《实验室生物安全》课件解析.ppt
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1、实验室生物安全的主要实验室生物安全的主要设备与仪器设备与仪器1实验室生物安全设备与仪器实验室生物安全设备与仪器 目的:目的:隔离操作者和感染性样本,防止操作人员被感隔离操作者和感染性样本,防止操作人员被感 染染 安全设备安全设备 -生物安全柜生物安全柜 个体防护装备个体防护装备-防护服;安全眼睛;手套鞋套;呼吸防护装置;紧急冲洗装置 等。2实验室生物安全设备与仪器实验室生物安全设备与仪器统计分析发现,已知原因的实验室感染只占全部感统计分析发现,已知原因的实验室感染只占全部感染的染的18,不明原因的实验室感染却高达,不明原因的实验室感染却高达82。不明原因的实验室感染,大多数是病原微生物形成不明
2、原因的实验室感染,大多数是病原微生物形成的感染性气溶胶在空气扩散,被工作人员吸入感染的感染性气溶胶在空气扩散,被工作人员吸入感染发病发病。34常用可防护生物危害的仪器装备常用可防护生物危害的仪器装备护目镜防护服5常用可防护生物危害的仪器装备常用可防护生物危害的仪器装备移液器移液器 生物安全柜生物安全柜高压灭菌锅高压灭菌锅灭菌器灭菌器6生物安全柜生物安全柜7什么是生物安全柜?什么是生物安全柜?什么是超净工作台?什么是超净工作台?名称名称结构结构气体气体压力压力气体排放气体排放保护对象保护对象生物安全柜生物安全柜 复杂复杂 负压负压 净化后排净化后排放放 操作者、样品、操作者、样品、环境环境 超净
3、工作台超净工作台 简单简单 正压正压 直接排放直接排放 样品样品操作者操作者环境环境操作操作样品样品8一、生物安全柜概述一、生物安全柜概述(一)概念:生物安全柜生物安全柜(biological safety cabinet,BSC)是操作有感染性的材料时,用来保护操作者本人、实验室环境及实验材料,使其避免暴露于操作过程中产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的负压排气柜负压排气柜。9生物安全柜基本工作原理生物安全柜基本工作原理l定向气流:定向气流:风幕风幕lHEPA滤器:滤器:一次性使用,一次性使用,框架内有多重褶迭框架内有多重褶迭的干性过滤材料的过滤器,对的干性过滤材料的过滤器,对0.3微米气溶胶
4、的过滤效微米气溶胶的过滤效能达到能达到99.97%。保证排出气体和内循环气体的无菌状态。保证排出气体和内循环气体的无菌状态。10生物安全柜的选择生物安全柜的选择生物安全柜生物安全柜保护类型保护类型保护对象保护对象 I 级 第二、三和四类病原微生物;挥发放射性核素/化学品 操作者,环境 级A1型 第二、三和四类病原微生物 操作者,环境和样品 外排风型级A2型 第二、三和四类病原微生物;痕量挥发放射性核素/化学品 操作者,环境和样品 级级B1型型 第二、三和四类病原微第二、三和四类病原微生物;少量挥发放射性生物;少量挥发放射性核素核素/化学品化学品 操作者,环境和样品操作者,环境和样品 级B2型
5、第二、三和四类病原微生物;挥发放射性核素/化学品 操作者,环境和样品 III级 第一、二、三和四类病原微生物;挥发放射性核素/化学品 操作者,环境和样品 11II级级A2型生物安全柜型生物安全柜室内空气污染的空气HEPA 滤过的空气正压污染空气12Secondary Barriers 第二道隔离 If primary barriers fail第一道隔离失败nclothing and other items of personal protective equipment become an important line of defense n工作服及其它个人防护用品成为重要的防线13生物安
6、全柜的使用生物安全柜的使用 个人防护要求:个人防护要求:使用生物安全柜时必须穿个人防护服,戴手套(手套应套在隔离衣的外面)最好带口罩和帽子,根据需要带防护眼罩或者面罩。工作之前,操作者应调节凳子高度确保自己的脸在开口之上。14生物安全柜的使用生物安全柜的使用生物安全柜内物品摆放原则:生物安全柜内物品摆放原则:按照从洁净区到污染区的方向摆放所有物品尽可能放在远离前格栅,靠近操作台后缘的位置。将废弃物袋、盛放废弃吸管的托盘以及吸滤瓶等体积较大的物品放在柜内某一侧。前格栅不能被实验记录本、仪器设备或者其他物品阻挡。15生物安全柜的使用生物安全柜的使用生物安全柜的操作流程生物安全柜的操作流程:开启生物
7、安全柜外排风机电源开关开启生物安全柜外排风机电源开关缓慢打开操作窗口,窗口开启距离缓慢打开操作窗口,窗口开启距离200mm或设定值,一般生物安全柜有窗口极限报警或设定值,一般生物安全柜有窗口极限报警10分钟后即可以开始实验操作分钟后即可以开始实验操作操作完毕后注意对生物安全柜进行消毒清洗工作操作完毕后注意对生物安全柜进行消毒清洗工作16生物安全柜的使用使用注意事项n双臂垂直缓慢进入前面的开口,在生物安全柜中等待大约一分钟,以使安全柜调整完毕后才可对物品进行处理。n所有操作应在离前窗10cm以外的工作区进行。n废弃物应丢弃在生物安全柜内的处理容器中,避免胳膊在前开口处快速移动和频繁进出。n尽量避
8、免污染的物品进入洁净区。n在生物安全柜内进行操作时,不能进行文字工作。n尽量减少操作者身后的人员活动。n房间中有人时一定要关闭紫外灯,以保护眼睛和皮肤,避免因不慎暴露而造成伤害。每周清洁紫外灯,除去可能影响杀菌效果的灰尘和污垢。17生物安全柜的使用注意事项生物安全柜的使用注意事项18生物安全柜的使用注意事项生物安全柜的使用注意事项19超净工作台超净工作台 超净工作台超净工作台是为保护试验样品而设计,为保护试验样品而设计,通过吹过工作区域的层流空气防止试验样品受粉尘或细菌的污染注意:超净工作台中不能操作感染性的材料,超净工作台中不能操作感染性的材料,因其气体是正压直接排放。一旦感染性样品放置于工
9、作区域,层流空气将把带有微生物介质的空气吹向前台正在操作的工作人员而产生危险。20生物安全柜与超净工作台的区别生物安全柜与超净工作台的区别名称名称结构结构气体气体压力压力气体排放气体排放保护对象保护对象生物安全柜生物安全柜 复杂复杂 负压负压 净化后排净化后排放放 操作者、样品、操作者、样品、环境环境 超净工作台超净工作台 简单简单 正压正压 直接排放直接排放 样品样品21灭灭 菌菌 器器 概念:概念:泛指能达到灭菌要求的一切设备,即能在一定时间内杀灭一切活的微生物(包括细菌芽胞)的设备,灭菌的保证水平为10 6(即一件物品经灭菌处理后仍然有微生物存活的概率为106)。n灭菌器的种类:灭菌器的
10、种类:1.高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器最常用最常用 2.干热灭菌器 3.环氧乙烷灭菌器和过氧化氢等 离子体灭菌器。22可防护安全危害的仪器设备可防护安全危害的仪器设备n移液辅助器 n加热器、接种环n防护服、防目镜23病原微生物实验室病原微生物实验室 生物安全管理生物安全管理24 原核生物型微生物:原核生物型微生物:包括两个菌(细菌、放线菌),四个体(衣原体、支原体、立克次体、螺旋体).病原微生物实验室生物安全管理病原微生物实验室生物安全管理-病原微生物的病原微生物的种类及特点种类及特点25原核生物型微生物的特点:原核生物型微生物的特点:1.大部分细菌可在人工培养基上生长繁殖。2.构成细菌毒力的
11、物质基础主要包括细菌的侵袭力(invasiveness)毒素(toxin).细菌致病性的强弱与细菌的毒力、侵入机体的数量、入侵途径及机体的免疫状态密切相关。3.细菌感染可采用抗生素来治疗。26n真核生物型微生物:真核生物型微生物:真菌(单细胞真菌和多细胞真菌)真菌(单细胞真菌和多细胞真菌)n特点:特点:1.真菌的致病:浅表真菌感染浅表真菌感染-如:皮肤癣菌。真菌机会性真菌机会性感染感染-如:白色念珠菌,新型隐球菌。真菌毒素的致病作用真菌毒素的致病作用-真菌中毒和引起肿瘤(黄曲霉毒素)。真菌性超敏反应真菌性超敏反应。n 2.治疗:对细菌抗生素不敏感,必须采用抗真菌药物治疗。27n非细胞型微生物:
12、非细胞型微生物:病毒病毒病毒结构:病毒结构:核酸(DNA/RNA),蛋白衣壳,包膜(某些病毒有);病毒特点:病毒特点:1.在易感的活细胞中寄生。病毒的致病作用主要通过侵入易感细胞、损伤细胞或改变细胞功能而引发。2.病毒感染用抗生素治疗无效,目前理想的抗病毒药物不多。28n非细胞型微生物:非细胞型微生物:朊粒朊粒(prion):朊粒的特点:朊粒的特点:1.一种特殊的致病因子,只含蛋白质,不含核酸。2.朊粒:是一种由正常宿主细胞基因编码的、构象异常的朊蛋白,是人和动物的传染性海绵状脑病(TSEs)的病原体。TSE 可通过多种途径传播(消化道、血液、神经及医源性)。3.抵抗力很强,一般高压灭菌条件不
13、能破坏。对患者的血液、体液,手术器械等必须用 1mol/L NaOH 处理 1小时,再高压灭菌 134 C,2小时。29第一类病原微生物第一类病原微生物 是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物,以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物;如:天花病毒、新疆出血热病毒、埃博拉病毒、猴痘病毒等29种病原体。第二类病原微生物第二类病原微生物 是指能够引起人类或者动物严重疾病,比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物;如:汉坦病毒、告致病性禽流感病毒、爱滋病毒、乙型脑炎病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病毒、SARS冠状病毒、西尼罗病毒、炭疽杆菌、布氏杆菌、结核分枝杆菌、霍乱弧菌、
14、鼠疫杆菌等 70 种。第三类病原微生物第三类病原微生物 是指能够引起人类或者动物疾病,但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害,传播风险有限,实验室感染后很少引起严重疾病,并且具备有效治疗和预防措施的微生物;如:肠道病毒、轮状病毒、肝炎病毒、风疹病毒、流感病毒、疱疹病毒、沙眼衣原体、破伤风梭菌 致病性大肠杆菌、脑膜炎球菌、伤寒沙门菌、志贺菌、葡萄球菌、白假丝酵母菌 等 275 种第四类病原微生物第四类病原微生物 是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。如:小鼠白血病病毒3031病原微生物实验室生物安全管理病原微生物实验室生物安全管理-病原微生物样本的病原微生物样本的采集采集 病原
15、微生物菌(毒)种、样本及已知或疑含病原体的物质病原微生物菌(毒)种、样本及已知或疑含病原体的物质 均称为均称为感染性物质感染性物质。基本要求:基本要求:1.采集设备与器材:采集设备与器材:必须有相应的生物安全防护设备与器材。如个人防护用品(隔离衣、帽、必须有相应的生物安全防护设备与器材。如个人防护用品(隔离衣、帽、口罩、鞋套、手套、防护眼镜等)、防口罩、鞋套、手套、防护眼镜等)、防 护器材、生物安全防护设施和实验护器材、生物安全防护设施和实验条件等。条件等。2.采集人员与操作规范:采集人员与操作规范:必须由掌握相关专业知识和操作技能的工作人员进行采集必须由掌握相关专业知识和操作技能的工作人员进
16、行采集 遵循生物安全操作规范遵循生物安全操作规范 具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段 具有详细的样本采集记录具有详细的样本采集记录 具有应急措施与预案具有应急措施与预案3.样本的分类、包装与运输:样本的分类、包装与运输:必须按规定要求对感染性物质行分类、包装与运输。疑似高致病性病原微必须按规定要求对感染性物质行分类、包装与运输。疑似高致病性病原微生物样本,应该采取特殊明确的标示生物样本,应该采取特殊明确的标示.32病原微生物实验室生物安全管理病原微生物实验室生物安全管理-病原微生物菌(毒)病原微生物菌(毒)种的保藏与管理种的保藏与管理 菌(毒)
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