应用锝99m标记survivin反义寡核苷酸进行肝癌反义显像课件.ppt

1、 胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践应用锝应用锝-99m标记标记Survivin反义寡核苷反义寡核苷酸进行肝癌反义显像的实验研究酸进行肝癌反义显像的实验研究 华中科技大学协和医院华中科技大学协和医院.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践Survivin基因高表达于人类大多数恶性肿基因高表达于人类大多数恶性肿瘤、而在正常成人终末分化的组织中不表瘤、而在正常成人终末分化的组织中不表达或低表达

2、达或低表达,参与了肿瘤的发生、发展参与了肿瘤的发生、发展,与与预后和肿瘤的耐药性也存在关联。预后和肿瘤的耐药性也存在关联。Survivin基因是一个极具潜在价值的癌基基因是一个极具潜在价值的癌基因。因。前前 言言.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践从理论上讲从理论上讲,只要靶只要靶DNA或或mRNA有过度的表有过度的表达达,便可以人工合成相应的反义寡核苷酸便可以人工合成相应的反义寡核苷酸(ASON),制成核素标记的分子探针制成核素标记的分子探针,利用核素利用核素显像设备达到早期、特异性地诊

3、断和治疗诸显像设备达到早期、特异性地诊断和治疗诸如肿瘤、炎症等疾病如肿瘤、炎症等疾病,因此具有广阔的应用前因此具有广阔的应用前景。景。前前 言言.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践DNARNA+antisense前前 言言.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践Survivin反义寡核苷酸的反义寡核苷酸的99mTc标记标记 及标记及标记物的分析物的分析99mTc-Survivin-ASON

4、在肝癌细胞和正常在肝癌细胞和正常肝细胞中的动力学分析肝细胞中的动力学分析 99mTc-Survivin-ASON在正常小鼠及荷人在正常小鼠及荷人肝癌裸鼠体内的生物学分布肝癌裸鼠体内的生物学分布 荷人肝癌裸鼠荷人肝癌裸鼠99mTc-Survivin-ASON肿瘤肿瘤反义显像研究反义显像研究 前前 言言.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践结结 果果.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践 AS

5、ON的的99mTc直接标记率为直接标记率为2.7。表明表明Survivin ASON的的99mTc标记是通过螯合剂的偶联标记是通过螯合剂的偶联作用完成的作用完成的,且标记成功。且标记成功。Survivin ASON 的锝标记的锝标记99mTc-MAG3-ASON 99mTc-DTPA-ASON 标记率标记率65.226.87%50.565.45%放化纯放化纯94%95%比活度比活度1190kBq/g 860kBq/g.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践在室温条件下在室温条件下,与生理盐水温

6、育与生理盐水温育4 h、24 h后后,99mTc-MAG3-ASON和和99mTc-DTPA-ASON的的放化纯分别为放化纯分别为92和和91、86和和84。99mTc-Survivin ASON 的稳定性的稳定性生理盐水生理盐水.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践99mTc-Survivin ASON 的稳定性的稳定性在在37条件下条件下,与新鲜人血清温育至与新鲜人血清温育至4h时时,两种两种标记物的放射峰均未出现漂移标记物的放射峰均未出现漂移;24h时时,两种标记两种标记物放射峰均出现

7、向前移动和变宽物放射峰均出现向前移动和变宽,且在峰的小分且在峰的小分子量一侧出现多个小峰子量一侧出现多个小峰,其中以其中以99mTc-DTPA-ASON较明显。较明显。新鲜血清新鲜血清.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践99mTc-Survivin ASON 的稳定性的稳定性99mTc-Survivin ASON 在生理盐水中比较稳定在生理盐水中比较稳定,与与血清保温血清保温4 h内其性质也基本稳定内其性质也基本稳定,但在但在4 h后会发后会发生血清蛋白结合反应和受核酸酶的破坏。生血清蛋白

8、结合反应和受核酸酶的破坏。血清蛋白血清蛋白结合反应结合反应新鲜血清新鲜血清核酸酶核酸酶破坏破坏.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践99mTc-Survivin ASON 的细胞动力学的细胞动力学024681012140124810Time(h)Cell Uptake Rate(%)MAG3-ASON in HCCMAG3-ASON in L02DTPA-ASON in HCCDTPA-ASON in L02.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见

9、症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践99mTc-Survivin ASON 的生物学分布的生物学分布At 4h and 12h postinjection in nude mice bearing tumor00.511.522.533.54Small intestineHeartLungBloodSpleenKidneyLiverTumorTumor/Muscle%ID/g4h postinjection12h postinjection.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品

10、管圈实践99mTc-Survivin ASON 的生物学分布的生物学分布 At 4h postinjection in nude mice bearing tumor00.511.522.533.54SmallintestineHeartLungBloodSpleenKidneyLiverTumorTumor/Muscle%ID/gSurvivin ASONSurvivin SON.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践接种后接种后5周周荷人肝癌荷人肝癌SMMC-7721裸鼠模型裸鼠模型.胆道

11、疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践静脉注射静脉注射99mTc标记的标记的Survivin 反义寡核苷酸反义寡核苷酸探针后探针后15 min,在荷人肝癌裸鼠中即可见肿瘤在荷人肝癌裸鼠中即可见肿瘤病灶部位有显像剂聚集病灶部位有显像剂聚集,于于4 h达到高峰达到高峰;随着时随着时间延长间延长,病灶周围本底逐渐减低病灶周围本底逐渐减低,肿瘤灶显影也肿瘤灶显影也更加清晰。更加清晰。荷人肝癌裸鼠肿瘤基因显像荷人肝癌裸鼠肿瘤基因显像.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾

12、胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践荷人肝癌裸鼠肿瘤基因显像荷人肝癌裸鼠肿瘤基因显像99mTc-Survivin ASON肿瘤显像肿瘤显像,注射后注射后4h见左大见左大腿根部肿瘤病灶腿根部肿瘤病灶处有明显异常显处有明显异常显像剂浓聚像剂浓聚,箭头箭头所示。右侧白色所示。右侧白色圆形浓聚灶为膀圆形浓聚灶为膀胱影。胱影。.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践荷人肝癌裸鼠肿瘤基因显像荷人肝癌裸鼠肿瘤基因显像99mTc-Survivin SON肿瘤显像肿瘤显像,注射后注

13、射后4h见左大见左大腿根部肿瘤病灶腿根部肿瘤病灶处仅有轻度显像处仅有轻度显像剂浓聚剂浓聚,分布不分布不均均,箭头所示。箭头所示。腹部右侧红色浓腹部右侧红色浓聚灶为膀胱影。聚灶为膀胱影。.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践事先注射未标记的事先注射未标记的Survivin ASON以封闭结合以封闭结合位点位点,60min后再注射后再注射99mTc-Survivin ASON探针探针,在注射标记寡核苷酸后在注射标记寡核苷酸后4h肿瘤灶肿瘤灶/对侧肌肉摄对侧肌肉摄取比为取比为0.930.23,较位

14、点封闭前降低了较位点封闭前降低了62.5。表明表明99mTc-Survivin ASON探针在肿瘤部位的探针在肿瘤部位的聚集是特异性摄取。聚集是特异性摄取。荷人肝癌裸鼠肿瘤基因抑制显像荷人肝癌裸鼠肿瘤基因抑制显像.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践荷人肝癌裸鼠肿瘤基因抑制显像荷人肝癌裸鼠肿瘤基因抑制显像99mTc-Survivin ASON肿瘤抑制肿瘤抑制显像显像,注射后注射后4h见见左大腿根部肿瘤左大腿根部肿瘤病灶处显像剂浓病灶处显像剂浓聚程度明显降低聚程度明显降低,显像剂分布稀疏显像剂

15、分布稀疏不均不均,箭头所示。箭头所示。.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践讨讨 论论.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践螯合剂的应用螯合剂的应用 Survivin 的的99mTc标记需要用螯合剂标记需要用螯合剂 Survivin 的的99mTc标记方法是可行的标记方法是可行的 S-acetyl-NHS-MAG3的偶联效果优于环的偶联效果优于环DTPA酸酐酸酐 环环DTPA酸酐可作为候选

16、的螯合剂酸酐可作为候选的螯合剂.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践99mTc-Survivin ASON的特性的特性 在在SMMC-7721肝癌细胞中有较高的摄取肝癌细胞中有较高的摄取 在在L-02正常肝细胞中仅轻微摄取正常肝细胞中仅轻微摄取 选择性的肝癌细胞摄取选择性的肝癌细胞摄取 在体外性质稳定在体外性质稳定.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践99mTc-Survivin ASON

17、的特性的特性 99mTc-Survivin SON在肿瘤组织中的摄取在肿瘤组织中的摄取明显低于明显低于ASON 冷冷Survivin ASON可抑制可抑制99mTc-Survivin ASON在肿瘤组织中的摄取在肿瘤组织中的摄取 被被肝癌组织选择性地摄取肝癌组织选择性地摄取,存在反义机制存在反义机制 在肿瘤组织中有较高摄取在肿瘤组织中有较高摄取,4h后趋于平衡后趋于平衡.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践结结 论论本标记方法可行合理本标记方法可行合理,99mTc-Survivin ASON可被肝癌细胞选择性摄取可被肝癌细胞选择性摄取,在荷肝在荷肝癌肿瘤模型中获得了特异性阳性显像。癌肿瘤模型中获得了特异性阳性显像。经过进一步对标记物载体等实验条件的经过进一步对标记物载体等实验条件的改进改进,可望用于肝癌等多种实体肿瘤的反可望用于肝癌等多种实体肿瘤的反义基因显像诊断。义基因显像诊断。.胆道疾病病人护理化工企业本质安全理论实践及方法内科护理学呼吸系统总论概论脾胃病常见症状及治疗经验偏瘫截瘫康复训练手册偏执性精神障碍品管圈实践.