府伟灵-无标记检测技术课件.ppt

1、府伟灵府伟灵第三军医大学附属西南医院检验科第三军医大学附属西南医院检验科国家检验医学临床重点专科国家检验医学临床重点专科全军检验医学重点实验室全军检验医学重点实验室全军检验医学专科中心全军检验医学专科中心重庆市分子诊断重点实验室重庆市分子诊断重点实验室科技革命科技革命大致时间大致时间主要内容主要内容第一次1617世纪近代科学的诞生第二次18世纪中后期蒸汽机和机械革命第三次19世纪中后期电力和运输革命第四次相对论和量子论等第五次20世纪中期电子技术和自动化20世纪中后期信息技术和网络化第六次21世纪中期新生物学革命，新生命生物与技术融合透射式透射式THzTHz时域光谱系统时域光谱系统球菌和杆菌的

2、亚球菌和杆菌的亚THzTHz振动光谱差异振动光谱差异dsDNAdsDNA的的THzTHz波谱差异波谱差异J Biomed Optics,2014(Accepted)Anal Bioanal Chem.2012;402(4):1625-1634J Infrared Milli Terahz Waves.2014;35:318-324THzTHz波飞行质谱分子诊断传统方法检测原理菌体蛋白质组特征峰引物扩增、探针检测细菌生长与生化鉴定细菌培养需要不需要需要完成时间24小时培养+检测12小时48小时培养鉴定操作过程简便相对复杂相对复杂配套试剂无需要需要活菌/死菌鉴别否否否成像能力否否能在体检测否否否集

3、成了狭槽纳米天线的微流体样本池结构示意图分子 mg级pgg级细菌102103个1个分子30 m3 mmnm细菌30 m3 mm15 m集成了狭槽纳米天线的微流体样本池结构示意图 乳腺癌的早期准确诊断和病理分型对于患者个体化精准治疗有极为重要的意义。不同分子分型的乳腺癌的流行病学危险因素、疾病自然进程及全身或局部治疗反应不尽相同。2011 年国际乳腺癌大会上形成专家共识，可根据免疫组织化学检测的ER、PR、HER-2 及Ki-67结果确定乳腺癌的分子分型。分子亚型免疫组化表型临床治疗及预后luminal AER（）和（或）和（或）PR PR（），HER-2（），Ki-Ki-67 67 阳性细胞数

4、阳性细胞数14%14%最常见的类型，预后最好，内分泌治疗luminal B ER（）和（或）和（或）PR PR（），HER-2（），Ki-67 Ki-67 阳性细胞数阳性细胞数14%14%细胞增殖速度快，细胞增殖速度快，内分泌治疗加化疗 ERER（）（）和（或）和（或）PR PR（），HER-2（），Ki-67 Ki-67 阳性细胞数不限阳性细胞数不限内分泌治疗联合抗联合抗HERHER一一2 2靶向治疗HER-2过表达ER（）和和PR PR（），HER-2（）恶性度高，恶性度高，预后较差，有转移倾向，行，有转移倾向，行化疗及抗HER-2治疗基底样型ER（），PR PR（）和（）和HER-2（-

5、），表达基底细，表达基底细胞角蛋白和肌上皮标记物胞角蛋白和肌上皮标记物预后最差，外科手术加化疗正常乳腺样ER（），PR PR（）和（）和HER-2（-），表达正常脂表达正常脂肪组织基因肪组织基因恶性度低，恶性度低，预后较好，对化疗不敏感Fig.The terahertz spectroscopic properties for water and breast tissues.Fig.The terahertz spectroscopic properties for water and breast tissues.PLoS ONE(2014)9:19J Infrared Milli Ter

6、ahz Waves(2014)35:493502 本973课题组前期利用太赫兹时域光谱技术对乳腺癌MCF-7（Luminal A型）与MDA-MB-231（Basal型）细胞系细胞悬液进行初步研究；显示两种悬液的吸收系数存在显著差异。正常肺细胞SAEC、肺癌细胞A549及分别经过阿霉素DOX处理后细胞的平均拉曼光谱图(A)和拉曼光谱经过主成分分析的二维视图(B)通过对血液样本拉曼特征光谱的实验研究和规律探索，通过对血液样本拉曼特征光谱的实验研究和规律探索，初步获取初步获取不同种属及不同状态血液样品的拉曼光谱基不同种属及不同状态血液样品的拉曼光谱基本特征参数本特征参数人和狗，兔子血液拉曼特征峰差

7、异性（1157cm-1）：全血（A）和干的血液（B）BA人兔子狗全血0.48 0.20 0.15 干的血液0.83 0.23 0.09 人和动物特征峰峰面积比值（1157/1003 cm-1）人和动物1157cm-1特征峰强度存在一定的差异性HumanMonkey峰位置755 1003 1223 1376 1397 1549 1564 1582 1603 1619 1635 1653 人全血0.92 1.00 0.90 0.24 0.39 2.61 1.85 2.37 0.99 2.51 1.04 6.05 猴全血1.26 1.00 0.27 1.12 7.04 2.98 2.20 2.28

8、0.96 2.55 2.76 0.33 人和猴子血液（全血）拉曼特征峰面积的比值（以1003cm-1为参考）HumanMonkey峰位置755 1003 1223 1376 1397 1549 1564 1582 1603 1619 1635 1653 人全血0.92 1.00 0.90 0.24 0.39 2.61 1.85 2.37 0.99 2.51 1.04 6.05 猴全血1.26 1.00 0.27 1.12 7.04 2.98 2.20 2.28 0.96 2.55 2.76 0.33 人和猴子血液（全血）拉曼特征峰面积的比值（以1003cm-1为参考）传感器芯片 生物素化靶标纳米金磁颗粒 特异性识别分子 免疫传感器芯片检测尿液中微量蛋白的实时动态分析 4 种微量蛋白浓度标准曲线分析 SPR 免疫传感器和4 种蛋白反应的SPR角变化 SPR 和INM 检测结果的Altman-bland 分析适配子型传感器芯片检测TOX、CMV IgG的实时动态分析流池1：TOX IgG流池2：CMV IgG DNA传感器芯片检测靶基因实时动态分析4种病原菌靶基因浓度标准曲线分析DNA传感器芯片检测结核杆菌耐药突变的实时动态分析