环氧乙烷灭菌确认课件.ppt

1、LOGO环氧乙烷灭菌确认环氧乙烷灭菌确认 提提 纲纲环氧乙烷基础知识环氧乙烷基础知识环氧乙烷安全知识环氧乙烷安全知识环氧乙烷灭菌方案环氧乙烷灭菌方案环氧乙烷灭菌确认环氧乙烷灭菌确认相关标准相关标准灭菌确认灭菌确认 环氧乙烷灭菌法环氧乙烷灭菌法 属于化学灭菌法的一种，属于化学灭菌法的一种，是利用环氧乙烷是利用环氧乙烷气体进行杀菌的方法。它是一种传统的灭气体进行杀菌的方法。它是一种传统的灭菌方法，可应用于工服灭菌、不耐加热灭菌方法，可应用于工服灭菌、不耐加热灭菌的医疗器械、设施、设备等灭菌。菌的医疗器械、设施、设备等灭菌。1.1 气体性质气体性质环氧乙烷（Ethylene Oxide，EO、ETO

2、）室温时为无色气体，有醚类的特征气味。沸点10.4。在水中溶解度大；也能溶于酒精、丙酮等多数有机溶剂，对脂肪、油、润滑脂、某些配方的橡胶和涂料是强有力的溶剂。一、环氧乙烷基础知识一、环氧乙烷基础知识1.2 灭菌机制灭菌机制环氧乙烷具有非常强的渗透和扩散能力，其灭菌的机理主要是强氧化，因此具有广谱杀菌，灭菌能力强的特点，对微生物的繁殖体、芽抱有较强的杀灭效果。环氧乙烷的杀菌机制主要由于它是一种烷化剂，直接而且不可逆地与菌体蛋白质中的COOH、NH2、OH和SH反应，从而使菌体或芽孢中的蛋白质破坏，亦能与某些促进细菌繁殖的酶形成复合物，致使细菌失去活力或死亡。一、环氧乙烷基础知识一、环氧乙烷基础知

3、识二、环氧乙烷安全知识二、环氧乙烷安全知识操作注意事项操作注意事项密闭操作，局部排风。操作人员必须经过专门密闭操作，局部排风。操作人员必须经过专门培训，严格遵守操作规程。建议操作人员佩戴培训，严格遵守操作规程。建议操作人员佩戴自吸过滤式防毒面具（全面罩），穿防静电工自吸过滤式防毒面具（全面罩），穿防静电工作服，戴橡胶手套。远离火种、热源，工作场作服，戴橡胶手套。远离火种、热源，工作场所严禁吸烟。使用防爆型的通风系统和设备。所严禁吸烟。使用防爆型的通风系统和设备。防止气体泄漏到工作场所空气中。避免与酸类、防止气体泄漏到工作场所空气中。避免与酸类、碱类、醇类接触。在传送过程中，钢瓶和容器碱类、醇类

4、接触。在传送过程中，钢瓶和容器必须接地和跨接，防止产生静电。禁止撞击和必须接地和跨接，防止产生静电。禁止撞击和震荡。配备相应品种和数量的消防器材及泄漏震荡。配备相应品种和数量的消防器材及泄漏应急处理设备。应急处理设备。二、环氧乙烷安全知识二、环氧乙烷安全知识储存注意事项储存注意事项环氧乙烷是易燃易爆物质，明火可以引起燃烧或爆炸，环氧乙烷灭菌环氧乙烷是易燃易爆物质，明火可以引起燃烧或爆炸，环氧乙烷灭菌中应十分注意安全问题。中应十分注意安全问题。储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。避免光照。库温不宜超过避免光照。库温不宜超过30。应与酸类、碱。应与酸类、

5、碱类、醇类、食用化学品分开存放，切忌混储。类、醇类、食用化学品分开存放，切忌混储。采用防爆型照明、通风设施。禁止使用易产生采用防爆型照明、通风设施。禁止使用易产生火花的机械设备和工具。储区应备有泄漏应急火花的机械设备和工具。储区应备有泄漏应急处理设备。应严格执行极毒物品处理设备。应严格执行极毒物品“五双五双”管理制管理制度。度。二、环氧乙烷安全知识二、环氧乙烷安全知识在加人灭菌剂在加人灭菌剂之前，对灭菌之前，对灭菌周期内的产品周期内的产品进行处理，以进行处理，以达到预定温度达到预定温度和相对湿度。和相对湿度。该部分灭菌周该部分灭菌周期可在大气压期可在大气压下或真空下进下或真空下进行行在一密闭的

6、柜在一密闭的柜室内，包括进室内，包括进行去除空气、行去除空气、处理处理(若采用若采用)、加人灭菌剂、加人灭菌剂、EO作用、去除作用、去除EO和换气和换气(若若采用采用)的一系列的一系列处理步骤。处理步骤。预处理（若采用）预处理（若采用）灭菌周期灭菌周期通风通风 三、环氧乙烷灭菌方案三、环氧乙烷灭菌方案灭菌后应置于灭菌后应置于通风条件下使通风条件下使环氧乙烷充分环氧乙烷充分发挥。发挥。与其它任何一种灭菌法比较，环氧乙烷灭菌法是目前最复杂、最难控制的灭菌方法，这不仅仅是环氧乙烷气体的特殊性质，更因为是有众多的因素参与影响环氧乙烷的灭菌效果。包括产品包装形式、产品结构、微生物数量种类、真空度、EO浓

7、度、温度、湿度、时间等。其中，浓度，温度，湿度，时间是直接影响环氧乙烷灭菌效果的最重要的四要素，称为环氧乙烷灭菌四要素。三、环氧乙烷灭菌方案三、环氧乙烷灭菌方案 三、环氧乙烷灭菌方案三、环氧乙烷灭菌方案 三、环氧乙烷灭菌方案三、环氧乙烷灭菌方案 三、环氧乙烷灭菌方案三、环氧乙烷灭菌方案 三、环氧乙烷灭菌方案三、环氧乙烷灭菌方案 三、环氧乙烷灭菌方案三、环氧乙烷灭菌方案措施措施灭菌前灭菌前,先对产品进行一个真先对产品进行一个真空测试空测试(在小的真空柜里在小的真空柜里,做做10个样品的真空测试个样品的真空测试),看它最大看它最大承受负压的极限是多少承受负压的极限是多少,然后然后选择在什么压力下灭

8、菌选择在什么压力下灭菌.总的总的来说来说,采取负压灭菌的工艺较采取负压灭菌的工艺较多多,因为这样较为安全因为这样较为安全,EO灭灭菌彻底菌彻底.如果产品较难灭菌如果产品较难灭菌,耐耐真空度又较强真空度又较强,可选在可选在-50KP或或-70KP下灭菌下灭菌.一般采用一般采用Tyvek包装袋进行包包装袋进行包装产品装产品,产品材料为产品材料为PE或或PET等复合薄膜等复合薄膜,注塑类产品均可注塑类产品均可采用负压灭菌采用负压灭菌.（1）负压还是正压灭菌）负压还是正压灭菌,一方一方面根据所灭菌产品的材料承受面根据所灭菌产品的材料承受真空的程度真空的程度,一方面取决于灭菌一方面取决于灭菌工艺要求。负

9、压灭菌更为安全工艺要求。负压灭菌更为安全,彻底，但有些产品的包装耐真彻底，但有些产品的包装耐真空压力较弱空压力较弱,那只能采取正压那只能采取正压,否则产品会爆裂否则产品会爆裂,造成产品的破造成产品的破损。损。（2）有些产品不需要负压灭）有些产品不需要负压灭菌菌,因为它吸收因为它吸收EO较容易较容易,所用所用EO量少量少,容易灭菌容易灭菌,也不需要在也不需要在负压下灭菌负压下灭菌,一般在一般在10到到-15KP就可就可.负压，正压？负压，正压？三、环氧乙烷灭菌方案三、环氧乙烷灭菌方案包装：材料、大小、厚度、装载包装：材料、大小、厚度、装载数量数量堆放：总装载量（堆放：总装载量（80%），装），装

10、载物品不能接触柜壁，有一定距载物品不能接触柜壁，有一定距离间隔离间隔印刷：应保证印刷质量不会因灭印刷：应保证印刷质量不会因灭菌产生不良影响菌产生不良影响灭菌温度灭菌温度的确定的确定产品：材料，物理、化学性能产品：材料，物理、化学性能温度的常规极限通常在温度的常规极限通常在3763，一般常用，一般常用的合适温度为的合适温度为505。但是当温度高到足以使药但是当温度高到足以使药物发挥最大作用时，再升物发挥最大作用时，再升高温度，则杀菌作用亦不高温度，则杀菌作用亦不再加强。再加强。三、环氧乙烷灭菌方案三、环氧乙烷灭菌方案预真空度应考虑以下因素的影响预真空度应考虑以下因素的影响 1）对被灭菌物品、及其

11、包装的影响；）对被灭菌物品、及其包装的影响；2）负压灭菌与正压灭菌）负压灭菌与正压灭菌 3）对湿度的影响；）对湿度的影响；4）设定真空度与达到该真空度所需时间；）设定真空度与达到该真空度所需时间；5）真空持续时间（保压）。）真空持续时间（保压）。预真空度的大小决定残留空气的多少，而残留空气可直接预真空度的大小决定残留空气的多少，而残留空气可直接影响环氧乙烷气体、热量、湿气到达被灭菌物品的内部，影响环氧乙烷气体、热量、湿气到达被灭菌物品的内部，所以灭菌过程尤其是加湿前真空度对灭菌效果影响巨大。所以灭菌过程尤其是加湿前真空度对灭菌效果影响巨大。压力的确压力的确定定 三、环氧乙烷灭菌方案三、环氧乙烷

12、灭菌方案灭菌物品的含水量、微生物灭菌物品的含水量、微生物本身的干燥程度和灭菌环境本身的干燥程度和灭菌环境的相对湿度，对环氧乙烷的的相对湿度，对环氧乙烷的灭菌作用均有显著的影响。灭菌作用均有显著的影响。在抽真空后、加药前，此时在抽真空后、加药前，此时灭菌器内的湿度应控制灭菌器内的湿度应控制30%RH至至80%RH范围内范围内。采用半周期法进行微生物采用半周期法进行微生物性能验证，在除时间外所性能验证，在除时间外所有其他过程参数不变情况有其他过程参数不变情况下，确定无存活菌的下，确定无存活菌的EO最最短有效作用时间（半周期短有效作用时间（半周期）。灭菌工艺规定的作用）。灭菌工艺规定的作用时间应至少

13、为半周期的时间应至少为半周期的2倍。倍。湿度的确定湿度的确定灭菌时间的确定灭菌时间的确定 四、环氧乙烷灭菌确认四、环氧乙烷灭菌确认灭菌确认：对获得的结果进行记录和整理灭菌确认：对获得的结果进行记录和整理的书面程序，证明灭菌过程可持续生产符的书面程序，证明灭菌过程可持续生产符合预定规格的产品。合预定规格的产品。目的：得出无菌保证水平目的：得出无菌保证水平10-6的验证，验的验证，验证确认中的仪器、设备适合性；验证灭菌证确认中的仪器、设备适合性；验证灭菌循环科学性、适合性；文件化。循环科学性、适合性；文件化。四、环氧乙烷灭菌确认四、环氧乙烷灭菌确认理论基础理论基础微生物的死亡规律微生物的死亡规律遵

14、循一级化学反应遵循一级化学反应方程。灭菌时间方程。灭菌时间t，与存活微生物数量与存活微生物数量的对数值的对数值lgN呈直呈直线线性关系，这就线线性关系，这就是微生物的对数死是微生物的对数死亡规律。亡规律。四、环氧乙烷灭菌确认四、环氧乙烷灭菌确认灭菌确认系统图灭菌确认系统图 四、环氧乙烷灭菌确认四、环氧乙烷灭菌确认安装合格性确认：确认灭菌设安装合格性确认：确认灭菌设备及其辅助系统的安装符合设备备及其辅助系统的安装符合设备规格及设计规范规格及设计规范运行合格性确认：在制定的灭运行合格性确认：在制定的灭菌条件下对灭菌机进行实际空罐菌条件下对灭菌机进行实际空罐运行，检查其性能参数的符合性。运行，检查其

15、性能参数的符合性。物理性能鉴定应证明物理性能鉴定应证明:a)在规定预处理时间结束时，被灭菌物品在规定预处理时间结束时，被灭菌物品处于预处理规范规定的温度和相对湿度范处于预处理规范规定的温度和相对湿度范围内围内;b)加人蒸汽时湿度与压力升高的关系加人蒸汽时湿度与压力升高的关系;c)向灭菌器室内加人灭菌剂时，被灭菌物向灭菌器室内加人灭菌剂时，被灭菌物品的温度和湿度在灭菌过程规范规定的范品的温度和湿度在灭菌过程规范规定的范 围内围内;d)气体灭菌剂已经加人灭菌器室内气体灭菌剂已经加人灭菌器室内;e)温度和湿度及其他适用参数处于灭菌过温度和湿度及其他适用参数处于灭菌过程规范规定的范围内程规范规定的范围

16、内;f)在整个作用时间内，被灭菌物品保持在在整个作用时间内，被灭菌物品保持在规定的物理条件下规定的物理条件下;和和g)在通风过程中，被灭菌物品保持在规定在通风过程中，被灭菌物品保持在规定的温度范围内的温度范围内微生物学性能鉴定必须通过对微生物学性能鉴定必须通过对符合符合GB18281.1-ISO11138-1的生物指示的生物指示物灭活，证明该灭菌过程适合产品灭菌。物灭活，证明该灭菌过程适合产品灭菌。应把这些指示物放置在整个被灭菌物品中应把这些指示物放置在整个被灭菌物品中具代表性的部位，所选的周期条件对微生具代表性的部位，所选的周期条件对微生物产生的杀灭力低于通常指定灭菌周期的物产生的杀灭力低于

17、通常指定灭菌周期的杀灭力，达到保证无菌。杀灭力，达到保证无菌。产品初始染菌数产品初始染菌数灭菌产品管道类内腔不超过灭菌产品管道类内腔不超过10CFU/件件,外部不超过外部不超过100CFU/件件,非非管道类不超过管道类不超过100CFU/件件,敷料类不超过敷料类不超过100CFU/件件,消毒产品消毒产品1000CFU/件件参考的标准参考的标准:ISO11737-1灭菌过程中湿度验证控制怎么进行？如怎样灭菌过程中湿度验证控制怎么进行？如怎样确认测试或说怎样测试包装内的实际湿度，确认测试或说怎样测试包装内的实际湿度，还有就是湿度的无均匀性还有就是湿度的无均匀性湿度是采用蒸气发生器进行加湿，一般在处

18、理阶段进行湿度调湿度是采用蒸气发生器进行加湿，一般在处理阶段进行湿度调理，通过压力变化来控制加湿的量，一般要求灭菌期间湿度在理，通过压力变化来控制加湿的量，一般要求灭菌期间湿度在40%-80%RH之间。产品内的湿度测试即均匀性测试是在开始之间。产品内的湿度测试即均匀性测试是在开始验证时要完成的，运行三次，处理分析产品内的湿度均匀性；验证时要完成的，运行三次，处理分析产品内的湿度均匀性；而在日常生产中是不控制产品内湿度的，只是监测柜内湿度。而在日常生产中是不控制产品内湿度的，只是监测柜内湿度。确认中的几个问题确认中的几个问题纯纯EO气体灭菌和气体灭菌和EO混合气体灭菌在灭菌验证过程和混合气体灭菌

19、在灭菌验证过程和生产过程的差别生产过程的差别1、在加入等质量的、在加入等质量的EO气体的情况下，混合气体的压力变化较纯气体的情况下，混合气体的压力变化较纯EO气体大（注意这里指的是压力变化）。气体大（注意这里指的是压力变化）。2、混合、混合EO气体的气体的“穿透性穿透性”更强，表面在对于国内目前所用的一更强，表面在对于国内目前所用的一些全塑（如些全塑（如HDPE及复合腊类包装体现的较为明显，混及复合腊类包装体现的较为明显，混EO气体气体在灭菌过程中的胀包情况更明显一些）。在灭菌过程中的胀包情况更明显一些）。3、在相同产品、相同包装形式下，纯、在相同产品、相同包装形式下，纯EO气体的残留量较大，

20、产气体的残留量较大，产品品EO解析时间较长。解析时间较长。4、在、在EO气体的安全性上也有很大差别，如果做实际安全性实验，气体的安全性上也有很大差别，如果做实际安全性实验，EO混合气体更安全。混合气体更安全。5、对、对EO灭菌柜的要求：纯灭菌柜的要求：纯EO气体对气体对EO气体灭菌柜的腐蚀较大，气体灭菌柜的腐蚀较大，应引起注意。（注：当然混合气体的体积变化较大，因此对灭菌应引起注意。（注：当然混合气体的体积变化较大，因此对灭菌柜的密封情能是一种挑战）。柜的密封情能是一种挑战）。6、对化学灭菌指标剂的影响也不同。、对化学灭菌指标剂的影响也不同。7、纯、纯EO气体不论用负压灭菌还是用正压灭菌，对最

21、终的灭菌效气体不论用负压灭菌还是用正压灭菌，对最终的灭菌效果的影响是很小的。而果的影响是很小的。而EO混合气体目前国内大多采用正压灭菌，混合气体目前国内大多采用正压灭菌，主要是因为包装的因素，正压灭菌可以提高气体对全塑主要是因为包装的因素，正压灭菌可以提高气体对全塑PE包装包装袋等的穿透性。袋等的穿透性。确认中的几个问题确认中的几个问题EO灭菌的温度一般在灭菌的温度一般在45度到度到55度度,湿度湿度40%-80%,那那么温度过高会产生危险吗么温度过高会产生危险吗?对灭菌柜及灭菌的验证对灭菌柜及灭菌的验证,应应注意些什么呢注意些什么呢?不会有危险的不会有危险的.湿度在湿度在40%-80%RH,

22、是很正常的灭菌工艺是很正常的灭菌工艺,温度在这个范围也是温度在这个范围也是正常的正常的.对于验证对于验证,首先要考虑设备是否具备这样加热和加湿能力首先要考虑设备是否具备这样加热和加湿能力,如果有如果有,可以按照这样的参数去验证可以按照这样的参数去验证.验证时验证时,如果采用温度为如果采用温度为45-55度度,一般是一般是45度作为微生物性能鉴度作为微生物性能鉴定的参数设定点定的参数设定点,而而55度则作为物理性能鉴定的参数设定点度则作为物理性能鉴定的参数设定点,然后然后验证得出的温度范围就是验证得出的温度范围就是45-55度度;日常控制的范围则要在日常控制的范围则要在45-55度才可以度才可以

23、.确认中的几个问题确认中的几个问题通过检测生物指示剂通过检测生物指示剂中的细菌芽孢是否存中的细菌芽孢是否存活而判断产品是否达活而判断产品是否达到完全灭菌的效果。到完全灭菌的效果。通过生物指示剂中的细菌芽孢通过生物指示剂中的细菌芽孢模拟出产品带菌的最坏的情况模拟出产品带菌的最坏的情况，如果生物指示剂中的细菌芽，如果生物指示剂中的细菌芽孢被全部杀死，就等同于产品孢被全部杀死，就等同于产品中的微生物全部被杀死。中的微生物全部被杀死。1、菌片、菌片2、内含式、内含式 生物指示剂生物指示剂定义：一种直接由被灭菌物或适宜载体携带是细菌芽孢制剂。定义：一种直接由被灭菌物或适宜载体携带是细菌芽孢制剂。生物指示

24、剂生物指示剂菌片菌片内含式内含式菌片一般是把枯草杆菌菌片一般是把枯草杆菌黑色变种芽孢附着在试黑色变种芽孢附着在试纸上面的一种指示剂。纸上面的一种指示剂。也有把不锈钢片，不锈也有把不锈钢片，不锈钢条作为载体的。这个钢条作为载体的。这个跟据使用的要求而不同。跟据使用的要求而不同。把菌片至于灭菌柜最难把菌片至于灭菌柜最难灭菌的部位，灭菌工艺灭菌的部位，灭菌工艺完成以后，通过完成以后，通过 7 天天37温度下培养基培养，温度下培养基培养，观察有没有长菌而确定观察有没有长菌而确定灭菌是否合格。灭菌是否合格。内含式指示剂一般是一个内含式指示剂一般是一个小塑料瓶子，里面已经包小塑料瓶子，里面已经包含了菌片和

25、培养基。在灭含了菌片和培养基。在灭菌以后，只要把瓶子里面菌以后，只要把瓶子里面的培养基和菌片混合，至的培养基和菌片混合，至于于 37温度培养温度培养 48 小时，小时，观察培养基是否变色就可观察培养基是否变色就可以确定灭菌是否合格。以确定灭菌是否合格。自含式生物指示物是兼菌自含式生物指示物是兼菌片与培养基为一体的生物片与培养基为一体的生物指示物。指示物。生物指示剂生物指示剂Step 1Step 2Step 31、在环氧乙烷灭菌工艺中，全在环氧乙烷灭菌工艺中，全部使用自含式生物指示剂是一个部使用自含式生物指示剂是一个降低系统风险的最理想的选择。降低系统风险的最理想的选择。2、而我们选择不同品牌的

26、生物而我们选择不同品牌的生物指示剂的时候，主要选择的依据指示剂的时候，主要选择的依据就是生物指示剂的芽孢数量和就是生物指示剂的芽孢数量和 D 值的稳定性。值的稳定性。3.2 不同批次生物指示剂之间的不同批次生物指示剂之间的芽孢数量越稳定，表明该生产商芽孢数量越稳定，表明该生产商对于芽孢的控制，和生产中工艺对于芽孢的控制，和生产中工艺的控制能力越好。这样的生物指的控制能力越好。这样的生物指示剂质量就越好。示剂质量就越好。ISO 标准是芽标准是芽孢数量不少于孢数量不少于 1 百万个。如果某百万个。如果某生产商能够提供一个芽孢数量的生产商能够提供一个芽孢数量的范围，这个范围越窄，表面他们范围，这个范

27、围越窄，表面他们越有信心控制质量，质量就越好。越有信心控制质量，质量就越好。生物指示剂的选择生物指示剂的选择3.1 D值跟芽孢个体的健康程度，个值跟芽孢个体的健康程度，个体差异程度，和芽孢的纯净度有关。体差异程度，和芽孢的纯净度有关。这个是最关键的指标。而且这个是生这个是最关键的指标。而且这个是生物指示剂生产商的核心技术。虽然可物指示剂生产商的核心技术。虽然可能每个生产商的技术不同，但是不同能每个生产商的技术不同，但是不同批次之间的批次之间的 D 值越稳定，表明该生产值越稳定，表明该生产商的技术越先进。该指示剂质量就越商的技术越先进。该指示剂质量就越好。好。中国标准中国标准欧洲标准欧洲标准国际

28、标准国际标准 ISO11135 医疗器械医疗器械环氧乙烷灭菌确认和常规控制环氧乙烷灭菌确认和常规控制ISO10993-7医疗器械的生物学评价医疗器械的生物学评价 EO灭菌残留量灭菌残留量GB18279-2000医疗器械医疗器械环氧环氧乙烷灭菌确认和常规控制乙烷灭菌确认和常规控制GB16886.7 医疗器械的生物学医疗器械的生物学评价评价 EO灭菌残留量灭菌残留量GB18281.1 生物指示物生物指示物 通则通则YY0503-2005 环氧乙烷灭菌器环氧乙烷灭菌器EN550 医疗器械医疗器械环氧乙烷环氧乙烷灭菌确认和常规控制灭菌确认和常规控制EN556 标明标明“无菌无菌”的医疗器的医疗器械的要求械的要求EN1422医用灭菌器医用灭菌器环氧乙环氧乙烷灭菌器烷灭菌器要求和检测方法要求和检测方法 相关标准相关标准LOGO