临床检验学基础课件.ppt

1、 目前,我国临床医学检验(clinicalmedicallaboratory)的设置,主要包括临床生物化学、临床血液学、临床微生物学、临床免疫学、临床分子生物学和临床检验基础。由于临床医学检验与临床医学日益结合,因此已形成了包括实验诊断学在内的临床检验医学(clinical laboratory medicine)。临床检验基础是一门高度综合性的应用科学,是临床医学和实验室医学的桥梁学科,是前期课程的延伸,是医学检验五年制本科生的必修主干课程之一.近年来随着计算机,生物化学,分子生物学,生物医学工程学和电子技术等学科的发展,医学临床检验又吸收引进了大量的其他学科的先进技术,使临床检验工作在分析

2、检测的速度和灵敏度上有了很大的提高,检测的方法学有了很大的发展.主要内容:本门课程由一般血液检查,血栓与止血,体液检验,脱落细胞检验共十八章组成.学习目标:本门课程的教学目的和基本技能训练要求是:通过对临床诊断应用较广泛的各种标本的检测,使学生对临床检验工作形成较深刻的理解,掌握各种实验室理论和操作技能,养成良好的实验室工作作风,为毕业后能从事临床检验技术工作和管理工作奠定良好的理论和实验室基础.临床检验临床检验,源于古代对尿液的感官检查源于古代对尿液的感官检查,如尿液的颜色、气味等。如尿液的颜色、气味等。17世世纪荷兰纪荷兰Leeuwenhoek 发明显微镜发明显微镜,跨时代地推动了医学走进

3、微观世界。跨时代地推动了医学走进微观世界。人们从认识静态的血液细胞形态开始人们从认识静态的血液细胞形态开始,逐步深入到研究细胞的功能、逐步深入到研究细胞的功能、大分子物质、基因的结构和功能大分子物质、基因的结构和功能,试图探究生命现象的本质。试图探究生命现象的本质。20世纪世纪末以来末以来,临床医学检验的加速发展临床医学检验的加速发展,是现代物理学、化学、生物学、数是现代物理学、化学、生物学、数学等学科之间相互交融的结果学等学科之间相互交融的结果,特别是医学检验技术的进展特别是医学检验技术的进展,更直接映更直接映射出现代电学、电子学、计算机科学、光学等自然科学基础学科与生射出现代电学、电子学、

4、计算机科学、光学等自然科学基础学科与生物化学、免疫学、细胞生物学、遗传学、分子生物学等生物医学基础物化学、免疫学、细胞生物学、遗传学、分子生物学等生物医学基础学科杰出结合的光辉学科杰出结合的光辉;而当前正在兴起的现代信息网络技术而当前正在兴起的现代信息网络技术,又进一步又进一步实现了病理学、影象学等形态检查的远程医学传播实现了病理学、影象学等形态检查的远程医学传播,为临床医学及时为临床医学及时提供了检测报告和实时交流提供了检测报告和实时交流。临床检验基础临床检验基础,借助先进的检测技术借助先进的检测技术,对来自对来自离体的血液离体的血液,尿液尿液.粪便以及分泌物和排泄物粪便以及分泌物和排泄物等

5、标本进行理学、化学、病原学和显微镜等标本进行理学、化学、病原学和显微镜形态学的检查形态学的检查,以简便、快速的检测结果，以简便、快速的检测结果，基本满足临床医学检验筛检疾病的需求。基本满足临床医学检验筛检疾病的需求。：1 、从手工检测步入仪器自动化、电脑化检测。、从手工检测步入仪器自动化、电脑化检测。20世纪世纪50年代初问世的血液分析仪年代初问世的血液分析仪,从仪器自动计数血液红细胞、从仪器自动计数血液红细胞、白细胞几项参数开始白细胞几项参数开始,到如今发展到综合运用电学、光学、到如今发展到综合运用电学、光学、细胞化学等多种检测原理细胞化学等多种检测原理.具有复杂结构的中高档仪器具有复杂结构

6、的中高档仪器,能能同时提供全血细胞计数及其相关参数和同时提供全血细胞计数及其相关参数和(或或)网织红细胞计网织红细胞计数数.”幼稚细胞幼稚细胞”分类等多项参数。血液分析仪的特点包括分类等多项参数。血液分析仪的特点包括:用血量少用血量少(以微升计以微升计)、检测快速、检测快速(以分、秒计以分、秒计)、检测项目、检测项目多多(参数达参数达2040余项余项)、精度高、精度高(变异系数可低于变异系数可低于1%)、自、自动质量控制动质量控制(提供多种质量方式和质控图形提供多种质量方式和质控图形)以及信息取存以及信息取存和联网系统。和联网系统。用于临床检验基础的检验仪器用于临床检验基础的检验仪器,还有尿液

7、干化学分析仪、还有尿液干化学分析仪、尿沉渣分析仪、血沉仪等。同样具有检测简便、快速、精尿沉渣分析仪、血沉仪等。同样具有检测简便、快速、精密度高的特点。密度高的特点。这种检测方法省去了标本转运的程序，使这种检测方法省去了标本转运的程序，使检测的标本更新鲜、交叉污染率更低检测的标本更新鲜、交叉污染率更低,更接更接近被检者当时生理或病理实际状态。床边近被检者当时生理或病理实际状态。床边检测标本用量更少、检测速度更快、检测检测标本用量更少、检测速度更快、检测场所更灵活、结果报告更及时场所更灵活、结果报告更及时(常立等可取常立等可取),对检验者无需专门培训。干化学单项试带对检验者无需专门培训。干化学单项

8、试带或多联试带尿液定性或半定量检测或多联试带尿液定性或半定量检测,是典型是典型的床边检验实例。的床边检验实例。已有许多优质的商品化试剂应用于临床基已有许多优质的商品化试剂应用于临床基础检验，包括瑞氏染色液，血液分析仪、础检验，包括瑞氏染色液，血液分析仪、止凝血检测用的配套试剂盒、尿液分析仪止凝血检测用的配套试剂盒、尿液分析仪用配套的试带等。用配套的试带等。当前，我国检验界十分重视对血液分析仪、当前，我国检验界十分重视对血液分析仪、尿液沉渣显微镜检查操作的标准化。目前，尿液沉渣显微镜检查操作的标准化。目前，已经有血液分析仪的评价系统，保证了检已经有血液分析仪的评价系统，保证了检测质量和各种仪器之

9、间的可比性。对床边测质量和各种仪器之间的可比性。对床边检测项目更要求标准化、规范化，对止凝检测项目更要求标准化、规范化，对止凝血等各种商品化检测试剂，强调必须达到血等各种商品化检测试剂，强调必须达到应有的检测灵敏度和特异性。应有的检测灵敏度和特异性。质量保证包括人员和物质两大方面。在人员方面，质量保证包括人员和物质两大方面。在人员方面，主要是检验人员的医德素质和技能素质。检验主要是检验人员的医德素质和技能素质。检验者必须有高尚的医德、熟练的技能；熟悉如何者必须有高尚的医德、熟练的技能；熟悉如何避免检验前、中、后影响检测结果准确性的各避免检验前、中、后影响检测结果准确性的各种因素和防止主要干扰内

10、素的具体方法。检验种因素和防止主要干扰内素的具体方法。检验过程中，检验人员必须作好严格的室内质量控过程中，检验人员必须作好严格的室内质量控制，并积极参与室间质量控制的活动，不断提制，并积极参与室间质量控制的活动，不断提高检验质量的准确性和可靠性。高检验质量的准确性和可靠性。1.检验前，标本的采集和转运过程尤为重要；管检验前，标本的采集和转运过程尤为重要；管理好这两个环节，可降低理好这两个环节，可降低70%的检验差错率。的检验差错率。检验用的标本通常有血液、尿液、粪便及其他检验用的标本通常有血液、尿液、粪便及其他体液。有些标本的采集，需用严格的消毒方法，体液。有些标本的采集，需用严格的消毒方法，

11、并带有一定的创伤性。因此，检验人员应事先并带有一定的创伤性。因此，检验人员应事先向患者解释，让患者充分理解、积极配合，从向患者解释，让患者充分理解、积极配合，从而获取合格的标本。而获取合格的标本。留取标本的基本原则是保持离体标本采集质和量的完整留取标本的基本原则是保持离体标本采集质和量的完整性。任何离开人体的标本，要尽可能保持体内当时生理性。任何离开人体的标本，要尽可能保持体内当时生理或病理的固有状态：使标本的有形部分（指一般能用普或病理的固有状态：使标本的有形部分（指一般能用普通光学显微镜观察到的成分，如各种细胞、虫卵等）和通光学显微镜观察到的成分，如各种细胞、虫卵等）和无形成分（指一般能溶

12、解于液体，不能用显微镜观察到无形成分（指一般能溶解于液体，不能用显微镜观察到的化学物质，如蛋白质、葡萄糖等）的质和量基本不变。的化学物质，如蛋白质、葡萄糖等）的质和量基本不变。事实上，任何机体中的成分，一旦离开人体，则受到环事实上，任何机体中的成分，一旦离开人体，则受到环境的影响，会发生改变。衡量标本是否新鲜的简单尺度，境的影响，会发生改变。衡量标本是否新鲜的简单尺度，是从标本采集到检验所允许的时限。因此，标本越及时是从标本采集到检验所允许的时限。因此，标本越及时送检、越早完成检验，检验结果就越可靠。送检、越早完成检验，检验结果就越可靠。非疾病因素造成检验结果异常的主要环节可分为非疾病因素造成

13、检验结果异常的主要环节可分为3个阶段：第个阶段：第1阶段是在检阶段是在检测前，包括是否有合格的操作人员、合乎要求的标本以及被检测者当时的测前，包括是否有合格的操作人员、合乎要求的标本以及被检测者当时的生理特征和状态；第生理特征和状态；第2阶段是在实验检测中，包括具体的检测方法、仪器阶段是在实验检测中，包括具体的检测方法、仪器和试剂的质量等；第和试剂的质量等；第3阶段是检测后对结果的正确评价和解释。阶段是检测后对结果的正确评价和解释。由生理因素引起检验结果变异比检测过程中产生的技术性变异往往更大。生理变异可分为两大类：由生理因素引起检验结果变异比检测过程中产生的技术性变异往往更大。生理变异可分为

14、两大类：一类是不能控制的，如年龄和性别，对检验的影响是长期效应；另一类是能够加以控制的，一类是不能控制的，如年龄和性别，对检验的影响是长期效应；另一类是能够加以控制的，如食物、药物、情绪、活动状态、体位等，对检验的影响多为短期效应。如食物、药物、情绪、活动状态、体位等，对检验的影响多为短期效应。年龄：一般而言，检测时应考虑四组年龄：新生儿、儿童期到青春期、成人和老年年龄：一般而言，检测时应考虑四组年龄：新生儿、儿童期到青春期、成人和老年人。人。性别：不少检测项目的参考值，男女有别，即使在同一年龄阶段，也有明显的差异。性别：不少检测项目的参考值，男女有别，即使在同一年龄阶段，也有明显的差异。这种

15、情况主要反映在青春期后。例如：这种情况主要反映在青春期后。例如：在在1540岁，男女的红细胞计数值不同，女岁，男女的红细胞计数值不同，女性一般低于男性；妊娠期中后期，红细胞计数值随血容量增高和血液稀释可明显减性一般低于男性；妊娠期中后期，红细胞计数值随血容量增高和血液稀释可明显减低；红细胞沉降率，女性高于男性，如妊娠期低；红细胞沉降率，女性高于男性，如妊娠期3个月以上，可进一步增高。个月以上，可进一步增高。体位：直立时，血容量比卧位平躺时减少体位：直立时，血容量比卧位平躺时减少600700ml。从卧位到直立时，血容量。从卧位到直立时，血容量可减少可减少10%左右。左右。运动：对检验结果的影响程

16、度，与运动的强度和时间长短有关。运动：对检验结果的影响程度，与运动的强度和时间长短有关。时间和状态变化：昼夜更替、睡眠与觉醒状态、暴热、寒冷、紧张，可使肾上激素时间和状态变化：昼夜更替、睡眠与觉醒状态、暴热、寒冷、紧张，可使肾上激素分泌变化，从而引起血细胞数量、质量和许多物质浓度的改变。分泌变化，从而引起血细胞数量、质量和许多物质浓度的改变。如刚进食不久即作血液检测，可见血葡萄糖、脂肪浓度如刚进食不久即作血液检测，可见血葡萄糖、脂肪浓度增高。长期素食者，尿液偏碱，血维生素增高。长期素食者，尿液偏碱，血维生素B12接近缺乏，接近缺乏，胆红素则较高。禁食、减肥者，血糖和胰岛素减低，血胆红素则较高。

17、禁食、减肥者，血糖和胰岛素减低，血酮体可明显增高，血清许多酶活性增高，严重者还可发酮体可明显增高，血清许多酶活性增高，严重者还可发生酸中毒。饮酒者，产生轻度醉酒时，血葡萄糖浓度就生酸中毒。饮酒者，产生轻度醉酒时，血葡萄糖浓度就可增加可增加20%-50%。吸烟者，吸入一支烟，血糖浓度在。吸烟者，吸入一支烟，血糖浓度在10min内就可增加内就可增加0.56mmol/L，可持续，可持续1h之久，红细之久，红细胞计数、白细胞计数增高，精子计数减少，异形精子率胞计数、白细胞计数增高，精子计数减少，异形精子率增高，精子活动力减弱。增高，精子活动力减弱。口服方式，药效作用慢而持久；注射或吸入方式，药效口服方

18、式，药效作用慢而持久；注射或吸入方式，药效作用快而短促。当出现了不可思议异常检验结果时，作用快而短促。当出现了不可思议异常检验结果时，或与临床不符合时，应考虑是否有药物引起干扰。例或与临床不符合时，应考虑是否有药物引起干扰。例如，高浓度维生素如，高浓度维生素C，可使乳酸脱氢酶活性减低、尿，可使乳酸脱氢酶活性减低、尿干化学胆红素试验和尿糖试验假阴性，而使班氏尿糖干化学胆红素试验和尿糖试验假阴性，而使班氏尿糖测定假阳性。口服避孕药可影响许多试验的测定，也测定假阳性。口服避孕药可影响许多试验的测定，也应特别注意。应特别注意。因此，对短期效应的生理因素进行有效的预控，因此，对短期效应的生理因素进行有效

19、的预控，是保证检验质量至关重要的环节。是保证检验质量至关重要的环节。二、临床检验基础的应用目的二、临床检验基础的应用目的 如将血液分析仪和显微镜检查有机结合，如将血液分析仪和显微镜检查有机结合，可提供全血细胞数量和质量（形态）众多可提供全血细胞数量和质量（形态）众多的参数和红细胞、血小板、白细胞异常的的参数和红细胞、血小板、白细胞异常的最基本的实验诊断信息。例如，白细胞最基本的实验诊断信息。例如，白细胞（中性粒细胞）数量增高和血沉增高，支（中性粒细胞）数量增高和血沉增高，支持急性心肌梗死的诊断，可与心绞痛鉴别；持急性心肌梗死的诊断，可与心绞痛鉴别；显微镜发现病原体，是确诊感染性疾病的显微镜发现

20、病原体，是确诊感染性疾病的依据。依据。例如，尿液蛋白质检测对于肾脏疾病患者例如，尿液蛋白质检测对于肾脏疾病患者的病情估计、网织红细胞计数对于进行化的病情估计、网织红细胞计数对于进行化学疗法和放射疗法的患者或贫血患者的骨学疗法和放射疗法的患者或贫血患者的骨髓功能判断均具有可靠而实际的指导作用。髓功能判断均具有可靠而实际的指导作用。例如，从标本中检出寄生虫，可对感染人例如，从标本中检出寄生虫，可对感染人群进行必要的治疗和（或）隔离，防止疾群进行必要的治疗和（或）隔离，防止疾病的传播和传染。病的传播和传染。4为科学研究提供医学检验基本数据、基为科学研究提供医学检验基本数据、基本检验方法和操作技能。本

21、检验方法和操作技能。三学好临床基础检验的基本要求（三学好临床基础检验的基本要求（5）包括检验项目涉及的生理、病理基础，特别是检包括检验项目涉及的生理、病理基础，特别是检验基本理论验基本理论 临床检验基础的许多操作是进行其他临床医学检临床检验基础的许多操作是进行其他临床医学检验的必要基础，包括标本采集、操作规范、质量验的必要基础，包括标本采集、操作规范、质量控制等。因此，特别强调学生在实验课或在临床控制等。因此，特别强调学生在实验课或在临床实习中动手能力的训练。实习中动手能力的训练。学会如何评估和选择灵敏度高、特异性好学会如何评估和选择灵敏度高、特异性好的检验方法，有时是恰如其分、正确地比的检验

22、方法，有时是恰如其分、正确地比较和认识手工检验方法和仪器检验方法的较和认识手工检验方法和仪器检验方法的长处和短处。长处和短处。检验者应经常记忆最常用的检验项目参考值，以便结合临检验者应经常记忆最常用的检验项目参考值，以便结合临床，对检验结果进行有效的分析。现已用床，对检验结果进行有效的分析。现已用“参考值参考值”代替代替过去常用的过去常用的“正常值正常值”。这是因为检验项目的测定结果，。这是因为检验项目的测定结果，只能来自部分地区、部分健康人群的相对统计。再者，即只能来自部分地区、部分健康人群的相对统计。再者，即使在选定的人群中，检验结果被纳入参考范围的也只占被使在选定的人群中，检验结果被纳入

23、参考范围的也只占被检人群数的检人群数的95%，还有，还有5%人群末被统计在内。由于对每人群末被统计在内。由于对每个患者发病前的基础检验值的情况了解甚少，所以仅凭一个患者发病前的基础检验值的情况了解甚少，所以仅凭一次出现次出现“低于低于”或或“高于高于”（特别是略低于或略高于）参（特别是略低于或略高于）参考值范围的结果，并不能肯定为异常，通常至少应重复考值范围的结果，并不能肯定为异常，通常至少应重复2次以上检验、并出现相同或相近结果时，才可认为检验结次以上检验、并出现相同或相近结果时，才可认为检验结果可靠有效。果可靠有效。检验人员应用循证检验医学新思维指导临床检验，检验人员应用循证检验医学新思维

24、指导临床检验，不断追求和采纳已经科学评价和证明了的、具有不断追求和采纳已经科学评价和证明了的、具有当时最佳临床价值的当时最佳临床价值的“金标准金标准”检验项目和最佳检验项目和最佳检验方法，为临床提供有效的检验结果，要主动检验方法，为临床提供有效的检验结果，要主动与临床保持联系，共同分析异常检验结果的原因。与临床保持联系，共同分析异常检验结果的原因。必须认识到，由于医学检验在时间上和空间上存必须认识到，由于医学检验在时间上和空间上存在一定的局限性，因此，对任何检验结果均需慎在一定的局限性，因此，对任何检验结果均需慎重分析，才能作出符合实际的合理解释。重分析，才能作出符合实际的合理解释。第一章血液

25、标本采集和血涂片制备第一章血液标本采集和血涂片制备 血标本分为全血、血浆和血清等。全血：由血细胞和血标本分为全血、血浆和血清等。全血：由血细胞和血浆组成，主要用于临床血液学检查，如血细胞计数、血浆组成，主要用于临床血液学检查，如血细胞计数、分类和形态学检查等。全血标本的化学物质检查易受分类和形态学检查等。全血标本的化学物质检查易受血细胞量增减的影响，现在的临床化学检查已较少使血细胞量增减的影响，现在的临床化学检查已较少使用全血标本。血浆：为全血除去血细胞的部分，用于用全血标本。血浆：为全血除去血细胞的部分，用于血浆生理性和病理性化学成分的测定，适合临床生化血浆生理性和病理性化学成分的测定，适合

26、临床生化检查，特别是内分泌激素测定；血浆除钙离子外，含检查，特别是内分泌激素测定；血浆除钙离子外，含有其他全部凝血因子，适合血栓和止血的检查。细胞有其他全部凝血因子，适合血栓和止血的检查。细胞内、外各种溶质成分和含量有差别。疾病时，血细胞内、外各种溶质成分和含量有差别。疾病时，血细胞内成分变化较小，但血浆中成分变化可很大。血清：内成分变化较小，但血浆中成分变化可很大。血清：是离体后的血液自然凝固后析出的液体部分，除纤维是离体后的血液自然凝固后析出的液体部分，除纤维蛋白原等凝学因子在凝血时消耗外，其他成分与血浆蛋白原等凝学因子在凝血时消耗外，其他成分与血浆基本相同，更适用于多数临床化学和临床免疫

27、学检查。基本相同，更适用于多数临床化学和临床免疫学检查。在少数项目检查，血浆和血清的测定也有些差别。在少数项目检查，血浆和血清的测定也有些差别。血标本的正确采集是获得准确、可靠实验结果的关键。在血标本的正确采集是获得准确、可靠实验结果的关键。在标本采集前，应仔细考虑实验的需要，决定采血方法、所标本采集前，应仔细考虑实验的需要，决定采血方法、所需血量及选用合适的抗凝剂。血液标本的采集分为皮肤采需血量及选用合适的抗凝剂。血液标本的采集分为皮肤采血法、静脉采血法和动脉采血法。不同的采血法无论细胞血法、静脉采血法和动脉采血法。不同的采血法无论细胞成分或化学组成，都存在不同程度的差异，因此在判断和成分或

28、化学组成，都存在不同程度的差异，因此在判断和比较结果时必须予以考虑。所有的采血技术均要求保持血比较结果时必须予以考虑。所有的采血技术均要求保持血液标本的完整性。液标本的完整性。动脉血成分在全身几乎相同；而静脉血，由于组织或器官动脉血成分在全身几乎相同；而静脉血，由于组织或器官的不同，其在不同部位的成分也不同；动脉血含氧量明显的不同，其在不同部位的成分也不同；动脉血含氧量明显高于静脉血。高于静脉血。当所需血量较多或采用全自动血液分析仪测定时，通常使用静脉采血法当所需血量较多或采用全自动血液分析仪测定时，通常使用静脉采血法（venipuncture for blood collection）。位于

29、体表的浅静脉几乎均可）。位于体表的浅静脉几乎均可作为采血部位，通常采用肘部静脉；如肘部静脉不明显时，可改用手背作为采血部位，通常采用肘部静脉；如肘部静脉不明显时，可改用手背静脉或内踝静脉，必要时颈外静脉采血可用于小儿，但有危险性，以少静脉或内踝静脉，必要时颈外静脉采血可用于小儿，但有危险性，以少用为宜。根据采血量多少可选用不同型号注射器，配备相应的针头。某用为宜。根据采血量多少可选用不同型号注射器，配备相应的针头。某些特殊检查，为避免血小板激活，要使用塑料注射器和硅化处理后的试些特殊检查，为避免血小板激活，要使用塑料注射器和硅化处理后的试管或塑料试管。注射器和容器必须干燥，抽血不宜过快，以免产

30、生大量管或塑料试管。注射器和容器必须干燥，抽血不宜过快，以免产生大量泡沫或溶血；采血后应先拔针头，然后将血液徐徐注入标本容器，否则泡沫或溶血；采血后应先拔针头，然后将血液徐徐注入标本容器，否则易于溶血。易于溶血。采血前应向患者作适当解释，以消除疑虑和恐惧。如遇患者采血后发生采血前应向患者作适当解释，以消除疑虑和恐惧。如遇患者采血后发生晕厥，可让其平卧，通常休息片刻即可恢复。必要时可嗅芳香氨酊，针晕厥，可让其平卧，通常休息片刻即可恢复。必要时可嗅芳香氨酊，针刺或指掐人中、合谷等穴位。刺或指掐人中、合谷等穴位。皮肤采血法（皮肤采血法（skin puncture for blood collecti

31、on）,曾长期被称曾长期被称为毛细血管采血法，所采之血实质是微动脉、微静脉和毛细血管为毛细血管采血法，所采之血实质是微动脉、微静脉和毛细血管的混合血，含有细胞间质和细胞内液。主要用于需血微量的检查的混合血，含有细胞间质和细胞内液。主要用于需血微量的检查或一般常规检查。多选择手指或耳垂采血部位采血。耳垂采血痛或一般常规检查。多选择手指或耳垂采血部位采血。耳垂采血痛感较轻，操作方便，但血循环较差，受气温影响较大，检验结果感较轻，操作方便，但血循环较差，受气温影响较大，检验结果不够恒定。世界卫生组织（不够恒定。世界卫生组织（world health organization,WHO）推荐取左手无名指

32、指端内侧血液做血液一般检验。婴幼儿手指太推荐取左手无名指指端内侧血液做血液一般检验。婴幼儿手指太小可用大拇趾或足跟采血。严重烧伤患者，应选择皮肤完整处采小可用大拇趾或足跟采血。严重烧伤患者，应选择皮肤完整处采血，采血器以三棱针或专用血，采血器以三棱针或专用“采血针采血针”为好，特别是后者。为避为好，特别是后者。为避免交叉感染，应严格实行一人一针制免交叉感染，应严格实行一人一针制。真空采血法（真空采血法（vacuum tube for blood collection）,又称为负压采血法。国内外又称为负压采血法。国内外已生产专供医学检验使用的真空采血装置，有套筒式和头皮静脉式两种，后者还已生产专

33、供医学检验使用的真空采血装置，有套筒式和头皮静脉式两种，后者还设计备有软橡皮套管式止血装置，穿刺回血后，即可将另一端的硬插管插入真空设计备有软橡皮套管式止血装置，穿刺回血后，即可将另一端的硬插管插入真空定量硅化的采血试管中，血液足量后，拔出硬插管即止血，当插另一真空定量试定量硅化的采血试管中，血液足量后，拔出硬插管即止血，当插另一真空定量试管时又可采血，整个采血过程无血液外溢和污染。血标本转运方便，特别适用于管时又可采血，整个采血过程无血液外溢和污染。血标本转运方便，特别适用于病房和野外流动采血；能避免对医护人员的感染和患者血标本间的交叉感染。病房和野外流动采血；能避免对医护人员的感染和患者血

34、标本间的交叉感染。封闭式采血的血样无需容器之间的转移，减少了溶血现象，能有效保护血液有封闭式采血的血样无需容器之间的转移，减少了溶血现象，能有效保护血液有形成分，保持待验血标本原始性状的完整性，使检验结果更近真实，为临床诊断形成分，保持待验血标本原始性状的完整性，使检验结果更近真实，为临床诊断提供可靠依据。非封闭式采血，血标本暴露于空气中，待验血标本易受空气中尘提供可靠依据。非封闭式采血，血标本暴露于空气中，待验血标本易受空气中尘埃、微生物和二氧化碳等异物的污染。埃、微生物和二氧化碳等异物的污染。各种真空定量储存抗凝试管，根据需要标有不同的色码备用，适于不同的检验各种真空定量储存抗凝试管，根据

35、需要标有不同的色码备用，适于不同的检验项目（表项目（表1-1）。但真空采血管价格较高，有待进一步降低成本。）。但真空采血管价格较高，有待进一步降低成本。颜颜 色色 抗凝剂抗凝剂 应用范围灰应用范围灰 草酸盐、草酸盐、氟化钠氟化钠 全血、血浆，抑制糖原分解的酶全血、血浆，抑制糖原分解的酶 黄黄 消毒容器消毒容器 绿绿 肝素肝素 全血、血浆全血、血浆 红红 血清血清 蓝蓝 枸橼酸盐枸橼酸盐 全血、血浆，凝血一般检查全血、血浆，凝血一般检查 紫紫 乙二胺四乙酸盐乙二胺四乙酸盐 全血、血浆全血、血浆 钾盐用于血细胞、血小板和钾盐用于血细胞、血小板和 血液学检查 血液学检查血液学检查血液一般检查过去常用

36、皮肤采血，其主要缺点是易于溶血、凝血和可血液一般检查过去常用皮肤采血，其主要缺点是易于溶血、凝血和可能混入组织液。为了采血，局部皮肤揉擦对多数的检查项目都会有一能混入组织液。为了采血，局部皮肤揉擦对多数的检查项目都会有一定的影响；且采血针刺深度不一，个体之间皮肤厚度不同，难免有组定的影响；且采血针刺深度不一，个体之间皮肤厚度不同，难免有组织液混入而影响检查结果的准确性。皮肤采血检查结果重复性差、易织液混入而影响检查结果的准确性。皮肤采血检查结果重复性差、易发生凝块，现在多已该用静脉采血。发生凝块，现在多已该用静脉采血。开放式采血由于操作环节多、难于规范统一，在移液及丢弃注射器开放式采血由于操作

37、环节多、难于规范统一，在移液及丢弃注射器时可能造成环境污染。封闭式采血法操作规范，从静脉穿刺到血标本时可能造成环境污染。封闭式采血法操作规范，从静脉穿刺到血标本转运，整个过程血标本皆不与外界接触。既有利于标本的收集运送和转运，整个过程血标本皆不与外界接触。既有利于标本的收集运送和保存，也有利于防止医院内血源性传染病的交叉感染和环境保护。保存，也有利于防止医院内血源性传染病的交叉感染和环境保护。血液标本的采集是分析前质量控制的重要环节。血液标本的采集是分析前质量控制的重要环节。很多因素会影响到血液标本检测。很多因素会影响到血液标本检测。.患者患者 患者的活动情况和精神状态、药物、年患者的活动情况

38、和精神状态、药物、年龄、性别、种族、标本采集的时间以及是否吸烟龄、性别、种族、标本采集的时间以及是否吸烟等都会明显影响检测结果。例如，正常人一日之等都会明显影响检测结果。例如，正常人一日之间，白细胞数、嗜酸性粒细胞数、血小板数等均间，白细胞数、嗜酸性粒细胞数、血小板数等均有一定的波动。有一定的波动。血标本采集应规范操作，以减少误差。在采血前，应使患者尽量减血标本采集应规范操作，以减少误差。在采血前，应使患者尽量减少运动以保持平静；住院患者应在早晨卧床时取血。冬天，患者从少运动以保持平静；住院患者应在早晨卧床时取血。冬天，患者从室外进入室内，应等其暖和后再采血。室外进入室内，应等其暖和后再采血。

39、皮肤采血：应尽量避开有皮肤采血：应尽量避开有炎症、化脓、冻伤等皮肤损害部位处采血。皮肤出汗时，应先用干炎症、化脓、冻伤等皮肤损害部位处采血。皮肤出汗时，应先用干棉球擦干，以免稀释血液。采血时，不要挤压皮肤，血液应自然流棉球擦干，以免稀释血液。采血时，不要挤压皮肤，血液应自然流出。出。静脉采血：止血带压迫时间宜小于静脉采血：止血带压迫时间宜小于1min，若止血带结扎超，若止血带结扎超过过2min，大静脉血流受阻而使毛细血管内压上升，可有血管内液，大静脉血流受阻而使毛细血管内压上升，可有血管内液与组织液交流，能使相对分子质量小于与组织液交流，能使相对分子质量小于5000的物质逸入组织液；的物质逸入

40、组织液；随着压迫时间的延长，局部组织发生缺氧而引起血液成分的变化渐随着压迫时间的延长，局部组织发生缺氧而引起血液成分的变化渐大，检查结果出现不应有的增高或减低。大，检查结果出现不应有的增高或减低。血细胞内、外各种成分有梯度差，有的成分相差数十倍，血细胞内、外各种成分有梯度差，有的成分相差数十倍，故在采集、转移、保管和分离血细胞时应尽量避免溶血。故在采集、转移、保管和分离血细胞时应尽量避免溶血。发生溶血的主要原因有容器不洁、接触水、强力振荡和发生溶血的主要原因有容器不洁、接触水、强力振荡和分离血细胞时操作不慎等。溶血标本不仅红细胞计数、分离血细胞时操作不慎等。溶血标本不仅红细胞计数、血细胞比容降

41、低；而且能使血细胞内、外成分混合，血血细胞比容降低；而且能使血细胞内、外成分混合，血浆、血清的化学组成产生变化，影响钾、镁、转氨酶、浆、血清的化学组成产生变化，影响钾、镁、转氨酶、胆红素等多项指标的测定，使检查结果增高或减低，不胆红素等多项指标的测定，使检查结果增高或减低，不能反映原始标本的实际含量。能反映原始标本的实际含量。血液标本采集后应立即送检，并尽快进行检查。血液标本采集后应立即送检，并尽快进行检查。血液标本的保存条件非常重要，不适当的保存血液标本的保存条件非常重要，不适当的保存环境直接影响实验结果。血浆在环境直接影响实验结果。血浆在4保存保存24h后，后，某些凝血因子活性仅为采血后即

42、时活性的某些凝血因子活性仅为采血后即时活性的5%（减少（减少95%）。供血液分析仪进行细胞计数的）。供血液分析仪进行细胞计数的血液在室温下保存，低温（血液在室温下保存，低温（4）保存可使血小）保存可使血小板计数结果减低。因此，应根据实验项目确定板计数结果减低。因此，应根据实验项目确定最佳的保存条件。最佳的保存条件。分析检验结果时，应特别考虑药物及饮食分析检验结果时，应特别考虑药物及饮食因素对检验结果的影响。此外，血液标本因素对检验结果的影响。此外，血液标本的分析应密切结合临床，例如，患者有严的分析应密切结合临床，例如，患者有严重腹泻或呕吐时，红细胞计数可因脱水而重腹泻或呕吐时，红细胞计数可因脱

43、水而增高。增高。使用全血和血浆检查，通常采集静脉血，使用全血和血浆检查，通常采集静脉血，需要使用抗凝剂。所谓抗凝，是用物理或需要使用抗凝剂。所谓抗凝，是用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固。这种能够阻子的活性，以阻止血液凝固。这种能够阻止血液凝固的物质，称为抗凝剂或抗凝物止血液凝固的物质，称为抗凝剂或抗凝物质。检查的项目不同，所使用的抗凝剂也质。检查的项目不同，所使用的抗凝剂也不同。实验室常用的抗凝剂和使用方法如不同。实验室常用的抗凝剂和使用方法如下。下。乙二胺四乙酸（乙二胺四乙酸（ethylenediamine tetraa

44、cetic acid,EDTA）盐）盐 常用其钠盐常用其钠盐（EDTA-Na2-H2O）或钾盐（）或钾盐（EDTA-K2-2H2O），能与血液中钙离子结合成），能与血液中钙离子结合成螯合物，而使螯合物，而使CA2+失去凝血作用，从而阻止血液凝固。失去凝血作用，从而阻止血液凝固。Na2C10H14O8N2+Ca+CaC10H12O8N2+2Na+2H+EDTA盐对血细胞形态和血小板计数影响很小，适用于多项血液学检查，尤盐对血细胞形态和血小板计数影响很小，适用于多项血液学检查，尤其是血小板计数，但钠盐溶解度明显低于钾盐，有时影响抗凝效果。其是血小板计数，但钠盐溶解度明显低于钾盐，有时影响抗凝效果。

45、EDTA-K2特别适用于全血细胞分析及血细胞比容测定，室温下特别适用于全血细胞分析及血细胞比容测定，室温下6h，红细胞体积不变。，红细胞体积不变。根据国际血液学标准化委员会（根据国际血液学标准化委员会（International Committee for Standardization in Hematology,ICSH）1993年文件建议，血细胞计数用年文件建议，血细胞计数用EDTA-K2作抗凝剂，用量为作抗凝剂，用量为EDTA-K2-2H2O 1.5-2.2mg/ml血液。血液。EDTA影响影响血小板聚集，不适合于作凝血象检查和血小板功能实验。血小板聚集，不适合于作凝血象检查和血小板功

46、能实验。2.草酸盐（草酸盐（sodium oxalate）常用的有草酸盐、草酸钾、草酸铵，他）常用的有草酸盐、草酸钾、草酸铵，他们溶解后解离的草酸根与标本中的钙离子形成草酸钙沉淀，使们溶解后解离的草酸根与标本中的钙离子形成草酸钙沉淀，使ca2+失去凝血功能。失去凝血功能。Na2C2O4+CaC2O4+2Na+草酸盐抗凝的优点是溶解度好、价廉。草酸盐抗凝的优点是溶解度好、价廉。2mg草酸盐可抗凝草酸盐可抗凝1ml血液。血液。草酸钠通常用草酸钠通常用0.1mol/l浓度，与血液按浓度，与血液按1；9比例使用，过去主要用于比例使用，过去主要用于凝血象检查。实践发现，草酸盐对凝血凝血象检查。实践发现，

47、草酸盐对凝血V因子保护功能差，影响凝血因子保护功能差，影响凝血酶原时间测定，另外由于草酸盐与钙结合后形成的沉淀物影响自动凝酶原时间测定，另外由于草酸盐与钙结合后形成的沉淀物影响自动凝血仪的使用，因此，多数认为，凝血象检查选用枸橼酸钠为抗凝剂更血仪的使用，因此，多数认为，凝血象检查选用枸橼酸钠为抗凝剂更为适宜。高浓度钾离子或钠离子易使血细胞脱水皱缩，而草酸胺则可为适宜。高浓度钾离子或钠离子易使血细胞脱水皱缩，而草酸胺则可使血细胞膨胀，故测定血细胞比容时用草酸胺和草酸钾或草酸钠两者使血细胞膨胀，故测定血细胞比容时用草酸胺和草酸钾或草酸钠两者适当比例混合的抗凝剂，恰好不影响红细胞的形态和体积。若用草

48、酸适当比例混合的抗凝剂，恰好不影响红细胞的形态和体积。若用草酸钾或草酸钠作抗凝剂，与肝素为抗凝剂测定的血细胞比容比较，测定钾或草酸钠作抗凝剂，与肝素为抗凝剂测定的血细胞比容比较，测定值可降低值可降低8%-13%，此时的血浆量也相应增加；用它测定血浆中化学，此时的血浆量也相应增加；用它测定血浆中化学成分，结果可低成分，结果可低5%左右。标本中如加入高浓度的草酸盐抗凝剂，可左右。标本中如加入高浓度的草酸盐抗凝剂，可发生溶血和改变血液发生溶血和改变血液PH，干扰血浆中的钾、钠和氯测定，还能抑制，干扰血浆中的钾、钠和氯测定，还能抑制有些酶的活性。有些酶的活性。3肝素（肝素（heparin）肝素是生理性

49、抗凝剂，广泛存在于肺、）肝素是生理性抗凝剂，广泛存在于肺、肝、脾等几乎所有组织和血管周围肥大细胞和嗜碱粒细胞肝、脾等几乎所有组织和血管周围肥大细胞和嗜碱粒细胞的颗粒中。它是一种含硫酸基团的粘多糖，相对分子质量的颗粒中。它是一种含硫酸基团的粘多糖，相对分子质量15000，带有较多负电荷。抗凝机制较为复杂，主要是加，带有较多负电荷。抗凝机制较为复杂，主要是加强抗凝血酶强抗凝血酶（antithrombin，AT-）灭活丝氨酸蛋）灭活丝氨酸蛋白酶的作用，从而阻止凝血酶的形成，并有阻止血小板聚白酶的作用，从而阻止凝血酶的形成，并有阻止血小板聚集等多种抗凝作用。每毫升血液抗凝需要肝素（集等多种抗凝作用。每

50、毫升血液抗凝需要肝素（152.5）IU，所用制剂多为肝素的钠盐或钾盐。肝素具有抗凝力强、，所用制剂多为肝素的钠盐或钾盐。肝素具有抗凝力强、不影响血细胞体积、不易溶血等优点。除有些因素会干扰不影响血细胞体积、不易溶血等优点。除有些因素会干扰凝血机制检查项目外，绝大多数的检查都可用肝素作为抗凝血机制检查项目外，绝大多数的检查都可用肝素作为抗凝剂，它是红细胞渗透脆性试验理想的抗凝剂。尽管肝素凝剂，它是红细胞渗透脆性试验理想的抗凝剂。尽管肝素可以保持红细胞的自然形态，但由于其常可引起白细胞聚可以保持红细胞的自然形态，但由于其常可引起白细胞聚集，并使血涂片在罗氏染色（集，并使血涂片在罗氏染色（Roman