实验诊断学血栓与止血检测实用版课件.ppt
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1、实验诊断学血栓与止血检测PPT课件1止血止血凝血系统凝血系统抗凝血抗凝血纤溶系统纤溶系统前前 言言动动 态态 平平 衡衡2第一节第一节 基础理论基础理论 可做笔记一、止血机制一、止血机制二、凝血机制二、凝血机制三、抗凝系统三、抗凝系统四、纤溶系统四、纤溶系统3一一.止血机制:止血机制:要素要素血管壁血管壁结构和功能结构和功能血小板血小板质量和数量质量和数量凝血因子凝血因子活性活性41.Hemorrhage(Bleeding)2.Hemostasis(White Thrombus)3.Coagulation(Red Thrombus)Bleeding and Clotting-154.Resto
2、ration(endothelial cell regenerate)5.fibrolysis6.RecoveredBleeding and Clotting-26二、凝血机制二、凝血机制 血液由液体状态变为凝胶状态称为血液凝血液由液体状态变为凝胶状态称为血液凝固,这一过程分为固,这一过程分为三条三条途径途径两个两个系统。系统。7组织凝血激素(tissue thromboplastin)筛选试验 确诊试验当这些因素有缺陷时,毛细血管的完整性就受到破坏。Fibrin degradation products(FDPs):接触因子(contact factor)血管壁-血小板型,皮肤紫癜和粘膜出血
3、后天性凝血因子缺乏,如急性肝炎、肾移植、使用抗凝药物等。一、血管壁检测(vessel function screen)1.二期止血缺陷:PT、APTTINR=PTRISI3、血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验plasma protamine paracogulation test,3P)The PFA-100 Analyzer、检测等参考值:不同实验室稍有不同,一般3243s,超过正常对照10s以上即为异常第二节 血栓与止血检测主要说明体内凝血酶的生成,并已激活了纤溶系统,因此主要见于DIC的早期和中期;共同途径的凝血酶原、纤维蛋白原及因子、缺乏时也可延长,但敏感性略差;当这些因素有缺陷时,毛细血管的
4、完整性就受到破坏。出血时间(BT)和血小板计数(PLT)F(a)血管损伤血管损伤TFTF-Fa-Ca2+表面接触表面接触FFaFFaFFaFaFCa2+PF3Ca2+FXaFVaCa2+PF3FXFFVFgFbFXIIIa Ca2+FXIIIThe coagulation cascade外外 源源 凝凝 血血 系系 统统内内 源源 凝凝 血血 系系 统统Fa共共同同途途径径如血管胶原暴露组织因子,第三因子血凝瀑布系统血凝瀑布系统8三条三条途径途径两个两个系统系统l外源性凝血途径:TF与F结合直至激活FX 的过程,是体内凝血的主要途径。l内源性凝血途径:从F激活,Fa激活,到a-a-Ca2+-P
5、F3复合物形成后激活FX的过程。l凝血共同途径:从FX被激活至纤维蛋白形成。l外源性凝血系统:外源性凝血途径+共同途径l内源性凝血系统:内源性凝血途径+共同途径9The coagulation cascade(依赖依赖vitK因子:因子因子:因子、)编号编号同义名同义名纤维蛋白原(纤维蛋白原(fibrinogen)凝血酶原凝血酶原(prothrombin)组织凝血激素组织凝血激素(tissue thromboplastin)Ca2+前加速素前加速素(proaccelerin)前转变素前转变素(proconvertin)抗血友病因子抗血友病因子(antihemophilic factor,AHF
6、)血浆凝血激酶血浆凝血激酶(plasma thromboplastin component,PTC)Stuart-Prower因子因子血浆凝血激酶前质血浆凝血激酶前质(plasma thromboplastin antecedent,PTA)接触因子接触因子(contact factor)纤维蛋白稳定因子纤维蛋白稳定因子(fibrin-stabilizing factor)爱吃酒,死爱吃酒,死10PT、APTT都延长:VicK缺乏?老鼠药中毒?D-dimer(D-二聚体)血管壁及结构异常:如遗传性出血性毛细血管扩张症在创伤、大手术后、上消出血等的病人也可出现阳性。Detect the clot
7、ting time卫生部卫医发2000412号文件增高:可导致出血,见于先天性凝血因子缺乏,如血友病;内 源 凝 血 系 统毛细血管壁有缺陷:如遗传性出血性毛细血管扩张(本试验较有价值)、坏血病、过敏性紫癜、老年性紫癜等凝血过程中形成的纤维蛋白单体可与FDP形成可溶性复合物,鱼精蛋白能使纤维蛋白单体从可溶性复合物游离出来,使纤维蛋白单体再聚合成不溶性纤维蛋白丝,呈胶冻状态。病理性CRT阳性:共同途径的凝血酶原、纤维蛋白原及因子、缺乏时也可延长,但敏感性略差;The coagulation cascade阳性:男性5个出血点;Bleeding and Clotting-2参考值:不同实验室稍有不
8、同,一般3243s,超过正常对照10s以上即为异常anticoagulated with natrium citricumPT、APTT都延长:VicK缺乏?老鼠药中毒?INR=PTRISI增高:可导致出血,见于先天性凝血因子缺乏,如血友病;一期止血缺陷:血小板计数(PLT)、出血时间(BT)纤维蛋白稳定因子(fibrin-stabilizing factor)三、抗凝系统三、抗凝系统l细胞抗凝作用细胞抗凝作用l体液抗凝作用:体液抗凝作用:P3051、抗凝血酶、抗凝血酶AT-:可灭活活化的凝血因子。:可灭活活化的凝血因子。(、等等)AT-:体内最主要的生理抗凝物质。:体内最主要的生理抗凝物质。
9、2、蛋白、蛋白C和蛋白和蛋白S系统。系统。11 纤溶:纤溶酶原(纤溶:纤溶酶原(PLG)被特异性激活物转化为纤)被特异性激活物转化为纤溶酶(溶酶(PL),继而降解纤维蛋白(原)。),继而降解纤维蛋白(原)。凝血系统激活,凝血酶生成凝血系统激活,凝血酶生成 纤溶酶激活纤溶酶激活 继发性纤溶继发性纤溶t-PA、u-PA 直接激活纤溶酶直接激活纤溶酶 原发性纤溶原发性纤溶四、纤溶系统四、纤溶系统(组织型纤溶酶原激活物(t-PA),在血管内皮细胞合成;尿激酶型纤溶酶原激活物(U-PA),肾小管上皮细胞和血管内皮细胞产生。原纤,纤维蛋白原在没有大量转化 成纤维蛋白之前即被降解)P30612纤溶酶纤溶酶P
10、L可降解可降解Fg和和Fb纤维蛋白原降解产物纤维蛋白原降解产物纤维蛋白降解产物纤维蛋白降解产物D-二聚体二聚体13FDP与D-二聚体Fibrin degradation products(FDPs):纤维蛋白原和纤维蛋白被纤维蛋白原和纤维蛋白被纤溶酶降解产物的总称。纤溶酶降解产物的总称。D-dimer(D-二聚体)二聚体)交联的纤维蛋白在纤溶酶交联的纤维蛋白在纤溶酶降解下产生的降解下产生的FDP的一个成的一个成分,分,是目前认为是目前认为DIC实验诊实验诊断中一个特异性较强的指标断中一个特异性较强的指标 14第二节第二节 血栓与止血检测血栓与止血检测筛选试验筛选试验 确诊试验确诊试验一、血管壁
11、检测一、血管壁检测二、血小板功能检测二、血小板功能检测三、凝血功能检查三、凝血功能检查四、抗凝系统检测四、抗凝系统检测五、纤溶功能检查五、纤溶功能检查 P29615一、血管壁检测(一、血管壁检测(vessel function screen)1.出血时间测定出血时间测定(Bleeding time,BT)【原理】【原理】刺破刺破皮肤毛细血管后,从血液自然皮肤毛细血管后,从血液自然流流出出到自然停止所需的时间。到自然停止所需的时间。【方法】【方法】标准化出血时间测定器法标准化出血时间测定器法 (template bleeding time,TBT)16Template Bleeding Time
12、,TBT17 出血时间(出血时间(BTBT)测定主要受血小板的数量)测定主要受血小板的数量和质量、毛细血管结构和功能以及血小板与和质量、毛细血管结构和功能以及血小板与毛细血管之间相互作用的影响。毛细血管之间相互作用的影响。BT9min为异常18临床意义临床意义 BT 延长:延长:PLTPLT数量异常:数量异常:ITPITP、血栓性血小板减少、血栓性血小板减少性性紫癜紫癜等等PLTPLT功能缺陷:先天性血小板病如血小板无力症功能缺陷:先天性血小板病如血小板无力症、获得性血小板病如药物引起的血小板病等。、获得性血小板病如药物引起的血小板病等。血管性血友病(血管性血友病(von Willebrand
13、s disease,VWDVWD)。)。血管壁及结构异常:血管壁及结构异常:如如遗传性出血性毛细血管扩遗传性出血性毛细血管扩张症张症药物干扰:如服用药物干扰:如服用阿司匹林阿司匹林、潘生丁等。、潘生丁等。192.毛细血管脆性试验毛细血管脆性试验(毛细血管抵抗力试验、束臂试验,毛细血管抵抗力试验、束臂试验,CRT)主要反映毛细血管结构和功能,也与血小板质和量有关主要反映毛细血管结构和功能,也与血小板质和量有关20毛细血管脆性试验(毛细血管脆性试验(CRT)原理原理 毛细血管壁的完整性有赖于毛细血管的结构、功能和血小板毛细血管壁的完整性有赖于毛细血管的结构、功能和血小板质和量的正常,也与血浆质和量
14、的正常,也与血浆vWF等有关。当这些因素有缺陷时,等有关。当这些因素有缺陷时,毛细血管的完整性就受到破坏。毛细血管的完整性就受到破坏。方法方法 在上臂给静脉及毛细血管外加在上臂给静脉及毛细血管外加“标准压力标准压力”、增加血负荷,、增加血负荷,观察前臂一定范围内皮肤出血点的数量。观察前臂一定范围内皮肤出血点的数量。意义意义 主要反映毛细血管结构和功能,也与血小板质和量有关。主要反映毛细血管结构和功能,也与血小板质和量有关。21毛细血管壁的完整性有赖于毛细血管的结构、功能和血小板质和量的正常,也与血浆vWF等有关。D-dimer(D-二聚体)在创伤、大手术后、上消出血等的病人也可出现阳性。Kao
15、lin,phospholipids,2.The PFA-100 Analyzer卫生部卫医发2000412号文件Stuart-Prower因子诊断出血病的思维程序vicK缺乏?共同途径的凝血酶原、纤维蛋白原及因子、缺乏时也可延长,但敏感性略差;接触因子(contact factor)Kaolin,phospholipids,2.纤维蛋白原和纤维蛋白被纤溶酶降解产物的总称。交联的纤维蛋白在纤溶酶降解下产生的FDP的一个成分,是目前认为DIC实验诊断中一个特异性较强的指标 PT:1113s,超过正常对照3s以上为异常。Detect the clotting timeKaolin,phospholi
16、pids,2.纤溶功能检查 P306减低:可导致血栓形成,见于先天性缺乏和功能异常,如肺梗塞、深部静脉血栓等血栓性疾病;The coagulation cascade INR(international normalized ratio国际正常化比值):即PTRISI,ISI为国际敏感度指数(international senstivity index)INR正常值范围为0.、检测等l参考值参考值 阳性:男性阳性:男性5个出血点;女性个出血点;女性10个出血点。个出血点。22临临 床床 意意 义义 病理性病理性CRT阳性:阳性:毛细血管壁有缺陷:如遗传性出血性毛细血管扩张毛细血管壁有缺陷:如遗
17、传性出血性毛细血管扩张(本试验较有价值)、坏血病、过敏性紫癜、老年(本试验较有价值)、坏血病、过敏性紫癜、老年性紫癜等性紫癜等血小板有缺陷:原发性血小板减少性紫癜(血小板有缺陷:原发性血小板减少性紫癜(ITP)、血小板无力症等;、血小板无力症等;血管性血友病(血管性血友病(von willebrand disease,vWD)23PLT相关免疫球蛋白测定相关免疫球蛋白测定PAIgG增高:见于增高:见于ITP等等PLT粘附、聚集试验粘附、聚集试验二、血小板功能检测二、血小板功能检测 Platelet function screenP29924 临床意义临床意义1.PLT粘附、聚集功能降低:常见于
18、粘附、聚集功能降低:常见于PLT无力症、无力症、vWD、骨髓增生性疾病。、骨髓增生性疾病。2.PLT粘附、聚集功能升高:常见于一些高凝状态粘附、聚集功能升高:常见于一些高凝状态的疾病,如心梗、脑梗、静脉血栓形成等。的疾病,如心梗、脑梗、静脉血栓形成等。The PFA-100 Analyzer 25三、三、凝血功能检查凝血功能检查Examination for coagulating systemlAPTTlPTP301261.活化部分凝血活酶时间测定活化部分凝血活酶时间测定 (Activated partial thromboplastin time,APTT)l原理:原理:在抗凝血浆中,加入
19、在抗凝血浆中,加入活化活化接触因子激活接触因子激活剂剂(白陶土白陶土)和和部分凝血活酶部分凝血活酶(主要是脑磷脂,代(主要是脑磷脂,代替血小板的磷脂),再加入适量的替血小板的磷脂),再加入适量的CaCa2+2+即可满足即可满足内源性凝血的全部条件。内源性凝血的全部条件。l从加入从加入CaCa2+2+到血浆凝固所需的时间即称为活化部到血浆凝固所需的时间即称为活化部分凝血活酶时间。分凝血活酶时间。27Sample preparation1.collete blood 2.anticoagulated with natrium citricum (枸橼酸钠)(枸橼酸钠)3.centrifugated
20、 by 3000rpm for 15min.4.get the poor platelet plasma.(PPP)28Add reagents into PPP.(1.Kaolin,phospholipids,2.calcium)3243s1113sDetect the clotting time29APTTlAPTT的长短的长短:反映了血浆中内源凝血系统凝血因子的反映了血浆中内源凝血系统凝血因子的水平水平(、纤维蛋白原、纤维蛋白原)。lAPTT是目前最常用的是目前最常用的检查内源凝血系统是否正常的检查内源凝血系统是否正常的筛选试验。筛选试验。l参考值参考值:不同实验室稍有不同,一般不同实验
21、室稍有不同,一般323243s 43s,超过,超过正常对照正常对照10s10s以上即为异常以上即为异常 30临床意义临床意义 APTT延长:延长:lAPTT是是内源凝血因子缺乏最可靠的筛选试验内源凝血因子缺乏最可靠的筛选试验,可发现轻型的血友病。可发现轻型的血友病。l共同途径的凝血酶原共同途径的凝血酶原、纤维蛋白原及因子、纤维蛋白原及因子、缺乏时也可延长,但敏感性略差;缺乏时也可延长,但敏感性略差;l血中抗凝物如凝血因子抑制物或使用肝素等;血中抗凝物如凝血因子抑制物或使用肝素等;l其它:肝病、其它:肝病、DIC、大量输入库存血等。、大量输入库存血等。(凝血因子活性衰减)31APTT缩短:血栓前
22、状态及血栓性疾病等缩短:血栓前状态及血栓性疾病等肝素治疗监护肝素治疗监护:肝素主要加强:肝素主要加强AT-III的作用,的作用,APTT对肝素高度敏感,目前对肝素高度敏感,目前广泛用在普通肝素抗广泛用在普通肝素抗凝治疗监护中。凝治疗监护中。一般在肝素治疗期间,一般在肝素治疗期间,APTT维持维持在正常对照的在正常对照的1.52.5倍为宜倍为宜。对于低分子量肝素。对于低分子量肝素,APTT不敏感。不敏感。狼疮抗凝物的干扰:狼疮抗凝物的干扰:LAC是一种抗磷脂的自身是一种抗磷脂的自身抗体,在体内常引起静脉血栓抗体,在体内常引起静脉血栓;在体外和参与凝血在体外和参与凝血反应的磷脂相结合,故能干扰凝血
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