菊花的组织培养精心设计课件.ppt

1、菊花的组织培养菊花的组织培养 植物的组织培养又叫植物的组织培养又叫离体培养离体培养，指植物的，指植物的组织组织、器官或细胞等（器官或细胞等（外植体外植体课本课本34页旁栏页旁栏）在）在离离体条件体条件下，通过下，通过无菌无菌操作，在操作，在人工控制条件人工控制条件下下（一定的营养物质、激素、温度等其他外界条（一定的营养物质、激素、温度等其他外界条件）进行培养以获得再生的件）进行培养以获得再生的完整植株完整植株或生产具或生产具有经济价值的其他产品的技术。有经济价值的其他产品的技术。基础知识基础知识一、一、植物组织培养植物组织培养1、概念、概念概念：概念：原因：原因：全能性大小：全能性大小：2、植

2、物组织培养原理、植物组织培养原理：植物细胞的全能性植物细胞的全能性细胞的全能性是指细胞的全能性是指已分化已分化的细胞具有的细胞具有发育成完整个体的发育成完整个体的潜能潜能。生物体的每一个细胞都具有该物种生生物体的每一个细胞都具有该物种生长、发育、遗传变异的长、发育、遗传变异的全套遗传物质全套遗传物质受精卵受精卵 生殖细胞生殖细胞 体细胞体细胞植物细胞植物细胞 动物细胞动物细胞分裂能力强分裂能力强 分裂能力弱分裂能力弱1.什么叫分化？（其实质是什么来着什么叫分化？（其实质是什么来着?）2.什么叫脱（去）分化、再分化？什么叫脱（去）分化、再分化？3.愈伤组织的细胞有什么特点？愈伤组织的细胞有什么特

3、点？4.如何控制细胞的脱分化与去分化？如何控制细胞的脱分化与去分化？（阅读（阅读32-33页第一段解决下列问题页第一段解决下列问题）二、植物组织培养的基本过程二、植物组织培养的基本过程二、植物组织培养的基本过程二、植物组织培养的基本过程 离体器官、组织或细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根、芽 植物体 概念：概念：实质：实质：特点：特点：细胞分化细胞分化个体发育中，由一个或一种细胞增殖个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构或功能上产生的后代，在形态、结构或功能上发生稳定性差异的过程。发生稳定性差异的过程。基因的选择性表达基因的选择性表达普遍性普遍性持久性持久性稳定性稳定性不可逆

4、性不可逆性 离体器官、组织或细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根、芽 植物体 三、影响植物组织培养的因素：三、影响植物组织培养的因素：1、植物材料（外植体）的选取、植物材料（外植体）的选取（1）不同植物的组织培养难易程度不同）不同植物的组织培养难易程度不同 什么样的植物容易进行组织培养？什么样的植物容易进行组织培养？（2）同一种植物的不同组织培养难度不同）同一种植物的不同组织培养难度不同 什么样的组织容易进行组织培养？什么样的组织容易进行组织培养？容易进行无性生殖的植物，如烟草、胡萝卜容易进行无性生殖的植物，如烟草、胡萝卜幼龄、保存时间短的组织幼龄、保存时间短的组织菊花的组织培养一般选用何种材料

5、？菊花的组织培养一般选用何种材料？未开花植物的茎上部新萌生的侧枝未开花植物的茎上部新萌生的侧枝2、营养成分（培养基）、营养成分（培养基）（1）植物组织培养常用的培养基？）植物组织培养常用的培养基？MS培养基培养基大量元素大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S微量元素微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有机物有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖蔗糖等等（2）MS培养基的主要成分？培养基的主要成分？培养基中的各种成分的作用是什么？培养基中的各种成分的作用是什么？大量元素和微量元素提供植物细胞需要的各种无机大量元素和微量元素提供植物细胞需要

6、的各种无机盐；蔗糖提供碳源的同时维持细胞渗透压；甘氨酸、盐；蔗糖提供碳源的同时维持细胞渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是满足离体植物细胞的特殊营养维生素等物质主要是满足离体植物细胞的特殊营养物质需求物质需求课本课本33页旁栏思考：页旁栏思考：微生物培养基以有机营养为主，微生物培养基以有机营养为主，MS培养基则需提供大量无机营养培养基则需提供大量无机营养3、植物激素、植物激素（1）关键激素是什么？）关键激素是什么？（2）两种激素的不同使用顺序出现不同结果）两种激素的不同使用顺序出现不同结果（3）两种激素的不同用量出现不同结果）两种激素的不同用量出现不同结果4、pH、温度、光照等、温度、光照等 菊

7、花组织培养的菊花组织培养的PH？温度？光照？温度？光照？5、无菌环境、无菌环境菊菊花花的的组组织织培培养养再分化再分化材料性质、营养物质、材料性质、营养物质、调节物质、环境条件调节物质、环境条件基本原理基本原理:细胞的全能性细胞的全能性基本过程基本过程:脱分化脱分化愈伤组织愈伤组织影响因素：影响因素：制备制备MS固固体培养基体培养基外植体消毒外植体消毒 接种接种 培培 养养栽栽 培培四、实验操作四、实验操作 移移 栽栽流水流水冲洗冲洗无菌纸吸干无菌纸吸干70%酒精酒精无无菌水菌水冲洗冲洗无菌纸吸干无菌纸吸干0.1%氯化氯化汞汞无菌水无菌水冲洗至少三次之上冲洗至少三次之上（流水是为消毒吗？能消毒

8、的是什么？（流水是为消毒吗？能消毒的是什么？无菌水冲洗是为了干啥？）无菌水冲洗是为了干啥？）（哪（哪6步？）步？）1、配制各种母液、配制各种母液（大量元素、微量元素（大量元素、微量元素各浓缩多少倍？用量较小的有机物呢？）各浓缩多少倍？用量较小的有机物呢？）2、配制培养基、配制培养基（菊花组培是否添加植物激（菊花组培是否添加植物激素？）素？）3、灭菌、灭菌（哪种灭菌方法？）（哪种灭菌方法？）注意接种时的各种无菌操作。注意接种时的各种无菌操作。将菊花茎段插入培养基时特别应注意什么？将菊花茎段插入培养基时特别应注意什么？最好在哪儿培养？温度？光照？定期消毒？最好在哪儿培养？温度？光照？定期消毒？直接

9、移栽到土壤中吗？直接移栽到土壤中吗？1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）灼烧）4、无菌箱中的培养；、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间、移栽到消过毒的环境中生存一段时间在整个操作过程中，是如何来实现在整个操作过程中，是如何来实现无菌无菌环境的？环境的？35页旁栏思考：页旁栏思考：至少做一组以上的重复。对照实验用一个不接至少做一组以上的重复。对照实验用一个不接种的空白培养基与接种的培养基一同培养，用种的空白培养基与接种的培养

10、基一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。结果分析与评价结果分析与评价（一）对接种操作中污染情况的分析（一）对接种操作中污染情况的分析（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（三）是否进行了统计、对照与记录（三）是否进行了统计、对照与记录（四）生根苗的移栽是否合格（四）生根苗的移栽是否合格课题延伸（略）练习练习1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物

11、的组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。好，容易诱导脱分化和再分化。菊菊花花的的组组织织培培养养再分化再分化材料性质、营养物质、材料性质、营养物质、调节物质、环境条件调节物质、环境条件外植体的消毒

12、外植体的消毒接种接种基本原理基本原理:细胞的全能性细胞的全能性基本过程基本过程:脱分化脱分化愈伤组织愈伤组织影响因素：影响因素：操作流程：操作流程：配制配制MS固体培固体培养基养基培养培养移栽移栽栽培栽培1.下列关于愈伤组织的说法中不正确的是下列关于愈伤组织的说法中不正确的是()A.愈伤组织的细胞能够进行细胞分裂愈伤组织的细胞能够进行细胞分裂B.用叶培养形成的愈伤组织细胞能够进行光合作用用叶培养形成的愈伤组织细胞能够进行光合作用C.培养愈伤组织的培养基中应含有有机养料培养愈伤组织的培养基中应含有有机养料 D.人们可以从愈伤组织中提取所需物人们可以从愈伤组织中提取所需物质B2.植物组织培养过程中

13、的脱分化是指植物组织培养过程中的脱分化是指 A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞B.未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程C.植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程伤组织的过程D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程取植物的枝芽培育成一株新植物的过程C3 胡萝卜的韧皮部细胞通过组织培养，能发育成新的植株。下列有关的叙述中，不正确的是（）A说明高度分化的植物细胞具有全能性 B植物细胞的全能性得以表达要离开母体C新植株的形成是细胞分裂和分化的结果 D高度分化的动物细

14、胞也具有全能D4 甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗，以保证该品种的品质和产量速繁殖脱毒的种苗，以保证该品种的品质和产量水平。这种通过分生组织离体培养获得种苗的过水平。这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程不涉及细胞的程不涉及细胞的 A.有丝分裂有丝分裂B.分化分化 C.减数分裂减数分裂D.全能性全能性C 5、在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成、在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的 A.消毒灭菌消毒灭菌 B.适宜的温度适宜的温度 C.充足的光照充足的光照 D.适宜的养料和激素适宜的养料和激素C6 植物细胞表现出全能性的必要条件是植物细胞表现出全能性的必要条件是A.导入其他植物细胞的基因导入其他植物细胞的基因B.将成熟的细胞核移植到去核的卵细胞中将成熟的细胞核移植到去核的卵细胞中C.用适当浓度的秋水仙素处理用适当浓度的秋水仙素处理D.脱离母体后，给予适宜的营养和适宜的温度等脱离母体后，给予适宜的营养和适宜的温度等外界条件外界条件D