人教版选修3课件 第1部分 专题2 2.2 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术.ppt
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1、理解理解 教材新知教材新知 把握把握 命题热点命题热点 应用应用 落实体验落实体验 课下综合检测课下综合检测 课堂回扣练习课堂回扣练习 命题点一命题点一 命题点二命题点二 知识点一知识点一 知识点二知识点二 2 22 2 动物动物 细胞细胞 工程工程 专专 题题 2 2 2 22.2. 1 1 22 动物细胞工程动物细胞工程 22.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术 1动物细胞培养的过程:动物组织块动物细胞培养的过程:动物组织块 剪碎剪碎 用胰蛋白酶处理用胰蛋白酶处理 单个细胞单个细胞 加培养液加培养液 细胞悬细胞悬 液液原代培养原代培养传代培养。传代培养。 2动物细胞培养一
2、般选用胚胎或幼龄动物的组织,动物细胞培养一般选用胚胎或幼龄动物的组织, 细胞在培养过程中会出现细胞贴壁细胞在培养过程中会出现细胞贴壁(生长生长)和细胞和细胞 接触抑制现象。接触抑制现象。 3动物细胞培养的条件包括:无菌、无毒的环境,动物细胞培养的条件包括:无菌、无毒的环境, 适宜的营养、温度和适宜的营养、温度和pH及气体环境。及气体环境。 4动物核移植技术的原理是动物细胞核的全能性,动物核移植技术的原理是动物细胞核的全能性, 属于无性生殖。属于无性生殖。 5动物体细胞核移植的受体细胞是已经去核的动物体细胞核移植的受体细胞是已经去核的M 期卵母细胞。期卵母细胞。 动物细胞培养动物细胞培养 1概念
3、概念 从动物机体中取出相关的组织,将它分散成从动物机体中取出相关的组织,将它分散成_, 然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞_和和_。 单个细胞单个细胞 生长生长 增殖增殖 2过程过程 传代培养传代培养 先用先用_等处理贴满瓶壁的细胞,等处理贴满瓶壁的细胞, 再分瓶继续培养再分瓶继续培养 _代左右时,细胞增殖缓慢,甚至停止代左右时,细胞增殖缓慢,甚至停止 部分细胞部分细胞_发生改变,获得不死性,能无发生改变,获得不死性,能无 限增殖限增殖 核型核型 1050 胰蛋白酶胰蛋白酶 3相关概念相关概念 (1)细胞贴壁:细胞悬液中分散的细胞细胞贴壁:细胞悬液中分散的
4、细胞_上。上。 (2)细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到_ 时,细胞时,细胞_的现象。的现象。 (3)原代培养:指动物组织消化后的原代培养:指动物组织消化后的_。 (4)传代培养:贴满瓶壁的细胞,出现传代培养:贴满瓶壁的细胞,出现_后,需要重后,需要重 新用新用_等处理,然后分瓶继续培养,让细胞等处理,然后分瓶继续培养,让细胞_ 的培养过程。的培养过程。 贴附在瓶壁贴附在瓶壁 表面相互接触表面相互接触 停止分裂增殖停止分裂增殖 初次培养初次培养 接触抑制接触抑制 胰蛋白酶胰蛋白酶 继续增殖继续增殖 4培养条件培养条件 (1)无菌、无毒的环境:对无菌、无毒的
5、环境:对_和所有和所有_进行无菌进行无菌 处理。处理。 (2)营养营养 无机物:无机盐、无机物:无机盐、_等等 有机物:糖、氨基酸、促生长因子有机物:糖、氨基酸、促生长因子 _:补充培养液中没有完全搞清:补充培养液中没有完全搞清 楚的成分楚的成分 (3)温度和温度和pH 温度:温度:_ pH:_ (4)气体环境气体环境 O2:_所必需的所必需的 CO2:维持:维持_ 培养液培养液 培养用具培养用具 微量元素微量元素 动物血清、血浆动物血清、血浆 36.50.5 7.27.4 细胞代谢细胞代谢 培养液的培养液的pH 5应用应用连线连线 1为什么选用胚胎或幼龄动物组织进行细胞培养?为什么选用胚胎或
6、幼龄动物组织进行细胞培养? 提示:提示:幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度低,增殖能力很幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度低,增殖能力很 强,更易于培养。强,更易于培养。 2进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细 胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗? 提示:提示:用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋 白质。多数细胞培养的适宜白质。多数细胞培养的适宜pH为为7.27.4,胃蛋白酶在此环境,胃蛋白酶在此环境 中没有活性,而胰蛋白酶在此环境中活性较
7、高,因此胰蛋白酶中没有活性,而胰蛋白酶在此环境中活性较高,因此胰蛋白酶 适宜用于细胞培养时的消化。适宜用于细胞培养时的消化。 3动物细胞培养要经过脱分化的过程吗?为什么?动物细胞培养要经过脱分化的过程吗?为什么? 提示:提示:动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动 物细胞发育潜能变弱,失去了发育成完整个体的能力,所以动物物细胞发育潜能变弱,失去了发育成完整个体的能力,所以动物 细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。 4为什么进行动物细胞培养时,通常要添加血清?为什么进行动物细
8、胞培养时,通常要添加血清? 提示:提示:血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等物质,血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等物质, 而且还含有多种未知的促生长因子、促贴附因子及其他活性物而且还含有多种未知的促生长因子、促贴附因子及其他活性物 质,能促进细胞的生长、增殖和贴附。质,能促进细胞的生长、增殖和贴附。 1动物细胞培养过程解读动物细胞培养过程解读 (1)原理:细胞增殖。原理:细胞增殖。 (2)将动物细胞分散成单个细胞培养的原因:将动物细胞分散成单个细胞培养的原因: 保证细胞所需要的营养供应。保证细胞所需要的营养供应。 保证细胞内有害代谢产物的及时排出。保证细胞内有害代谢产物的及时排出。
9、 (3)细胞株和细胞系:细胞株和细胞系: 细胞株:传代培养的细胞能传到细胞株:传代培养的细胞能传到1050代,这样的传代细代,这样的传代细 胞称为细胞株。胞称为细胞株。 细胞系:传代培养的细胞在传到细胞系:传代培养的细胞在传到50代后,有部分细胞的遗代后,有部分细胞的遗 传物质发生了改变,获得不死性,这种具有癌变特点的细胞称为传物质发生了改变,获得不死性,这种具有癌变特点的细胞称为 细胞系。细胞系。 2动物细胞培养与植物组织培养的比较动物细胞培养与植物组织培养的比较 比较项目比较项目 植物组织培养植物组织培养 动物细胞培养动物细胞培养 区区 别别 原理原理 植物细胞的全能性植物细胞的全能性 细
10、胞增殖细胞增殖 培养基培养基 固体或半固体培养基,固体或半固体培养基, 包括矿质元素、蔗糖、包括矿质元素、蔗糖、 维生素、琼脂、植物激维生素、琼脂、植物激 素等素等 液体培养基,包括液体培养基,包括 无机盐、葡萄糖、无机盐、葡萄糖、 维生素、氨基酸、维生素、氨基酸、 动物血清等动物血清等 培养条件培养条件 再分化阶段需光再分化阶段需光 不需光不需光 细胞来源细胞来源 离体植物器官、组织或离体植物器官、组织或 细胞细胞 胚胎或幼龄动物组胚胎或幼龄动物组 织、器官织、器官 比较项目比较项目 植物组织培养植物组织培养 动物细胞培养动物细胞培养 区区 别别 过程过程 脱分化、再分化脱分化、再分化 原代
11、培养、传代培养原代培养、传代培养 结果结果 获得新个体或细胞产品获得新个体或细胞产品 大量产生细胞或细胞大量产生细胞或细胞 产物产物 用途用途 快速繁殖名贵花卉和果树快速繁殖名贵花卉和果树 培养无病毒植株、转基因培养无病毒植株、转基因 植物植物 大规模生产细胞产品如药大规模生产细胞产品如药 物、食品添加剂、香料、色物、食品添加剂、香料、色 素等素等 生产蛋白质制品如生产蛋白质制品如 病毒疫苗、干扰素、病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体等单克隆抗体等 检测有毒物质检测有毒物质 研究生理、药理、研究生理、药理、 病理病理 相同点相同点 都需要人工条件下的无菌操作,无菌培养都需要人工条件下的无菌操作,无
12、菌培养 都是合成培养基都是合成培养基 都需要适宜的温度、都需要适宜的温度、pH等条件等条件 都进行有丝分裂都进行有丝分裂 特别提醒特别提醒 (1)植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过 程,但植物组织培养过程中细胞既分裂又分化,而动物细胞培养程,但植物组织培养过程中细胞既分裂又分化,而动物细胞培养 过程中细胞只分裂不分化。过程中细胞只分裂不分化。 (2)植物组织培养可获得新个体,体现了细胞的全能性,而动植物组织培养可获得新个体,体现了细胞的全能性,而动 物细胞培养只能得到细胞,没有体现细胞的全能性。物细胞培养只能得到细胞,没有体现细胞的
13、全能性。 (3)植物组织培养中需要加入植物激素等促生长因子,而动物植物组织培养中需要加入植物激素等促生长因子,而动物 细胞培养基中需要加入血清、血浆。细胞培养基中需要加入血清、血浆。 动物体细胞核移植技术和克隆动物动物体细胞核移植技术和克隆动物 1动物核移植概念动物核移植概念 (1)供体:动物一个细胞的供体:动物一个细胞的_。 (2)受体:去掉细胞核的受体:去掉细胞核的_。 (3)结果:形成重组胚胎,发育成结果:形成重组胚胎,发育成_。 2类型类型 胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植 _ 细胞核细胞核 卵母细胞卵母细胞 动物个体动物个体 体细胞核移植体细胞核移植 3体细胞核移植的过程体细胞核移植的过
14、程 4体细胞核移植的应用前景体细胞核移植的应用前景 (1)畜牧生产方面:加速家畜畜牧生产方面:加速家畜_进程,促进进程,促进_ _。 (2)保护濒危物种方面:增加动物的保护濒危物种方面:增加动物的_。 (3)医药卫生领域:转基因动物作为医药卫生领域:转基因动物作为_,生产医,生产医 用蛋白。用蛋白。 (4)治疗人类疾病:转基因克隆动物细胞、组织和器官作为治疗人类疾病:转基因克隆动物细胞、组织和器官作为 _的供体等。的供体等。 遗传改良遗传改良 优良畜优良畜 群繁育群繁育 存活数量存活数量 生物反应器生物反应器 异种移植异种移植 5体细胞核移植技术存在的问题体细胞核移植技术存在的问题 (1)体细
15、胞核移植技术的体细胞核移植技术的_非常低。非常低。 (2)克隆动物存在健康问题,表现出克隆动物存在健康问题,表现出_缺陷、遗传缺陷缺陷、遗传缺陷 等。等。 (3)克隆动物食品的克隆动物食品的_问题存在争议。问题存在争议。 成功率成功率 生理生理 安全性安全性 1动物核移植技动物核移植技术的理论基础术的理论基础(原理原理)是什么?克隆动物属于是什么?克隆动物属于 有性生殖还是无性繁殖?有性生殖还是无性繁殖? 提示:提示:动物细胞核的全能性。无性繁殖。动物细胞核的全能性。无性繁殖。 2为什么体细胞核移植较胚胎细胞核移植更困难?为什么体细胞核移植较胚胎细胞核移植更困难? 提示:提示:由于动物胚胎细胞
16、分化程度低,恢复其全能性相对由于动物胚胎细胞分化程度低,恢复其全能性相对 容易;而动物体细胞分化程度高,恢复其全能性十分困难。因容易;而动物体细胞分化程度高,恢复其全能性十分困难。因 此动物体细胞核移植的难此动物体细胞核移植的难度就明显高于胚胎细胞核移植。度就明显高于胚胎细胞核移植。 3用于核移植的供体细胞一般都选用传代用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞,代以内的细胞, 这是为什么?这是为什么? 提示:提示:培养的动物细胞一般当传代至培养的动物细胞一般当传代至1050代左右时,部分代左右时,部分 细胞核型可能会发生变化,其细胞遗传物质可能会发生突变,而细胞核型可能会发生变化,其
17、细胞遗传物质可能会发生突变,而 10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。 4在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必 须先去掉受体卵母细胞的细胞核?须先去掉受体卵母细胞的细胞核? 提示:提示:为使核移植的胚胎或动物的细胞核内的遗传物质全为使核移植的胚胎或动物的细胞核内的遗传物质全 部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞。部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞。 5通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体 动物进行了动物进行了100%复制吗?
18、为什么?复制吗?为什么? 提示:提示:不是。绝大部分不是。绝大部分DNA来自于供体细胞核,但其核外来自于供体细胞核,但其核外 还有少量的还有少量的DNA,即线粒体中的,即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞;是来自于受体卵母细胞; 其次生物的性状还受环境的影响。其次生物的性状还受环境的影响。 1核移植分析核移植分析 (1)原理:动物细胞核的全能性,而不是动物细胞的全能性。原理:动物细胞核的全能性,而不是动物细胞的全能性。 因动物体细胞的全能性受到限制,不能经培养直接发育成完整个因动物体细胞的全能性受到限制,不能经培养直接发育成完整个 体。所以用体细胞核移植技术能够得到克隆动物,说明动物体细胞体
19、。所以用体细胞核移植技术能够得到克隆动物,说明动物体细胞 的细胞核具有全能性。的细胞核具有全能性。 (2)供体和受体的选择:供体和受体的选择: 供体:一般选用传代供体:一般选用传代10代以内的细胞,因为代以内的细胞,因为10代以内的细胞代以内的细胞 一般能保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞正常的遗传基础。一般能保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞正常的遗传基础。 受体:减受体:减中期的卵母细胞。一方面细胞大,易于操中期的卵母细胞。一方面细胞大,易于操 作;卵黄多,营养丰富,为发育提供充足的营养。另一方面作;卵黄多,营养丰富,为发育提供充足的营养。另一方面 此时具备受精能力,细胞质中含有能刺激
20、融合后重组细胞进此时具备受精能力,细胞质中含有能刺激融合后重组细胞进 行分裂分化并形成重组胚胎的物质。行分裂分化并形成重组胚胎的物质。 特别提醒特别提醒 核移植技术的供体细胞不能选择生殖细胞核移植技术的供体细胞不能选择生殖细胞 的细胞核,因为生殖细胞与正常体细胞相比,遗传物质是减的细胞核,因为生殖细胞与正常体细胞相比,遗传物质是减 半的。半的。 2克隆动物的遗传特点克隆动物的遗传特点 (1)克隆动物的性状与细胞核供体生物的性状基本相同,但克隆动物的性状与细胞核供体生物的性状基本相同,但 不完全相同,因为:不完全相同,因为: 克隆动物的细胞质遗传物质来自于受体卵母细胞的细胞克隆动物的细胞质遗传物
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