浅谈肿瘤标志物培训课件.ppt

1、肿瘤标志物（肿瘤标志物（tumor markers，TM)肿瘤标志物是指在肿瘤发生和增殖的过程中，由肿瘤细胞合成、释放或者是机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质，这些物质在血液、体液及组织中可检测到，达到一定的水平时能提示某些肿瘤的存在。肿瘤标志物高与查到癌细胞是两回事，也不一定肿瘤标志物高与查到癌细胞是两回事，也不一定是代表患有肿瘤！是代表患有肿瘤！浅谈肿瘤标志物11/5/20221血清肿瘤标志物分类血清肿瘤标志物分类 浅谈肿瘤标志物11/5/20222一、为什么要查肿瘤标记物？一、为什么要查肿瘤标记物？我们知道，早期诊断是治愈肿瘤的关键；而有些肿瘤标记物的升高往往早于临床症状的出现，因此肿瘤

2、标记物有助于早期发现肿瘤迹象，早诊断、早治疗，从而提高疗效。比如，我们国家70年代以后在上海等地，通过对大量人群的甲胎蛋白普查，曾检出不少肝癌特别是小肝癌患者，使很多病人得到了及时手术切除的机会。二、肿瘤标记物还能用于以下方面二、肿瘤标记物还能用于以下方面 出现肿瘤症状或可疑肿物后的鉴别诊断 肿瘤生物特点和疾病阶段的判断 肿瘤治疗后的疗效观察和判断预后 提示肿瘤的复发、转移浅谈肿瘤标志物11/5/20223肿瘤指标升高是不是肯定就有肿瘤了？肿瘤指标升高是不是肯定就有肿瘤了？答案是不一定。肿瘤标志物不仅存在于恶性肿瘤中，也存在于良性肿瘤、胚胎组织、甚至正常组织中；肿瘤的诊断不能单独依靠肿瘤标志物

3、的检查，需要由临床检查、影像检查、内镜检查或手术探查等综合判断，而病理诊断是肿瘤诊断的“金标准”浅谈肿瘤标志物11/5/20224肿瘤标记物筛查结果判读肿瘤标记物筛查结果判读 肿瘤标记物检查肿瘤标记物检查阴性阴性：患相关恶性肿瘤的概率相对较低；如有家族史、癌前病变或有症状，仍需定期复查,结合其他检查；肿瘤标记物检查肿瘤标记物检查阳性阳性：检测可能有假阳性或患良性疾病；优先考虑复检,复检仍阳性者进一步检查；指标轻度升高，不要轻下结论，持续观察肿瘤标志物的动态变化，如进行性升高，患恶性肿瘤的概率比较高；中重度升高或多项指标持续升高，提示肿瘤发生的可能性很高，必须尽快做医学影像学和细胞病理学等检查；

4、不同医院检验科仪器、试剂各不相同，参考值不一定一样，因此，不能随意比较不同医院测量值的高低。浅谈肿瘤标志物11/5/20225除了恶性肿瘤，引起肿瘤标记物升除了恶性肿瘤，引起肿瘤标记物升高的其他因素包括：高的其他因素包括：良性疾病良性疾病，如炎症性疾病：肝脏良性疾病时，AFP、CA19-9、CEA会升高；肾功能衰竭时2-微球蛋白及CA15-3、CA19-9、CEA和PSA会升高；风湿病时CA19-9浓度可增高；生理变化生理变化：妊娠时AFP、CA125、HCG会升高；不良习惯不良习惯：吸烟、酗酒；检查引起检查引起：屡次进行直肠指检后，PSA值可升高；服用某些药物服用某些药物；饲养宠物饲养宠物；

5、此外，抽血过程中的污染、抽血引起的红细胞破裂、标本保存不当、试剂差异及检测欠规范等因素也会干扰检查结果。浅谈肿瘤标志物11/5/20226肿瘤标志物升高了，可不可以明确肿瘤标志物升高了，可不可以明确是哪个部位的肿瘤？是哪个部位的肿瘤？有时可以，但多数不能单凭借肿瘤标记物来明确，还需要有时可以，但多数不能单凭借肿瘤标记物来明确，还需要结合其他检查。结合其他检查。一种肿瘤标记物往往与多种恶性肿瘤有关，以下是一些常见的肿瘤标记物及其所提示可能有肿瘤发生的脏器：CA19-9 胰腺、胃肠道和肝胆 CA15-3 乳腺、肺、卵巢、肝 CA242 结直肠、胰腺、卵巢 CA72-4 胃、卵巢、胰腺、乳腺 CA1

6、25 卵巢、子宫、胰腺、肝、肺 CA50 胰腺、乳腺、肺、胃肠道和肝胆浅谈肿瘤标志物11/5/20227常见肿瘤的标志物检测常见肿瘤的标志物检测 浅谈肿瘤标志物11/5/20228ADVIA Centaur XP全自动化学发光分析系统检测原全自动化学发光分析系统检测原理理浅谈肿瘤标志物11/5/20229经典直接化学发光方法经典直接化学发光方法 吖啶酯(AE)为放光剂 采用微磁颗粒分离 两种结合模式：竞争法夹心法浅谈肿瘤标志物11/5/202210免疫测定免疫测定 抗体 抗原 示踪/发光剂：吖啶酯 分离方法：微磁颗粒分离 检测装置浅谈肿瘤标志物11/5/202211抗原抗体特意专一结合是检测的

7、抗原抗体特意专一结合是检测的基础基础抗原抗原抗体抗体结合位点结合位点浅谈肿瘤标志物11/5/202212发光剂是检测的技术核心发光剂是检测的技术核心AE抗原抗原抗体抗体结合位点结合位点浅谈肿瘤标志物11/5/202213吖啶酯简介吖啶酯简介提升扩散速率最大程度避免结合位点的遮蔽提高分析灵敏度碱性磷酸酶哎啶酯浅谈肿瘤标志物11/5/202214 一秒钟高强度的光释放使报告结果更快光释放光释放(RLUs)时间时间(妙妙)12吖啶酯简介吖啶酯简介浅谈肿瘤标志物11/5/202215哎啶酯直接化学发光法的优点哎啶酯直接化学发光法的优点 无需额外的信号放大或底物无需额外的信号放大或底物 光的释放快速光的

8、释放快速 对温度和对温度和pH值的影响不敏感值的影响不敏感 背景干扰最小背景干扰最小浅谈肿瘤标志物11/5/202216微磁颗粒微磁颗粒分离技术分离技术 氧化铁颗粒被吸引至磁场区 与抗原或抗体发生共价结合微磁颗粒(PMP)抗体浅谈肿瘤标志物11/5/202217 用于分离结合与未结合的反应物磁场未结合的AE微磁颗粒分离技术微磁颗粒分离技术浅谈肿瘤标志物11/5/202218检测原理的反应模式检测原理的反应模式 夹心法 竞争法 抗体捕获模式浅谈肿瘤标志物11/5/202219夹心法夹心法 步骤步骤 1哎啶酯哎啶酯(AE)抗体抗体样品中的分析样品中的分析物特异性抗原物特异性抗原其它颗粒其它颗粒浅谈

9、肿瘤标志物11/5/202220PMP-抗体抗体-抗原抗原-抗体抗体AE复合物复合物加入与特异性抗体结合的微磁颗粒PMP，孵育，结合抗原的PMP再与AE-标记抗体结合夹心法夹心法 步骤步骤 2浅谈肿瘤标志物11/5/202221MagnetPMP-抗体抗体-抗原抗原-抗体抗体AE复合物复合物比色杯比色杯夹心法夹心法 步骤步骤 3浅谈肿瘤标志物11/5/202222样品浓度样品浓度光释放光释放(RLUs)加入酸碱试剂启动化学发光反应计算浓度夹心法夹心法 步骤步骤 4浅谈肿瘤标志物11/5/202223微磁颗粒微磁颗粒(PMP)抗体抗体样品抗原样品抗原AE-标记抗原标记抗原AE-标记抗原与样品抗原

10、竞争结合与PMP共价结合的有限的抗体结合位点浅谈肿瘤标志物11/5/202224 磁场磁场PMP-抗体抗体-抗原抗原复合物复合物PMP-抗体抗体-抗原抗原 AE复合物复合物孵育后将反应混合物置于磁场下，分离并除去未结合的AE浅谈肿瘤标志物11/5/202225样品浓度样品浓度光释放光释放(RLUs)加入酸碱启动化学发光反应计算浓度浅谈肿瘤标志物11/5/202226AE-标记抗体标记抗体PMP-标记抗原标记抗原样品中的分析样品中的分析物特异性抗原物特异性抗原结合抗原的PMP与样品抗原竞争AE-标记抗体上有限的抗原结合位点浅谈肿瘤标志物11/5/202227 磁场磁场PMP-抗原抗原-抗体抗体A

11、E复合物复合物孵育后将反应混合物置于磁场下，分离并除去未结合的AE浅谈肿瘤标志物11/5/202228样品浓度样品浓度光释放光释放(RLUs)加入酸碱试剂启动化学发光反应计算浓度浅谈肿瘤标志物11/5/202229竞争法竞争法夹心法夹心法样品浓度样品浓度样品浓度样品浓度光释放光释放(RLUs)光释放光释放(RLUs)浅谈肿瘤标志物11/5/202230抗体捕获模式抗体捕获模式 分析物是样品中含有的抗体 采用一种直接针对样品中抗体的特异性抗体浅谈肿瘤标志物11/5/202231抗体捕获模式抗体捕获模式 结合有抗人类IgM特异性抗体的微磁颗粒（PMP）被加入到样品中 人类IgM抗体与PMP上结合的

12、抗人类IgM抗体进行结合浅谈肿瘤标志物11/5/202232 样品中的抗体通过磁场作用与可能造成干扰的其它物质进行分离抗体捕获模式抗体捕获模式浅谈肿瘤标志物11/5/202233 加入对样品中抗体具有亲和力的AE-标记抗体抗体捕获模式抗体捕获模式浅谈肿瘤标志物11/5/202234 未结合的AE标记抗原从结合物中被分离出来抗体捕获模式抗体捕获模式浅谈肿瘤标志物11/5/202235 在这个抗体捕获模式的例子中，在这个抗体捕获模式的例子中，样品浓度和光释放强度之间有直样品浓度和光释放强度之间有直接的关系接的关系RLU浓度抗体捕获模式抗体捕获模式浅谈肿瘤标志物11/5/202236谢谢大家谢谢大家浅谈肿瘤标志物11/5/202237