈值时,增高,超过肾阈值时,

    29、CBCB即从尿中排出即从尿中排出 尿胆红素尿胆红素(bilirubin)(bilirubin)【检测原理检测原理】偶氮法(偶联反应)偶氮法(偶联反应)试带法多采用此原理试带法多采用此原理-在强酸介质中结合胆红素与重氮盐发生偶联反应呈在强酸介质中结合胆红素与重氮盐发生偶联反应呈红色红色-颜色深浅与胆红素含量颜色深浅与胆红素含量成正比成正比 氧化法(氧化法(HarrisonHarrison法)法)-胆红素被硫酸钡吸附而浓缩,与胆红素被硫酸钡吸附而浓缩,与FeClFeCl3 3反应,被氧化为胆青素、反应,被氧化为胆青素、胆绿素和胆黄素复合物,呈胆绿素和胆黄素复合物,呈蓝绿色、绿色或黄绿色蓝绿色、绿色

    30、或黄绿色-呈色快慢和深浅程度与胆红素含量呈色快慢和深浅程度与胆红素含量成正比成正比 第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【方法评价方法评价】偶氮法偶氮法尿液颜色过深会影响结果判断;尿液颜色过深会影响结果判断;假阳性可见于:假阳性可见于:大剂量氯丙嗪治疗或尿中含有盐大剂量氯丙嗪治疗或尿中含有盐 酸苯偶氮吡啶代谢产物酸苯偶氮吡啶代谢产物假阴性见于:假阴性见于:尿维生素尿维生素C C浓度达浓度达1.42mmol/L1.42mmol/L和存在亚和存在亚 硝酸盐时,可抑制偶氮反应硝酸盐时,可抑制偶氮反应 尿标本保存不当,尿胆红素遇光氧化尿标本保存不当,尿胆红素遇光氧化第六章第六章 尿液一般检验尿液一般

    31、检验【方法评价方法评价】氧化法氧化法 HarrisonHarrison法灵敏度较高,操作稍繁法灵敏度较高,操作稍繁假阳性:假阳性:尿中存在水杨酸盐、阿司匹林、牛黄等尿中存在水杨酸盐、阿司匹林、牛黄等假阴性:假阴性:标本未避光保存标本未避光保存 第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【质量保证质量保证】【参考区间参考区间】尿胆红素尿胆红素阴性阴性 第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【临床应用临床应用】主要用于黄疸的诊断和鉴别诊断主要用于黄疸的诊断和鉴别诊断 阳性阳性见于见于胆汁淤积性黄疸胆汁淤积性黄疸、肝细胞性黄疸肝细胞性黄疸 溶血性黄疸为溶血性黄疸为阴性阴性 【检测原理检测原理】尿胆原和尿

    32、胆素的检测原理见表尿胆原和尿胆素的检测原理见表 尿胆原尿胆原(urobilinogen)(urobilinogen)尿胆素尿胆素(urobilin)(urobilin)【方法学评价方法学评价】1灵敏度和特异性灵敏度和特异性【方法学评价方法学评价】2干扰因素干扰因素 (1)醛反应法:醛反应法的干扰因素见表。)醛反应法:醛反应法的干扰因素见表。(2)偶氮法:当尿液标本中)偶氮法:当尿液标本中甲醛浓度甲醛浓度为为2000mg/L或或亚硝酸盐亚硝酸盐50mg/L以上,其灵敏度下降。以上,其灵敏度下降。醛反应法的干扰因素醛反应法的干扰因素 【质量保证质量保证】【临床意义临床意义】尿胆原已成为尿液分析仪尿

    33、胆原已成为尿液分析仪试带法组合检验项目之一。胆红素、尿胆原试带法组合检验项目之一。胆红素、尿胆原等检查有助于黄疸的诊断与鉴别诊断。等检查有助于黄疸的诊断与鉴别诊断。黄疸鉴别诊断黄疸鉴别诊断六、六、尿本周蛋白尿本周蛋白(Bence Jones protein BJPBence Jones protein BJP)骨髓瘤细胞所合成的异常免疫球蛋白,其轻链与骨髓瘤细胞所合成的异常免疫球蛋白,其轻链与重链合成不平衡,因轻链产生过多,使重链合成不平衡,因轻链产生过多,使游离游离IgIg轻轻链(链(LCLC)过剩过剩 LCLC能自由通过肾小球滤过膜,当浓度超过近曲小能自由通过肾小球滤过膜,当浓度超过近曲小

    34、管重吸收极限时,可自尿中排出,即管重吸收极限时,可自尿中排出,即本周蛋白尿本周蛋白尿(Bence Jones proteinuria Bence Jones proteinuria)或轻链尿。)或轻链尿。本周蛋白有本周蛋白有和和两种两种 BJPBJP重要特性重要特性在在pH 4.9pH 4.90.10.1条件下,加热至条件下,加热至40406060时可时可发生凝固,温度升至发生凝固,温度升至9090100100时溶解,而温时溶解,而温度减低至度减低至5656左右,又可重新凝固。左右,又可重新凝固。也称也称凝溶蛋白凝溶蛋白【检测原理检测原理】热沉淀热沉淀-溶解法溶解法基于本周蛋白凝溶特性基于本周

    35、蛋白凝溶特性对对-甲苯磺酸法甲苯磺酸法基于对基于对-甲苯磺酸法能沉淀甲苯磺酸法能沉淀BJPBJP,而不与清蛋白和球蛋白起反应的原理而测定而不与清蛋白和球蛋白起反应的原理而测定乙酸纤维素膜电泳和乙酸纤维素膜电泳和SDS-PAGESDS-PAGE电泳电泳基于蛋白电泳分离的检测原理基于蛋白电泳分离的检测原理免疫方法免疫方法 均基于区带电泳原理和特异性抗原抗体反应原理均基于区带电泳原理和特异性抗原抗体反应原理 第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【方法评价方法评价】检测尿游离检测尿游离LCLC最佳方法最佳方法电泳法电泳法免疫固定电泳法免疫固定电泳法可判断可判断、型型 第六章第六章 尿液一般检验尿液一

    36、般检验【质量控制质量控制】检测前检测前新鲜尿液标本新鲜尿液标本尿液浑浊时需离心取上清液尿液浑浊时需离心取上清液热沉淀热沉淀-溶解法,若遇蛋白尿,须先沉淀普通蛋白溶解法,若遇蛋白尿,须先沉淀普通蛋白质,然后趁热过滤,取上清液检查质,然后趁热过滤,取上清液检查使用电泳法,需预先浓缩尿液使用电泳法,需预先浓缩尿液10105050倍倍第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【质量控制质量控制】检测中检测中凝溶法应严格控制凝溶法应严格控制pHpH在在4.54.55.55.5范围,范围,最适最适pH 4.9pH 4.90.10.1电泳法操作中,需同时检测患者及正常人,电泳法操作中,需同时检测患者及正常人,以

    37、正确判断区带位置以正确判断区带位置检测后检测后 肌红蛋白、溶菌酶、游离重链等也可出现类似肌红蛋白、溶菌酶、游离重链等也可出现类似于于M M蛋白的区带,蛋白的区带,因此当乙酸纤维素膜上出现波峰或因此当乙酸纤维素膜上出现波峰或怀疑有相关疾病时,应进行免疫电泳怀疑有相关疾病时,应进行免疫电泳第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【参考区间参考区间】尿本周蛋白阴性尿本周蛋白阴性 第六章第六章 尿液一般检验尿液一般检验【临床应用】【临床应用】用于用于多发性骨髓瘤(多发性骨髓瘤(MMMM)、原发性淀粉样变原发性淀粉样变性、巨球蛋白血症及其他恶性淋巴增殖性疾病性、巨球蛋白血症及其他恶性淋巴增殖性疾病的诊断和

    38、鉴别诊断的诊断和鉴别诊断MMMM巨球蛋白血症巨球蛋白血症原发性淀粉样变性原发性淀粉样变性其他其他 2/32/3重链病患者尿中有重链病患者尿中有BJP BJP 七、血红蛋白(七、血红蛋白(BloodBlood)当发生血管内溶血时,大量Hb释放入血液形成血红蛋白血症。若Hb量超过结合珠蛋白结合能力时,血浆游离Hb可经肾小球滤出,当超过1.001.35g/L时,Hb可随尿液排出,即为血红蛋白尿血红蛋白尿(hemoglobinuria)。因此,溶血时是否出现血红蛋白尿取决于血红蛋白尿取决于3个个因素因素:血浆内游离的Hb、结合珠蛋白和肾小管重吸收能力。【检测原理检测原理】1试带法试带法 过氧化物酶法过

    39、氧化物酶法。常用的色素原有邻联甲苯胺、氨。常用的色素原有邻联甲苯胺、氨基比林和四甲基联苯胺基比林和四甲基联苯胺(TMB)等。)等。2化学法化学法 与试带法反应原理一致。常用方法有邻联甲苯胺法、与试带法反应原理一致。常用方法有邻联甲苯胺法、氨基比林(匹拉米洞)法等。氨基比林(匹拉米洞)法等。3免疫法免疫法 采用免疫胶体金法测定原理。采用免疫胶体金法测定原理。【方法学评价方法学评价】【质量保证质量保证】【参考区间参考区间】阴性。阴性。【临床意义临床意义】尿液出现尿液出现Hb是是血管内溶血的证据之血管内溶血的证据之一一。因此,尿液。因此,尿液Hb测定有助于血管内溶血性疾病的测定有助于血管内溶血性疾病

    40、的诊断。诊断。常见血管内溶血因素及疾病常见血管内溶血因素及疾病八、亚硝酸盐(八、亚硝酸盐(nitritenitrite)尿液亚硝酸盐(尿液亚硝酸盐(NIT)主要来自病原菌对硝酸盐的还原反主要来自病原菌对硝酸盐的还原反应,其次来源于体内的一氧化氮(应,其次来源于体内的一氧化氮(NO)。体液中内皮细胞、)。体液中内皮细胞、巨噬细胞、粒细胞等使精氨酸在酶的作用下生成巨噬细胞、粒细胞等使精氨酸在酶的作用下生成NO,而,而NO极极易在体内有氧条件下,氧化成亚硝酸盐和硝酸盐。易在体内有氧条件下,氧化成亚硝酸盐和硝酸盐。【检测原理检测原理】Griess法。尿液法。尿液NIT先与对氨基苯磺胺(或先与对氨基苯磺

    41、胺(或对氨基苯砷酸)形成重氮盐,再与对氨基苯砷酸)形成重氮盐,再与3-羟基羟基-1,2,3,4-四氢苯四氢苯并喹啉(或并喹啉(或N-1-萘基乙二胺)结合形成红色偶氮化合物,其颜萘基乙二胺)结合形成红色偶氮化合物,其颜色深浅与色深浅与NIT含量成正比。含量成正比。【方法学评价方法学评价】尿液尿液NIT阳性检出率取决于阳性检出率取决于3个个条件:条件:尿液中的致病菌是否存在硝酸盐还原酶尿液中的致病菌是否存在硝酸盐还原酶 尿液在膀胱内是否停留足够长的时间(尿液在膀胱内是否停留足够长的时间(4h)尿液中是否存在适量硝酸盐尿液中是否存在适量硝酸盐 亚硝酸盐测定的干扰因素亚硝酸盐测定的干扰因素 【质量保证

    42、质量保证】【参考区间参考区间】阴性。【临床意义临床意义】目前,亚硝酸盐作为尿液化学检查组合项目之一,主要用于尿路感染的快速筛检。因此,解释结果时可与白细胞酯酶、尿沉渣显微镜检查结果相结合,综合分析。尿细菌培养法为确证试验。九、白细胞酯酶(九、白细胞酯酶(leukocyteleukocyte)【检测原理检测原理】中性粒细胞酯酶法中性粒细胞酯酶法:中性粒细胞胞质中含有:中性粒细胞胞质中含有特异性酯酶,能使试带中吲哚酚酯产生吲哚酚,特异性酯酶,能使试带中吲哚酚酯产生吲哚酚,吲哚酚与重氮盐形成紫红色缩合物,其呈色深浅吲哚酚与重氮盐形成紫红色缩合物,其呈色深浅与中性粒细胞的多少呈正比。与中性粒细胞的多少

    43、呈正比。【方法学评价方法学评价】【质量保证质量保证】【参考区间参考区间】阴性。【临床意义临床意义】用于用于诊断泌尿系统感染诊断泌尿系统感染。肾移。肾移植后发生排斥反应时,植后发生排斥反应时,尿液中以淋巴细胞为主,白尿液中以淋巴细胞为主,白细胞酯酶呈阴性细胞酯酶呈阴性。此时,应以显微镜检查为准。此时,应以显微镜检查为准。十、维生素十、维生素C C(VicVic)【检测原理检测原理】还原法。呈色反应由绿色或深蓝色还原法。呈色反应由绿色或深蓝色至粉红色变化,其呈色深浅与维生素至粉红色变化,其呈色深浅与维生素C含量成正比。含量成正比。【方法学评价方法学评价】【质量保证质量保证】【参考区间参考区间】阴性

    44、。阴性。【临床意义临床意义】维生素维生素C浓度增高可对隐血浓度增高可对隐血/血红蛋白、胆红素、血红蛋白、胆红素、葡萄糖、亚硝酸盐试带反应产生严重的干扰(表葡萄糖、亚硝酸盐试带反应产生严重的干扰(表5-23)。)。检测维生素检测维生素C并非用于维生素并非用于维生素C的定量的定量,而是,而是用于用于判断试带法其他检测项目是否准确可靠,是否受到维判断试带法其他检测项目是否准确可靠,是否受到维生素生素C的影响,以对阴性结果给予正确的分析和评价的影响,以对阴性结果给予正确的分析和评价。十一、人绒毛膜促性腺激素十一、人绒毛膜促性腺激素(hCG)(hCG)人绒毛膜促性腺激素(hCG)是由胎盘合体滋养细胞分泌

    45、的一种具有促进性腺发育的糖蛋白激素,相对分子质量为47 000。【检测原理检测原理】1.单克隆免疫胶体金法单克隆免疫胶体金法 2.其他方法其他方法 检测检测hCG的方法还有酶联免疫吸附的方法还有酶联免疫吸附试验(试验(ELISA)、电化学发光免疫法()、电化学发光免疫法(ECLIA)、微)、微粒子化学发光免疫法(粒子化学发光免疫法(MCLIA)、)、放射免疫法放射免疫法和检和检孕卡法等。孕卡法等。【参考区间参考区间】定量:定量:25IU/L。定性:阴性。定性:阴性。【临床意义临床意义】1诊断早期妊娠诊断早期妊娠2诊断异位妊娠诊断异位妊娠 3诊断流产诊断流产 4辅助诊断滋养细胞疾病辅助诊断滋养细

    46、胞疾病 5肿瘤标志物肿瘤标志物 十二、微量清蛋白十二、微量清蛋白 在无尿路感染和心力衰竭的情况下,尿液清蛋白超过正在无尿路感染和心力衰竭的情况下,尿液清蛋白超过正常但低于常规试带法可检出的范围,称为常但低于常规试带法可检出的范围,称为微量清蛋白尿微量清蛋白尿(MA)。因常规定性试验阴性,所以不能诊断为蛋白尿。因常规定性试验阴性,所以不能诊断为蛋白尿。【检测原理检测原理】1放射免疫法放射免疫法(RIA)2酶联免疫吸附法(酶联免疫吸附法(ELISA)3免疫比浊法免疫比浊法 【方法学评价方法学评价】【参考区间参考区间】成人:(成人:(1.270.78)mg/mmol Cr或(或(11.216.93)

    47、mg/gCr。AER:530mg/24h。【临床意义临床意义】糖尿病肾病的早期诊断与监测糖尿病肾病的早期诊断与监测,微量清蛋白,微量清蛋白尿是糖尿病患者发生肾小球微血管病变最早期的指尿是糖尿病患者发生肾小球微血管病变最早期的指标之一。标之一。微量清蛋白尿是微量清蛋白尿是心血管疾病、高血压病患者心血管疾病、高血压病患者并发肾脏损伤的指征之一并发肾脏损伤的指征之一。十三、肌红蛋白十三、肌红蛋白 (Mb)肌红蛋白(肌红蛋白(Mb)是横纹肌(心肌和骨骼肌)合成)是横纹肌(心肌和骨骼肌)合成的一种含亚铁血红素单链的蛋白质,其相对分子质量的一种含亚铁血红素单链的蛋白质,其相对分子质量17 800、结构及特

    48、性与血红蛋白相似。当横纹肌组织、结构及特性与血红蛋白相似。当横纹肌组织受损伤时,受损伤时,Mb可大量释放至细胞外,并可迅速通过肾可大量释放至细胞外,并可迅速通过肾小球滤过而由肾脏排出。小球滤过而由肾脏排出。Mb阳性的尿液称肌红蛋白尿。阳性的尿液称肌红蛋白尿。【检测原理】【检测原理】【质量保证】【质量保证】【参考区间】【参考区间】阴性。阴性。【临床【临床应用应用】肌红蛋白尿检测主要用于鉴别肌红蛋白尿检测主要用于鉴别是否发生肌肉损伤是否发生肌肉损伤。1组织局部缺血组织局部缺血 2骨骼肌损伤骨骼肌损伤 3创伤创伤 4阵发性肌红蛋白尿阵发性肌红蛋白尿 5原发性肌肉疾病原发性肌肉疾病 十四十四 尿液尿液

    49、2-2-微球蛋白(微球蛋白(2-M2-M)是一种低分子量蛋白质,为人类白细胞膜抗原(是一种低分子量蛋白质,为人类白细胞膜抗原(HLA)I类抗原的轻链类抗原的轻链 可由肾小球滤过,可由肾小球滤过,但但99.9%由近曲小管回收,因由近曲小管回收,因此,尿液中很少此,尿液中很少【检测原理】【检测原理】放免法放免法酶免法酶免法化学发光法化学发光法【参考区间参考区间】0.2 mg/L370 ug/24h【临床【临床应用应用】1.肾小管炎症肾小管炎症,中毒引起肾小管病变时,肾小,中毒引起肾小管病变时,肾小管对管对2-M重吸收功能不良,故重吸收功能不良,故2-M增高。在肾增高。在肾小球病变时,肾小管吸收功能

    50、良好,小球病变时,肾小管吸收功能良好,2-M正常正常或轻度升高或轻度升高 2.预示某些药物对肾小管的损害预示某些药物对肾小管的损害:如某些抗生:如某些抗生素、重金属、造影剂等素、重金属、造影剂等十五十五 尿液尿液1 1-微球蛋白微球蛋白(1 1-M)-M)ul-微球蛋白微球蛋白(l-M)为分子量仅为分子量仅26 000的一种糖蛋的一种糖蛋白,由白,由167个氨基酸组成。个氨基酸组成。u血浆中血浆中l-M以两种形式存在,游离型或与以两种形式存在,游离型或与IgG、清蛋白结合型。结合型清蛋白结合型。结合型l-M不能通过肾小球滤过不能通过肾小球滤过膜。膜。u游离型游离型l-M可自由通过肾小球,可自由

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