高考生物一轮复习-实验31-DNA的粗提取与鉴定课件-新人教版选修1.ppt

1、实验原理实验原理1.DNA在不同浓度的在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，其中在物溶液中的溶解度不同，其中在物质的量浓度为质的量浓度为0.14 mol/L时最低。时最低。2.DNA不溶于酒精，但是细胞中的一些有机物如蛋白质则不溶于酒精，但是细胞中的一些有机物如蛋白质则溶于酒精，可以用酒精提纯。溶于酒精，可以用酒精提纯。3.DNA遇二苯胺遇二苯胺(沸水浴沸水浴)会被染成蓝色，可用来鉴定会被染成蓝色，可用来鉴定DNA分子。分子。实验流程实验流程1.做该实验时，不能用猪血代替鸡血，因为哺乳动物成熟做该实验时，不能用猪血代替鸡血，因为哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核，不能提取的红细胞中没有细胞核，

2、不能提取DNA。2.制备鸡血细胞液时，要注意向鸡血中加柠檬酸钠，防止制备鸡血细胞液时，要注意向鸡血中加柠檬酸钠，防止血液凝固。血液凝固。3.涨破细胞的方法：向血细胞中加入蒸馏水，血细胞溶液涨破细胞的方法：向血细胞中加入蒸馏水，血细胞溶液的浓度大于蒸馏水的浓度，从而使血细胞大量吸水而涨破。不的浓度大于蒸馏水的浓度，从而使血细胞大量吸水而涨破。不能用生理盐水，因为血细胞溶液的浓度与生理盐水的浓度相当，能用生理盐水，因为血细胞溶液的浓度与生理盐水的浓度相当，所以血细胞在生理盐水中不能吸收水分。所以血细胞在生理盐水中不能吸收水分。4.两次加入蒸馏水，第一次是为了使血细胞吸水涨破；第两次加入蒸馏水，第一

3、次是为了使血细胞吸水涨破；第二次是为了降低氯化钠的浓度，有利于二次是为了降低氯化钠的浓度，有利于DNA的析出。的析出。5.两次析出两次析出DNA的方法：第一次是加入蒸馏水，降低氯化的方法：第一次是加入蒸馏水，降低氯化钠的浓度，促使钠的浓度，促使DNA析出；第二次是加入冷酒精，因为析出；第二次是加入冷酒精，因为DNA不不溶于酒精溶液。溶于酒精溶液。6.鉴定鉴定DNA时要用两支试管，其中不加时要用两支试管，其中不加DNA的试管起对照的试管起对照作用，该试管溶液不变色，另一支加有作用，该试管溶液不变色，另一支加有DNA的试管溶液变蓝色。的试管溶液变蓝色。选材时注意选用细胞易破碎、选材时注意选用细胞易

4、破碎、DNA含量相对较高含量相对较高的生物组织；鉴定的生物组织；鉴定DNA的二苯胺试剂要现配现用，否则会影响的二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定效果。鉴定效果。2010江苏卷江苏卷某生物兴趣小组开展某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究粗提取的相关探究活动，具体步骤如下：活动，具体步骤如下：材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份份，每份10 g。剪碎后分成两组，一组置于剪碎后分成两组，一组置于20、另一组置于、另一组置于20条件下保条件下保存存24 h。DNA粗提取：粗提取：第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入第一步：将上述材料分别放入研

5、钵中，各加入15 mL研磨研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。第二步：先向第二步：先向6只小烧杯中分别注入只小烧杯中分别注入10 mL滤液，再加入滤液，再加入20 mL体积分数为体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步：取第三步：取6支试管，分别加入等量的支试管，分别加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶溶液溶解上述絮状物。解上述絮状物。DNA检测：在上述试管中各加入检测：在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂，混合均

6、二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热匀后，置于沸水中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表。浅，结果如下表。材料保存温度材料保存温度花菜花菜辣椒辣椒蒜黄蒜黄2020(注：注：“”越多表示蓝色越深越多表示蓝色越深)分析上述实验过程，回答下列问题：分析上述实验过程，回答下列问题：(1)该探究性实验的课题名称是该探究性实验的课题名称是_。(2)第二步中第二步中“缓缓地缓缓地”搅拌，这是为了减少搅拌，这是为了减少_。(3)根据实验结果，得出结论并分析。根据实验结果，得出结论并分析。结论结论1：与：与20相比，相同实验材料在相比，相同实验材料在20条件

7、下保存，条件下保存，DNA的提取量较多。的提取量较多。结论结论2：_。针对结论针对结论1，请提出合理的解释：，请提出合理的解释：_。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均均不相溶，且对不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据纯度，依据氯仿的特性，在氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：_。然后用体积分数为然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使的冷酒精溶液使DNA析出。析出。思路点拨：思路点拨：本题主要考查本题主要考查DNA粗提取的相关知识

8、，意在考粗提取的相关知识，意在考查考生的实验与探究能力。如果查考生的实验与探究能力。如果DNA断裂，就不容易被提取出断裂，就不容易被提取出来；温度主要是通过影响酶的活性来影响生理过程。粗提取得来；温度主要是通过影响酶的活性来影响生理过程。粗提取得到的到的DNA中含有少量的蛋白质，可以通过氯仿的特殊功能来去中含有少量的蛋白质，可以通过氯仿的特殊功能来去除蛋白质，提高除蛋白质，提高DNA纯度。纯度。答案：答案：(1)探究不同材料和不同保存温度对探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影提取量的影响响(2)DNA断裂断裂(3)等质量的不同实验材料，在相同的保存等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的温度下，从蒜黄提取的DNA量最多低温抑制了相关酶的活量最多低温抑制了相关酶的活性，性，DNA降解速度慢降解速度慢(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液分混合，静置一段时间，吸取上清液