第二章菌种选育、保藏与复壮课件.ppt

1、 第二章第二章菌种选育、保藏与复壮.2022-10-9第一节食品发酵与酿造工业菌种第一节食品发酵与酿造工业菌种第二节菌种选育第二节菌种选育 第三节菌种保藏与复壮第三节菌种保藏与复壮第四节国内外主要菌种保藏机构第四节国内外主要菌种保藏机构.2022-10-9第一节 食品发酵与酿造工业菌种.2022-10-92022-10-94一、现代发酵工业对菌种的要求现代发酵工业对菌种的要求（1 1）非病源菌，不产生有害活性物或毒素；）非病源菌，不产生有害活性物或毒素；（2 2）发酵周期短，发酵产物的产生能力强；）发酵周期短，发酵产物的产生能力强；（3 3）高转化，易分离纯化，低成本，高质量；）高转化，易分离

2、纯化，低成本，高质量；（4 4）生长繁殖力强，速度快，较强产孢能力；）生长繁殖力强，速度快，较强产孢能力；（5 5）原料广，价廉，易被微生物利用、转化；）原料广，价廉，易被微生物利用、转化；（6 6）对添加的前体物质有耐受能力；）对添加的前体物质有耐受能力；（7 7）菌种纯，遗传特性稳定，抗噬菌体能力强。）菌种纯，遗传特性稳定，抗噬菌体能力强。.2022-10-9二、现代发酵工业常见菌种现代发酵工业常见菌种.2022-10-9类别类别微生物名称微生物名称产物产物用途用途细菌细菌短杆菌短杆菌谷氨酸谷氨酸食用、医药食用、医药短杆菌短杆菌肌苷酸肌苷酸食用、医药食用、医药枯草杆菌枯草杆菌淀粉酶淀粉酶葡

3、萄糖、糊精、酒精发酵、啤酒酿造葡萄糖、糊精、酒精发酵、啤酒酿造枯草杆菌枯草杆菌蛋白酶蛋白酶酱油速酿、饲料酱油速酿、饲料巨大芽孢杆巨大芽孢杆菌菌葡萄糖异构酶葡萄糖异构酶由葡萄糖制造果糖由葡萄糖制造果糖酵母菌酵母菌酒精酵母酒精酵母酒精酒精医药、食用医药、食用假丝酵母假丝酵母单细胞蛋白单细胞蛋白酵母菌体蛋白酵母菌体蛋白脆壁酵母脆壁酵母乳糖酶乳糖酶食品工业食品工业霉菌霉菌黑曲霉黑曲霉柠檬酸柠檬酸食用、医药食用、医药黑曲霉黑曲霉柚苷酶、酸性蛋白柚苷酶、酸性蛋白酶酶柑橘罐头脱除苦味柑橘罐头脱除苦味黑曲霉黑曲霉单宁酶、糖化酶单宁酶、糖化酶分解单宁、酶精制、酒精发酵工业分解单宁、酶精制、酒精发酵工业栖土曲霉栖

4、土曲霉蛋白酶蛋白酶同枯草杆菌蛋白酶同枯草杆菌蛋白酶根霉根霉糖化酶、甾体激素糖化酶、甾体激素葡萄糖制造、酒精厂糖化、医药葡萄糖制造、酒精厂糖化、医药毛霉毛霉蛋白酶蛋白酶腐乳生产腐乳生产青霉菌青霉菌葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶蛋白除葡萄糖、脱氧、食品罐头贮存蛋白除葡萄糖、脱氧、食品罐头贮存木霉菌木霉菌纤维素酶纤维素酶淀粉和食品加工、饲料淀粉和食品加工、饲料黄曲霉菌黄曲霉菌淀粉酶淀粉酶食用、化工食用、化工红曲霉红曲霉糖化酶、红曲色素糖化酶、红曲色素葡萄糖制造、酒精厂糖化、调色剂葡萄糖制造、酒精厂糖化、调色剂.2022-10-9枯草芽孢杆菌.2022-10-9戊糖片球菌.2022-10-9植物乳杆菌.20

5、22-10-9多粘类芽孢杆菌.2022-10-9酿酒酵母.2022-10-9粉状毕赤酵母.2022-10-9红葡萄浓缩汁中的酵母菌形态.2022-10-9产朊假丝酵母.2022-10-9黑曲霉.2022-10-9黑曲霉.2022-10-9青霉.2022-10-9米曲霉米曲霉蛋白酶、淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等.2022-10-9根霉根霉.2022-10-9绿色木霉绿色木霉产生微晶纤维素酶，羧甲基纤维素酶、纤维二糖酶，可完全水解纤维素。.2022-10-9拟康氏木霉产生纤维素酶，羧甲基纤维素酶、纤维二糖酶，可完全水解纤维素。.2022-10-9第二节菌种选育.2022-10-9一、新菌种的

6、分离与筛选一、新菌种的分离与筛选利用人工环境，使样品中目标微生物成为优势菌。样品来源越广泛，获得新菌种的可能性越大。纯种分离的常用方法有平板划线分离法、稀释分离法和涂布分离法。样品样品采集采集富集富集培养培养分离分离纯化纯化一般生产性能的测定通过初筛和复筛的方法来确定。性能性能鉴定鉴定.2022-10-9（一）样品采集（一）样品采集 原则原则 样品来源越广泛，获得新菌种的可能性越大。样品来源越广泛，获得新菌种的可能性越大。土壤采样方法土壤采样方法Q土壤的有机质含量和通风状况（土壤的有机质含量和通风状况（5 525cm25cm深度深度）Q土壤的土壤的pHpH和植被状况和植被状况Q地理条件地理条件

7、Q季节条件季节条件E细菌、放线菌：细菌、放线菌：耕地、菜园和近郊土壤；E酵母菌：酵母菌：果园树根的土壤中；E霉霉 菌：菌：动植物残体及霉腐土层中；E黑曲霉：黑曲霉：稻场、谷物堆积处。pHpH7.0 7.0：霉菌、酵母菌居多pH7.0 pH7.0 7.57.5：细菌、放线菌丰富.2022-10-9（二）富集培养（二）富集培养 富集培养的目的富集培养的目的 利用人工环境，使样品中目标微生物成为优势菌。利用人工环境，使样品中目标微生物成为优势菌。富集培养的方法富集培养的方法控制培养基的营养成分控制培养基的营养成分控制培养条件控制培养条件 富集培养的方式富集培养的方式分批培养（分批培养（Batch c

8、ulture Batch culture）连续培养（连续培养（Continuous culture Continuous culture）分批补料培养（分批补料培养（Fed-batch culture Fed-batch culture）.2022-10-92022-10-926（三）纯种分离（三）纯种分离（1 1）平板划线分离法）平板划线分离法（2 2）稀释分离法）稀释分离法（3 3）涂布分离法）涂布分离法（4 4）毛细管分离法）毛细管分离法（5 5）小滴分离法）小滴分离法.2022-10-9.2022-10-92022-10-928初筛和复筛初筛和复筛（1 1）初筛（定性）初筛（定性粗放！

9、）粗放！）平板筛选平板筛选 （变色圈、透明圈、生长圈、抑菌圈变色圈、透明圈、生长圈、抑菌圈 ）摇瓶发酵筛选摇瓶发酵筛选（2 2）复筛（定量）复筛（定量精确！）精确！）1 1个菌株重复个菌株重复3 35 5瓶，精确分析瓶，精确分析如酶活力单位、耐酒精程度等。如酶活力单位、耐酒精程度等。.2022-10-9溶磷细菌的平板筛选溶磷细菌的平板筛选(5d).2022-10-9青霉菌溶磷实验青霉菌溶磷实验高效溶磷的真菌菌株高效溶磷的真菌菌株.2022-10-9（四）性能鉴定（四）性能鉴定v生产性能测定生产性能测定 通常使用初筛和复筛的方法确定。直接从自然界分离得到的菌通常使用初筛和复筛的方法确定。直接从自

10、然界分离得到的菌株为野生型菌株。我们常将这些自然界中直接获得的新菌株称株为野生型菌株。我们常将这些自然界中直接获得的新菌株称为进一步育种工作的原始菌株或出发菌株。为进一步育种工作的原始菌株或出发菌株。v毒性试验毒性试验若毒性大而且无法排除者应予以淘汰。若毒性大而且无法排除者应予以淘汰。v种属鉴定种属鉴定.2022-10-9二、自然选育二、自然选育v自然选育的定义自然选育的定义 利用微生物在一定条件下产生自发变异，通过利用微生物在一定条件下产生自发变异，通过分离、筛选分离、筛选，排除劣质性，排除劣质性状的菌株，选择出维持原有生产水平或具有更优良生产性能的高产菌株，状的菌株，选择出维持原有生产水平

11、或具有更优良生产性能的高产菌株，达到纯化与复壮菌种、保持稳定生产性能的目的。其主要原理是达到纯化与复壮菌种、保持稳定生产性能的目的。其主要原理是微生物微生物群体分离群体分离。v自然选育的方法自然选育的方法（1）通过表现形态淘汰不良菌株；）通过表现形态淘汰不良菌株；（2）考察目的代谢产物产量；）考察目的代谢产物产量；（3）进行遗传基因型纯度试验，考察菌种纯度；）进行遗传基因型纯度试验，考察菌种纯度；（4）传代稳定性试验：斜面传）传代稳定性试验：斜面传3-5代。代。.2022-10-9自然选育.2022-10-9 资料显示，某些芽孢杆菌具有分解和利资料显示，某些芽孢杆菌具有分解和利用用葡聚糖葡聚糖

12、的能力，请设计方案从自然界中筛选的能力，请设计方案从自然界中筛选一产一产葡聚糖酶葡聚糖酶的菌株，并简要分析各主要步骤的菌株，并简要分析各主要步骤的依据。的依据。05年江南大学微生物年江南大学微生物(发酵发酵)考研试题考研试题.2022-10-9三、诱变育种三、诱变育种v诱变育种：诱变育种：指人为地、有意识地将对象生物置于指人为地、有意识地将对象生物置于诱变因子诱变因子中，中，使该生物体发生使该生物体发生突变突变，从这些突变体中筛选具有优良性状的，从这些突变体中筛选具有优良性状的突变株的过程。突变株的过程。提高了菌种发生提高了菌种发生突变的频率突变的频率和和变异幅度变异幅度，提高获优机率。，提高

13、获优机率。v突变：突变：在自然状况下发生的突变在自然状况下发生的突变自然突变（自然突变（10-610-9）v诱变诱变：人为地利用物理或化学因素诱发的突变（：人为地利用物理或化学因素诱发的突变（10-410-5）v诱变剂诱变剂：能够显著提高突变频率的物理或化学因素。：能够显著提高突变频率的物理或化学因素。.2022-10-9（一）常见诱变剂及作用基本原理（一）常见诱变剂及作用基本原理v物理诱变因子物理诱变因子 紫外线、紫外线、X射线、快中子等射线、快中子等v化学诱变因子化学诱变因子 硫酸二乙酯（硫酸二乙酯（DES）、亚硝酸、）、亚硝酸、吖啶橙吖啶橙v生物诱变因子生物诱变因子 噬菌体、转座子等噬菌

14、体、转座子等.2022-10-9（二）诱变基本方法及影响因素（二）诱变基本方法及影响因素v诱变剂的选择：诱变剂的选择：作用机理；突变谱作用机理；突变谱v诱变剂量选择：诱变剂量选择：最适剂量（致死率最适剂量（致死率70-80%时）时）v增效（变）剂：增效（变）剂：氯化锂（氯化锂（0.5%）v外部环境条件：外部环境条件：如温度、氧气、如温度、氧气、pH、水分、水分v出发菌株的选择：出发菌株的选择：生产菌株、野生菌株生产菌株、野生菌株v出发菌株的生理状态：出发菌株的生理状态：细菌细菌-对数生长期；幼年孢子；营养体；湿态敏对数生长期；幼年孢子；营养体；湿态敏感（感（真菌真菌：106 cfu/mL孢子悬

15、浮液；孢子悬浮液；细菌细菌：108 cfu/mL的菌液）的菌液）v诱变效应的测定：诱变效应的测定：直接法和浓缩法，培养后测定目的产物量直接法和浓缩法，培养后测定目的产物量v诱变方法：诱变方法：单因子、复合诱变单因子、复合诱变v优良突变株的筛选方法：优良突变株的筛选方法：随机筛选或半理性化筛选随机筛选或半理性化筛选.2022-10-9（三）诱变育种流程（三）诱变育种流程.2022-10-9第三节菌种保藏与复壮第三节菌种保藏与复壮.2022-10-9一、菌种的衰退一、菌种的衰退v菌种衰退（菌种衰退（degeneration）生产菌种或筛选出来的较优良菌株，由于进行接种传代或保藏之后，群生产菌种或筛

16、选出来的较优良菌株，由于进行接种传代或保藏之后，群体某些形态特征及生理特征体某些形态特征及生理特征逐渐减退逐渐减退甚至甚至完全丧失完全丧失的现象。的现象。由于菌种的自发突变使其典型性状，特别是产量性状发生由于菌种的自发突变使其典型性状，特别是产量性状发生负变负变的现象。的现象。v菌种退化的主要表现菌种退化的主要表现产量下降，目的代谢产物减少，原料转化率下降；产量下降，目的代谢产物减少，原料转化率下降；生长速度缓慢，目的代谢产物合成能力下降，发酵周期延长；生长速度缓慢，目的代谢产物合成能力下降，发酵周期延长；产孢子能力变弱，孢子形成数量减少；产孢子能力变弱，孢子形成数量减少；抗逆性减弱；抗逆性减

17、弱；形态畸形等。形态畸形等。.2022-10-9（一）引起菌种退化变异的因素v遗传基因型的分离遗传基因型的分离丝状真菌、多细胞组成、有的单核、有的多核，遗传物质基础有多样性的复丝状真菌、多细胞组成、有的单核、有的多核，遗传物质基础有多样性的复杂性，为群体繁殖，往往出现遗传基因型的分离杂性，为群体繁殖，往往出现遗传基因型的分离-数量遗传的自体调节现象。数量遗传的自体调节现象。v自发变异的产生自发变异的产生负向变异为多数，结果：目的代谢产物产量下降，生长逐步变弱变慢，孢子负向变异为多数，结果：目的代谢产物产量下降，生长逐步变弱变慢，孢子形成能力低下等。形成能力低下等。原因：长期保藏；频繁传代（例斜

18、面保藏、发酵厂种子制备）；菌体在代谢原因：长期保藏；频繁传代（例斜面保藏、发酵厂种子制备）；菌体在代谢过程中产生具有诱变作用的物质；存在增变。过程中产生具有诱变作用的物质；存在增变。v人工诱变导致的退化变异人工诱变导致的退化变异基因突变基因突变（退化的根本原因）（退化的根本原因）连续传代连续传代（加速退化的直接原因）（加速退化的直接原因）.2022-10-9（二）衰退的防止v控制传代次数：不超过控制传代次数：不超过7代，易变异的不过代，易变异的不过5代代 v砂土管、冻干管保藏的原种，开启不能超过砂土管、冻干管保藏的原种，开启不能超过3次，以防污染。次，以防污染。v选择良好保藏方法：保证菌选择良

19、好保藏方法：保证菌不死不死、不衰不衰、保存、保存活性活性及原有典型性状及原有典型性状v良好的培养条件：注意斜面菌株的培养条件（保藏、活化培养基）良好的培养条件：注意斜面菌株的培养条件（保藏、活化培养基）v采用不同类型的细胞进行接种采用不同类型的细胞进行接种产孢子霉菌产孢子霉菌细菌细菌.2022-10-9二、菌种的复壮二、菌种的复壮v广义广义 是指在菌种的生产性状尚未衰退前，就经是指在菌种的生产性状尚未衰退前，就经常有意识的进行纯种分离和生产性能的测定，从而常有意识的进行纯种分离和生产性能的测定，从而使菌种的生产性能逐步提高的一种措施。使菌种的生产性能逐步提高的一种措施。v狭义狭义 指菌种已经发

20、生衰退后，再通过纯种分离指菌种已经发生衰退后，再通过纯种分离和性能测定的办法从衰退的群体中找出尚未衰退的和性能测定的办法从衰退的群体中找出尚未衰退的个体，以达到保持该菌种原有典型性状的一种措施。个体，以达到保持该菌种原有典型性状的一种措施。v复壮的方法复壮的方法纯种分离纯种分离淘汰已衰退的个体淘汰已衰退的个体通过寄主体进行复壮通过寄主体进行复壮.2022-10-9（一）纯种分离 v菌落纯菌落纯 用稀释平板法或平板划线法，取得单细胞菌落，再通过菌落和菌的特征分析和用稀释平板法或平板划线法，取得单细胞菌落，再通过菌落和菌的特征分析和性能测定，获得具有原来性状或性状更好的菌株。性能测定，获得具有原来

21、性状或性状更好的菌株。v菌株纯（细胞纯）菌株纯（细胞纯）只有菌丝的：在显微镜下用毛细管挑取只有一个核的菌；只有菌丝的：在显微镜下用毛细管挑取只有一个核的菌；有孢子的：在显微镜下用毛细管挑取单个孢子。有孢子的：在显微镜下用毛细管挑取单个孢子。一般只要求达到菌落纯的水平一般只要求达到菌落纯的水平用于退化不太严重的情况。用于退化不太严重的情况。纯度纯度操作方法操作方法适用情适用情况况菌落纯菌落纯稀释平板法、稀释平板法、划线法、表划线法、表面皿法面皿法退化不退化不严重严重菌株纯菌株纯（细（细胞纯）胞纯）单细胞分离法单细胞分离法（或二者结（或二者结合）合）.2022-10-9（二）淘汰已衰退的个体v可通

22、过物理、化学方法处理菌体或孢子，使其大部分死亡可通过物理、化学方法处理菌体或孢子，使其大部分死亡(80%以上以上)，存活的菌多为生长健壮者，从中选出优良菌株。，存活的菌多为生长健壮者，从中选出优良菌株。用用10%酒精处理，能耐之的一般为原菌株（啤酒酵母）。酒精处理，能耐之的一般为原菌株（啤酒酵母）。在培养基内加青霉素，抗药性较强的细菌一般为原菌株在培养基内加青霉素，抗药性较强的细菌一般为原菌株(产抗生素产抗生素)。适当提高培养温度适当提高培养温度 加乳酸，淘汰酸奶菌种中的衰退个体。加乳酸，淘汰酸奶菌种中的衰退个体。v一般可将单菌落分离与培养条件综合进行复壮，效果更好一般可将单菌落分离与培养条件

23、综合进行复壮，效果更好.2022-10-92022-10-946（一）保藏原理（一）保藏原理 根据微生物的生理、生化特性，人工地创造根据微生物的生理、生化特性，人工地创造条件条件，使之达，使之达到到不死、不衰、不污染不死、不衰、不污染的休眠状态的休眠状态。（二）菌种保藏方法（二）菌种保藏方法斜面低温保藏法（最简单的菌种保存法）斜面低温保藏法（最简单的菌种保存法）矿油保藏法矿油保藏法载体吸附保藏法载体吸附保藏法冷冻真空干燥法（最佳的微生物菌体保存法之一）冷冻真空干燥法（最佳的微生物菌体保存法之一）液氮超低温保藏法液氮超低温保藏法（当前最理想的保存法）（当前最理想的保存法）三、菌种的保藏三、菌种的

24、保藏.2022-10-9CICC保藏菌种.2022-10-9GIMCC保藏菌种.2022-10-9 请从保藏原理、保藏适应对象、请从保藏原理、保藏适应对象、保藏期及优缺点等方面对各种保藏方保藏期及优缺点等方面对各种保藏方法进行比较说明。法进行比较说明。.2022-10-92022-10-950保藏方法保藏方法保藏原保藏原理理适用菌种适用菌种保藏期保藏期优点优点缺点缺点斜面低温液体石蜡油保藏砂土管保藏冷冻真空干燥液氮超低温.2022-10-92022-10-951保藏方法保藏方法保藏原保藏原理理适用菌种适用菌种保藏期保藏期优点优点缺点缺点斜面低温低温低温霉菌霉菌,放线菌放线菌,酵母菌酵母菌,细菌

25、均细菌均可可霉菌霉菌,放线菌及有芽放线菌及有芽孢细菌孢细菌4-64-6月月;酵母酵母菌菌3 3月月;无芽孢细菌无芽孢细菌约约1 1月月简便有效，适合简便有效，适合非长期保藏的菌非长期保藏的菌种种保期短保期短,传代频传代频繁繁,易变异易变异液体石蜡油封保藏低温、缺氧低温、缺氧霉菌霉菌,放线菌放线菌,酵母菌酵母菌霉菌霉菌,放线菌放线菌,芽孢芽孢细菌细菌2323年年,酵母菌酵母菌1-21-2年年,无芽孢细菌无芽孢细菌约约1 1年年 制作简单，不需制作简单，不需特殊设备，且不特殊设备，且不需常移种需常移种直立保存直立保存,不便不便携带，不适石携带，不适石蜡碳源或敏感蜡碳源或敏感者者 砂土管保藏低温、缺

26、氧、低温、缺氧、缺营养缺营养细菌芽孢细菌芽孢,霉菌、霉菌、放线菌的孢子放线菌的孢子2-52-5年年 简单易行简单易行工作量大工作量大,费人费人力，不适干敏力，不适干敏性无孢菌性无孢菌冷冻真空干燥低温低温(-20(-20以以下下)、干燥、干燥、缺氧缺氧除少数不产孢除少数不产孢子只产菌丝体子只产菌丝体的丝状真菌外的丝状真菌外均可均可5-105-10年年保藏期长，成活保藏期长，成活率高率高需特定设备、需特定设备、操作繁琐操作繁琐,要求要求严格严格液氮超低温超低温超低温(-150(-150-196)196)各类微生物各类微生物1010年以上年以上保存时间长保存时间长需特殊设备，需特殊设备，操作复杂操作

27、复杂.2022-10-9第四节 国内外主要菌种保藏机构.2022-10-9单位简称单位简称单单 位位 名名 称称单位简称单位简称单单 位位 名名 称称CCCCMCCCCM中国微生物菌种保藏管理委员会中国微生物菌种保藏管理委员会NICPBPNICPBP卫生部药品生物制品检定所卫生部药品生物制品检定所ACCCACCC中国农业微生物菌种保藏中心中国农业微生物菌种保藏中心MCCCMCCC中国海洋微生物菌种保藏管理中中国海洋微生物菌种保藏管理中心心 CICCCICC中国工业微生物菌种保藏中心中国工业微生物菌种保藏中心CACCCACC中国抗生素微生物菌种保藏中心中国抗生素微生物菌种保藏中心CMCCCMCC

28、中国医学微生物菌种保藏中心中国医学微生物菌种保藏中心IMBIMB中国医学科学院医学生物学研究中国医学科学院医学生物学研究所所CGMCCCGMCC中国普通微生物菌种保藏中心中国普通微生物菌种保藏中心SIASIA四川抗生素研究所四川抗生素研究所ISFISF中国农业科学院土壤与肥料研究中国农业科学院土壤与肥料研究所所IANPIANP石家庄华北制药厂抗生素研究所石家庄华北制药厂抗生素研究所ASAS中国科学院微生物研究所中国科学院微生物研究所CVCCCVCC中国兽医微生物菌种保藏中心中国兽医微生物菌种保藏中心IFFIIFFI中国食品发酵工业研究院中国食品发酵工业研究院NCIVBPNCIVBP农业部兽药监

29、察研究所农业部兽药监察研究所AS-IVAS-IV中国科学院武汉病毒研究所中国科学院武汉病毒研究所CFCCCFCC中国林业微生物菌种保藏中心中国林业微生物菌种保藏中心CCTCC CCTCC 中国典型培养物保藏中心中国典型培养物保藏中心(武大武大)RIFRIF中国林业科学院林业研究所中国林业科学院林业研究所表表 国内国内主要菌种保藏机构主要菌种保藏机构.2022-10-9表表 国外国外主要菌种保藏机构主要菌种保藏机构单位简单位简称称单单 位位 名名 称称单位简单位简称称单单 位位 名名 称称ATCCATCC美国典型菌种保藏中心美国典型菌种保藏中心NIBHNIBH日本国家生命科学和人类技术研究日本国

30、家生命科学和人类技术研究所所NRRLNRRL美国农业研究菌种保藏中美国农业研究菌种保藏中心心IFOIFO日本大阪发酵研究所日本大阪发酵研究所CSHCSH美国冷泉港实验室美国冷泉港实验室IAMIAM日本东京大学应用微生物研究所日本东京大学应用微生物研究所CBSCBS荷兰微生物菌种保藏中心荷兰微生物菌种保藏中心CCTMCCTM法国典型微生物保藏中心法国典型微生物保藏中心KCTCKCTC韩国典型菌种保藏中心韩国典型菌种保藏中心CMICMI英联邦真菌研究所英联邦真菌研究所DSMZDSMZ德国微生物菌种保藏中心德国微生物菌种保藏中心SSISSI丹麦国立血清研究所丹麦国立血清研究所UKNCCUKNCC英国

31、国家菌种保藏中心英国国家菌种保藏中心IMIIMI国际真菌学研究所（英国）国际真菌学研究所（英国）.2022-10-9节节主要内容主要内容知识点知识点一一酿造工业菌酿造工业菌种种工业菌种质量要求；常用菌种类型工业菌种质量要求；常用菌种类型二二菌种选育菌种选育新菌种的分离与筛选新菌种的分离与筛选；自然选育自然选育；诱变育种；诱变育种（突变，诱变，（突变，诱变，诱变剂诱变剂，诱变作用机理，诱变作用机理，影影响诱变效果的因素响诱变效果的因素，诱变方法）诱变方法）；其它育种；其它育种技术技术三三衰退复壮与衰退复壮与保藏保藏菌种衰退菌种衰退(主要表现；主要表现；引起菌种退化变异的因引起菌种退化变异的因素素

32、；防止菌种衰退的措施防止菌种衰退的措施)；复壮（广义、狭；复壮（广义、狭义；义；方法方法）；）；菌种保藏（原理、方法比较）菌种保藏（原理、方法比较）四四保藏机构保藏机构国内机构；国外机构国内机构；国外机构本章小结本章小结.2022-10-9思考题思考题1.发酵工业用菌种应满足哪些条件？发酵工业用菌种应满足哪些条件？2.如何进行新菌种的分离和筛选？如何进行新菌种的分离和筛选？3.试述物理因素诱变的机理。试述物理因素诱变的机理。4.引起菌种衰退的原因有哪些？引起菌种衰退的原因有哪些？5.防止菌种衰退的措施有哪些？防止菌种衰退的措施有哪些？6.如何进行菌种的复壮？如何进行菌种的复壮？7.菌种保存的机理是什么？简要介绍各种菌种保存方法。菌种保存的机理是什么？简要介绍各种菌种保存方法。8.试设计一个从自然界中筛选高温淀粉酶产生菌的实验方案。试设计一个从自然界中筛选高温淀粉酶产生菌的实验方案。.2022-10-9