第十部分动物营养研究方法教学课件.ppt
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- 第十 部分 动物 营养 研究 方法 教学 课件
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1、第十章第十章 动物营养研究方法动物营养研究方法 本章内容本章内容第一节第一节 化学分析法化学分析法第二节第二节 消化实验消化实验第三节第三节 代谢试验代谢试验第四节第四节 平衡实验平衡实验第五节第五节 饲养实验饲养实验第一节第一节 化学分析法化学分析法一、营养物质的分析一、营养物质的分析 三、动物组织和血液理化成分分析三、动物组织和血液理化成分分析二、抗营养因子分析二、抗营养因子分析作用作用:为判定动物营养状况、动物营养需要和饲料为判定动物营养状况、动物营养需要和饲料的营养价值提供基础数据。的营养价值提供基础数据。分类:分类:营养物质的分析、抗营养因子分析及动物组营养物质的分析、抗营养因子分析
2、及动物组织和血液理化成分分析。织和血液理化成分分析。一、营养物质的分析一、营养物质的分析概念:概念:应用物理、化学原理和方法对饲料、动应用物理、化学原理和方法对饲料、动物组织及动物排泄物的某些成分,进行定性、定物组织及动物排泄物的某些成分,进行定性、定量分析。量分析。(1)(1)水分水分 (2)(2)粗蛋白(粗蛋白(CPCP)真蛋白)真蛋白(TP)(TP)(3)(3)粗脂肪(粗脂肪(EEEE)(4)(4)粗纤维(粗纤维(CFCF)(5)(5)粗灰分粗灰分 (6)(6)无氮浸出物(无氮浸出物(NFENFE)1 1、概略养分分析概略养分分析一、营养物质的分析一、营养物质的分析(1 1)维生素)维生
3、素 (2 2)矿物质)矿物质 (3 3)微量元素)微量元素 (4 4)氨基酸)氨基酸 (5 5)脂肪酸)脂肪酸 (6 6)纯蛋白质)纯蛋白质 (7 7)糖等)糖等2 2、纯养分分、纯养分分析析一、营养物质的分析一、营养物质的分析(1)(1)饲料饲料 (2)(2)排泄物(粪、尿、呼出气、皮屑等)排泄物(粪、尿、呼出气、皮屑等)(3)(3)动物组织动物组织 (4)(4)血液血液 (5)(5)整体动物整体动物3 3、分析对象、分析对象一、营养物质的分析一、营养物质的分析(1)(1)称量法称量法 (2)(2)比色法比色法 (3)(3)滴定法滴定法 (4)(4)原子吸收法原子吸收法 (5)(5)色谱法色
4、谱法 (6)(6)荧光法荧光法 (7)(7)电泳电泳 (8)(8)分子生物技术分子生物技术4 4、分析方法、分析方法一、营养物质的分析一、营养物质的分析二、抗营养因子分析二、抗营养因子分析 抗营养因子是指饲料中本身所有或从外抗营养因子是指饲料中本身所有或从外界进入,影响饲料营养价值和动物生长的界进入,影响饲料营养价值和动物生长的物质。物质。1 1、概念、概念(1 1)影响蛋白质消化)影响蛋白质消化 蛋白酶抑制剂、凝集素、皂苷、多酚化合物等蛋白酶抑制剂、凝集素、皂苷、多酚化合物等 (2 2)影响矿物元素利用)影响矿物元素利用 植酸、草酸、葡萄糖硫苷、棉酚植酸、草酸、葡萄糖硫苷、棉酚 (3 3)影
5、响维生素利用)影响维生素利用 双香豆素、抗维生素双香豆素、抗维生素B B族因子等族因子等2 2、种类、种类二、抗营养因子分析二、抗营养因子分析(4 4)影响碳水化合物利用)影响碳水化合物利用 (5 5)刺激免疫系统的抗营养因子)刺激免疫系统的抗营养因子 如如:抗原蛋白抗原蛋白 (6 6)综合性抗营养因子)综合性抗营养因子 如如:水溶性非淀粉多糖。水溶性非淀粉多糖。二、抗营养因子分析二、抗营养因子分析 分析饲料中抗营养因子的种类和含量,可分析饲料中抗营养因子的种类和含量,可指导饲料的合理加工、利用、贮存,如通过指导饲料的合理加工、利用、贮存,如通过加热可提高豆类籽实的营养价值。加热可提高豆类籽实
6、的营养价值。3 3、意义、意义二、抗营养因子分析二、抗营养因子分析 (1)(1)酶法酶法 (2)(2)比色法比色法 (3)(3)滴定法滴定法 (4)(4)原子吸收法原子吸收法 (5)(5)色谱法色谱法 (6)(6)荧光法荧光法4 4、分析方法、分析方法二、抗营养因子分析二、抗营养因子分析三、动物组织血液理化成分分析三、动物组织血液理化成分分析 (1 1)动物组织和血液中各种营养物质;)动物组织和血液中各种营养物质;(2 2)动物组织和血液中与营养物质有关的功)动物组织和血液中与营养物质有关的功能酶或相关酶;能酶或相关酶;(3 3)动物动物组织和血液中某些代谢中间产)动物动物组织和血液中某些代谢
7、中间产物或最终产物。物或最终产物。1 1、分析对象、分析对象 (1 1)概略养分或纯养分;)概略养分或纯养分;(2 2)营养物质代谢产物;)营养物质代谢产物;(3 3)相关标识功能酶,如硒)相关标识功能酶,如硒血浆谷胱甘肽过血浆谷胱甘肽过氧化物酶、锌氧化物酶、锌血清碱性磷酸酶、铜血清碱性磷酸酶、铜血浆铜蓝血浆铜蓝蛋白氧化酶和血浆尿素氮等。蛋白氧化酶和血浆尿素氮等。2 2、分析内容、分析内容三、动物组织血液理化成分分析三、动物组织血液理化成分分析第二节第二节 消化实验消化实验一、一、消化试验概念与目的消化试验概念与目的 四、尼龙袋法四、尼龙袋法三、三、体外消化试验体外消化试验二、二、体内消化试验
8、体内消化试验 以测定动物对饲料养分的消化能力或饲料养以测定动物对饲料养分的消化能力或饲料养分的可消化性为目的的试验。分的可消化性为目的的试验。2 2、目的:、目的:准确地量化饲料中各种养分被动物消化利用准确地量化饲料中各种养分被动物消化利用的程度的程度 ,也是评定饲料营养价值的重要方法。,也是评定饲料营养价值的重要方法。3 3、种类、种类一、消化试验概念与目一、消化试验概念与目的的1 1、概念:、概念:体内(体内(in vivo)消化实验消化实验离体(离体(in vitro)消化实验消化实验尼龙袋法尼龙袋法(nylon bags technique)全收粪法全收粪法指示剂法指示剂法消化道消化液
9、消化道消化液人工消化液人工消化液肛门收粪肛门收粪内源指示剂内源指示剂外源指示剂外源指示剂消化实验消化实验体内(体内(in vivoin vivo)消)消化实验化实验离体(离体(in vitroin vitro)消)消化实验化实验尼龙袋法尼龙袋法(nylon bags(nylon bags technique)technique)全收粪法全收粪法指示剂法指示剂法消化道消化液消化道消化液人工消化液人工消化液肛门收粪肛门收粪回肠收粪回肠收粪内源指示剂内源指示剂外源指示剂外源指示剂消化实验方法剖析消化实验方法剖析粪中养分组成:粪中养分组成:饲料中未消化的养分饲料中未消化的养分;消化道分泌物消化道分泌物
10、;消化道脱落细胞消化道脱落细胞;消化道微生物及其代谢产物。消化道微生物及其代谢产物。4.4.消化率计算公式消化率计算公式表观消化率表观消化率=(食入养分(食入养分 -粪中养分)粪中养分)食入养分食入养分X 100%X 100%一、消化试验概念与目一、消化试验概念与目的的真消化率真消化率=食入养分食入养分 -(粪中养分(粪中养分-内源养分)内源养分)食入养分食入养分 X100%X100%一、消化试验概念与目一、消化试验概念与目的的食入饲料总能食入饲料总能-粪中总能粪中总能食入饲料总量食入饲料总量(kg)表观消化能表观消化能(MJ/kg)食入总能食入总能 -(粪中总能(粪中总能-内源能)内源能)食
11、入饲料总量(食入饲料总量(kg)真消化能真消化能(MJ/kg)消化能消化能一、消化试验概念与目一、消化试验概念与目的的(一)种类(一)种类(二)不同饲料消化率的测定方法(二)不同饲料消化率的测定方法(三)基本步骤(三)基本步骤二、二、体内消化实验体内消化实验(一)体内消化试验的种(一)体内消化试验的种类类 1 1、根据其收粪方式可分为:、根据其收粪方式可分为:(1 1)全收粪法;)全收粪法;(2 2)部分收粪法(指示剂法)部分收粪法(指示剂法)2.2.全收粪法根据收粪的部位不同又分为:全收粪法根据收粪的部位不同又分为:(1 1)肛门收粪法;)肛门收粪法;(2 2)回肠末端收粪法)回肠末端收粪法
12、 全收粪法全收粪法 1 1)优点:)优点:试验操作方便、测定较准确;试验操作方便、测定较准确;2 2)缺点)缺点 排泄物污染严重;排泄物污染严重;采食量、排粪量难以准确记录;采食量、排粪量难以准确记录;粪中养分含量受环境影响大;粪中养分含量受环境影响大;工作量大。工作量大。指示剂法指示剂法1 1)对指示剂的要求)对指示剂的要求 不能被动物消化吸收不能被动物消化吸收 在饲料中、粪便中能均匀分布在饲料中、粪便中能均匀分布 有很高的回收率有很高的回收率 对动物没有毒副作用对动物没有毒副作用 2 2)种类)种类 外源指示剂外源指示剂饲料本身不含,人为加入饲料中的指示物质,饲料本身不含,人为加入饲料中的
13、指示物质,一般多用一般多用CrCr2 2O O3 3;内源指示剂内源指示剂饲料本身含有,不能被动物消化吸收但可以测饲料本身含有,不能被动物消化吸收但可以测定的成分,多用酸性不容灰分(定的成分,多用酸性不容灰分(AIA acid insoluble ashAIA acid insoluble ash)2mol 2mol 或或4mol HCl4mol HCl 不溶不溶 4 4)缺点:)缺点:指示剂回收率对消化率影响较大,并且指示剂回收率对消化率影响较大,并且很难找到回收率很理想的指示物质:分析困难,很难找到回收率很理想的指示物质:分析困难,较难获得重复性高的测定数据;与全收粪法最后较难获得重复性高
14、的测定数据;与全收粪法最后的缺点相同。的缺点相同。3 3)优点:优点:在于减少收集全部粪便带来的麻烦,在于减少收集全部粪便带来的麻烦,省时省力,尤其是在收集全部粪便较困难时。省时省力,尤其是在收集全部粪便较困难时。指示剂法指示剂法 5 5)消化率的计算)消化率的计算原理:食入指示剂量原理:食入指示剂量=排出指示剂量排出指示剂量饲粮指示剂含量饲粮指示剂含量粪中养分含量粪中养分含量粪中指示剂含量粪中指示剂含量饲粮养分含量饲粮养分含量100-100-100100养分消化养分消化率(率(%)=指示剂法指示剂法回肠末端回肠末端消化率测定消化率测定 1 1)T T型瘘管型瘘管 优点:优点:安瘘管后对荷术动
15、安瘘管后对荷术动物生理影响小;物生理影响小;缺点:缺点:必须用指示剂,因必须用指示剂,因不可能收集全部粪尿,由此取不可能收集全部粪尿,由此取样缺乏代表性,而且较麻烦。样缺乏代表性,而且较麻烦。图图1 1、T T型瘘管示意图型瘘管示意图 优点:收粪简便,而且可收集全部粪样;优点:收粪简便,而且可收集全部粪样;缺点:手术复杂、成功率低和护理相对麻烦。缺点:手术复杂、成功率低和护理相对麻烦。2 2)回)回-直肠吻合术直肠吻合术回回直肠吻合术直肠吻合术 图图3 33)3)盲肠切除法盲肠切除法 (家禽)家禽)代谢笼中装了瘘管的猪代谢笼中装了瘘管的猪(二)消化率的测定(二)消化率的测定1 1 直接测定法(
16、直接测定法(适合配合饲料和某些原料适合配合饲料和某些原料)优点:优点:简单,直接以待测饲料为全部饲粮,无养分互简单,直接以待测饲料为全部饲粮,无养分互作的干扰;作的干扰;缺点:缺点:某些饲料适口性差,时间长后可能导致营养缺某些饲料适口性差,时间长后可能导致营养缺乏症。乏症。原理:原理:被测料替代实际基础饲料的一部分,分别被测料替代实际基础饲料的一部分,分别测定基础饲粮和替代后饲粮的养分。测定基础饲粮和替代后饲粮的养分。优点:优点:克服养分不平衡的影响。克服养分不平衡的影响。缺点:缺点:基础饲粮营养平衡,则代入被测饲料后可基础饲粮营养平衡,则代入被测饲料后可能出现不平衡。能出现不平衡。2 2 间
17、接测定法间接测定法(饲料替代法,套算法或二次试验法(饲料替代法,套算法或二次试验法)(二)消化率的测定(二)消化率的测定 第一次:测定基础饲粮养分消化率第一次:测定基础饲粮养分消化率 第二次:测定新饲粮养分消化率第二次:测定新饲粮养分消化率 为减少动物的影响,用二组动物同时试验为减少动物的影响,用二组动物同时试验 新饲粮组成:新饲粮组成:70-85%70-85%基础饲粮基础饲粮+15-30%+15-30%被测饲被测饲料料 间接测定间接测定 二次消化试验二次消化试验(二)消化率的测定(二)消化率的测定 第一组第一组 第二组第二组 第一次第一次 消化试验消化试验 基础日粮基础日粮 预饲期预饲期 试
18、验期试验期 基础日粮基础日粮 +被测饲料被测饲料 5 57 7天过渡期天过渡期 第二次第二次 消化试验消化试验 基础日粮基础日粮 +被测饲料被测饲料 试验期试验期 基础日粮基础日粮 交叉试验步骤示意交叉试验步骤示意 套算法的试验步骤套算法的试验步骤式中:式中:D D为被测饲料养分消化率为被测饲料养分消化率 A A为基础饲粮养分消化率为基础饲粮养分消化率 B B为混合饲粮养分消化率为混合饲粮养分消化率 F F为被测饲料养分占混合饲粮该养分的比例。为被测饲料养分占混合饲粮该养分的比例。F FX100X100 A AD(D()(B-A)(B-A)(二)消化率的测定(二)消化率的测定假定基础饲粮养分消
19、化率不变;假定基础饲粮养分消化率不变;养分间无互作效应。养分间无互作效应。混合饲粮中被测饲料的比例很重要混合饲粮中被测饲料的比例很重要1 1、动物选择、动物选择2 2、日粮配制、日粮配制 3 3、试验步骤、试验步骤 (三)消化试验的基本步骤与要求(三)消化试验的基本步骤与要求4 4、粪的收集和处理、粪的收集和处理5 5、养分消化率和消化能测定、养分消化率和消化能测定(1 1)预试期:适应环境、摸清采食量、排粪规律)预试期:适应环境、摸清采食量、排粪规律 (2 2)正试期:记录采食量、收集排粪)正试期:记录采食量、收集排粪 时时 间:单胃动物:间:单胃动物:5-105-10天;天;反刍动物:反刍
20、动物:7-147-14天天3 3、试验步骤、试验步骤 预备试验期预备试验期 正式试验期正式试验期 牛、羊牛、羊 10-1410-14天天 10-1410-14天天 马马 7-107-10天天 8-108-10天天 猪猪 5-105-10天天 6-106-10天天 家禽家禽*3-5 3-5 天天 4-5 4-5 天天 表表 不同种类的动物的试验期规定不同种类的动物的试验期规定*一般是进行代谢实验,采用强饲法,试验期为一般是进行代谢实验,采用强饲法,试验期为1-21-2天。天。4 4、粪的收集和处理、粪的收集和处理(1 1)收粪方法:)收粪方法:专用消化柜或消化栏、动物肛专用消化柜或消化栏、动物肛
21、门上套收粪袋门上套收粪袋 (2 2)粪样处理)粪样处理 1 1)全粪法:收集全部粪便)全粪法:收集全部粪便 2 2)指示剂法:每天定时收粪)指示剂法:每天定时收粪 粪样称重,混匀,按总重的粪样称重,混匀,按总重的1/10-1/501/10-1/50取取 样,加样,加1010盐酸盐酸1010mLmL/100g/100g鲜粪样和少量甲鲜粪样和少量甲苯,固氮防腐。苯,固氮防腐。5 5、养分消化率和消化能测定、养分消化率和消化能测定例例1 1:测定仔猪饲粮:测定仔猪饲粮CPCP消化率消化率 日采食量:日采食量:1000g1000g,饲粮饲粮CPCP含量:含量:16%16%日排粪量:日排粪量:250g2
22、50g,粪中粪中CPCP含量:含量:12%12%CPCP消化率消化率=(1000(100016%-25016%-25012%12%)(1000100016%16%)100100=81.2%81.2%例例 2:2:某饲粮消化实验结果如下某饲粮消化实验结果如下,计算计算CFCF消化率消化率 饲料饲料CFCF含量含量:40%:40%粪中粪中CFCF含量含量:40%:40%饲料指示剂添加量饲料指示剂添加量:3%:3%粪中指示剂含量粪中指示剂含量:6%:6%CFCF消化率消化率=100 100 3 36 640404040100100=50=50 1 1)直接测定)直接测定 :根据消化试验结果和结合能根
23、据消化试验结果和结合能 值测定进行值测定进行 DE=DE=(GE-FEGE-FE)/采食量(采食量(kgkg)(四)消化能值的测定(四)消化能值的测定 饲料消化能饲料消化能 =(33.47-8.3433.47-8.34)/2/2 =12.57 =12.57(MJ/KgMJ/Kg)例如:体重例如:体重50Kg50Kg的猪,每日食入日粮的猪,每日食入日粮2Kg2Kg,含总,含总 能能33.47MJ33.47MJ,每日排粪中的总能为,每日排粪中的总能为8.34MJ8.34MJ,计算,计算其采食饲料的的消化能。其采食饲料的的消化能。(四)消化能值的测定(四)消化能值的测定 根据每日食入的可消化粗蛋白质
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