气体毒物及挥发性毒物分析课件.ppt

1、 气体毒物及挥发性毒物气体毒物及挥发性毒物 内容内容 对毒物进行分类介绍。对毒物进行分类介绍。掌握掌握 1.1.中毒特点以及取材和检验的要求。中毒特点以及取材和检验的要求。2.2.毒物的理化共性和特性以及与分离毒物的理化共性和特性以及与分离 检测方法之间的关系。检测方法之间的关系。3.3.常用分离和检测方法的基本原理及常用分离和检测方法的基本原理及 实用意义。实用意义。4.4.各类毒物的代表。各类毒物的代表。主要内容概念和种类取材及保存分离原理及方法常用检测手段乙醇和甲醇氢氰酸及氰化物一氧化碳 概念概念 指常温常压下蒸气压较高，易变成气态分子从检材指常温常压下蒸气压较高，易变成气态分子从检材

2、体系中挥发逸出的有毒化合物。体系中挥发逸出的有毒化合物。特点特点 分子量小、化学结构简单、常温常压下一般为液分子量小、化学结构简单、常温常压下一般为液 体，能随水蒸气蒸馏。体，能随水蒸气蒸馏。种类种类 小分子醇类小分子醇类(甲醇、乙醇）、醛类（甲醛、水合氯甲醇、乙醇）、醛类（甲醛、水合氯 醛）、醚类（乙醚）、卤代烃（四氯化碳、氯仿）醛）、醚类（乙醚）、卤代烃（四氯化碳、氯仿）和苯（苯胺、硝基苯、苯酚）的衍生物等。和苯（苯胺、硝基苯、苯酚）的衍生物等。氰化物因能形成挥发性较大的氢氰酸而归入此类氰化物因能形成挥发性较大的氢氰酸而归入此类。概念概念 指常温常压下以气体状态存在的有指常温常压下以气体状

3、态存在的有 毒化合物。毒化合物。特点特点 分子小、结构简单、中毒途径单一分子小、结构简单、中毒途径单一 （吸入性）。（吸入性）。种类种类 主要包括一些小分子的有机化合物主要包括一些小分子的有机化合物 和一些无机酸碱的分解产物。和一些无机酸碱的分解产物。水煤气水煤气 CO+H2 燃料燃料 天然气天然气 小分子烷烃和少量硫化氢为主小分子烷烃和少量硫化氢为主 液化石油气液化石油气 小分子烷烃和烯烃小分子烷烃和烯烃 沼气沼气 甲烷和硫化氢甲烷和硫化氢 NH3 纤维、化肥等原料纤维、化肥等原料来源来源 工业原料工业原料 SO2 硫酸、硫酸钠合成硫酸、硫酸钠合成 和废气和废气 H2S 纤维燃料制革废气纤维

4、燃料制革废气 NO2 硝酸生产火箭燃料硝酸生产火箭燃料 芥子气芥子气 Cl2CH2CH2-S 军事毒气军事毒气 路易氏气路易氏气 ClCH=CHAsCl2 检材检材 常用血常用血.某些情况下也可用玻璃体、胃内容某些情况下也可用玻璃体、胃内容 物、肺等为检材。物、肺等为检材。保存保存 气体或可变成气体气体或可变成气体 a.尽量不留空间尽量不留空间 b.密闭密闭 c.冷藏冷藏 送检送检 及时及时 气态分子气态分子 气相气相 两相界面两相界面 液态分子液态分子 液相液相 挥发性物质的分子可挥发性物质的分子可以由液态逸散成气态，以由液态逸散成气态，也可由气态凝聚成液也可由气态凝聚成液态。态。在恒温、密

5、闭的容器在恒温、密闭的容器中，中，经过一段时间后，经过一段时间后，气态和液态之间可以气态和液态之间可以达到一个动态平衡。达到一个动态平衡。在一定条件下在一定条件下,气液平衡时，单纯物质气态分子的多气液平衡时，单纯物质气态分子的多少是固定的少是固定的,由其饱和饱和蒸气压的大小决定。由其饱和饱和蒸气压的大小决定。(顶空法顶空法中由气相中浓度得到液相浓度的基础中由气相中浓度得到液相浓度的基础)同一温度下，饱和蒸气压越高的物质同一温度下，饱和蒸气压越高的物质,越易挥发成气体。越易挥发成气体。如：如：30时，水的饱和蒸气压为时，水的饱和蒸气压为4.24KPa，甲醇为，甲醇为21.6KPa。（液相浓度相等

6、的情况下，平衡时蒸汽压越。（液相浓度相等的情况下，平衡时蒸汽压越高的，气相中的浓度越高。）高的，气相中的浓度越高。）物质的饱和蒸气压可随温度升高而增大。水的沸点为物质的饱和蒸气压可随温度升高而增大。水的沸点为100，甲醇沸点为，甲醇沸点为64.5。（可通过加热增加毒物在。（可通过加热增加毒物在气相中的浓度。）气相中的浓度。）检材可看成是以水为溶剂含有多种挥发性组分和难挥发检材可看成是以水为溶剂含有多种挥发性组分和难挥发性组分的稀溶液。性组分的稀溶液。在一定温度下，平衡时溶液的总蒸气压是溶剂水与各挥在一定温度下，平衡时溶液的总蒸气压是溶剂水与各挥发性组分蒸气分压的总和。发性组分蒸气分压的总和。P

7、=Pw+P1+P2+根据根据Roult定律，溶剂水和挥发性组分蒸气分压的大小定律，溶剂水和挥发性组分蒸气分压的大小分别与其摩尔分数成正比。分别与其摩尔分数成正比。Pw=XwPw P1=X1P1 P2=X2P2 X摩尔分数摩尔分数 P饱和蒸气压饱和蒸气压 对某一挥发性成分来讲，液相摩尔分数越大，其蒸气压对某一挥发性成分来讲，液相摩尔分数越大，其蒸气压越高；在液相摩尔分数相同的情况下，饱和蒸气压越大越高；在液相摩尔分数相同的情况下，饱和蒸气压越大的成分，其蒸气压越高。的成分，其蒸气压越高。气液平衡时，气相中水及挥发性组分的摩尔分数，等于各自的气液平衡时，气相中水及挥发性组分的摩尔分数，等于各自的蒸

8、气压与总蒸气压的比值。蒸气压与总蒸气压的比值。Yw=Pw/P=Xw Yw=Pw/P=Xw PwPw/P/P Yi=PiYi=Pi/P/P=Xi =Xi Pi Pi/P/PPi Pi 挥发性组分饱和蒸气压挥发性组分饱和蒸气压 PwPw水饱和蒸气压水饱和蒸气压Y Y气相摩尔分数气相摩尔分数 X X 液相摩尔分数液相摩尔分数由上两式换算可得气相浓度（摩尔比）与液相浓度的关系为：由上两式换算可得气相浓度（摩尔比）与液相浓度的关系为：Y Yi/Yw=Pii/Yw=Pi/Pw/Pw Xi/Xw Xi/Xw Xi/Xw Xi/Xw 相对挥发度相对挥发度(relative volatitile)(relati

9、ve volatitile)当当Pi Pi Pw Pw 时，时，1 1，气相浓度，气相浓度液相浓度。液相浓度。当当Pi Pi Pw Pw 时，时，1 1，气相浓度，气相浓度 液相浓度。液相浓度。气体毒物和挥发性毒物的分离方式气体毒物和挥发性毒物的分离方式 蒸馏法蒸馏法 *直接蒸馏法直接蒸馏法 *水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法 扩散法扩散法 *ConwayConway氏碟氏碟 *WidmarkWidmark瓶瓶 驱气法和抽气法驱气法和抽气法 顶空法顶空法 通过加热提高挥发性组分的蒸气压，使检材溶通过加热提高挥发性组分的蒸气压，使检材溶液沸腾，挥发性组分变成蒸气从溶液中逸出，同液沸腾，挥发性组分变成蒸气

10、从溶液中逸出，同时将蒸气不断地引出加热装置，使之冷却加以收时将蒸气不断地引出加热装置，使之冷却加以收集后供检测用。集后供检测用。收集的蒸气液体称收集的蒸气液体称“馏液馏液”。蒸馏法分为直接蒸馏法和水蒸气蒸馏法。蒸馏法分为直接蒸馏法和水蒸气蒸馏法。适用：适用面广适用：适用面广。直接蒸馏法直接蒸馏法优点优点 简便简便缺点缺点 温度较高，受热不温度较高，受热不 均匀。均匀。馏液中高沸点组分馏液中高沸点组分 浓度降低。浓度降低。适用适用 沸点低、稳定沸点低、稳定 的组分。的组分。水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法 优点优点 检材受热均匀。检材受热均匀。提高馏液中高沸提高馏液中高沸 点组分的浓度，点组分的浓度，缩

11、短蒸馏时间。缩短蒸馏时间。缺点缺点 操作较麻烦。操作较麻烦。适用适用 高沸点、不稳高沸点、不稳 定的组分。定的组分。蒸馏酸性或碱性毒物时，蒸馏前可先适当调节检蒸馏酸性或碱性毒物时，蒸馏前可先适当调节检材的酸碱性，以提高毒物的挥发性。材的酸碱性，以提高毒物的挥发性。收集挥发性较大的酸性或碱性毒物时，可适当用收集挥发性较大的酸性或碱性毒物时，可适当用酸性或碱性溶液进行收集，以减少毒物的挥发损酸性或碱性溶液进行收集，以减少毒物的挥发损失，如氢氰酸。失，如氢氰酸。蒸馏时应防止检材爆沸或蒸干。蒸馏时应防止检材爆沸或蒸干。方法方法：将检材置于一密闭容器中，以一种溶：将检材置于一密闭容器中，以一种溶 剂或化

12、学试剂作为吸收剂，吸收气剂或化学试剂作为吸收剂，吸收气 液平衡时气相中的挥发性组分，然后液平衡时气相中的挥发性组分，然后 对吸收液中的挥发性毒物或消耗剩余对吸收液中的挥发性毒物或消耗剩余 的试剂进行检测。的试剂进行检测。不可逆反应不可逆反应 竭尽法（全部分离）竭尽法（全部分离）吸收剂吸收剂 溶剂吸收溶剂吸收 平衡法（部分分离）平衡法（部分分离）将一种不影响检测的气体（如氮气、空气），将一种不影响检测的气体（如氮气、空气），通过加压（驱气法）或减压（抽气法）的方式通过加压（驱气法）或减压（抽气法）的方式通过检材，同时将检材中的挥发性组分带出，通过检材，同时将检材中的挥发性组分带出，并加以收集。如

13、果不断地通入气体，可使检材并加以收集。如果不断地通入气体，可使检材中的挥发性组分全部得以分离。属于竭尽法。中的挥发性组分全部得以分离。属于竭尽法。分离和检测可以同时进行。分离出的挥发分离和检测可以同时进行。分离出的挥发性组分可通过出口处的试纸直接检测，也可以性组分可通过出口处的试纸直接检测，也可以用溶剂或试剂吸收后再行检测。用溶剂或试剂吸收后再行检测。方法方法 将检材置于一密闭系统中，保持恒温一段时将检材置于一密闭系统中，保持恒温一段时 间间，当气液两相达到平衡时，直接抽取一当气液两相达到平衡时，直接抽取一 定体积的气定体积的气 相用于分相用于分 析。此时，气相中挥发性组分的浓度与液析。此时，

14、气相中挥发性组分的浓度与液 相中的含量有一定的关系。顶空分析与气相色谱法相中的含量有一定的关系。顶空分析与气相色谱法 联用时称顶空气相色谱法（联用时称顶空气相色谱法（head space gas chromatography).特点特点 简便，定量比较麻烦（需加内标）。简便，定量比较麻烦（需加内标）。适用适用 属于平衡法，适用于属于平衡法，适用于蒸气压较高的毒物。蒸气压较高的毒物。检材目的不明确预试筛查定性分析定量分析馏液预试（嗅、观、试、测、验）GC筛查（馏液或顶空、保留值）化学反应、GC、GC-MS化学比色法、GC嗅嗅 特殊气味，如苯胺、来苏儿、硝基苯特殊气味，如苯胺、来苏儿、硝基苯观观

15、色（苯胺加热变红）色（苯胺加热变红）澄清度（苯酚）澄清度（苯酚）分层（氯仿）分层（氯仿）试试 酸碱性（苯胺、苯酚）酸碱性（苯胺、苯酚）测测 紫外光谱（苯的衍生物）紫外光谱（苯的衍生物）验验 类别反应类别反应 溴水反应溴水反应 沉淀（苯酚、苯胺）沉淀（苯酚、苯胺）黄酸盐反应黄酸盐反应 紫红（醇类）紫红（醇类）希夫氏试剂反应希夫氏试剂反应 红（醛类）红（醛类）性质性质 无色、透明液体无色、透明液体 易挥发，乙醇易挥发，乙醇bp.78.4，甲醇甲醇bp.64.5bp.64.5 。能与水、丙酮、乙醚、氯能与水、丙酮、乙醚、氯仿等混溶。仿等混溶。来源来源 A.常用溶剂常用溶剂 B.含酒精饮料含酒精饮料

16、啤酒啤酒36 葡萄酒葡萄酒1030 白酒白酒3565 C.血液腐败时可产生血液腐败时可产生 乙醇，同时产生正乙醇，同时产生正 丙醇（丙醇（201）。）。D.工业酒精中甲醇含工业酒精中甲醇含 量较高量较高乙醇乙醇 主要为中枢抑制，中毒和致死剂量个体差异较大主要为中枢抑制，中毒和致死剂量个体差异较大 （与酶的多少，饮酒习惯等有关）。（与酶的多少，饮酒习惯等有关）。甲醇甲醇 主要为视神经损害，大剂量可致呼吸衰竭死亡。主要为视神经损害，大剂量可致呼吸衰竭死亡。职业违规职业违规 酒后驾车（酒后酒后驾车（酒后20，醉酒，醉酒80）酗酒酗酒 醉酒致死？诱发疾病？醉酒致死？诱发疾病？犯罪犯罪 借酒投毒借酒投毒

17、 灌醉后实施（与其它毒物的关系灌醉后实施（与其它毒物的关系 有无协同作用？是否增加毒性？）有无协同作用？是否增加毒性？）假酒假酒 甲醇甲醇意外意外 检材检材 常用血，现场可用呼气，腐败尸体常用血，现场可用呼气，腐败尸体 可用玻璃体或脑脊液。密闭冷藏。可用玻璃体或脑脊液。密闭冷藏。取材应及时。取材应及时。检测检测 一般目的比较明确，通常需定量。一般目的比较明确，通常需定量。方法方法 化学反应（基本不用），重铬酸钾化学反应（基本不用），重铬酸钾 硫酸比色法，硫酸比色法，GC法（常用）。法（常用）。C-t（1号白酒2小时）0100200300051015时间（h）浓度（mg/L）原理原理 ROH+C

18、S2+KOH ROC=SK（黄酸盐）（黄酸盐）S 钼酸铵钼酸铵 MoO32(ROCSSK)紫红色络合物紫红色络合物 适用适用 醇的类别反应。灵敏度较低，可用于馏液中醇醇的类别反应。灵敏度较低，可用于馏液中醇 类化合物的预试。类化合物的预试。原理原理 I I2 2+KOH +KOH KIO KIO CH CH3 3CHCH2 2OH +KIO CHOH +KIO CH3 3CHOCHO CH CH3 3C-+KIO C-+KIO CHI CHI3 3 O O 碘仿（黄色）碘仿（黄色）适用适用 丙酮、乙醛可干扰。丙酮、乙醛可干扰。区别乙醇和其它醇。区别乙醇和其它醇。原理原理 甲醇氧化剂甲醇氧化剂

19、CuO 甲醛甲醛 反应反应 a.变色酸反应（紫色）变色酸反应（紫色）b.Schiff氏试剂反应（品红）氏试剂反应（品红）c.苯肼铁氰化钾反应（红色）苯肼铁氰化钾反应（红色）适用适用 大量乙醇中检识甲醇。大量乙醇中检识甲醇。原理原理 3C2H5OH+2Cr2O72-+16H+(橙色）橙色）=3CH3COOH+Cr3+11H2O （绿色（绿色600nm）3C2H5OH 2K2Cr2O7 适用适用 测定馏液或扩散吸收液中乙醇的含量。测定馏液或扩散吸收液中乙醇的含量。其它还原性物质也可使重铬酸钾还原，其它还原性物质也可使重铬酸钾还原，使测定值偏高，不能区别乙醇和甲醇，使测定值偏高，不能区别乙醇和甲醇，

20、也不能区别乙醇及其代谢物乙醛。也不能区别乙醇及其代谢物乙醛。样品样品 直接顶空进样直接顶空进样(稀释血、尿）稀释血、尿）蒸馏液蒸馏液 血稀释沉淀蛋白（三氯乙酸）后的上清液血稀释沉淀蛋白（三氯乙酸）后的上清液 检测检测 常采用内标法（异丙醇或叔丁醇，硫酸铵饱和液）常采用内标法（异丙醇或叔丁醇，硫酸铵饱和液）色谱色谱 聚乙二醇类固定液（聚乙二醇类固定液（10PEG400），），FID,柱温柱温 80100，进样口，进样口180180，检测器，检测器180180。特点特点 灵敏度高、分离能力强灵敏度高、分离能力强 可同时进行定性和定量可同时进行定性和定量 可分别测定乙醇及其代谢物可分别测定乙醇及其代

21、谢物 可鉴别乙醇和甲醇或其它具可能干扰的的挥发物可鉴别乙醇和甲醇或其它具可能干扰的的挥发物 质。质。美国Varian 3800GC 美国Dani HSS86.50Headspace血液中乙醇和内标异丙醇的色谱图血液中乙醇和内标异丙醇的色谱图 a.异丙醇异丙醇(tR=4.206min)b.乙乙 醇醇(tR=4.340min)a.甲甲 醛醛(tR=2.036min)b.乙醛乙醛(tR=2.339min)c.甲甲 醇醇(tR=3.487min)d.异丙醇异丙醇(tR=3.859min)e.乙醇乙醇(tR=3.972min)f.正丙醇正丙醇(tR=6.314min)性状性状 无色、无臭、无刺激的气体，

22、分子量无色、无臭、无刺激的气体，分子量28.1，比重略，比重略 轻于空气，易燃烧。轻于空气，易燃烧。来源来源 a.煤气（煤气（CO+H2，占，占630）b.城市天然气中有些也含有少量一氧化碳城市天然气中有些也含有少量一氧化碳 b.有机物不完全燃烧有机物不完全燃烧中毒原因中毒原因 a.意外（热水器、汽车、烤火、着火、煤气泄漏、意外（热水器、汽车、烤火、着火、煤气泄漏、爆破等）爆破等）b.自杀自杀 c.他杀他杀 d.假象（如死后焚尸）假象（如死后焚尸）通常体内血红蛋白通常体内血红蛋白(hemoglobin,Hb)与氧与氧(O2)结合结合形成氧合血红蛋白（形成氧合血红蛋白（oxy hemoglobi

23、n,HbO2),给机给机体组织供。体组织供。当有一氧化碳当有一氧化碳(CO)存在时，一氧化碳则可与血红蛋白存在时，一氧化碳则可与血红蛋白结合结合,生成碳氧血红蛋白生成碳氧血红蛋白(carboxhemoglobin,HbCO)，使血红蛋白失去携，使血红蛋白失去携氧功能而造成中毒。氧功能而造成中毒。HbO2+CO HbCO+O2 HbCO OHbCO O2 2 HbOHbO2 2 CO CO K K平衡平衡 210 210 血红蛋白与一氧化碳结合的能力比与氧结合的能血红蛋白与一氧化碳结合的能力比与氧结合的能 力大力大200多倍。多倍。碳氧血红蛋白占血红蛋白总量的百分比称之为碳碳氧血红蛋白占血红蛋白

24、总量的百分比称之为碳氧血红蛋白饱和度氧血红蛋白饱和度.碳氧血红蛋白量碳氧血红蛋白量 HbCO(%)=100%血红蛋白总量血红蛋白总量 碳氧血红蛋白饱和度是判断一氧化碳中毒严重程碳氧血红蛋白饱和度是判断一氧化碳中毒严重程度的重要指标，饱和度越高，机体缺氧越严重。度的重要指标，饱和度越高，机体缺氧越严重。正常情况正常情况102020 死亡死亡6060检材检材 最好是新鲜心血，炭化尸体可取骨髓。最好是新鲜心血，炭化尸体可取骨髓。保存保存 尽量少留空间尽量少留空间 密闭冷藏密闭冷藏 不能用甲醛固定不能用甲醛固定检验要求检验要求 及时及时 定量定量 分类机理检测HbCO检测CO利用HbCO和HbO2性质

25、上的差异，直接检测HbCO。将HbCO中的CO释放出来，检测CO。化学法UVvis氯化钯法GC原理原理 HbCO性质比性质比HbO2稳定，在稳定，在 外界因素作用下，与外界因素作用下，与 HbO2相相 比，能较长时间地保持其鲜比，能较长时间地保持其鲜 红色。饱和度大红色。饱和度大 于于20时结时结 果比较明显。饱和度越大，果比较明显。饱和度越大，红色保持得越久。红色保持得越久。方法方法 a.加热法加热法 b.氢氧化钠法氢氧化钠法 适用适用 简便、快速，无需特殊仪简便、快速，无需特殊仪 器。适合现场或基层快速器。适合现场或基层快速 做出初步判断。做出初步判断。吸收光谱吸收光谱 Hb、HbCO和和

26、HbO2分别在分别在420nm左右和左右和500600nm处处有两个吸收带，利用三者光谱有两个吸收带，利用三者光谱上得差异可检测上得差异可检测HbCO的饱和的饱和度。度。检测方法检测方法 还原光谱法还原光谱法 直接测定法直接测定法 双波长吸光度比值法双波长吸光度比值法 双波长等吸收度比值法双波长等吸收度比值法 蛋白蛋白 吸收峰（吸收峰（nm）Hb 555 HbO2 540 576 HbCO 538 568 中毒血中主要有中毒血中主要有HbCO、HbO2和和Hb，所测光谱为三种蛋白的，所测光谱为三种蛋白的叠加光谱，如果先用还原剂将叠加光谱，如果先用还原剂将血中的血中的HbO2还原成还原成Hb，所

27、测，所测的就是的就是Hb 和和HbCO的叠加光谱。的叠加光谱。叠加光谱的形状因饱和度不同叠加光谱的形状因饱和度不同而不同。而不同。先用饱和度为先用饱和度为0%的血通的血通CO制备制备饱和度为饱和度为100的血，再按一定比的血，再按一定比例混合，制成不同饱和度的血，并例混合，制成不同饱和度的血，并分别测定吸收光谱。分别测定吸收光谱。饱和度越低的血，越接近饱和度越低的血，越接近Hb 的吸收光谱；饱和度越高的，越接的吸收光谱；饱和度越高的，越接近近HbCO的光谱。的光谱。检血用连二亚硫酸钠还原后半检血用连二亚硫酸钠还原后半定量。定量。饱和度饱和度 419nm(HbCOHbCO)吸收度吸收度 通通OO

28、2 2（HbOHbO2 2)0%A)0%A0 0稀释检血稀释检血 通通CO(HbCO)100%ACO(HbCO)100%A100100 X%Ax X%Ax Ax Ax A A0 0按下式计算饱和度按下式计算饱和度:HbCO(%)=:HbCO(%)=100%100%A A100100A Ao o 特点：操作简便，但稀释倍数高，准确度下降。特点：操作简便，但稀释倍数高，准确度下降。原理原理 血样还原后，测得的吸光度为血样还原后，测得的吸光度为Hb和和HbCO吸光吸光度的加和值，分别测定度的加和值，分别测定538nm 和和555nm处的吸处的吸收度，并计算二者的比值收度，并计算二者的比值。HbCOm

29、ax=538nm Hbmax=555nm 饱和度饱和度，则，则A A538538,A,A555555,A,A538538/A/A555555。A A538538/A/A555555值与饱和度之间有近似的直线关系，通值与饱和度之间有近似的直线关系，通过测定空白血、过测定空白血、100100饱和血和检血的吸光度比饱和血和检血的吸光度比值值,可换算出可换算出HbCOHbCO的饱和度。的饱和度。方法方法 空白空白 还原剂还原剂 0血血 A0（538/555)稀释血稀释血 100%血血 A100（538/555)稀释检血还原剂稀释检血还原剂 x血血 AX（538/555x）计算计算 AX（538/555

30、x）A0（538/555)HbCO(）X100%A100（538/555)A0（538/555)原理原理 检血经还原后，血中主要为检血经还原后，血中主要为Hb和和HbCO。在。在500 600nm吸收带，选择两个合适的波长（如吸收带，选择两个合适的波长（如530nm和和580nm），），分别测定吸光度值。在这两分别测定吸光度值。在这两 个波长处，个波长处，Hb的吸收相等，的吸收相等，HbCO 的吸收差值较大。利用差示法可消除的吸收差值较大。利用差示法可消除Hb的吸收，使吸收差值的吸收，使吸收差值Ax Ax 仅与仅与HbCO 的含量成正比。然后再测定同一血样饱和度为的含量成正比。然后再测定同一血

31、样饱和度为100时的吸光度差值时的吸光度差值A A100100，即可从二者的比值求得血中，即可从二者的比值求得血中HbCOHbCO的饱和度。的饱和度。A A1 1=A=AHb1Hb1+A+AHbCO1HbCO1 (1)(1)A2=A A2=AHb2Hb2+A+AHbCO2HbCO2 (2)(2)(1)(1)（2 2）A A1 1A A2 2=(A=(AHb1Hb1+A+AHbCO1HbCO1)(A(AHb2Hb2+A+AHbCO2HbCO2)得：得：A=AA=AHbCO1HbCO1 A AHbCO2HbCO2 AxAx 方法方法稀释检血还原剂稀释检血还原剂 测测Ax(530-584)通通CO

32、测测A100(530-584)计算计算 AxAx HbCO(%)=X100 A A100100依据吸收度的加和性，依据吸收度的加和性，通过测定两个波长吸收通过测定两个波长吸收度的差值，可扣除干扰度的差值，可扣除干扰物（物（Hb）的吸收，得到）的吸收，得到HbCO的吸收度差值，此的吸收度差值，此差值与差值与 HbCO的量成正比。的量成正比。A530=AHbCO(530)+AHb(530)A584=AHbCO(584)+AHb(584)A530-A584=AHbCO(530)+AHb(530)-AHbCO(584)-AHb(584)Ax=Ax=AHbCO(530)-AHbCO(584)A A100

33、 100=A=A100(530)100(530)-A-A100(584)100(584)HbCO(%)=Ax/Ax/A A100100 100%100%说明说明 此法操作简便、快速。此法操作简便、快速。检血不需准确稀释。检血不需准确稀释。等吸收波长测定后，只要仪器和条件不变，不必等吸收波长测定后，只要仪器和条件不变，不必每次都测。每次都测。Hb的等吸收波长很多，应选的等吸收波长很多，应选HbCO吸收差值较大吸收差值较大的两个波长。的两个波长。原理原理 在密闭容器中在密闭容器中,钯离子可定钯离子可定量吸收并氧化血中释放出来的量吸收并氧化血中释放出来的CO,同时同时,钯离子被还原成金属钯离子被还原

34、成金属钯钯,在吸收液表面形成一层金属在吸收液表面形成一层金属膜膜,即钯镜即钯镜.PdCl2+CO+H2O=Pd+2HCl+CO2 根据所加入和消耗的钯离子的根据所加入和消耗的钯离子的量量,可计算出可计算出CO的量的量.装置装置 检血检血+稀硫酸稀硫酸 氯化钯溶液氯化钯溶液说明说明 吸收吸收1mol的的CO,需消耗需消耗1mol的氯化钯的氯化钯.消耗消耗的氯化钯量可通过测定吸收前后的氯化钯量可通过测定吸收前后278nm处处氯化钯溶液的吸收度差值计算得到氯化钯溶液的吸收度差值计算得到.A1=EC1L A2=EC2L A=EL C C=A/EL 按按1个个HbCO与与4个个CO结合进行换算结合进行换算(1mgCO相当相当576gHbCO),根据人平均血红根据人平均血红蛋白可估算出蛋白可估算出HbCO饱和度饱和度.检材检材 血血、空气空气分离分离 加释放剂（加释放剂（25乳酸）乳酸）顶空法顶空法 色谱柱色谱柱 吸附柱吸附柱 分子筛分子筛检测器检测器 热导检测器（热导检测器（TCD）CO 氢火焰离子检测器氢火焰离子检测器(FID）H CO CH4 优点优点 对腐败检材效果较好对腐败检材效果较好