实验动物微生物学和寄生虫学质量控制课件.ppt

1、实验动物微生物学和寄生虫学质量控制内内 容容一、前 言二、实验动物微生物和寄生虫感染危害性及其对实 验研究的干扰作用三、实验动物微生物和寄生虫控制分级四、实验动物微生物和寄生虫质量控制五、动物实验中的生物危害及其防制 实验动物实际生产中，由于其饲养环境及种属的不同，而有其各自不同的易感病原，极易造成实验动物传染病的爆发和流行，严重干扰实验动物生产和动物实验研究。因此做好实验动物微生物和寄生虫控制是非常的重要。实验动物被病原微生物感染的形式很多，有的可引起动物发病，表现出临床症状和病理变化，甚至死亡；有的动物呈无症状性感染，虽然不致病和不引起死亡，但可影响动物自身的稳定性和反应，改变机体的免疫功

2、能或与其他病原起协同、激发式拮抗作用，干扰实验结果。使实验得不到真实，可靠的结论；有些属于人畜共患病。因此必需实行实验动物微生物、寄生虫控制的标准化。二、实验动物微生物和寄生虫感染危害、实验动物微生物和寄生虫感染危害性及其对实验研究的干扰作用性及其对实验研究的干扰作用 实验动物致病菌按其感染对象分为两大类：1 1、人兽共患病原体、人兽共患病原体：普通级动物必须排除的病原菌；（如结核分枝杆菌、大鼠流行性出血热病毒、布氏杆菌、狂犬病毒、沙门氏菌等）2 2、动物致病菌和条件致病菌、动物致病菌和条件致病菌：清洁级动物和SPF级动物要求排除的病原菌（如致病性大肠杆菌等）实验动物按其所感染的微生物影响的侧

3、重点可分为三类：1 1、可引起人畜共患病的微生物、可引起人畜共患病的微生物：如流行性出血热病毒、狂犬病毒等。2 2、影响实验动物本身存活率的微生物、影响实验动物本身存活率的微生物：这类微生物常造成动物传染病发生，影响动物生长、发育、繁殖,如鼠痘病毒、兔巴氏杆菌、犬细小病毒等。3 3、影响实验结果的微生物、影响实验结果的微生物：这类微生物多是实验动物体内的正常微生物，甚至参与体内营养代谢，如大肠杆菌正常状态下可合成B族维生素和维生素K供动物使用。但当外界环境发生变化，手术、X照射，实验刺激时，大肠杆菌可能会变成条件致病菌，影响动物状况和实验结果。食物和水混有污染的尿，接触带菌的老鼠的排泄物3、慢

4、性菌痢急性发作过去有菌痢史，发作时呈现急性典型菌痢症状。志贺菌在自然界分布较窄，主要是在人类和非人灵类动物间传播。2、对宿主机体产生机械性损伤：寄生虫体移行过程中可对组织、脏器造成损伤。在肿瘤学研究中，常引起移植肿瘤污染。小结：微生物感染对人,动物和实验的影响多数情况下呈良性经过，仅在口腔粘膜出现疱疹和溃疡，之后病毒可长期潜伏在呼吸道或泌尿生殖器官附近的神经节，也可长期潜伏在组织器官中，产生抗体。清洁级动物种子必须来源于SPF动物或无菌动物。目前我们所检测的病毒一般都可以用免疫酶实验进行，其中汉坦病毒、仙台病毒采用免疫荧光实验。相似于人的HTLV-1引起白血病国内外多见散发，偶见爆发。其中对实

5、验动物健康危害较大的细菌有20多余种。非人灵长类所有种，人可能是宿主五、动物实验中的生物危害及其防制钩端螺旋体（各种血清型）食物和水混有污染的尿，接触带菌的老鼠的排泄物这种病毒已被认为是迄今为止的唯一抗癌谱广、具有高度抗癌特性的微生物。实验动物细菌感染对实验动物和动物实验的影响也具有一定的共性，归纳起来包括三个方面：动物感染后不表现临床症状。*不同级别的动物，规定所携带的微生物不同。实验动物微生物和寄生虫感染可分为四大类：病毒感染危害性及其对实验研究的干扰作用 细菌感染危害性及其对实验研究的干扰作用 真菌感染危害性及其对实验研究的干扰作用 寄生虫感染危害性及其对实验研究的干扰作用我省实验动物常

6、携带微生物1、病毒感染危害性及其对实验研究的干扰作用病原 携带动物在非人灵长类的临床症状传播方式人感染症状备注B病毒，Herpesvirus simiae,CercopithecineHerpesvirus 1猕猴属无临床症状，有时口腔中出现水疱咬伤时体液和唾液上行脊髓炎、脑脊髓炎、脑炎、死亡肝炎A病毒所有种类的非人灵长类无临床症状，少数出现肝炎接触排泄物肝炎疫苗免疫SV40猕猴属无临床症状接触分泌物、尿、已感染的疫苗致癌的潜在危险猴出血热病毒猕猴属、非洲一些猴vervet，patas猕猴表现出血症状、高致死率；在patas中无临床症状；在vervet中有时致病。接触分泌物和血液未证实感染人报

7、道在进口patas中出现高抗体；狒狒血清阳性。埃波拉病毒食蟹猴无临床症状或严重出血性疾病接触分泌物全身广范围的出血猴免疫缺陷病毒旧大陆猴大部分无临床症状，在亚洲种表现AIDS疾病血液接触，皮肤病变没有人发病的病例，有血清阳性的报道与人的HIV病毒研究相关。猴的T淋巴细胞病旧大陆猴无临床症状，有时出现淋巴细胞增生性疾病和T淋巴细胞瘤可能咬伤、抓伤相似于人的HTLV-1引起白血病与人的AIDS疾病研究有关猴的D型逆转录病毒亚洲种猴AIDS可能咬伤、抓伤，接触污染唾液在人群中有抗体产生，但没有致病的报道与人的AIDS疾病研究有关泡沫病毒旧大陆和新大陆猴常无临床症状接触分泌物在人群中有抗体产生，但没有

8、致病的报道与人的AIDS疾病研究有关猴痘病毒中非和扎伊尔的一些物种大部分无临床症状，有时出现发热和丘疹接触分泌物 痘病变来自非洲猴的检测猴狂犬病毒许多种类狂犬病伤口接触唾液狂犬病黄热病毒非洲和新大陆种在南美猴种从症状不明显到死亡变化蚊子黄热猴疱疹病毒猴疱疹病毒1 1型感染（型感染（B B病毒）病毒）由猴B病毒又称疱疹病毒引起的人和猴共患的一种传染病。猴是B病毒的自然宿主，感染率可达10-60。多数情况下呈良性经过，仅在口腔粘膜出现疱疹和溃疡，之后病毒可长期潜伏在呼吸道或泌尿生殖器官附近的神经节，也可长期潜伏在组织器官中，产生抗体。人类接触性感染，主要表现脑脊髓炎症状，多数病人发生死亡。猴感染B

9、病毒后，初期在舌表面和口腔粘膜与皮肤交界的唇缘有疱疹，最后形成溃疡表面，有纤维素性坏死痂皮，7-14天自愈。感染猴外观正常，部分患猴鼻内会出现黏液和脓性分泌物。B病毒对乙醚、脱氧胆酸盐、氯仿等脂溶剂敏感，对热敏感，5630min即可灭活。紫外线也可将其灭活。猴免疫缺陷病毒感染猴免疫缺陷病毒感染n 由猴逆转D型病毒（SRV）、猴免疫缺陷病毒（SIV）、猴T细胞趋向性病毒1型（STLV-1）、泡沫病毒（SFV）引起的免疫缺陷病毒病。猴感染后主要表现为亚临床携带，免疫抑制、肿瘤的形成。猴免疫缺陷病毒感染（猴免疫缺陷病毒感染（SIVSIV）自然感染动物出现典型临床症状，较难观察到。人工感染的动物模型的

10、临床症状主要表现3个疾病期，急性期，亚临床期和AIDS期。AIDS期出现的时间一般在半年到2年之间，与动物的免疫状况有关。1、急性期出现时间一般在感染7天后，动物表现摄食减少，感染1个月内可触摸到浅表淋巴结肿大，血液中病毒载量较高，淋巴细胞数量降低，CD4/CD8值出现倒置。2、急性期感染后，动物进入亚急性期，动物无临床症状，血液中病毒载量维持一个平台期，CD4/CD8值恢复正常。3、AIDS期动物表现腹泻、消瘦、身体肢端出现丘疹。血液中病毒载量再次升高，淋巴细胞数量降低，出现贫血症状，CD4/CD8值出现倒置，最终死亡。猴免疫缺陷病毒对含氯物质敏感，活病毒使用含有效氯1的消毒剂在5分钟内能将

11、病毒杀死，75的乙醇消毒需要30分钟以上。狂犬病 狂犬病，又称恐水症。是由狂犬病病毒感染犬引起的以极度兴奋、狂燥不安、流涎、攻击人兽为特征的一种高度接触性人兽共患病。病毒通过患病犬或带毒犬的咬伤而传给正常动物或人。也可通过消化道和呼吸道及损伤皮肤、粘膜感染。本病没有明显的流行季节。临床症状：狂暴型狂暴型：极度兴奋，攻击性强，下额麻痹下垂、流涎，行走不稳，终因全身衰竭和呼吸肌麻痹而死亡。麻痹型麻痹型：喉头、下额、后肢麻痹，流言，吞咽困难，最终全身麻痹而死亡。猫多为狂暴型，行为异常，无目的狂奔，攻击人、物。猴多表现为麻痹型。狂犬病毒可在强酸、强碱、乙醇、甲醛、阳光，紫外线等条件下被灭活，在100度

12、2分钟，60度10-15分钟完全灭活。但在4度下的脑组织中可存活数月，在已死动物体内可存活很长时间。流行性出血热感染流行性出血热感染 发生于大鼠的烈性传染病，又名肾综合征出血热。由汉坦病毒引起，感染人的主要临床特征：高热、出血性肾脏损伤。实验大鼠和野鼠是该病毒的自然宿主，因此，大鼠感染后一般无病理变化。据报道，在乳小鼠、乳长爪沙鼠的动物模型中，能观察到病变组织的广泛充血、出血、渗出、坏死等，其中肾脏最为严重。人类感染主要是接触带毒动物以及排泄物，吸入型感染。该病毒对脂溶剂敏感，乙醚、氯仿、丙酮、去氧胆酸盐等均可灭活，PH5.0以下，60，1h可使其全部杀死，紫外线照射30分钟也能灭活病毒。仙台

13、病毒感染仙台病毒感染 仙台病毒是大、小鼠群中常见的病毒之一，由副流感病毒I 型引起的一种呼吸道传染病。急性感染多见于断乳小鼠，成年鼠多数情况下呈隐性感染，在饲养条件恶化，气温骤变或并发呼吸道细菌感染时，传播快，流行广，造成呼吸道疾病的流行。仙台病毒隐性感染会给实验研究带来严重干扰。1、严重影响机体体液与细胞免疫应答2、影响干扰实验性致瘤作用 3、影响胚胎的发育，对鼠类生殖繁育造成影响 该病毒对乙醚及热敏感，PH3.0条件下极易灭活。小鼠肝炎病毒感染小鼠肝炎病毒感染 由小鼠肝炎病毒引起的一种高度传染性疾病。随毒株、品种和年龄不同而出现肝炎、脑炎、乳鼠肠炎和进行性消耗综合症为特征的疾病。常见隐性感

14、染而无明显临床症状。易感染动物：小鼠。（国内普通小鼠群抗体阳性率为20%-50%）。多数在应急因素影响下爆发。该毒株对酸稳定，不同毒株对热的稳定性不同，其中低毒力毒株和对热稳定的毒株是实验鼠群最严重的污染物。对实验研究的干扰：对实验研究的干扰：1 1、引起小鼠致死性肝炎、脑炎和肠炎2、改变机体的各种免疫应答参数（产生高水平的IL-6、IFNgamma和低水平的IL-2和IL-l0）。3 3、是许多酶系统发生改变，增高某些肝酶活性（异柠檬酸脱氢酶，葡萄糖6一磷酸脱氢酶和肝谷一草转氨酶）而抑制另一些肝脏的酶（P450,NADAH，肝氧化酶琥珀酸脱氢酶）。4 4、裸鼠感染可严重影响肿瘤免疫学的研究

15、。4、实验动物寄生虫学监测（普通小鼠抗体阳性率为3%）。弯曲杆菌（空肠亚种、胚胎亚种）（2）用不健康的动物材料制成生物制品可扩散疾病。病毒通过患病犬或带毒犬的咬伤而传给正常动物或人。实验动物微生物、寄生虫的检测动物感染后不表现临床症状。清洁级动物种子必须来源于SPF动物或无菌动物。3、对实验的干扰：动物发病死亡，造成实验在特殊的饲养条件和环境中培育繁殖（隔离系统）。3、加强实验动物的管理，保种单位要对保种的动物定期进行质量检查，发现问题及时更新种群。无临床症状，少数出现肝炎8、加强职业道德教育。在人与猴，猴与猴，以及猴与人间相互传染过程中，苍蝇和蟑螂是重要的传染媒介。肺、肝、脾、十二指肠、回肠

16、、心、肾等器官出血。实验动物微生物和寄生虫的控制对实验动物和动物实验非常重要。该病的传染性很强，迅速蔓延，常与其它疾病合并感染。无菌的概念是相对的，只是根据目前现有的科学知识和检测方法在一定时期内不能检出的病原体而已。但在4度下的脑组织中可存活数月，在已死动物体内可存活很长时间。动物实验中发生的危害的原因：多数情况下呈良性经过，仅在口腔粘膜出现疱疹和溃疡，之后病毒可长期潜伏在呼吸道或泌尿生殖器官附近的神经节，也可长期潜伏在组织器官中，产生抗体。小鼠肝炎病毒感染肝的病变淋巴细胞性脉络丛脑膜炎感染淋巴细胞性脉络丛脑膜炎感染 由淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒引起的一种急性传染病，也感染人。感染后目前还无法

17、治疗。主要侵害中枢神经系统，呈现脑脊髓炎症状。易感动物：易感动物：小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、人。（普通小鼠抗体阳性率为3%）。对动物的危害：对动物的危害：引起动物大脑、内脏器官病变，小鼠带毒后可表现为无症状的带毒者，可以垂直传播给子代。人感染后可引起流感样症状或脑膜炎。对实验的干扰：对实验的干扰：抑制体液和细胞免疫应答（能在B、T淋巴细胞和巨噬细胞中大量复制）；在肿瘤学研究中，常引起移植肿瘤污染。该病毒对乙醚和去污剂敏感，不耐热，5620min即可灭活。0.1甲醛、紫外线也可将其灭活。鼠痘感染鼠痘感染 鼠痘病毒鼠痘病毒：危害实验小鼠最为严重的病毒之一。全身感染，传播快，死亡率高。国内外多见散发，

18、偶见爆发。小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、兔都能感染。（国内普通小鼠、大鼠、豚鼠群抗体阳性率为30%-70%。）小鼠感染后主要引起全身或局部皮肤的痘疹，表现为肢、尾肿胀，发炎和坏疽，肢体脱落。剖检主要表现肝、脾、淋巴结、胸腺的广泛坏死，肠、肾、膀胱的出血等。鼠痘病毒对干燥、低温抵抗力较强，但2氢氧化钠、0.5%福尔马林、3石炭酸可以杀死病毒。对实验的干扰：对与免疫有关实验研究的影响对实验的干扰：对与免疫有关实验研究的影响，可严重影响体液和细胞介导的免疫应答；引起小鼠自发性自体免疫疾病；抑制吞噬细胞的吞噬能力；对移植免疫的影响对移植免疫的影响可加速同种异系，甚至同系小鼠间皮肤移植的排斥；对致瘤对致瘤作用

19、研究的干扰作用研究的干扰，被感染后的组织易被误诊为浸润性肺癌；能抑制某些化学药致瘤作用。啮齿类动物细小病毒感染啮齿类动物细小病毒感染 啮齿类动物细小病毒包括小鼠细小病毒和大鼠细小病毒，其中包括许多毒侏。动物感染后不表现临床症状。这种病毒已被认为是迄今为止的唯一抗癌谱广、具有高度抗癌特性的微生物。易感动物为小鼠（普通鼠群抗体阳性率为60%）。影响小鼠的生长发育及繁殖功能。实验研究已经发现其对肝癌、胃癌、肉瘤等多种肿瘤均有明显杀伤作用。所以当实验动物感染此病毒，将会给肿瘤的研究造成严重的干扰。犬细小病毒感染犬细小病毒感染1、易感动物：犬2、对动物的危害：动物感染后，表现为出血 性肠炎或心肌炎，可引

20、起动物大批死亡。3、对实验的干扰：动物发病死亡，造成实验 中断；改变机体的酶系统和免疫反应。兔病毒性出血症兔病毒性出血症 俗称“兔瘟”。引起兔的一种急性、烈性、病毒性传染病。兔病毒性出血症是由细小病毒属的兔出血症病毒引起。青年兔和成年兔易感，发病急，死亡率高，目前普通级兔多数疫苗免疫，因此，爆发的现象较少见。典型临床症状表现，以实质器官淤血、出血为主要特征。肺、肝、脾、十二指肠、回肠、心、肾等器官出血。兔出血症病毒抵抗力很强。耐酸、乙醚和氯仿。据报道，含毒病料经1-2%甲醛2.5小时，10%漂白粉2-3小时，2%戊二醛1小时，1%氢氧化钠3.5小时均可完全灭活病毒。细菌细菌感染危害性及其对实验

21、研究的干扰感染危害性及其对实验研究的干扰作用作用 可引起实验动物细菌性疾病的细菌涉及到30个属的68种细菌。其中对实验动物健康危害较大的细菌有20多余种。实验动物感染不同种类细菌所致疾病的临床表现和病理变化特征性不强，多数表现精神沉郁、食欲不振、被毛粗乱、体重下降、行动呆滞等全身性症状。常常会发生一种病理变化可由多种细菌引起。实验动物细菌感染对实验动物和动物实验的影响也具有一定的共性，归纳起来包括三个方面：1 1、人兽共患病原菌和动物致病菌、人兽共患病原菌和动物致病菌 这类细菌中代表性的是沙门氏菌、志贺氏菌、布氏杆菌、结核分枝杆菌等，不仅可以引起实验动物的严重疾病，而且也是人类的重要致病菌，应

22、坚决予以排除，确保人与动物的安全。2 2、条件性致病菌、条件性致病菌 当动物在某些诱因的作用下，机体抵抗力下降，导致疾病发生，甚至流行。目前我国人畜共患病原菌已经得到控制，条件性致病菌对动物的影响相对比较严重。3 3、正常菌群的细菌（菌群失调）、正常菌群的细菌（菌群失调）各种细菌即使是正常菌群，在动物体内的存在都会影响其生理参数和实验的重复性。这些变化又可将对动物结果产生不同程度的干扰和影响。病原携带动物在非人灵长类的临床症状传播方式人感染症状备注弯曲杆菌（空肠亚种、胚胎亚种）非人灵长类中的许多种类大部分无临床症状，可能出现厌食、腹泻和流产直接接触分泌物胃肠炎抗生素治疗钩端螺旋体（各种血清型）

23、啮齿类动物，非人灵长类中的许多种类大部分无临床症状，有时出现发热，流产食物和水混有污染的尿，接触带菌的老鼠的排泄物发热、胃肠炎、黄疸、神经症状抗生素治疗分支杆菌（非洲型、牛型、人型）牛、旧大陆猴、人消耗性消瘦，致死，新大陆猴不敏感分泌物、皮肤和肠道病变、气溶胶呼吸道疾病不推荐治疗沙门菌（伤寒、肠炎）非人灵长类中的许多种类成年动物通常无症状，幼年动物胃肠炎症状分泌物摄入胃肠炎抗生素治疗志贺菌（痢疾）非人灵长类中的许多种类年青动物无明显症状分泌物摄入胃肠炎抗生素治疗耶森氏菌（假结核）啮齿类和鸟类传播给非人灵长类急性致死、慢性腹泻、体重减轻污染食物摄入亚临床或不特异的症状抗生素治疗类鼻疽假单胞菌东南

24、亚猴种大部分无临床症状，有时出现支气管肺炎、肠炎、坏死口腔、粘膜、气溶胶引起肺炎、坏死，感染后持续时间较长抗生素治疗结核病结核病 由结核分枝杆菌引起的人和动物共患的一种慢性传染病。大部分实验动物都能感染，以猴发病率最高。猴感染结核病的病原主要是结核分枝杆菌，与人感染的病原一样。感染的组织器官包括肺、脾、肝、肾、脑等，形成干酪样病灶，并以淋巴源性播散。感染动物通过痰液、粪、尿等排出病原。结核分枝杆菌抗干燥;抗酸、碱或染料;抗一般化学试剂。在液体中加热62-6315分钟,或在75%酒精中作用数分钟即可被杀死。该病原自然畜主较多，所有温血动物都可以感染，鼠类是重要的贮存畜主，带菌率高。无菌的概念是相

25、对的，只是根据目前现有的科学知识和检测方法在一定时期内不能检出的病原体而已。对实验的干扰：对与免疫有关实验研究的影响，可严重影响体液和细胞介导的免疫应答；所以当实验动物感染此病毒，将会给肿瘤的研究造成严重的干扰。1、急性期出现时间一般在感染7天后，动物表现摄食减少，感染1个月内可触摸到浅表淋巴结肿大，血液中病毒载量较高，淋巴细胞数量降低，CD4/CD8值出现倒置。多杀巴斯德杆菌感染兔主要表现为卡他性鼻炎症状，鼻腔充满黏液。（普通小鼠抗体阳性率为3%）。结核分枝杆菌抗干燥;抗酸、碱或染料;抗一般化学试剂。1、体外寄生虫对动物造成干扰，使动物骚动不安，影响采食和休息，最终动物消瘦，发育不良，降低对

26、其他疾病的抵抗力。常无临床症状，有时出现发热，贫血，死亡该病毒对乙醚及热敏感，PH3.多数情况下呈良性经过，仅在口腔粘膜出现疱疹和溃疡，之后病毒可长期潜伏在呼吸道或泌尿生殖器官附近的神经节，也可长期潜伏在组织器官中，产生抗体。改变机体的酶系统和免疫反应。1甲醛、紫外线也可将其灭活。支气管肺炎病例在气管、鼻腔中有泡沫状粘液，肺部有大小不等的凸出表面的脓疱，外有一个层结缔组织包膜，脓汁乳白色，粘稠似奶油。采取积极措施控制实验动物微生物、寄生虫质量检测，保证实验动物的质量。人和猴以细菌性痢疾为主要症状。相似于人的HTLV-1引起白血病虫 的动物。在特殊的饲养条件和环境中培育繁殖（隔离系统）。2、影响

27、实验动物本身存活率的微生物：这类微生物常造成动物传染病发生，影响动物生长、发育、繁殖,如鼠痘病毒、兔巴氏杆菌、犬细小病毒等。实验动物致病菌按其感染对象分为两大类：目前我们所检测的病毒一般都可以用免疫酶实验进行，其中汉坦病毒、仙台病毒采用免疫荧光实验。大部分实验动物都能感染，以猴发病率最高。大部分无临床症状，在亚洲种表现AIDS疾病1、急性期出现时间一般在感染7天后，动物表现摄食减少，感染1个月内可触摸到浅表淋巴结肿大，血液中病毒载量较高，淋巴细胞数量降低，CD4/CD8值出现倒置。清洁动物 屏障系统 不携带对动物危害大,对科学研究种类 饲养环境 概念目前我们所检测的病毒一般都可以用免疫酶实验进

28、行，其中汉坦病毒、仙台病毒采用免疫荧光实验。主要侵害中枢神经系统，呈现脑脊髓炎症状。大部分无临床症状，有时出现支气管肺炎、肠炎、坏死病毒通过患病犬或带毒犬的咬伤而传给正常动物或人。分支杆菌（非洲型、牛型、人型）实验动物微生物和寄生虫的控制对实验动物和动物实验非常重要。其中对实验动物健康危害较大的细菌有20多余种。根据植入无菌动物体内菌种数目的不同，可分为单菌、双菌、三菌和多菌动物。无菌的概念是相对的，只是根据目前现有的科学知识和检测方法在一定时期内不能检出的病原体而已。清洁级动物种子必须来源于SPF动物或无菌动物。2、直接导致实验动物的大量死亡；接触粪便，幼虫能穿透皮肤在人与猴，猴与猴，以及猴

29、与人间相互传染过程中，苍蝇和蟑螂是重要的传染媒介。结核病猴的肺结核病猴的脾结核病感染猴的浅表淋巴结结核病感染猴的脑钩端螺旋体病钩端螺旋体病 由钩端螺旋体引起的一种重要而复杂的人畜共患传染病和自然疫源性传染病。人接触性感染，主要表现为发热、黄疸、血红蛋白尿、出血、流产、皮肤和粘膜坏死、水肿等。该病原自然畜主较多，所有温血动物都可以感染，鼠类是重要的贮存畜主，带菌率高。动物感染后大多呈一过性临床反应，症状表现不明显。病原主要损害肝、肾组织。钩体对干燥非常敏感，在干燥环境下数分钟即可死亡，极易被稀盐酸、70%酒精、漂白粉、来苏儿、石炭酸、肥皂水和0.5%升汞灭活。钩体对理化因素的抵抗力较弱，如紫外线

30、、温热5055，30min均可被杀灭。弯曲杆菌病弯曲杆菌病 非人灵长类感染弯曲杆菌主要是两个亚种：空肠亚种Campylobacter jejuni、胚胎亚种Campylobacter fetus。临床症状：大部分无临床症状，隐性携带。发病时表现急性胃肠炎症状，引起猴水样腹泻（血便）、流产。目前有关猴感染弯曲杆菌病的报道较少，可能与病原检测的技术有关。志贺菌病志贺菌病 由志贺菌(Shigella spp)或称痢疾杆菌引起人和实验动物肠道感染的一种细菌性疾病。称志贺菌病。人和猴以细菌性痢疾为主要症状。本属细菌有A、B、C、D四个群45个血清型。其对人和实验动物均有致病性。志贺菌在自然界分布较窄，主

31、要是在人类和非人灵类动物间传播。研究表明，猕猴在天然情况下，可能因接触被人类污染的物品而感染上志贺菌，尤其在被捕获之后，带菌率不断增加，由此说明，人类带菌者是猕猴痢疾的传染源。传播途径是病原菌经口腔进入胃肠道。在人与猴，猴与猴，以及猴与人间相互传染过程中，苍蝇和蟑螂是重要的传染媒介。重要临床症状:细菌性痢疾、急性胃肠炎。表现四种症状类型：1、急性典型菌痢发病急、高热、呕吐拒食、排脓血便。2、急性非典型菌痢先发生水性腹泻，排泄物的粘液量逐渐增加，随后出现血便。3、慢性菌痢急性发作过去有菌痢史，发作时呈现急性典型菌痢症状。4、慢性迟缓型有菌痢史，经常发病，排稀糊状或水样粪便。巴斯德杆菌病巴斯德杆菌

32、病 多杀巴斯德杆菌感染引起兔的巴斯德杆菌病，嗜肺巴斯德杆菌感染啮齿类动物。多杀巴斯德杆菌感染兔主要表现为卡他性鼻炎症状，鼻腔充满黏液。剖检时可见肺硬化，萎缩不张，形成灰色小结节，肺脓肿。嗜肺巴斯德杆菌以隐形感染形式广泛存在，感染率较高，无临床症状，SPF动物的感染往往来自于引种动物。兔支气管鲍特杆菌兔支气管鲍特杆菌 本病是家兔常见的一种传染病，由波氏杆菌引起，传播广泛，常以鼻炎和肺炎为特征，仔兔、青年兔都曾急性发作，成年兔常为慢性经过。根据程度不同可分鼻炎型、支气管肺炎型和败血型。鼻炎型兔鼻腔粘膜充血，有多量浆液性或粘液性鼻分泌物。支气管肺炎病例在气管、鼻腔中有泡沫状粘液，肺部有大小不等的凸出

33、表面的脓疱，外有一个层结缔组织包膜，脓汁乳白色，粘稠似奶油。支原体病支原体病 支原体是介于病毒和细菌之间的一群多形性微生物。是啮齿类动物慢性呼吸道病的主要病原体。该病的传染性很强，迅速蔓延，常与其它疾病合并感染。实验动物感染支原体而致病的主要是肺炎支原体、溶神经支原体和关节炎支原体，其中以肺炎支原体危害最严重。寄生虫寄生虫感染危害性及其对实验研究的干感染危害性及其对实验研究的干扰作用扰作用 实验动物的寄生虫种类繁多，国内外报道的已达六、七十种。从寄生虫的分类学角度可分为原虫、蠕虫和节肢动物，蠕虫又可分为吸虫和线虫。对实验的干扰作用对实验的干扰作用：1 1、体外寄生虫对动物造成干扰，使动物骚动不

34、安，影响采食和休息，最终动物消瘦，发育不良，降低对其他疾病的抵抗力。2 2、对宿主机体产生机械性损伤：寄生虫体移行过程中可对组织、脏器造成损伤。3 3、对宿主产生毒性作用：寄生虫的分泌物、排泄物对宿主都有一定的毒性作用。4 4、对宿主生理、生化和免疫系统的影响。宿主免疫系统对虫体的识别及清除作用，干扰机体免疫学和血液学指标。寄生虫寄生虫单细胞单细胞多细胞多细胞鞭毛纲（如锥虫）鞭毛纲（如锥虫）孢子虫纲（如球虫）孢子虫纲（如球虫）梨形虫纲（如马巴贝西虫）梨形虫纲（如马巴贝西虫）线虫纲（如蛔虫）线虫纲（如蛔虫）棘头虫纲（如棘头虫）棘头虫纲（如棘头虫）吸虫纲（如肝片吸虫）吸虫纲（如肝片吸虫）绦虫纲（如

35、有钩绦虫）绦虫纲（如有钩绦虫）蜘蛛纲（如螨虫）蜘蛛纲（如螨虫）昆虫纲（如蚊、蝇）昆虫纲（如蚊、蝇）原虫原虫蠕虫蠕虫节肢动物节肢动物寄生虫的种类寄生虫的种类寄生虫的传播途径寄生虫的传播途径1.通过饲料、饮水、垫料等经口、皮肤感染。2.通过昆虫感染。3.通过胎盘感染。实验动物最容易感染的是体外寄生虫。病原携带动物在非人灵长类的临床症状传播方式人感染症状备注溶组织阿米巴非人灵长类中的许多种类无临床症状，有的猴表现腹泻接触污染粪便通常不致病型永久根除，治疗无效弓形体非人灵长类中的许多种类，猫分泌传染性卵无临床症状摄入啮齿类污染的粪便少数发热，部分出现流产、畸胎通过非人灵长类感染人不大可能，往往出现在免

36、疫缺陷和移植研究中鞭毛虫旧大陆猴有时断断续续的粘液性腹泻接触污染粪便小孩出现永久根除，治疗无效疟原虫（食蟹猴疟原虫，巴西疟原虫，三日疟原虫）猕猴属常无临床症状，有时出现发热，贫血，死亡蚊子从猴传染人途径没有证实影响血液学检测指标粪类园线虫非人灵长类所有种无临床症状接触粪便，幼虫能穿透皮肤胃肠炎可能治疗鞭虫常非人灵长类所有种，人可能是宿主无临床症状，严重时出现腹泻接触污染粪便腹泻可能治疗肺刺螨猕猴，狒狒常无症状不清楚，可能接触痰争论感染呼吸系统研究实验体外寄生虫（螨、虱）旧大陆猴、新大陆猴搔痒症，皮肤病直接接触污染物皮炎可能治疗3、结果不真实。是由狂犬病病毒感染犬引起的以极度兴奋、狂燥不安、流涎

37、、攻击人兽为特征的一种高度接触性人兽共患病。钩端螺旋体（各种血清型）血液中病毒载量再次升高，淋巴细胞数量降低，出现贫血症状，CD4/CD8值出现倒置，最终死亡。2、传染途径控制染病原体的动物。在非人灵长类的临床症状真菌感染危害性及其对实验研究的干扰作用1细菌检测分离培养的方法，其中泰泽病原体采用免疫荧光初筛，再分离病原的方法；通过非人灵长类感染人不大可能，往往出现在免疫缺陷和移植研究中清洁级动物种子必须来源于SPF动物或无菌动物。（普通小鼠抗体阳性率为3%）。病毒通过患病犬或带毒犬的咬伤而传给正常动物或人。*不同级别的动物，规定所携带的微生物不同。4、实验动物寄生虫学监测方法不 能检出任何微生

38、物和寄生实验动物细菌感染对实验动物和动物实验的影响也具有一定的共性，归纳起来包括三个方面：1、急性典型菌痢发病急、高热、呕吐拒食、排脓血便。2、实验动物细菌学检测无临床症状，少数出现肝炎猕猴属、非洲一些猴vervet，patas猕猴鼻炎型兔鼻腔粘膜充血，有多量浆液性或粘液性鼻分泌物。弓形虫病弓形虫病 由孢子纲的弓形虫感染引起的，能够在人和动物之间传染的重要人兽共患病。小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、犬和猴为中间宿主，猫为终末宿主。弓形虫在终末宿主的肠上皮细胞内完成有性生殖随粪便排出卵囊，在体外完成孢子化过程成为侵袭性卵囊，中间宿主动物吞食侵袭性卵囊后，在其体内进行无性生殖，主要经消化道感染，吸血昆虫也

39、是本病的传播者。自然感染的大鼠、小鼠和地鼠基本不表现临床症状，但组织切片上可见灶性脑炎。卵囊能抗酸碱和普通消毒剂，可选用火焰、3%火碱液、1%来苏儿、0.5%氨水、日光下暴晒等进行消毒。真菌真菌感染危害性及其对实验研究的干扰感染危害性及其对实验研究的干扰作用作用病原真菌根据其侵袭部位及发病的条件可分为浅部真菌、深部真菌和条件致病菌真菌三类。浅部真菌浅部真菌：侵害毛发、皮肤、指（趾）甲等浅表部位的真菌。常见石膏样毛癣菌，石膏样小孢子菌和羊毛状小孢子。深部真菌深部真菌：累及内脏器官极其它组织的真菌。常见的有新生隐球菌、荚膜组织胞浆菌、粗球孢子菌等。条件致病真菌条件致病真菌：在机体免疫功能损伤，内环

40、境出现紊乱的情况下才具有致病性的真菌。常见有白色链珠菌、烟曲霉菌和黄曲霉菌、毛菌、根菌犁头菌等。病原真菌大多数为人兽共患病，其病原性比其它微生物弱，一般为慢性过程，多呈散发性，病理变换缺少特征性，多以慢性增生性炎症为主。机体免疫功能正常，不易发生真菌感染，而免疫功能低下，特别是细胞免疫功能低下时，常发生真菌感染。由于真菌孢子容易飞扬，因此，实验动物患有真菌病，不仅影响科学实验的准确性，而且容易污染环境，威胁动物群体以及饲养人员和实验人员的健康。一旦发现实验动物被真菌感染，应立即将该饲养单元的所有动物一并处死、焚烧，防止隐性感染动物可能造成的对其他动物、饲养人员、实验人员及环境的污染。实验动物微

41、生物和寄生虫的控制对实验动物和动物实验非常重要。在实验动物领域，除大型或稀有实验动物外，一般不采用疫苗接种或药物治疗，多通过加强日常预防管理、发生疫病时及时扑灭、消毒和采取有效的隔离措施等手段来切断实验动物传染病流行的三个基本条件：传染源、传播方式和途径、易感动物，从而达到消除实验动物的传染病影响因素。小结小结：微生物感染对人,动物和实验的影响 直接影响：直接影响：（1）引起人畜共患病，影响工作人员的身体健康。（2）引起动物传染病，影响均衡生产，影响动物健康和质量。（3）严重干扰实验结果的可靠性、准确性、重复性。（4）污染环境 间接影响：间接影响：（1）引用不正确的实验结果可能会导致临床的错误

42、治疗。（2）用不健康的动物材料制成生物制品可扩散疾病。（3）重复实验可造成新的人力、物力、才力的浪费。因此，要保证工作人员的身体健康，实验结果的准确和一些实验的特殊要求，必须对实验动物进行微生物控制，这是不断提高实验水平的需要，也是实验动物科学发展的必然趋势。三、实验动物微生物和寄生虫三、实验动物微生物和寄生虫 的控制分级的控制分级微生物学分级微生物学分级 根据实验动物所携带的微生物情况，将实验动物分为不同的等级。大多数国家通常将实验动物分为无菌动物、无特定致病原动物和常规动物。我国按微生物和寄生虫控制标准，将实验动物分为四个等级以满足不同的实验目的：1 1、普通动物、普通动物 2 2、清洁动

43、物、清洁动物 3 3、无特定致病原动物（、无特定致病原动物（SPFSPF）4 4、无菌动物、无菌动物 *不同级别的动物，规定所携带的微生物不同。普通动物普通动物 普通动物普通动物（conventional animal，CV），饲养在开放系统中，在微生物控制上要求最低的动物，要求不携带人畜共患病和动物烈性传染病病原的动物，排除体外寄生虫和真菌（这类实验动物的用途决定了其面对的实验人员大都是学生，人员多，发生传染危害性大，因此国家标准2001版要求取消普通级实验大、小鼠）。清洁级动物清洁级动物 清洁动物（clean animal，CL），除不带有普通动物应排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学

44、研究干扰大的病原。清洁级动物种子必须来源于SPF动物或无菌动物。普遍应用于短期或部分科研实验。无特定病原体动物无特定病原体动物 无特定病原体动物（specific pathogen free animal，SPF），简称SPF动物，指动物体内无特定的微生物和寄生虫存在，但带有非特定的微生物和寄生虫。除不具有普通动物、清洁级动物应该排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原。是我国目前科研工作推荐使用的一类标准级别的实验动物。无菌动物和悉生动物无菌动物和悉生动物 无菌动物（germfree animal，GF），是指无可检出一切生命体的动物，进一步是指用现有的检测技术在动

45、物体内外的任何部位，均检不出任何活的微生物和寄生虫的动物。包括病毒、立克次体、细菌（包括螺旋体、支原体）、真菌和原虫。无菌的概念是相对的，只是根据目前现有的科学知识和检测方法在一定时期内不能检出的病原体而已。在特殊的饲养条件和环境中培育繁殖（隔离系统）。悉生动物悉生动物（gnotobiotic animal，GN），又称已知菌动物或已知菌丛动物，是在无菌动物体内植入已知微生物的动物，并且饲养在隔离系统内。根据植入无菌动物体内菌种数目的不同，可分为单菌、双菌、三菌和多菌动物。不同微生物控制的实验动物的比较不同微生物控制的实验动物的比较 种类 饲养环境 概念 无菌动物 隔离系统 以封闭的无菌技术获

46、得的,用现有 方法不 能检出任何微生物和寄生 虫 的动物。悉生动物 隔离系统 确知所带的微生物菌丛,经特殊饲 养的动物。SPF动物 屏障系统 无特定的微生物和寄生虫的动物。清洁动物 屏障系统 不携带对动物危害大,对科学研究 干扰大的病原微生物。普通动物 开放系统 不携带人畜共患病和动物烈性传 染病原体的动物。四、实验动物微生物和寄生虫质量控制四、实验动物微生物和寄生虫质量控制 坚持预防为主的原则，控制动物流行病的三个基本环节传染源、传播途径和易感动物。1、传染源的控制 2、传染途径控制 3、易感性的控制 4、卫生防疫与消毒灭菌 采取积极措施控制实验动物微生物、寄生虫质量检测，保证实验动物的质量

47、。检测的种类：检测的种类：1、实验动物病毒学检测2、实验动物细菌学检测3、实验动物真菌学检测4、实验动物寄生虫学监测 方法可参照相关中华人民共和国国家标准。实验动物微生物、寄生虫的检测1 1、检测内容、检测内容 2 2、检测程序、检测程序 动物 编号 外观检查 麻醉 检测体外寄生虫和皮肤病原真菌 采血 无菌解剖 体内寄生虫和细菌检测采样 检验报告 3、检测方法检测方法 3.1细菌检测细菌检测分离培养的方法，其中泰泽病原体采用免疫荧光初筛，再分离病原的方法；结核分枝杆菌和布鲁杆菌采用免疫学检测方法。3.2病毒检测病毒检测免疫学检测方法，免疫酶、免疫荧光以及ELISA试验。目前我们所检测的病毒一般

48、都可以用免疫酶实验进行，其中汉坦病毒、仙台病毒采用免疫荧光实验。3.3寄生虫检测寄生虫检测直接显微镜镜检，其中弓形虫检测采用间接血凝实验检测抗体。无菌的概念是相对的，只是根据目前现有的科学知识和检测方法在一定时期内不能检出的病原体而已。无临床症状，有时出现淋巴细胞增生性疾病和T淋巴细胞瘤传播途径是病原菌经口腔进入胃肠道。种类 饲养环境 概念猴是B病毒的自然宿主，感染率可达10-60。五、动物实验中的生物危害及其防制改变机体的酶系统和免疫反应。青年兔和成年兔易感，发病急，死亡率高，目前普通级兔多数疫苗免疫，因此，爆发的现象较少见。是由狂犬病病毒感染犬引起的以极度兴奋、狂燥不安、流涎、攻击人兽为特

49、征的一种高度接触性人兽共患病。B病毒，Herpesvirus simiae,CercopithecineHerpesvirus 1目前我们所检测的病毒一般都可以用免疫酶实验进行，其中汉坦病毒、仙台病毒采用免疫荧光实验。对致瘤作用研究的干扰，被感染后的组织易被误诊为浸润性肺癌；预防动物实验中生物危害的发生5%福尔马林、3石炭酸可以杀死病毒。动物感染后不表现临床症状。细菌感染危害性及其对实验研究的干扰作用在肿瘤学研究中，常引起移植肿瘤污染。5小时，10%漂白粉2-3小时，2%戊二醛1小时，1%氢氧化钠3.我国按微生物和寄生虫控制标准，将实验动物分为四个等级以满足不同的实验目的：无菌动物 隔离系统

50、以封闭的无菌技术获得的,用现有易感动物：小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、人。五、实验动物中的生物危害及其防制 生物危害生物危害（biohazard）是指在生命科学中，由于实验人员的错误操作，而使有害病原体散播到外界，污染外界环境，并造成周围人及动物感染发病。动物实验中发生的危害的原因：在用实验动物进行生命科学研究时，生物危害的产生于实验者、实验动物及实验环境三大要素。1 1、实验动物、实验动物1.1 普通级实验动物在开放环境中饲养，常常可能有携带病原体的各种媒介昆虫及野鼠进入，把各种病原体感染实验动物。1.2 野生动物 利用像灵长类动物等作为实验动物时，由于其生物学特性，多采用野生，或短期人工繁育训化