食品中有害污染物的检验优秀课件.ppt

1、食品中有害污染物的检验优选食品中有害污染物的检验有机磷农药多为磷酸酯类或硫代磷酸酯类，其结构式中R1、R2多为甲氧基（CH3O-）或乙氧基（C2H5O-）；Z为氧（O）或硫（S）原子：X为烷氧基、芳氧基或其他取代基团。可以合成多种有机磷化合物。过去我国生产的有机磷农药绝大多数为杀虫剂，如常用的对硫磷、内吸磷、马拉硫磷、乐果、敌百虫及敌敌畏等，近几年来已先后合成杀菌剂、杀鼠剂等有机磷农药。敌敌畏，dichlorvos，O,O-二甲基-O-（2，2-二氯乙烯基）磷酸酯。POM e OM e OOCHC C l2l甲拌磷，phorate，O,O-二乙基-S-乙硫基甲基二硫代磷酸酯PC2H5OC2H5

2、OSSCH2S C2H5甲基对硫磷（O,O-二甲基-O-对硝基苯基硫代磷酸酯）对硫磷（O,O-二乙基-O-对硝基苯基硫代磷酸酯）PSCH3OCH3OONO2NO2OPC2H5OC2H5OS有机磷农药大多呈油状或结晶状，工业品呈淡黄色至棕色，除敌百虫和敌敌畏之外，大多是有蒜臭味。不溶于水，易溶于有机溶剂不溶于水，易溶于有机溶剂如苯、丙酮、乙醚、三氯甲烷及油类，对光、热、氧均较稳定，遇碱易分遇碱易分解破坏解破坏，敌百虫例外。所以有机磷农药的提取与净化应在中性或酸性条件下进行。敌百虫为白色结晶，能溶于水，遇碱可转变为毒性较大的敌敌畏。GB/T14553-2003 粮食、水果和蔬菜中有机磷农药测定的

3、气相色谱法一、气相色谱法一、气相色谱法 原理：样品经处理（提取、净化和浓缩）后，有机磷农药组分经气相色谱柱分离进入火焰光度检测器，在富氢焰上燃烧，以HPO碎片的形式，放射出波长526nm的特性光谱。检测该波长光线的强度，用色谱峰保留时间定性，峰高或峰面积定量。将蔬菜切碎混匀，称取10.00g于250ml具塞锥形瓶中 加入无水硫酸钠脱水 加入活性炭脱色（加入中性氧化铝脱油）加入二氯甲烷提取，滤纸过滤 挥发提取剂 二氯甲烷定容至2.0ml。样品处理：样品处理：水果、蔬菜和谷物样品中加入丙酮水，水果、蔬菜和谷物样品中加入丙酮水，以捣碎法用组织捣碎机匀浆提取；以捣碎法用组织捣碎机匀浆提取；组织捣碎机组

4、织捣碎机 匀浆液经抽滤，匀浆液经抽滤，真空抽滤装置真空抽滤装置 滤液中加入足够的氯化钠固体使溶液处于氯化钠滤液中加入足够的氯化钠固体使溶液处于氯化钠饱和状态，猛烈振摇，静置，丙酮与水相分层，收饱和状态，猛烈振摇，静置，丙酮与水相分层，收集丙酮层（上层）；集丙酮层（上层）；水相用二氯甲烷提取；水相用二氯甲烷提取；将将丙酮丙酮和和二氯甲烷二氯甲烷提取液合并，无水硫酸提取液合并，无水硫酸钠脱水。钠脱水。漩涡振荡器漩涡振荡器 旋转蒸发器减压浓缩，浓缩液用二氯甲烷旋转蒸发器减压浓缩，浓缩液用二氯甲烷转移并定容。转移并定容。旋旋转转蒸蒸发发仪仪氮吹仪氮吹仪小结样品前处理 二氯甲烷提取 中性氧化铝脱油 活性

5、炭脱色 无水硫酸钠脱水色谱测定：气相色谱法火焰光度检测器（FPD）526nm玻璃柱固定相担体：Chromororb W AW DMCS固定液：QF-1,SE-30,OV-17,OV-101,PEGA,NPGA 火焰光度检测器（火焰光度检测器（FPD）通常用来）通常用来检测含有硫磷元素的有机物。用火焰检测含有硫磷元素的有机物。用火焰光度检测器测定有机磷农药有高选择光度检测器测定有机磷农药有高选择性和高灵敏性的特点。性和高灵敏性的特点。第二节 黄曲霉毒素B1黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉(aspergillus flavus)寄

6、生曲霉(a.parasiticus)产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。黄曲霉毒素在紫外线照射下能产生荧光，根据荧光黄曲霉毒素在紫外线照射下能产生荧光，根据荧光颜色不同，将其分为颜色不同，将其分为B族和族和G族两大类及其衍生物。族两大类及其衍生物。B1是最危险的致癌物，经常在玉米，花生，棉花种是最危险的致癌物，经常在玉米，花生，棉花种子，一些干果中常能检测到。子，一些干果中常能检测到。AFT目前已发现目前已发现20余余种。种。AFT主要污染粮油食品、动植物食品等；如花主要污染粮油食品、动植物食品等；如花生、玉米，大米、生、玉米，大米、小麦小麦、豆类、豆类、坚果坚

7、果类、肉类、乳类、肉类、乳及乳制品、水产品等均有黄曲霉毒素污染。其中以及乳制品、水产品等均有黄曲霉毒素污染。其中以花生和玉米污染最严重。家庭自制发酵食品也能检花生和玉米污染最严重。家庭自制发酵食品也能检出黄曲霉毒素，尤其是高温高湿地区的粮油及制品出黄曲霉毒素，尤其是高温高湿地区的粮油及制品种检出率更高。种检出率更高。黄曲霉毒素相对分子量为312-346.难溶于水,易溶于油,甲醇,丙酮和氯仿氯仿等有机溶剂,但不溶于石油醚,己烷和乙醚中.一般在中性溶液中较稳定,但在强酸性溶液中稍有分解,在pH9-10的强碱溶液中或在氧化剂存在下分解迅速.其纯品为无色结晶,耐高温,黄曲霉毒素B1的分解温度为268紫

8、外线对低浓度黄曲霉毒素有一定的破坏性.黄曲霉毒素主要由黄曲霉和寄生曲霉产黄曲霉毒素主要由黄曲霉和寄生曲霉产生生化学结构上，黄曲霉毒素属于二呋喃氧化学结构上，黄曲霉毒素属于二呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，即含有一个二呋喃杂萘邻酮的衍生物，即含有一个二呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）B1和和G1的二呋喃环末端有双键。二呋喃的二呋喃环末端有双键。二呋喃环末端有双键者毒性较强并有致癌性环末端有双键者毒性较强并有致癌性主要为肝脏主要为肝脏急性中毒的动物主要表现为肝脏损伤、肝实质急性中毒的动物主要表现为肝脏损伤、肝实质细胞消失延迟、胆管增生、肝细胞脂质消失延细胞消失延迟、胆管增生、肝

9、细胞脂质消失延迟和肝出血迟和肝出血慢性中毒主要表现为生长发育迟缓、肝脏出现慢性中毒主要表现为生长发育迟缓、肝脏出现亚急性或慢性损伤。可引起原发性肝细癌亚急性或慢性损伤。可引起原发性肝细癌也可作用于其他器官，如肾脏、胃、直肠、乳也可作用于其他器官，如肾脏、胃、直肠、乳腺、卵巢等腺、卵巢等 黄曲霉毒素检验黄曲霉毒素检验高效液相色谱法高效液相色谱法1、原理、原理 样品中的黄曲霉毒素经样品中的黄曲霉毒素经C18柱分离，用柱分离，用带荧光检测器的高效液相色谱仪检测，带荧光检测器的高效液相色谱仪检测，以保留时间定性，峰高或峰面积定量。以保留时间定性，峰高或峰面积定量。2、样品处理、样品处理 （1）样品提取

10、）样品提取 称取适量样品，加少量水浸润，混匀称取适量样品，加少量水浸润，混匀后加入三氯甲烷，振摇提取，再加入无水后加入三氯甲烷，振摇提取，再加入无水硫酸钠，经快速定性滤纸滤于具塞量筒中。硫酸钠，经快速定性滤纸滤于具塞量筒中。2、样品处理、样品处理 （2）样品净化和衍生化反应）样品净化和衍生化反应 将少量提取液通过装有硅镁吸附剂的层将少量提取液通过装有硅镁吸附剂的层析管，用三氯甲烷析管，用三氯甲烷-正己烷、三氯甲烷正己烷、三氯甲烷-甲醇甲醇淋洗除去杂质，最后用丙酮淋洗除去杂质，最后用丙酮-水洗脱水洗脱AFT，收，收集于烧杯内，集于烧杯内，在水浴上将溶剂挥干，用少量三氯甲烷溶解残渣在水浴上将溶剂挥

11、干，用少量三氯甲烷溶解残渣并转移到具塞小试管中。取部分溶液加入正己烷、并转移到具塞小试管中。取部分溶液加入正己烷、三氟乙酸，将试管塞紧，混匀，静置三氟乙酸，将试管塞紧，混匀，静置30min，使，使AFTB1衍生为衍生为AFTB2a，用氮气吹干，加入少量流动，用氮气吹干，加入少量流动相溶解供高效液相色谱测定。相溶解供高效液相色谱测定。3、测定、测定 将按上述方法处理的衍生和未衍生样品和标将按上述方法处理的衍生和未衍生样品和标准溶液注入高效液相色谱仪分析。准溶液注入高效液相色谱仪分析。荧光检测器，荧光检测器，Ex=360nm,Em=425nm C18色谱柱（色谱柱（2504mm）甲醇甲醇-0.01

12、mol/L磷酸二氢钾（磷酸二氢钾（1+1）1.3ml/min样品用三氟乙酸衍生的目的是确证样品样品用三氟乙酸衍生的目的是确证样品中是否含有中是否含有AFTBAFTB1 1。确证样品中是否含有黄曲霉毒素？确证样品中是否含有黄曲霉毒素？未衍生化的未衍生化的衍生化的衍生化的标准溶液（标准溶液（AFTB1）标准溶液（标准溶液（AFTB2a）样品溶液样品溶液(出峰情况判断，出峰情况判断，有？无有？无?)样品溶液衍生化后在此样品溶液衍生化后在此出峰，可判断样品中检出峰，可判断样品中检出出AFTB1一、四环素类抗生素的残留检验一、四环素类抗生素的残留检验 由放线菌产生的一类广谱抗生素，由放线菌产生的一类广谱

13、抗生素，是家畜、家禽常用的防病治病药物。包是家畜、家禽常用的防病治病药物。包括括金霉素金霉素(CTC)、土霉素、土霉素(OTC)、四环、四环素素（TC）及半合成衍生物及半合成衍生物。其结构均为其结构均为十二氢化并四苯十二氢化并四苯基本骨架。基本骨架。第三节第三节 抗生素残留量抗生素残留量57R5R7HCl金霉素金霉素OHH土霉素土霉素HH四环素四环素 抗生素结构中都含有酸性的酚羟抗生素结构中都含有酸性的酚羟基和烯醇羟基及碱性的二甲氨基，该基和烯醇羟基及碱性的二甲氨基，该类药物均为酸碱两性化合物。类药物均为酸碱两性化合物。57 易溶于稀酸和稀碱。易溶于稀酸和稀碱。在我国四环素、土霉素和金霉素是允

14、在我国四环素、土霉素和金霉素是允许使用，但有最高残留限量规定。许使用，但有最高残留限量规定。家家禽禽高效液相色谱法的检出限：四环素：0.15mg/kg 土霉素：0.20mg/kg 金霉素：0.65mg/kgHPLCHPLC法测定四环素类兽药残留法测定四环素类兽药残留 取一定量切碎的肉样食品，用适量取一定量切碎的肉样食品，用适量5%5%高氯酸高氯酸振荡提取；振荡提取；将提取液离心后，取上清液经将提取液离心后，取上清液经0.45um0.45um滤膜过滤；滤膜过滤；反相色谱分离，紫外检测器检测，保留时间反相色谱分离，紫外检测器检测，保留时间定性，定性，工作曲线法工作曲线法定量。定量。检测波长：检测波

15、长：355nm；色谱柱色谱柱:ODS柱；柱；流动相：乙腈流动相：乙腈+0.01mol/L磷酸二氢磷酸二氢钠溶液（钠溶液（35+65）（）（pH2.5），），使用前用超声波脱气；使用前用超声波脱气；柱温：室温，流速是柱温：室温，流速是1.0ml/min.工作曲线的制作：工作曲线的制作：取切碎的肉样，分别加入不同浓度的取切碎的肉样，分别加入不同浓度的四环素类抗生素标准溶液，按样品前处四环素类抗生素标准溶液，按样品前处理方法处理后，进样测定，记录保留时理方法处理后，进样测定，记录保留时间和峰高。以峰高为纵坐标，以待测物间和峰高。以峰高为纵坐标，以待测物浓度为横坐标，绘制工作曲线。浓度为横坐标，绘制工

16、作曲线。78.这世上，没有谁活得比谁容易，只是有人在呼天抢地，有人在默默努力。50.人本是人，不必刻意去做人；世本是世，无须精心去处世。坐亦禅，行亦禅，一花一世界，一叶一如来，春来花自青，秋至叶飘零，无穷般若心自在，语默动静体自然。不要刻意地去追逐，一切遵循自然的规律，开心轻松，过好每一天。16.雄鹰必须比鸟飞得高，因为它的猎物就是鸟。76.相信别人，放弃自己，这是许多失败人生的开始！2.感谢上天让我孤单，忍受灵魂的磨难。77.勤奋者废寝忘食，懒惰人总没有时间。日本83.当我们眺望远方的时候，近处的风景便看不清了。25.自古成功在尝试。68.懒散是一个母亲，她有一个儿子：抢劫，还有一个女儿：饥

17、饿。雨果85.很多人应该都吃过“茶叶蛋”，蛋壳破裂最多的，才是最入味。同样，人生经历愈丰富，挫折愈多，愈有味道。苦难可以帮助一个人成长，而之后的快乐是你想象不到的。64.人生就有许多这样的奇迹，看似比登天还难的事，有时轻而易举就可以做到，其中的差别就在于非凡的信念。23.每个人都有属于自己的舞台，这个舞台，是那么光灿，美丽，生命从此辉煌无悔！只要坚韧不拔的走下去！53.前有阻碍，奋力把它冲开，运用炙热的激情，转动心中的期盼，血在澎湃，吃苦流汗算什么。48.我们最值得自豪的不在于从不跌倒，而在于每次跌倒之后都爬起来。49.不渴望能够一跃千里，只希望每天能够前进一步。72.任何成就都是刻苦劳动的结果。76.青春太好，好到你无论怎么过都觉浪掷，回头一看，都要生悔。17.应对失败和挫折，一笑而过是一种乐观自信，然后重振旗鼓，这是一种勇气心。应对误解和仇恨，一笑而过是一种坦然宽容，然后持续本色，这是一种达观心。79.少壮不努力，老大徒伤悲。