授课用-沪科版生物高中拓展型课程《微生物课件(共70张).ppt

1、1*微 生 物*是肉眼难以看清的各是肉眼难以看清的各类生物的总称。类生物的总称。（一般体形在（一般体形在0.10.1毫米毫米以下的小生物。）以下的小生物。）2第一节、微生物学的建立n一、第一个看见并描述微生物的人一、第一个看见并描述微生物的人n1717世纪世纪 列文列文虎克虎克(荷兰荷兰)n16741674年他用自制显微镜观察到了被他称为年他用自制显微镜观察到了被他称为“小动小动物物”的细菌，首次揭示了一个崭新的微生物世界。的细菌，首次揭示了一个崭新的微生物世界。3n二、主要科学家：二、主要科学家：n法国微生物学家：巴斯德法国微生物学家：巴斯德n德国细菌学家：科赫德国细菌学家：科赫n1919世

2、纪中期后，微生物学的建立世纪中期后，微生物学的建立4n1.1.巴斯德的重要成就：巴斯德的重要成就：nA.A.研究清楚了微生物发酵过程；研究清楚了微生物发酵过程；nB.B.发明发明“巴氏消毒法巴氏消毒法”：P5P5n加热到加热到6262，保持，保持30min,30min,杀死有害杀死有害微生物。用于牛奶、奶酪、啤酒等消微生物。用于牛奶、奶酪、啤酒等消毒。毒。nC.C.提出提出“微生物致病论微生物致病论”。nD.D.研究新的治病法研究新的治病法免疫法，发明免疫法，发明了炭疽病疫苗和狂犬病疫苗。了炭疽病疫苗和狂犬病疫苗。5nE.E.设计了曲颈瓶实验：设计了曲颈瓶实验：P5P5图图n*否定了否定了“自

3、然发生说自然发生说”的的n*证明只有在活细菌存在条件下才能繁证明只有在活细菌存在条件下才能繁殖出新的细菌殖出新的细菌n*自然发生说自然发生说:n生物体是从无生物体是从无生命物质自然发生命物质自然发生的。生的。6n实验过程：实验过程：P5P5nA A瓶：煮沸的肉汤几天后仍保持澄清瓶：煮沸的肉汤几天后仍保持澄清nB B瓶：未煮沸的肉汤几天后变混浊瓶：未煮沸的肉汤几天后变混浊nA A瓶去除曲颈玻璃管后：肉汤变混浊瓶去除曲颈玻璃管后：肉汤变混浊n证明微生物不是从营养液中自然发生的，证明微生物不是从营养液中自然发生的，而是来自空气中原已存在的微生物。而是来自空气中原已存在的微生物。n*导测导测P206P

4、206综合题综合题/2/27n*2.科赫的主要成就：（补充）n第一次发现分离出伤寒杆菌、炭疽杆菌、霍乱弧菌、结核病细菌；n第一次发现了鼠蚤传播鼠疫的秘密；n第一次证明一种特定的微生物引起一种特定疾病；n发明了蒸汽灭菌法。n制定科赫法则：为研究病原微生物制订的严格准则n创立了固体培养基划线分离纯种法。8n*原核生物类群原核生物类群n 细菌（真细菌、古细菌）、放线菌、细菌（真细菌、古细菌）、放线菌、支原体、支原体、衣原体、立克次氏体、蓝藻衣原体、立克次氏体、蓝藻（蓝细菌）等（蓝细菌）等n*真核生物类群真核生物类群n 真菌（酵母菌、霉菌、蕈）真菌（酵母菌、霉菌、蕈）n 原生生物（单细胞藻类、原生动物

5、、原生生物（单细胞藻类、原生动物、黏菌）黏菌）n*非细胞生物类群非细胞生物类群n 病毒病毒第二节 微生物类群9（一）原核生物类群（一）原核生物类群包括细菌、放线菌、蓝藻、支原体、包括细菌、放线菌、蓝藻、支原体、立克次氏体、衣原体等。立克次氏体、衣原体等。n*共同结构：共同结构：n细胞壁、细胞膜、细胞质、拟核（无核细胞壁、细胞膜、细胞质、拟核（无核膜、含膜、含DNADNA，无染色体）、核糖体，无染色体）、核糖体唯一细胞器唯一细胞器101.1.细菌细菌 *形态形态球菌、杆菌、螺菌球菌、杆菌、螺菌 *（广义的细菌范畴包括放线菌、支原（广义的细菌范畴包括放线菌、支原体、衣原体等）体、衣原体等）（1 1

6、）真细菌）真细菌 生活在通常环境条件下生活在通常环境条件下11n细菌的三种细菌的三种主要形态主要形态杆菌杆菌球菌球菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌乳酸杆菌乳酸杆菌12a.特殊结构：特殊结构：质粒（小型环状质粒（小型环状DNADNA分子）分子）其其上含有一些抗性基因上含有一些抗性基因鞭毛：运动（某些细菌）鞭毛：运动（某些细菌）*细胞壁成分：粘肽（肽聚糖）组细胞壁成分：粘肽（肽聚糖）组成，成，青霉素抑制其合成青霉素抑制其合成13芽孢：芽孢：P10 环境不利环境不利菌体外形成厚荚菌体外形成厚荚膜膜菌体成为菌体成为休眠体休眠体，既是，既是芽芽孢孢条件适宜时萌发成一个细条件适宜时萌发成一个细菌。菌。n一般

7、一般121121，15min15min以上才能杀灭以上才能杀灭芽孢。芽孢。14b.b.细菌的繁殖细菌的繁殖一般为分裂繁殖一般为分裂繁殖无丝分裂无丝分裂细菌的变异只有基因突变。因无减数分裂，所以无细菌的变异只有基因突变。因无减数分裂，所以无基因重组；无染色体，故无染色体变异。基因重组；无染色体，故无染色体变异。15nC.C.细菌在自然界的主要作用细菌在自然界的主要作用P10n *分解者：大多数分解者：大多数 （腐生细菌）（腐生细菌）n *生产者：光合细菌、化能自养细菌生产者：光合细菌、化能自养细菌（如硝化细菌等）（如硝化细菌等）n *消费者：寄生细菌（一般为致病菌）消费者：寄生细菌（一般为致病菌

8、）n共生现象：如人体内的正常菌群的作用共生现象：如人体内的正常菌群的作用P1016共生：两种生物生活在共生：两种生物生活在一起，互相有利，分开一起，互相有利，分开后两种或一种生物不能后两种或一种生物不能独立生存的现象。独立生存的现象。根瘤菌是一种固氮菌根瘤菌是一种固氮菌细菌在自然界氮循环中的作用细菌在自然界氮循环中的作用P13P1317（2 2）古细菌）古细菌:生活在极端环境条件下生活在极端环境条件下nA.A.与真细菌的不同与真细菌的不同n*细胞壁组成不同，细胞壁组成不同，青霉素不能抑制其合青霉素不能抑制其合成成。n*对抗菌素利福平不敏感，与真核细胞相对抗菌素利福平不敏感，与真核细胞相似（似（

9、利福平可抑制细菌利福平可抑制细菌RNARNA的合成的合成）n*有些类群有些类群cellcell内的内的核酸、蛋白质耐高温核酸、蛋白质耐高温。18nB.B.典型代表典型代表n产甲烷菌：严格缺氧产甲烷菌：严格缺氧甚至高温环境甚至高温环境n极端嗜热菌：热泉、极端嗜热菌：热泉、海底活火山周围，海底活火山周围，82 82 110110，且，且耐高压耐高压n极端嗜盐菌：最适盐极端嗜盐菌：最适盐浓度浓度3 34mol/L4mol/Ln嗜酸菌：最适嗜酸菌：最适PH0.7PH0.7产甲烷菌产甲烷菌P11P111212*其生存的极端环境与地球早期环境相似，因此古细菌在生物进化上有重要地位，是研究进化的好材料。古细

10、菌为何会引起高度关注？*古细菌有耐热、耐酸、耐高渗种类，在生物工程上有潜在实用价值。19n2.2.放线菌放线菌P11P11n细菌范畴内的原核生细菌范畴内的原核生物物n细胞形态：分支状菌丝细胞形态：分支状菌丝n繁殖：孢子繁殖繁殖：孢子繁殖n分布：主要在土壤，能产分布：主要在土壤，能产生抗生素生抗生素20n3.3.蓝细菌（蓝藻）蓝细菌（蓝藻）n细胞质基质中含光合细胞质基质中含光合色素色素n代谢类型：自养需氧代谢类型：自养需氧型型n属于生产者属于生产者n典型代表：颤藻典型代表：颤藻发菜：一种陆生的蓝藻发菜：一种陆生的蓝藻21n蓝细菌曾被称为蓝藻或蓝绿藻，是一类分布很广，含有叶绿素a，能够在光合作用时

11、释放氧气的原核微生物。蓝细菌主要以二分裂或多分裂方式进行繁殖，少数蓝细菌可形成孢子，孢子壁厚，能抵抗不良环境。由成串细胞连成丝状的蓝细菌，在细胞链断裂时形成的片段，称之为链丝段，具有繁殖功能。n蓝细菌有广泛的分布，从水生到陆生生态系统，从热带到南北极都有分布。它们已经被证实:可以通过氮气的固定来提高稻田和其他土壤的肥力方面有重要作用。蓝细菌是海洋生态系统的重要组成部分和海洋初级生产力的重要组成部分。22（二）真核生物类群（二）真核生物类群n具有完整细胞结构（有核膜、各具有完整细胞结构（有核膜、各种细胞器等）、有染色体种细胞器等）、有染色体n1.1.真菌真菌：n大部分营腐生生活（属于分解大部分营

12、腐生生活（属于分解者）、进行孢子繁殖者）、进行孢子繁殖23n（1 1）酵母菌）酵母菌在自然界作用：分解者在自然界作用：分解者出芽生殖（环境适宜，一出芽生殖（环境适宜，一般进行有氧呼吸）、或孢般进行有氧呼吸）、或孢子繁殖子繁殖单细胞单细胞应用：酿酒、发面（制应用：酿酒、发面（制面包馒头等）面包馒头等）24n（2 2）霉菌：）霉菌：n多细胞多细胞n*基本结构：分支的长丝基本结构：分支的长丝状细胞组成的菌丝状细胞组成的菌丝集集合合团块状菌丝体团块状菌丝体n*繁殖方式：孢子繁殖繁殖方式：孢子繁殖n无性孢子（无性孢子（孢子囊孢子、孢子囊孢子、分生孢子分生孢子），有性孢子），有性孢子（接合孢子接合孢子）n

13、*在自然中的作用：大多在自然中的作用：大多为分解者为分解者n*典型代表：青霉、根霉、典型代表：青霉、根霉、曲霉等曲霉等菌丝菌丝孢子孢子25孢子孢子*应用：发酵生产抗菌素、酶制剂、食应用：发酵生产抗菌素、酶制剂、食品发酵等品发酵等*寄生种类可致病：皮肤癣症等寄生种类可致病：皮肤癣症等26n（3 3）蕈）蕈蘑菇等蘑菇等 P15P15结结构构地上：子实体地上：子实体菌盖：菌盖：菌柄菌柄菌褶菌褶地下：地下：丝状，与菌柄相连丝状，与菌柄相连繁殖方式：孢子繁殖繁殖方式：孢子繁殖在自然界作用：在自然界作用：分解者分解者272.2.原生生物原生生物n（1 1）单细胞藻类）单细胞藻类广泛分布于各种水体广泛分布于

14、各种水体n*共同结构：单细胞，具有含共同结构：单细胞，具有含光合色素光合色素的细的细胞器胞器n*典型代表典型代表n 衣藻衣藻 绿色，可运动，叶绿体杯状绿色，可运动，叶绿体杯状n 小球藻小球藻 绿色，不运动绿色，不运动n 甲藻甲藻 黄绿色黄绿色n 硅藻硅藻 粉红色，细胞壁含粉红色，细胞壁含SiOSiO2 2构成精致斑纹构成精致斑纹衣藻、小球藻属于绿藻衣藻、小球藻属于绿藻光合色素不一定与高等植物相同光合色素不一定与高等植物相同28衣藻衣藻硅硅 藻藻小球藻小球藻一种甲藻一种甲藻29n*繁殖方式：繁殖方式：n无性繁殖无性繁殖(细胞分裂、孢子繁殖细胞分裂、孢子繁殖)n有性繁殖：通常发生於生活史中的有性繁

15、殖：通常发生於生活史中的艰难时期艰难时期(如不利的环境条件如不利的环境条件)。30n*在自然界的作用在自然界的作用n生产者，光合作用增加水的含氧量生产者，光合作用增加水的含氧量n有害：有害：P15P15n大量繁殖可形成赤潮大量繁殖可形成赤潮n 大量消耗水中氧气导致水生动物死亡大量消耗水中氧气导致水生动物死亡n某些甲藻产生神经毒素，通过食物某些甲藻产生神经毒素，通过食物链危害水生动物和人类。链危害水生动物和人类。31（2 2）原生动物）原生动物n*共同结构：几乎都是能运动的单细胞动物，共同结构：几乎都是能运动的单细胞动物，具一个或多个细胞核。具一个或多个细胞核。n*繁殖：繁殖：n 无性繁殖：一般

16、为分裂生殖（无丝或有丝无性繁殖：一般为分裂生殖（无丝或有丝分裂）分裂）n 有性生殖：少数种类，环境不利时有性生殖：少数种类，环境不利时n*在自然界作用：消费者在自然界作用：消费者n典型代表：变形虫、草履虫、疟原虫等典型代表：变形虫、草履虫、疟原虫等32疟原虫疟原虫疟疾的病原体疟疾的病原体疟原虫破坏的红细胞疟原虫破坏的红细胞33n(3)(3)黏菌：黏菌：P18n一类介于原生动物和真菌之间的真核生物一类介于原生动物和真菌之间的真核生物营养体营养体细胞型：似变形虫细胞型：似变形虫非细胞型：一团含许多细胞核非细胞型：一团含许多细胞核的原生质团的原生质团多头绒泡黏菌多头绒泡黏菌*结构特点：无细胞壁结构特

17、点：无细胞壁摄食：吞噬细菌、有机物颗粒摄食：吞噬细菌、有机物颗粒34摄于美国奥林匹克国家公园的黏菌摄于美国奥林匹克国家公园的黏菌 35n繁殖方式之一：繁殖方式之一：孢子繁殖（条件孢子繁殖（条件恶劣时）恶劣时）草坪上的黏菌与其草坪上的黏菌与其移动轨迹移动轨迹36（三）非细胞类群（三）非细胞类群病毒病毒n1.1.结构特点：结构特点：n蛋白质：构成衣壳蛋白质：构成衣壳n核酸：位于中心，构核酸：位于中心，构 成核心成核心n一种病毒只含有一种一种病毒只含有一种核酸：核酸：DNADNA或或RNARNA。n营养方式：寄生营养方式：寄生37噬菌体：只有噬菌体：只有DNADNA烟草花叶病毒：只烟草花叶病毒：只有

18、有RNARNA38n*病毒类型：病毒类型：n裸病毒（无包膜）裸病毒（无包膜）结构结构1 1，4 4，6 6分别是指分别是指 衣壳衣壳 ，成分是，成分是 蛋白蛋白质质 。2 2，3 3，5 5分别代表的物质是分别代表的物质是 核酸核酸 ，一种病毒只含有一种一种病毒只含有一种 核酸，核酸，DNADNA或或RNA RNA 。39n包膜病毒：包膜病毒：HIVHIV、EBVEBV埃博拉埃博拉(EBOLA)(EBOLA)病病毒毒 1234HIVHIV1.1.包膜包膜 2.2.包膜子粒包膜子粒3.3.蛋白质衣壳蛋白质衣壳 4.RNA4.RNA40n埃博拉病毒（埃博拉病毒（EBVEBV）:属丝状病毒科，呈长丝

19、状体，属丝状病毒科，呈长丝状体，单股负链单股负链RNARNA病毒病毒，有，有18,95918,959个碱基，分子量为个碱基，分子量为4.174.171010。外有包膜，外有包膜，病毒颗粒直径大约病毒颗粒直径大约80nm80nm，大，大小小100nm100nm（30030015001500）nmnm，感染能力较强的病毒，感染能力较强的病毒一般长（一般长（665665805)nm805)nm左右，有分支形、左右，有分支形、U U形、形、6 6形或形或环形，分支形较常见。有囊膜，表面有（环形，分支形较常见。有囊膜，表面有（8 810)nm10)nm长的纤突。纯病毒粒子由一个螺旋形核糖核壳复合长的纤突

20、。纯病毒粒子由一个螺旋形核糖核壳复合体构成，含负链线性体构成，含负链线性RNARNA分子和分子和4 4个毒粒结构蛋白。个毒粒结构蛋白。EBV41天花病毒天花病毒流感病毒流感病毒非非典典病病毒毒放大放大3535万倍的艾滋病万倍的艾滋病毒毒HIVHIV一些一些RNA病毒病毒禽流感病毒禽流感病毒H5N142结构简单个体微小结构简单个体微小（体积小、面积大，有利于物质代（体积小、面积大，有利于物质代谢）谢）n分布广、种类多分布广、种类多 n营养方式多样（吸收多转化快）营养方式多样（吸收多转化快）n生长繁殖快生长繁殖快n适应强、变异频适应强、变异频*微生物的共同特征微生物的共同特征高等生物无法高等生物无

21、法具备的特征具备的特征 P1843第三节第三节 微生物的营养微生物的营养44n一、营养物质的种类和功能一、营养物质的种类和功能营养物质营养物质 主要种类主要种类功能功能碳源碳源COCO2 2、糖类（葡萄、糖类（葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉、糖、淀粉、纤维纤维素素）脂肪酸脂肪酸 合成有机物的合成有机物的碳源，大多可碳源，大多可作为能源作为能源（COCO2 2不是能源）不是能源）45氮源氮源蛋白胨（多肽混合蛋白胨（多肽混合物）、铵盐、硝酸盐、物）、铵盐、硝酸盐、嘌呤、嘧啶、尿素、嘌呤、嘧啶、尿素、胺、分子氮（胺、分子氮（N2）等）等用于合成蛋白用于合成蛋白质、核酸等含质、核酸等含氮物质

22、氮物质无机无机盐盐P S Cl Mg FeNa K Ca Mn Zn Mo Cu等无机化合等无机化合物物 酶的成分，酶的成分，调节渗透压等调节渗透压等*有机物氮源（如蛋白胨等）也可以作为碳有机物氮源（如蛋白胨等）也可以作为碳源，但是碳源物质不能作氮源源，但是碳源物质不能作氮源46生长因子：生长因子：p20 微生物微生物自己不能合成自己不能合成或合成量不足，或合成量不足，但又是生长代但又是生长代谢必需的物质。谢必需的物质。维生素、氨基酸、维生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶嘌呤和嘧啶 含含N N碱基碱基 等等（酵母浸膏、牛肉（酵母浸膏、牛肉浸膏等天然物质已浸膏等天然物质已含有某些生长因子）含有某些生长因子

23、）一些酶和一些酶和核酸的成核酸的成分，调节分，调节代谢代谢水水生长代谢必不可少的成分生长代谢必不可少的成分*有些微生物不需要生长因子也能生长，如光有些微生物不需要生长因子也能生长，如光合作用的微生物、大肠杆菌等合作用的微生物、大肠杆菌等47二二.微生物的营养类型微生物的营养类型碳源碳源能源能源实例实例光能自养需光能自养需氧型氧型光能自养厌光能自养厌氧型氧型化能化能自养需自养需氧型氧型异养需氧型异养需氧型异养兼性厌异养兼性厌氧型氧型异养厌氧型异养厌氧型CO2CO2CO2有机物有机物有机物有机物有机物有机物光能光能光能光能氧化氧化NH3等无等无机物机物分解有机物分解有机物分解有机物分解有机物分解有

24、机物分解有机物单细胞藻类、单细胞藻类、蓝细菌等蓝细菌等光合细菌光合细菌硝化细菌等硝化细菌等大多数细菌和大多数细菌和真核微生物真核微生物乳酸菌乳酸菌酵母菌酵母菌48n光合细菌光合细菌(简称简称PSB)PSB)是地球上出现最早、自然界中普遍是地球上出现最早、自然界中普遍存在、具有原始光能合成体系的原核生物，是在厌氧条存在、具有原始光能合成体系的原核生物，是在厌氧条件下进行件下进行不放氧光合作用不放氧光合作用的细菌的总称。的细菌的总称。n是一类以光作为能源、能在厌氧光照或好氧黑暗条件下是一类以光作为能源、能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然界中的有机物、硫化物、氨等作为供氢体兼碳利用自然界中的有机物

25、、硫化物、氨等作为供氢体兼碳源进行光合作用的微生物。源进行光合作用的微生物。n光合细菌广泛分布于自然界的土壤、水田、沼泽、湖泊、光合细菌广泛分布于自然界的土壤、水田、沼泽、湖泊、江海等处，主要分布于水生环境中光线能透射到的缺氧江海等处，主要分布于水生环境中光线能透射到的缺氧区。区。n在水产养殖中，能够降解水体中的亚硝酸盐、硫化物等在水产养殖中，能够降解水体中的亚硝酸盐、硫化物等有毒物质，实现充当饵料、净化水质、预防疾病、作为有毒物质，实现充当饵料、净化水质、预防疾病、作为饲料添加剂等功能，光合细菌适应性强，能忍耐高深度饲料添加剂等功能，光合细菌适应性强，能忍耐高深度的有机废水和较强的分解转化能

26、力，对酚、氰等毒物有的有机废水和较强的分解转化能力，对酚、氰等毒物有一定有忍受和分解能力等特点，它的诸多特性，使其在一定有忍受和分解能力等特点，它的诸多特性，使其在无公害水产养殖中具有巨大的应用价值。无公害水产养殖中具有巨大的应用价值。49三三.培养基培养基人工配制的适合微生物生长繁人工配制的适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质殖或产生代谢产物的营养基质n1.1.配制原则配制原则nA.A.选择适宜的营养物质选择适宜的营养物质nB.B.注意各种营养物质的浓度、比例、适宜的注意各种营养物质的浓度、比例、适宜的PHPHnC.C.配制后进行严格灭菌配制后进行严格灭菌n 高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌

27、法高压灭菌锅高压灭菌锅 n 1.05/cm1.05/cm2 2,121,121，151530min30min为什么采用为什么采用121 121 灭菌？灭菌？P20 此温度以上才能杀死培养基中的细菌芽孢。此温度以上才能杀死培养基中的细菌芽孢。502.2.培养基的类型培养基的类型nA.A.通用培养基：通用培养基：P21n满足多种微生物的需求满足多种微生物的需求n 如牛肉膏蛋白胨培养基如牛肉膏蛋白胨培养基含天然物质，含碳源、氮源、含天然物质，含碳源、氮源、生长因子等生长因子等51n*P20n能光合作用的微生物，培养基只需简单的能光合作用的微生物，培养基只需简单的无机盐和水无机盐和水n异养微生物，培养

28、基需加入成分较多异养微生物，培养基需加入成分较多n 例如：例如：n 大肠杆菌：大肠杆菌：需加入蔗糖、水、无机盐等需加入蔗糖、水、无机盐等n 酵母菌：酵母菌：可用豆芽汁蔗糖培养基可用豆芽汁蔗糖培养基n 大多数细菌：大多数细菌：用牛肉膏蛋白胨培养基用牛肉膏蛋白胨培养基52nB.B.选择培养基选择培养基培养特定的微生物培养特定的微生物 2121n具有选择作用的培养基，即通过使培养基缺失具有选择作用的培养基，即通过使培养基缺失某种物质或加入某种物质，或某种特殊的反应某种物质或加入某种物质，或某种特殊的反应选择出特定微生物，称为选择培养基。选择出特定微生物，称为选择培养基。n例：例：n缺氮培养基缺氮培养

29、基选出自生固氮菌；选出自生固氮菌；n加青霉素等抗生素加青霉素等抗生素选出抗药性细菌或真核选出抗药性细菌或真核微生物微生物n加高浓度加高浓度NaClNaCl选出耐盐菌选出耐盐菌n用纤维素为唯一碳源用纤维素为唯一碳源选出以分解纤维素为选出以分解纤维素为唯一碳源的微生物唯一碳源的微生物n不含有机碳源的培养基不含有机碳源的培养基选出自养微生物选出自养微生物n 53n加伊红、美兰染料加伊红、美兰染料选出大肠杆菌选出大肠杆菌（菌落呈现有金属光泽的紫黑色）（菌落呈现有金属光泽的紫黑色）n（*鉴别培养基）鉴别培养基）：n在培养基中加入某种试剂或化学药品，在培养基中加入某种试剂或化学药品，使难以区分的微生物经培

30、养后呈现出明使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别，快速鉴别某种微生物。这样的显差别，快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴别培养基。）培养基称之为鉴别培养基。）54n选择培养基与鉴别培养基的主要区别：选择培养基与鉴别培养基的主要区别：n选择培养基上的微生物，有选择培养基上的微生物，有2 2种或两种以种或两种以上时，只有适应环境（选择培养基的营上时，只有适应环境（选择培养基的营养基础）的微生物才能存活。养基础）的微生物才能存活。n鉴别培养基上的微生物，有两种或两种鉴别培养基上的微生物，有两种或两种以上时，在培养基中加入某种试剂或化以上时，在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种

31、变化，从学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物（但培养基上而区别不同类型的微生物（但培养基上的各个微生物种类均不死亡）。的各个微生物种类均不死亡）。55n3.3.培养基的形态：培养基的物理状态培养基的形态：培养基的物理状态nA.A.液体培养基：液体培养基：n应用：微生物培养、计数、利用微生应用：微生物培养、计数、利用微生物发酵生产物发酵生产获得特定产物（例如利用获得特定产物（例如利用酵母菌酿酒）酵母菌酿酒）n 缺点：分离纯化微生物困难缺点：分离纯化微生物困难nB.B.固体培养基：固体培养基：n加入琼脂做凝固剂（琼脂的优点加入琼脂做凝固剂（琼脂的优点 P21P21）n应用：鉴定

32、菌种、应用：鉴定菌种、分离提纯微生物分离提纯微生物，保存菌种等保存菌种等n微生物在其上形成微生物在其上形成菌落菌落56n各种微生物在一定条件下形成的各种微生物在一定条件下形成的菌落特征菌落特征（如大小、形状、边缘、表面、质地、颜（如大小、形状、边缘、表面、质地、颜色等）具有一定的稳定性，色等）具有一定的稳定性，是衡量菌种纯是衡量菌种纯度、辨认和鉴定菌种的重要依据度、辨认和鉴定菌种的重要依据。菌落菌落 ：在固体培养基上：在固体培养基上（内）以母细胞为中心（内）以母细胞为中心的一团肉眼可见的、有的一团肉眼可见的、有一定形态、构造等特征一定形态、构造等特征的子细胞的集团。的子细胞的集团。n也称为单菌

33、落，即一个微生物个体形成的也称为单菌落，即一个微生物个体形成的菌落菌落575859nC.C.半固态培养基半固态培养基n用于观察微生物运动用于观察微生物运动60n*其他分类方法（补充）其他分类方法（补充）n根据对培养基组成物质的化学成分区分：根据对培养基组成物质的化学成分区分：天然培养基、合成培养基和半合成培养天然培养基、合成培养基和半合成培养基。基。n根据培养基的营养成分是否根据培养基的营养成分是否“完全完全”，可以分为基本培养基、完全培养基和补可以分为基本培养基、完全培养基和补充培养基充培养基n专门用于培养病毒等寄生微生物的专门用于培养病毒等寄生微生物的活组活组织培养基织培养基，如鸡胚等；，

34、如鸡胚等；n专门用于培养自养微生物的无机盐培养专门用于培养自养微生物的无机盐培养基等。基等。614.4.实验：培养基的配制实验：培养基的配制nA.A.仪器和试剂：仪器和试剂：p21p21nB.B.配制方法：配制方法：n（1 1）根据配方称取原料）根据配方称取原料n（2 2）溶解、熔化）溶解、熔化n *先用少量水（牛肉膏用热水）溶解先用少量水（牛肉膏用热水）溶解n *再加入琼脂熔化（不断搅拌防止沉淀再加入琼脂熔化（不断搅拌防止沉淀被烧焦）被烧焦）【或琼脂单独熔化后加入】【或琼脂单独熔化后加入】n *用热水补充蒸发损失的水至规定容积用热水补充蒸发损失的水至规定容积62n（3 3）调节）调节PHPH

35、：n用精密试纸、用精密试纸、10%NaOH10%NaOH或或10%Hcl10%Hcl调节调节PHPH至规至规定要求定要求n（如牛肉膏蛋白胨培养基如牛肉膏蛋白胨培养基PH7.2PH7.27.4）n（4 4）分装）分装n将培养基趁热倒入将培养基趁热倒入250ml250ml三角烧瓶三角烧瓶n注意：不要沾在瓶口，可用漏斗操作注意：不要沾在瓶口，可用漏斗操作n（5 5）包扎：两层牛皮纸扎紧瓶口）包扎：两层牛皮纸扎紧瓶口63n（6 6）灭菌）灭菌n灭菌容器灭菌容器高压灭菌锅高压灭菌锅n灭菌条件：灭菌条件：1.05kg/cm1.05kg/cm2 2、121121、151530min30minn原因：杀灭微生

36、物及其芽孢。原因：杀灭微生物及其芽孢。n（洗净的培养皿等用牛皮纸包扎后一起灭菌）（洗净的培养皿等用牛皮纸包扎后一起灭菌）n（7 7）倒平板）倒平板n*灭菌后培养基冷却至灭菌后培养基冷却至5050左右左右n*启动超净工作台启动超净工作台打开三角烧瓶包装打开三角烧瓶包装用用酒精灯火焰灼烧瓶口酒精灯火焰灼烧瓶口将培养基倒入灭菌的培将培养基倒入灭菌的培养皿（养皿（约约20ml/20ml/每皿，在火焰旁操作每皿，在火焰旁操作）n*冷却，若出现冷凝水，则培养皿倒置，冷却，若出现冷凝水，则培养皿倒置，n30 30 3737恒温箱内干燥恒温箱内干燥64n倒平板操作倒平板操作65n在酒精灯火焰边操作的原因：在酒

37、精灯火焰边操作的原因：n酒精灯在超净台以外（无风）操作时，酒精灯在超净台以外（无风）操作时，利用火焰气流上升，利用火焰气流上升，在其附近区域可以在其附近区域可以保证没有空气中的尘埃落下污染培养基保证没有空气中的尘埃落下污染培养基等。等。n如何检查培养基灭菌是否彻底？如何检查培养基灭菌是否彻底？将未接种微生物的培养基在一定温度下培将未接种微生物的培养基在一定温度下培养（倒置）一定时间，观察是否有微生物养（倒置）一定时间，观察是否有微生物出现。出现。66四、微生物接种以及抗生素抑菌实验现四、微生物接种以及抗生素抑菌实验现象观察象观察n（一）（一）：接种和菌落观察：接种和菌落观察nA.A.菌种、接种

38、工具置于启动的超净工作台菌种、接种工具置于启动的超净工作台5 510min10min；nB.B.点燃酒精灯，打开菌种试管，灼烧试管口；点燃酒精灯，打开菌种试管，灼烧试管口；nC.C.灼烧接种环灼烧接种环nD.D.接种环在菌种试管培养基接种环在菌种试管培养基无菌落处冷却无菌落处冷却，然，然后刮取少许菌苔后刮取少许菌苔67nE.E.接种：接种：n在已准备好的牛肉膏蛋白胨固体培养基上，用在已准备好的牛肉膏蛋白胨固体培养基上，用划线接种法划线接种法接种接种n注意事项：注意事项：n转动培养皿在三个方向划线，转动培养皿在三个方向划线，使接种物逐渐稀释使接种物逐渐稀释n每次划线后都要灼烧接种环每次划线后都要

39、灼烧接种环n后一次划线从前一次的末端后一次划线从前一次的末端划出，并只能与前次划线接划出，并只能与前次划线接触一次触一次n最后结束的末端不能接触第最后结束的末端不能接触第一次的起点端一次的起点端68划线接种法获得的单菌落划线接种法获得的单菌落nF.F.培养、观察培养、观察n倒置培养皿，在倒置培养皿，在3737恒温箱培养恒温箱培养23d23d，观察各种细菌菌落形观察各种细菌菌落形态。态。n倒置培养的原因：倒置培养的原因：n防止冷凝水滴落污染防止冷凝水滴落污染培养基培养基全过程注意无菌操作！全过程注意无菌操作！实验结束须用肥皂洗手！实验结束须用肥皂洗手！69n（二）抗生素抑菌现象观察（二）抗生素抑

40、菌现象观察 P23n步骤：步骤：n1.准备好培养基（已灭菌），启动超净工准备好培养基（已灭菌），启动超净工作台；作台；n2.接种：平板涂布法接种：平板涂布法n 用无菌滴管若干支，分别吸取不同的细菌用无菌滴管若干支，分别吸取不同的细菌悬浮液，分别滴在若干个平板培养基表面，悬浮液，分别滴在若干个平板培养基表面，用不同的无菌玻璃刮铲涂匀。用不同的无菌玻璃刮铲涂匀。n3.用无菌镊子将分别浸过不同浓度的某种用无菌镊子将分别浸过不同浓度的某种抗生素（或不同的抗生素）和无菌水（作抗生素（或不同的抗生素）和无菌水（作为对照）的圆纸片（沥干的）均匀置于培为对照）的圆纸片（沥干的）均匀置于培养基表面，在培养基底部做好标记。养基表面，在培养基底部做好标记。70n4.4.在在3737恒温箱中培养一定时间（恒温箱中培养一定时间（2 23d3d）后，在培养基底部测量每个圆纸片周围后，在培养基底部测量每个圆纸片周围清晰区的宽度，并记录。清晰区的宽度，并记录。n5.5.分析结构，作出结论。分析结构，作出结论。抑菌现象抑菌现象清晰区：细菌清晰区：细菌不能生长不能生长结论：清晰区越宽，说结论：清晰区越宽，说明抗生素抑菌效果越好明抗生素抑菌效果越好