微生物的营养和培养基课件.ppt

1、back3微生物能利用的碳源类型微生物能利用的碳源类型大大超过了动物界或植物界所能利用的碳化合物。大大超过了动物界或植物界所能利用的碳化合物。也是宝贵的氮源也是宝贵的氮源“C.H.O.N”和和“C.H.O.N.X”型型，尽量避免将之作为廉价的碳源使用。尽量避免将之作为廉价的碳源使用。美味佳肴美味佳肴 清除石油污染清除石油污染 单纯扩散对营养物的运送缺乏选择能力和逆浓单纯扩散对营养物的运送缺乏选择能力和逆浓度梯度的度梯度的“浓缩浓缩”能力，不是细胞获取营养物能力，不是细胞获取营养物质的主要方式。质的主要方式。酶酶cc培养基培养基微生物的菜谱微生物的菜谱名目繁多、种类各异名目繁多、种类各异1.1.

2、液体培养基液体培养基（liquid media）一类呈液体状态的培养基，在实验室和生产实践一类呈液体状态的培养基，在实验室和生产实践中用途广泛，尤其适用于大规模的培养微生物。中用途广泛，尤其适用于大规模的培养微生物。2.2.固体培养基固体培养基（solid media）广义：广义：一类外观呈固体状态的培养基。一类外观呈固体状态的培养基。狭义：狭义：在液体培养基中加入凝固剂，使之成为在液体培养基中加入凝固剂，使之成为固体的培养基。固体的培养基。固体培养基为微生物生长提供一个营养表面，固体培养基为微生物生长提供一个营养表面，微生物在这表面上可以形成单个菌落。微生物在这表面上可以形成单个菌落。（1

3、1）固化培养基（）固化培养基（solidified medium）例如，加有例如，加有1 12 2琼脂（琼脂（agar）或或5 51212明胶（明胶（gelatin）的液体培养基，可制成遇热可融化、冷却后则呈凝固态的液体培养基，可制成遇热可融化、冷却后则呈凝固态的用途最广的固化培养基。的用途最广的固化培养基。常称常称“固体培养基固体培养基”，由液体培养基中加入适量，由液体培养基中加入适量的的凝固剂凝固剂（gelling agent）而成。而成。凝固剂必须具有的特点：凝固剂必须具有的特点：a.a.不被微生物液化、分解和利用不被微生物液化、分解和利用b.b.在微生物生长的范围内保持固体状态在微生物

4、生长的范围内保持固体状态c.c.凝固点的温度对微生物无害凝固点的温度对微生物无害d.d.不因消毒灭菌的高温处理而破坏不因消毒灭菌的高温处理而破坏e.e.配制方便、价格低廉配制方便、价格低廉f.f.透明度好、粘着力强透明度好、粘着力强常用的凝固剂：常用的凝固剂：琼脂（琼脂（agar）、明胶（明胶（gelatin）、海藻酸钠（海藻酸钠（alginate）、）、脱乙酰吉兰糖胶（脱乙酰吉兰糖胶（Gelrite）、）、多聚醇多聚醇F127F127（pluronic polyol F127 F127）等。等。（2 2）非可逆性固化培养基非可逆性固化培养基EgEg.血清培养基或无机硅胶（血清培养基或无机硅胶

5、（silica gel）培养基培养基等，其中的硅胶平板是专门用于化能自养细菌的等，其中的硅胶平板是专门用于化能自养细菌的分离、纯化等。分离、纯化等。指一类一旦凝固后不能在重新融化的固化培养基。指一类一旦凝固后不能在重新融化的固化培养基。（3 3）天然固态培养基天然固态培养基例如，培养真菌用的由麸皮、米糠、木屑、纤维、稻例如，培养真菌用的由麸皮、米糠、木屑、纤维、稻草粉等配制成的培养基；草粉等配制成的培养基；由马铃薯片、胡萝卜条、大米、麦粒、面包、由马铃薯片、胡萝卜条、大米、麦粒、面包、动物或植物组织直接制备的培养基。动物或植物组织直接制备的培养基。由天然固态基质直接配制成的培养基。由天然固态基

6、质直接配制成的培养基。（4 4）滤膜（）滤膜（membrane filter）是一种坚韧且带有无数微孔的醋酸纤维薄膜。若把是一种坚韧且带有无数微孔的醋酸纤维薄膜。若把滤膜制成圆片覆盖在营养琼脂或浸有营养液的纤维素衬滤膜制成圆片覆盖在营养琼脂或浸有营养液的纤维素衬垫上，就形成了具有固体培养基性质的培养条件。垫上，就形成了具有固体培养基性质的培养条件。滤膜主要用于对含菌量很少的水中微生物的过滤、滤膜主要用于对含菌量很少的水中微生物的过滤、浓缩，然后揭下滤膜，把它放在含适当营养液的衬垫上浓缩，然后揭下滤膜，把它放在含适当营养液的衬垫上进行培养，待长出菌落后，可计算出单位水样中的实际进行培养，待长出菌

7、落后，可计算出单位水样中的实际含菌量。含菌量。固体培养基在科学研究和生产实践上具有广阔的用途，固体培养基在科学研究和生产实践上具有广阔的用途，例如，可用于菌种的分离、鉴定，例如，可用于菌种的分离、鉴定，菌落计数，检验杂菌，菌落计数，检验杂菌，选种、育种，菌种保藏，选种、育种，菌种保藏，抗生素等生物活性物质的生物测定，抗生素等生物活性物质的生物测定，获取大量真菌孢子，获取大量真菌孢子，以及用于微生物固体培养和大规模生产等。以及用于微生物固体培养和大规模生产等。3.3.半固体培养基半固体培养基（semi-solid media）例如，例如，“稀琼脂稀琼脂”（sloppy agar），），它在小型容

8、它在小型容器倒置时不会流出，但在剧烈震荡后则呈破散状器倒置时不会流出，但在剧烈震荡后则呈破散状态。态。指在液体培养基中加入少量的指在液体培养基中加入少量的凝固剂凝固剂而配而配制成的半固体状态培养基，制成的半固体状态培养基，一般可在液体培养基中加入一般可在液体培养基中加入0.50.5左右的琼脂制成。左右的琼脂制成。半固体培养基可放入试管中形成半固体培养基可放入试管中形成“直立柱直立柱”，这在微，这在微生物学实验中有许多独特的用途，生物学实验中有许多独特的用途，例如，细菌的动力观察（在半固体直立柱中央进行细例如，细菌的动力观察（在半固体直立柱中央进行细菌的穿刺接种，观察细菌的运动能力），菌的穿刺接

9、种，观察细菌的运动能力），微生物趋化性的研究，微生物趋化性的研究，厌氧菌的培养、分离和计数，厌氧菌的培养、分离和计数，细菌和酵母菌的菌种保藏，细菌和酵母菌的菌种保藏，以及噬菌体效价测定（双层平板法）等。以及噬菌体效价测定（双层平板法）等。4.4.脱水培养基脱水培养基（dehydrated culture media）又称又称脱水商品培养基脱水商品培养基（dehydrated commercial media）或或预制干燥培养基预制干燥培养基（pre-fabricated dried culture media）,指含有除水以外的一切成分的商品培养基，使用时只要加入指含有除水以外的一切成分的商品

10、培养基，使用时只要加入适量水分并加以灭菌即可，是一类既有成分精确又有使用方适量水分并加以灭菌即可，是一类既有成分精确又有使用方便等优点的便等优点的现代化培养基现代化培养基。鉴别培养基鉴别培养基(differential medium)伊红和美蓝二种苯胺染料可抑制伊红和美蓝二种苯胺染料可抑制G+细菌和一些难培养的细菌和一些难培养的G细菌。细菌。在低酸度时，这二种染料结合形成沉淀，起着产酸指示剂的作用。在低酸度时，这二种染料结合形成沉淀，起着产酸指示剂的作用。试样中的多种肠道菌会在试样中的多种肠道菌会在EMB培养基上产生相互易区分的特征菌落培养基上产生相互易区分的特征菌落，因而易于辨。例如大肠杆菌强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，因而易于辨。例如大肠杆菌强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，菌体呈酸性，菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可看到菌体呈酸性，菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光。绿色金属闪光。鉴别培养基鉴别培养基大肠杆菌大肠杆菌 绿脓杆菌绿脓杆菌 大肠杆菌从菌落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光。大肠杆菌从菌落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光。病毒、立克次氏体和衣原体等活细病毒、立克次氏体和衣原体等活细胞专性寄生微生物，常用鸡胚培养法胞专性寄生微生物，常用鸡胚培养法和动物培养法进行培养。和动物培养法进行培养。