真菌感染的治疗课件.ppt
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- 真菌 感染 治疗 课件
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1、真菌感染现状与对策真菌感染发生率急剧上升原因v低免疫人群上升v检测技术的提高和发展内内 容容v真菌感染现状真菌感染现状v临床感染现状临床感染现状v真菌耐药现状真菌耐药现状v实验室对策实验室对策1真菌耐药监测提供经验用药依据2传统检测和非培养方法结合争取最佳治疗时间3鉴定菌株到种4告诉医生如何应用真菌药敏结果vSFI诊断和治疗策赂诊断和治疗策赂当前真菌感染的特点v曲霉菌感染上升v非白念感染上升v白色念珠菌感染为主(50-60%)v某些真菌生前不易出现阳性 据WHO统计,能引起人类疾病的真菌约有 270 余种,尤其是深部真菌,可侵袭心、肺、血液、胃肠等人体各个器官和系统。真菌感染已成为临床感染学中
2、不可忽略的一部分。念珠菌属已成为重症监护病房(ICU)病人中最常见的致病菌中的第四位。1995年,欧洲重症监护感染流行学会(EPIC)调查报告分析了1992年在14个欧洲国家1417个ICU病房在一天之内44.8接受抗感染治疗的病人中有17.1的患者的感染是与真菌有关。美国医院内感染监测系统的统计资料美国医院内感染监测系统的统计资料1992-1993年与1980-1982年相比念珠菌的发病率由百万分之2.6增至72.8、隐球菌病由4.0增至65.5、曲霉菌8.4增至12.4,占所有病原感染患者上升率的首位。v美国 1997年真菌感染由1980年的第10位上升到第7位,死亡率上升3.9倍v侵袭性
3、真菌感染死亡率达76%美国美国49家医院血液分离病原菌及死亡率家医院血液分离病原菌及死亡率次序次序病原菌病原菌菌株菌株数数%死亡率死亡率(%)1凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌3,908 31.9212金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌1,928 15.7 253肠球菌肠球菌1,354 11.1 324念珠菌念珠菌934 7.6 405大肠艾希菌大肠艾希菌7005.7 246克雷伯菌克雷伯菌6625.4277肠杆菌属肠杆菌属5574.5288假单胞菌属假单胞菌属5424.4339沙雷菌属沙雷菌属1771.42610草绿色链球菌草绿色链球菌1731.423Edmond et al.Clin.Inf
4、ect.Dis.(1999).29:239-244近年来我国院内SFI发病率也日趋增高中华医学杂志2003年3月第83卷第5期真菌感染总例数149人,其中134例为系统性真菌感染,最后5年75例均为系统性真菌感染不同基础疾患下侵袭性曲霉病的发病率基础疾患基础疾患 发病率范围发病率范围(%)肺肺 心脏移植心脏移植 19-26肝移植肝移植1.5-10肾移植肾移植0.5-10异基因造血干细胞移植异基因造血干细胞移植4-9自体造血干细胞移植自体造血干细胞移植0.5-6Denning Clin Infect Dis 2001 26 pp781-805真菌血症菌类分布深部真菌感染的死亡率深部真菌感染的死亡
5、率v隐球菌病:v不能及时诊断和治疗 86%一年内死亡 92%在二年内死亡v器官移植死亡原因 90%由于曲霉菌感染 不能及时确诊。念珠菌病死率达40%、侵袭性曲霉菌病可高达50-100%。301医院尸检报告v1977-1997肺真菌感染3.7%(38/1027),局限性感染7.8%,播散性92.2%,曲菌34.2%,白念26.3%,新型隐球菌13.2%,孢子丝菌和毛霉菌各3.8%,复合真菌感染21%。真菌感染死亡率高的原因v尸体解剖发现 50%播散性真菌感染血培养阴性v 缺乏敏感的检测指标v患者无特异的临床症状v真菌培养报告太慢v患者由此失去最佳的治疗时间北京医院北京医院992株念珠菌对株念珠菌
6、对4种抗真菌药的敏感性种抗真菌药的敏感性%(ATB-Fungus-2)内内 容容v真菌感染现状真菌感染现状v临床感染现状v真菌耐药现状v实验室对策实验室对策1.真菌耐药监测提供经验用药依据真菌耐药监测提供经验用药依据2.传统检测方法传统检测方法3非培养方法争取最佳治疗时间非培养方法争取最佳治疗时间SFI诊断和治疗策赂诊断和治疗策赂对 策v耐药监测提供经验用药依据耐药监测提供经验用药依据v传统检测传统检测v非培养方法快速报告,抓住最佳的治疗时机v尽最大努力鉴定到种v药敏结果存在局限性v正确解读实验室报告 全球多中心真菌体外敏感性监测全球多中心真菌体外敏感性监测以美国衣阿华(IOWA)大学为中心3
7、8个国家和地区99个研究室参加了“全球抗真菌耐药监测”研究 (1997-2005年)纸片扩散法:只有氟康唑和伏立康唑国家和地区v欧美国家:美国(10)、英国(9)、德国(4)、意大利(8)、俄罗斯(9)等v亚洲国家中国(5)、新加坡(1)、日本(1)、韩国(2)、马来西亚(1)等v非洲国家南非(7)、厄瓜多尔(2)等v中东国家沙特阿拉伯(1)、以色列(1)等国外ARTEMISv2000年以前33个国家62个研究中心v2001年35个国家89个研究中心v2002年36个国家111个研究中心v2003年39个国家128个研究中心国内ARTEMIS参加单位v1998-2002年北京协和医院检验科上海
8、中山医院临床微生物中心v2003年上海华山医院抗生素研究所广州呼吸病研究所检验科浙江大学第一附属医院感染科酵母菌种类变化酵母菌种类变化九十年代最引人注目的是酵母菌种类发生了明显的九十年代最引人注目的是酵母菌种类发生了明显的变化,白念珠菌比例减少,上升的:变化,白念珠菌比例减少,上升的:菌名菌名 85-92年年()96-2002年年(%)白念珠菌白念珠菌80-9043-75热带念珠菌热带念珠菌10-1310-15近平滑念珠菌近平滑念珠菌 1-614-21光滑念珠菌光滑念珠菌 3-412-24克柔念珠菌克柔念珠菌 1 5-27葡萄芽念珠菌葡萄芽念珠菌 12-5新型隐球菌新型隐球菌 11-5前10位
9、的酵母菌对氟康唑的敏感性 菌名菌名 株数株数SSDDR%白念珠菌白念珠菌 3883398.40.70.8近平滑念珠菌近平滑念珠菌 262893.84.41.8 热带念珠菌热带念珠菌 299092.54.92.6葡萄芽念珠菌葡萄芽念珠菌 27493.43.33.3新型隐球菌新型隐球菌68889.14.86.1念珠菌属念珠菌属258381.210.78.1季也蒙念珠菌季也蒙念珠菌36578.612.98.5其它念珠菌其它念珠菌115875.311.313.4光滑念珠菌光滑念珠菌561165.520.114.4克柔念珠菌克柔念珠菌1206 17.731.150.71997-2005主要酵母样真菌分离
10、率(ARTEMIS)主要念珠菌对氟康唑的耐药率主要念珠菌对氟康唑的耐药率%1997-2005光滑和克柔对氟康唑的耐药性%邹折假丝酵母在全球的分离率邹折假丝酵母在全球的分离率%邹折假丝酵母对氟康唑和伏立康唑的耐药率邹折假丝酵母对氟康唑和伏立康唑的耐药率%季也蒙假丝酵母在全球的分离率季也蒙假丝酵母在全球的分离率%不同病区季也蒙假丝酵母对氟康唑和伏立不同病区季也蒙假丝酵母对氟康唑和伏立康唑的敏感率康唑的敏感率%中国5家医院1998年-2003年临床分离菌种分布比较百分比()真菌2003年中国5家医院酵母菌属真菌对氟康唑的敏感率()百分比()真菌中国5家医院伏立康唑对1009株酵母菌属真菌的抗菌活性(
11、mg/L)目前常用的酵母目前常用的酵母鉴定程序鉴定程序 酵母种的鉴定以生理,生化特征为主,真菌的形态为辅。传统的方法是碳源的发酵和同化。目前已普遍采用API20c Aux 试剂盒及VITEK(自动微生物分析仪),可鉴定40余种酵母。标本接种于含氯霉素的标本接种于含氯霉素的沙氏葡萄糖琼脂及显沙氏葡萄糖琼脂及显色培养基,分别置色培养基,分别置2525 C及及3737 C培养培养48小时,小时,常见的酵母在常见的酵母在显色培养基即可报告,鉴定的显色培养基即可报告,鉴定的符合符合率在率在9595左右。左右。深部标本(痰、粪、尿、脓、体液、咽拭、深部标本(痰、粪、尿、脓、体液、咽拭、尿道及阴道分泌物)尿
12、道及阴道分泌物)念珠菌显色培养基念珠菌显色培养基 原理:几种常见念珠菌独特的酶底物与显原理:几种常见念珠菌独特的酶底物与显色基团化学结合色基团化学结合 既可用于检测,又可根据菌落颜色用于鉴既可用于检测,又可根据菌落颜色用于鉴定定95%以上的以上的白念珠菌(白念珠菌(绿、翠绿或兰绿、翠绿或兰色)、色)、热带念珠菌热带念珠菌(蓝或粉红色)、(蓝或粉红色)、克柔克柔念珠菌念珠菌(粉红,模糊有微毛或白色),(粉红,模糊有微毛或白色),85%的光滑念珠菌(紫或白),其它念珠的光滑念珠菌(紫或白),其它念珠菌呈白色。菌呈白色。3037培养培养48h后观察结果。后观察结果。如为如为霉菌霉菌,应种于察氏琼脂,
13、应种于察氏琼脂,其对青霉、曲霉及镰刀霉都具其对青霉、曲霉及镰刀霉都具鉴定作用。鉴定作用。CSFCSF应种于沙氏葡萄应种于沙氏葡萄糖琼脂,分别置糖琼脂,分别置2525 C及及3737 C培培养养1周,周,血液血液种于脑心浸出肉种于脑心浸出肉汤,汤,3737 C培养培养1周。周。快速鉴定白色假丝酵母菌v玉米培养基:厚膜孢子v血清芽管试验:出芽现象曲霉曲霉v烟曲霉、黄曲霉烟曲霉、黄曲霉最常见的病原菌最常见的病原菌v曲霉球黑曲霉、烟曲霉多见曲霉球黑曲霉、烟曲霉多见v肺曲霉病烟曲霉、土曲霉、黄曲霉、构巢肺曲霉病烟曲霉、土曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、亮白曲霉曲霉、亮白曲霉v播散性曲霉病烟曲霉、构巢曲霉、黄曲霉
14、、播散性曲霉病烟曲霉、构巢曲霉、黄曲霉、局限曲霉局限曲霉v耳真菌病黑曲霉耳真菌病黑曲霉v脑曲霉病土曲霉脑曲霉病土曲霉v鼻窦感染烟曲霉、黄曲霉鼻窦感染烟曲霉、黄曲霉曲霉分类曲霉分类vRaper(1995年)18个群:132个种及18个变种v新的变种在被不断发现v至少有20个种能感染人和动物,常见约8个种常见的致病曲霉种常见的致病曲霉种v烟曲霉(烟曲霉(A.fumigatus)v黄曲霉(黄曲霉(A.flavus)v构巢曲霉(构巢曲霉(A.nidulans)v黑曲霉(黑曲霉(A.niger)v土曲霉(土曲霉(A.terreus)v棒曲霉(棒曲霉(A.clavatus)v杂色曲霉(杂色曲霉(A.vew
15、sicolor)曲霉属的特征性结构曲霉属的特征性结构v分生孢子头:由分生孢子梗茎、顶囊、瓶梗、分生孢子头:由分生孢子梗茎、顶囊、瓶梗、梗基、分生孢子链梗基、分生孢子链v顶囊:分生孢子梗顶部的可孕性膨大。顶囊顶囊:分生孢子梗顶部的可孕性膨大。顶囊表面有瓶梗(产孢细胞),可有单层、双层表面有瓶梗(产孢细胞),可有单层、双层(瓶梗和梗基)或二者兼有(瓶梗和梗基)或二者兼有v足细胞:特化的厚壁膨大的菌丝细胞足细胞:特化的厚壁膨大的菌丝细胞v壳细胞:特化的厚壁的囊状细胞,形态各异壳细胞:特化的厚壁的囊状细胞,形态各异曲霉的真菌学检查曲霉的真菌学检查v鉴定依赖于形态学特征鉴定依赖于形态学特征v直接镜检:痰
16、、脓、痂皮、耵聍、甲屑、粪、直接镜检:痰、脓、痂皮、耵聍、甲屑、粪、尿尿v方法:取标本少量于仔玻片上,加一滴方法:取标本少量于仔玻片上,加一滴10KOH,覆上盖玻片,覆上盖玻片v结果:可见分隔菌丝、分生孢子。有时可见结果:可见分隔菌丝、分生孢子。有时可见分生孢子头、顶囊、小梗、闭囊壳及子囊孢分生孢子头、顶囊、小梗、闭囊壳及子囊孢子(有性期)子(有性期)菌丝形态鉴别菌丝形态鉴别v念珠菌:菌丝较细,有孢子及假菌念珠菌:菌丝较细,有孢子及假菌丝丝v毛霉菌:菌丝粗,约为曲霉菌丝的毛霉菌:菌丝粗,约为曲霉菌丝的23倍,多不分隔倍,多不分隔血清学检测抗原1-3-D-葡聚糖测定原理v1-3-D-葡聚糖是真菌
17、细胞壁的共有成分,通过检测1-3-D-葡聚糖的含量可用于评估患者是否真菌感染或感染的程度1-3-D-葡聚糖测定的临床价值葡聚糖测定的临床价值v提示有无真菌感染v不能提示哪一种真菌感染v含量与疗效与相关性v特异性和敏感性不受抗生素影响1-3-D-葡聚糖测定的正常值葡聚糖测定的正常值v10pg/ml 以下 无真菌感染v10-20pg/ml 病情观察期v大于20pg/ml 真菌感染(一)念珠菌抗原甘露聚糖(一)念珠菌抗原甘露聚糖193 patients(392 samples);43 with ICSensitivity SpecificityMannan(ag)40%98%Antimannan(a
18、b)53%94%ag and/or ab80%93%Sendid B et al,J Clin Microbiol 1999;37:1510-7(二)抗原:半乳甘露聚糖(二)抗原:半乳甘露聚糖Serial Aspergillus Galactomannan Screeningn=362 high-risk neutropenic patientsSandwich ELISA 2 times weekly,11.7%positiven=30 proven IAn=9 probable IAn=264 with no IASensitivity89.7%Specificity98.1%PPV87.
19、5%NPV98.4%Maertens J et al,Blood 2001;97:1604-10抗原检测抗原检测v由于曲霉感染机体至机体应答产生抗体二周后才有显著升高。由于曲霉感染机体至机体应答产生抗体二周后才有显著升高。抗体检测对侵袭性曲霉感染的早期诊断帮助不大。抗体检测对侵袭性曲霉感染的早期诊断帮助不大。v抗原检测在曲霉感染的免疫学诊断中倍受青睐。抗原检测的抗原检测在曲霉感染的免疫学诊断中倍受青睐。抗原检测的标本可取血清、尿液、脑脊液及标本可取血清、尿液、脑脊液及BAL 液等。液等。v被检测的抗原成分主要是半乳甘露聚糖被检测的抗原成分主要是半乳甘露聚糖(galactomannan,GM)脂
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