血小板血型系统课件.pptx

1、第五章第五章血小板血型系统及检测技术血小板血型系统及检测技术1目的要求目的要求掌握：掌握：适合性血小板输注适合性血小板输注熟悉：熟悉：血小板血型检测技术血小板血型检测技术 血小板血型抗原分类及其临床意义血小板血型抗原分类及其临床意义2教学内容教学内容n血小板血型抗原及其抗体血小板血型抗原及其抗体n血小板血型检测技术血小板血型检测技术n血小板血型的临床意义血小板血型的临床意义n适合型血小板输注适合型血小板输注34指用同种免疫抗体检测出指用同种免疫抗体检测出 的血小板表面抗原的血小板表面抗原血小板相关抗原血小板相关抗原 血小板特异性抗原血小板特异性抗原(5n血小板表面存在的与其他细胞或组织共有的抗

2、原血小板表面存在的与其他细胞或组织共有的抗原n包括：红细胞的血型系统（包括：红细胞的血型系统（ABO等）等）人类白细胞抗原（人类白细胞抗原（HLA）6n存在存在ABO、Lewis、I、i和和P抗原抗原n缺失缺失Rh、Duffy、Kell、Kidd系统系统的抗原的抗原7Chromosome 6DPDQDRBCAClass IIClass I存在存在HLA-A和和B位点的抗原位点的抗原HLA-C位点的抗原位点的抗原?未发现未发现HLA-DP、DQ和和DR等位点抗原等位点抗原经细胞因子刺激，可产生经细胞因子刺激，可产生HLA-DR抗原抗原8n即人类血小板抗原（即人类血小板抗原（human plate

3、let antigen，）n血小板特有的血小板特有的,其他组织细胞没有其他组织细胞没有n表现血小板独特的遗传多态性表现血小板独特的遗传多态性n均存在于血小板膜糖蛋白（均存在于血小板膜糖蛋白（GP）上）上9血小板特异性抗原血小板特异性抗原10n1990年国际血液学标准化委员会年国际血液学标准化委员会(ICSH)、国际、国际输血协会（输血协会（ISBT）血小板血清学研讨会对血）血小板血清学研讨会对血小板抗原系统进行国际命名小板抗原系统进行国际命名n2003年国际输血协会（年国际输血协会（ISBT）和国际血栓和）和国际血栓和止血协会（止血协会（ISTH）建立的血小板命名委员会）建立的血小板命名委员会

4、（PNC）11n在系统前冠以在系统前冠以HPA，即人类血小板抗原，即人类血小板抗原（human platelet antigen）英文缩写）英文缩写n按发现顺序用数字编号按发现顺序用数字编号n只有在只有在2个对偶抗原全被检测出来后，才能被称个对偶抗原全被检测出来后，才能被称为系统，对偶抗原按其在人群中频率由高到低，为系统，对偶抗原按其在人群中频率由高到低，用字母命名，高的为用字母命名，高的为a，低的为，低的为b n尚未发现对偶抗原的，给予暂时命名，在等位尚未发现对偶抗原的，给予暂时命名，在等位基因数字后加后缀基因数字后加后缀w表示表示12血小板抗原频率调查与日本人、白种人比较血小板抗原频率调查

5、与日本人、白种人比较13人类血小板同种抗原频率人类血小板同种抗原频率14血小板糖蛋白的功能和血小板同种抗体血小板糖蛋白的功能和血小板同种抗体1516同种抗体抗原自身抗体血小板抗原与抗体血小板抗原与抗体17nMoulinier在在1957年从一个血小板减少症年从一个血小板减少症婴儿的母亲血清中发现婴儿的母亲血清中发现n最早发现，但至今没有发现这个抗原的最早发现，但至今没有发现这个抗原的同种异型，并尚未被国际正式命名同种异型，并尚未被国际正式命名n应用抗人球蛋白消耗试验，这种抗体能应用抗人球蛋白消耗试验，这种抗体能与与22%的法国人的血小板反应的法国人的血小板反应n其他未命名的其他未命名的HPA：

6、PLE、Vaa、Moua等等18n产生机理：机体对血小板表面或相关抗原免疫产生机理：机体对血小板表面或相关抗原免疫n临床分类：血循环中的游离抗体临床分类：血循环中的游离抗体 结合于血小板上的抗体结合于血小板上的抗体(PAIgG)n血型学分类：血小板同种抗体血型学分类：血小板同种抗体 自身抗体自身抗体n见于：血小板输注治疗无效；同种免疫血小板见于：血小板输注治疗无效；同种免疫血小板 减少症；自身免疫血小板减少症；药物、病毒、减少症；自身免疫血小板减少症；药物、病毒、细菌引起的血小板减少症细菌引起的血小板减少症19n血小板表面存在众多复杂抗原，因此反复大量血小板表面存在众多复杂抗原，因此反复大量输

7、注血小板的患者约输注血小板的患者约50%以上产生血小板同种以上产生血小板同种抗体抗体n据报道据报道HLA抗体占多数，约抗体占多数，约80%左右左右nHPA抗体单独存在的频率较低（抗体单独存在的频率较低（2%-3%）nHPA抗体与抗体与HLA抗体共存（抗体共存（18%左右）左右）n必须首先识别并去除血清中存在的必须首先识别并去除血清中存在的HLA抗体，抗体，才能分析血小板抗体的特异性才能分析血小板抗体的特异性20n血小板输注无效血小板输注无效n输血后紫癜输血后紫癜n被动免疫血小板减少症被动免疫血小板减少症n新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜n移植相关的同种免疫血小板

8、减少症移植相关的同种免疫血小板减少症n血小板的自身免疫作用血小板的自身免疫作用21n鉴别有无鉴别有无HLA抗体存在的方法抗体存在的方法 淋巴细胞毒试验淋巴细胞毒试验 混合淋巴细胞培养混合淋巴细胞培养n除去血小板表面除去血小板表面HLA抗原方法抗原方法 00氯喹或酸溶液处理血小板氯喹或酸溶液处理血小板22 23n指患者在输注合适剂量的血小板后没有产指患者在输注合适剂量的血小板后没有产生生“适当的反应适当的反应”，即连续两次输注足量，即连续两次输注足量随机供者血小板后，没有达到合适的校正随机供者血小板后，没有达到合适的校正血小板计数增加值（血小板计数增加值（CCI），临床出血表），临床出血表现亦未

9、见改善现亦未见改善n长期依靠血小板支持治疗长期依靠血小板支持治疗n这是临床输血中颇为棘手的问题这是临床输血中颇为棘手的问题24n免疫因素免疫因素（17.5%）：HLA抗体、抗体、HPA抗体、抗体、ABO抗抗体、自身抗体、药物抗体、循环免疫复合物等体、自身抗体、药物抗体、循环免疫复合物等n非免疫因素非免疫因素（67.5%）：发热、败血症、脾肿大、骨发热、败血症、脾肿大、骨髓移植、髓移植、DIC、静注抗菌素等；血小板质量、静注抗菌素等；血小板质量n非免疫非免疫+免疫因素免疫因素（15%）25262728n临床临床:出血趋势不减轻，或出现输血性紫癜，出血加重。出血趋势不减轻，或出现输血性紫癜，出血加

10、重。血小板计数较输注前不仅不增高，有时还会下降。血小板计数较输注前不仅不增高，有时还会下降。n校正血小板计数增加值校正血小板计数增加值（CCI）:CCI=(输注后血小板计数输注后血小板计数-输注前血小板计数输注前血小板计数)体表面积体表面积(m2)输入血小板总数（输入血小板总数（1011L）PTR判定标准判定标准:1小时小时CCI 7.5109L 20-24小时小时CCI 4.5 109L 29n血小板回收率（血小板回收率（percentage platelet recovery,PPR）:PPR=(输注后血小板数输注前血小板数输注后血小板数输注前血小板数)血容量血容量(L)输入血小板总数输入

11、血小板总数2/3 PTR判定标准：判定标准：1hPPR30%20-24hPPR 20%30n选用单一供者血小板（机釆血小板）选用单一供者血小板（机釆血小板）n自身血小板输注自身血小板输注n去除血小板中白细胞：去除血小板中白细胞：WBC 5 106 n去除血小板表面抗原：用氯喹或枸橼酸解离去除血小板表面抗原：用氯喹或枸橼酸解离技术去除技术去除HLA抗原；抗原；n紫外线照射灭活抗原提呈细胞（紫外线照射灭活抗原提呈细胞（antigen presenting cell,APC）功能）功能31n首先考虑血小板质量问题，可输注首先考虑血小板质量问题，可输注ABO 同型的非库同型的非库存血小板，以排除存血小

12、板，以排除ABO系统的抗体或血小板质量方面系统的抗体或血小板质量方面的影响因素的影响因素n若有发热、感染、若有发热、感染、DIC 等导致血小板消耗增加的因素等导致血小板消耗增加的因素存在，积极治疗原发病，并增加输注剂量存在，积极治疗原发病，并增加输注剂量n若有同种抗体存在，则挑选若有同种抗体存在，则挑选HLA、HPA 相合的供者相合的供者血小板，或使用激素、免疫抑制剂或静脉注射免疫球血小板，或使用激素、免疫抑制剂或静脉注射免疫球蛋白。蛋白。n若病人持续输注血小板效果不佳而又找不到明确的原若病人持续输注血小板效果不佳而又找不到明确的原因，则应考虑药物性抗体的存在，停用或换用相关药因，则应考虑药物

13、性抗体的存在，停用或换用相关药物物32病因病因 处理处理免疫性免疫性因素因素 HLA 同种抗体同种抗体 输注输注HLA抗原配合的血小板或交叉配合试验相合的抗原配合的血小板或交叉配合试验相合的血小板血小板 血小板特异性抗体血小板特异性抗体 输注血小板特异性抗原（输注血小板特异性抗原（HPA）配合的血小板或交）配合的血小板或交叉配合试验相合的血小板叉配合试验相合的血小板 自身抗体自身抗体 大量静脉注射免疫球蛋白、皮质类固醇、脾切除术大量静脉注射免疫球蛋白、皮质类固醇、脾切除术 药物（如肝素）药物（如肝素）停用诱发药物停用诱发药物 非免疫性非免疫性因素因素 脾肿大脾肿大 治疗病因治疗病因 药物（如两

14、性霉素药物（如两性霉素B）若可能时，停用诱发药物若可能时，停用诱发药物 消耗增加消耗增加 治疗病因治疗病因 败血症败血症 治疗病因治疗病因 33 n供者选择：供者选择：ABO和和Rh相合相合 HLA相合相合 HPA相合相合n大量静脉注射免疫球蛋白（大量静脉注射免疫球蛋白（IVIG）n血浆置换血浆置换n免疫抑制剂免疫抑制剂n抗纤溶药物等抗纤溶药物等34解决血小板输注无效的方法流程解决血小板输注无效的方法流程 针对有针对有2次或次或2次以上输注次以上输注6个或者个或者6个单位以上的浓缩血小板患者个单位以上的浓缩血小板患者,分别测定分别测定1小时小时,20-24小时的小时的CCI值值,如果低于预期的

15、标准值如果低于预期的标准值,视为输注无效视为输注无效抽取患者抽取患者2ml静脉血静脉血(不加抗凝剂不加抗凝剂)及及2ml ACD抗凝静脉血抗凝静脉血 HLA抗体检测抗体检测HLA抗体阳性抗体阳性,采用采用HLA交叉配合实验交叉配合实验,选择配合实验阴性的血小板进行输注选择配合实验阴性的血小板进行输注出现出现HLA抗体阴性的血小板输注无效抗体阴性的血小板输注无效 HPA抗体检测抗体检测HPA抗体阳性抗体阳性,HLA、HPA交叉配合阴性血小板或交叉配合阴性血小板或HPA同型输注同型输注35（posttransfusion purpura,PTP）指输注全血或血小板后引起的急性、暂时指输注全血或血小

16、板后引起的急性、暂时性的同种免疫性血小板减少综合征性的同种免疫性血小板减少综合征n在输血后在输血后1周左右突然发生周左右突然发生n瘀点、瘀斑和黏膜出血，严重者有内脏和颅内出瘀点、瘀斑和黏膜出血，严重者有内脏和颅内出血血大多数的患者是女性，有输血或妊娠史大多数的患者是女性，有输血或妊娠史36n血小板抗体筛选血小板抗体筛选n血小板交叉配血试验，选择配合型血小板交叉配血试验，选择配合型的血小板供体输注的血小板供体输注n大量静脉注射免疫球蛋白大量静脉注射免疫球蛋白37n定义：定义：是由于胎儿和母亲的血小板血型不合，是由于胎儿和母亲的血小板血型不合，使母亲产生同种抗体，通过胎盘进入胎儿体内，使母亲产生同

17、种抗体，通过胎盘进入胎儿体内，与胎儿血小板反应而导致胎儿和新生儿的血小与胎儿血小板反应而导致胎儿和新生儿的血小板减少。板减少。n常见，病死率较高，约常见，病死率较高，约13%38n内脏和中枢神经系统出血内脏和中枢神经系统出血n脑水肿脑水肿n出生时有严重而广泛的瘀点和瘀斑出生时有严重而广泛的瘀点和瘀斑n出生时正常，出生时正常，2-3天后出现血小板显著减少天后出现血小板显著减少n血小板抗原的鉴定血小板抗原的鉴定n血小板抗体的检查血小板抗体的检查n(39治疗措施治疗措施新生儿新生儿静脉注射免疫球蛋白静脉注射免疫球蛋白n预防预防随时监测母亲血清中血小板抗体随时监测母亲血清中血小板抗体效价高时可对母亲作

18、血浆置换治疗，降低母亲效价高时可对母亲作血浆置换治疗，降低母亲血浆中抗体的含量血浆中抗体的含量40（Passive allo-immune thrombocytopenia,PAT）由于患者输入了被免疫的供血者提供的由于患者输入了被免疫的供血者提供的含有血小板特异性同种异体抗体的血浆引起的含有血小板特异性同种异体抗体的血浆引起的血小板减少；输血后立即发病，大约维持血小板减少；输血后立即发病，大约维持1周。周。一旦发现献血员患有这种病症，应暂停一旦发现献血员患有这种病症，应暂停献血。献血。HPA-1a、HPA-5b41（Transplantation-associated alloimmune

19、thrombocytopenia,TAAT）n发病机制：骨髓移植后，宿主淋巴细胞残余物发病机制：骨髓移植后，宿主淋巴细胞残余物的混合嵌合性使得从的混合嵌合性使得从HPA-1a阳性移植物中得阳性移植物中得到的血小板与到的血小板与HPA-1a抗体发生免疫反应。抗体发生免疫反应。n治疗：免疫球蛋白疗法和脾切除术治疗：免疫球蛋白疗法和脾切除术n主要发病抗原：主要发病抗原：HPA-1a、HPA-5b42 特发性血小板减少性紫癜特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP）患者体内存在抗血小板自身抗体，使血小患者体内存在抗血小板自身抗体，使血小板大

20、量破坏，是一种自身免疫疾病板大量破坏，是一种自身免疫疾病出血症状出血症状43n血小板相关免疫球蛋白（血小板相关免疫球蛋白（PAIgG）：与血小板）：与血小板上的相关抗原结合上的相关抗原结合，PAIgG升高的水平与血小升高的水平与血小板减少的程度有关板减少的程度有关n 游离抗体游离抗体4445n血小板输注不仅没有疗效，还有可能因血小板表面各类血小板抗血小板输注不仅没有疗效，还有可能因血小板表面各类血小板抗原的同种免疫作用，导致输血后紫癜等输血反应原的同种免疫作用，导致输血后紫癜等输血反应n应用皮质激素等免疫抑制剂应用皮质激素等免疫抑制剂脾切除术脾切除术n大量血浆置换大量血浆置换大剂量静脉注射免疫

21、球蛋白大剂量静脉注射免疫球蛋白长春生物碱类药物偶联单采血小板，给难治型长春生物碱类药物偶联单采血小板，给难治型ITP患者输患者输注，获得较好疗效注，获得较好疗效4647n发热、感染、发热、感染、DIC、出血、脾肿大、出血、脾肿大n血小板同种抗体血小板同种抗体n与输注量、病人血容量和一般情况有关与输注量、病人血容量和一般情况有关48 HLA配合：血清学方法：淋巴细胞毒技术；配合：血清学方法：淋巴细胞毒技术；PCR技术技术 HPA配合：血清学方法：配合：血清学方法：SEPSA，凝胶微柱法等；，凝胶微柱法等；PCR技术技术4950血小板输血的适应症血小板输血的适应症515253Thank you!5

22、455n应用：应用：HPA-2抗原的检测抗原的检测n实验室中实验室中MPHA可以产生很好的结果可以产生很好的结果56n原理：血小板与已包被在微孔中的免疫单克隆抗血小原理：血小板与已包被在微孔中的免疫单克隆抗血小板抗体混合后与待测的血清孵育，洗涤。再加入抗板抗体混合后与待测的血清孵育，洗涤。再加入抗-IgG包被的红细胞。如果血小板被抗体致敏，那么红包被的红细胞。如果血小板被抗体致敏，那么红细胞将覆盖在血小板上形成单层；否则指示红细胞将细胞将覆盖在血小板上形成单层；否则指示红细胞将在孔的中央形成紧密的细胞扣。在孔的中央形成紧密的细胞扣。n使用低离子强度介质可以提高血小板的敏感性使用低离子强度介质可

23、以提高血小板的敏感性n可使用可使用IgG抗抗-D和抗和抗-IgG检测血小板结合的抗体检测血小板结合的抗体575859血小板输血血小板输血60血小板输血血小板输血6162特制血小板特制血小板63血小板输血的适应症血小板输血的适应症646566输注的血小板方法输注的血小板方法67输注的血小板方法输注的血小板方法6869写在最后写在最后成功的基础在于好的学习习惯成功的基础在于好的学习习惯The foundation of success lies in good habits 结束语当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的，所以不要放弃，坚持就是正确的。When You Do Your Best,Failure Is Great,So DonT Give Up,Stick To The End演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日