实验诊断学CAI课件.ppt
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- 实验 诊断 CAI 课件
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1、实验诊断学CAI课件实验诊断学CAI课件l(一)最早和最原始的实验诊断lHippoerates希腊名医。l时间:公元前400年l方法:感官直视法(色、嗅、味等)l标本:尿液实验诊断学CAI课件(二)临床血液学检验1、系统地科学地研究血细胞从16世纪末至17世 纪初显微镜发明和改良开始。2、方法学变化 传统的方法:以手工操作,显微镜,计数板为标志 现代方法:以血细胞自动分析仪为主要标志3、血细胞研究及检验方法发展简史实验诊断学CAI课件年份发展史1590 年1658 年1673 年1749 年1774 年1842 年1852 年1855 年1867 年1868 年1871 年1875 年1877
2、 年1878 年1880 年1882 年1891 年1892 年1930 年1895 年1902 年1910 年1923 年1924 年1929 年1934 年1946 年1953 年1954 年20 世纪 60 年代20 世纪 80 年代20 世纪 90 年代发明复合显微镜观察到蛙的红细胞改进显微镜结构,观察到人的红细胞观察到白细胞观察到人红细胞并非呈球形,而是扁平圆形;首次观察到淋巴细胞观察到血小板使用刻度毛细血管,并进行红细胞计数发明血细胞计数板设计血细胞稀释用计数管证明红细胞来自骨髓,揭示造血功能认识红细胞功能配制成红细胞稀释液建立白细胞分类建立血红蛋白定量方法发明血细胞染色法为形态学
3、奠定基础认识血小板止血功能改进血细胞染色法认识中性粒细胞趋化、吞噬、灭菌功能改进血红蛋白测定配制成白细胞稀释液,改进血细胞染色法,发明活体染色证明巨核细胞生成血小板,单核细胞吞噬功能认识血小板粘附、聚集功能建立 Westergren 血沉测定法发明骨髓穿刺血液分析仪问世;建立 Wintrobe 红细胞比容测定法和红细胞 值计算法证明红细胞寿命为 120 天Coulter 血球计数仪(电阻抗原理)应用于临床建立微量红细胞比容测定法血液分析仪在世界各国推广应用基于激光法原理的血液分析仪问世综合光学、电学、细胞化学原理的血液分析仪代表了当今的发展趋势实验诊断学CAI课件4、发展史的简要过程:显微镜R
4、BCWBCPLT计数染色 血细胞功能BM穿刺针血细胞分析仪(电 阻激光光学、电学、染色相结合)手工分析仪器分析实验诊断学CAI课件19世以前观察人体化学组成变化1918年Lichtwitz提出“临床化学”名词1931年Peter 等出版临床化学专著19世纪末显量分析和容量分析20世纪初;Folin比色分析50年代酶活力测定80年代自动化分析(超微量)实验诊断学CAI课件17世纪末显微镜观察微生物19世纪年代创巴氏消毒法(Pasteur)Lister创建无芯外科手术Koch 证明微生物是传染病的致病因子细胞培养与染色技术1900年后病原微生物分离证实1929年Fleming发现青霉素分子微生物检
5、验实验诊断学CAI课件l微生物ll病原微生物ll抗生素ll杀灭病原微生物(变异)实验诊断学CAI课件天花(公元713741唐代)预防天花(人痘苗、牛痘苗)细胞免疫体液免疫1901年“免疫学”名词提出血清学(抗体:抗原)1958年Barnet克隆选择学说T细胞亚群抗体分子结构1975年单克隆抗体制备Ig基因重排细胞因子(受体、基因、活性)分子免疫学实验诊断学CAI课件细胞免疫检验:ICC,淋巴细胞亚群分类与功 能检测。体液免疫检验:Ag,Ab,C等检测实验诊断学CAI课件(六)实验诊断学发展可发现以下特点:1、从简单到复杂,从形态到功能,从手工到仪器(自动化)2、技术创新,方法创新,观念创新是发
6、展的动力3、临床应用与实验技术相互促进,共同提高。实验诊断学CAI课件(一)自动化(例举10种)自动血细胞分析仪 自动细胞鉴定仪自动生化分析仪 自动血镜养仪自动化子发光分析仪 自动尿液分析仪自动放免分析仪 自动染色体分析仪自动酶免分析仪 流式细胞仪实验诊断学CAI课件(二)试剂商品化(1)FDA、SDA认可试剂(2)与仪器配套试剂(3)质优价廉试剂(自评)实验诊断学CAI课件(三)方法学的标准化国际标准化国内标准化区域内标准化原则:精密、准确、简便、快速实验诊断学CAI课件(四)POCT(Point of care test):意译:床边检验 即刻检验特点:操作简便、试剂稳定、快速、仪器设备简
7、单适用:急诊室、诊所、家庭检测等缺点:标准化、规矩化、质检等较差实验诊断学CAI课件分析前分析中分析后全面质量控制实验诊断学CAI课件室 内 质 量 检 测室 内 质 量 控 制(部、省、市、国 际)全 面 质 量 控 制实验诊断学CAI课件临床专家检验专家最直接最准确最经济最有意义共同优选检验项目实验诊断学CAI课件四、临床应用:疾病诊断(病因、鉴别)疗效观察预后判断 预防保健科学研究 实验诊断学CAI课件 结果解释(1)(2)同一疾病不同结果 同一结果不同疾病 结合临床静 态 数 据动 态 机 体统 一实验诊断学CAI课件五、学习的重点与方法 方法:掌握共性知识(先):概念性、普通性、实用
8、性 注意个性知识(后):特殊性、专业性、复杂性 重点:1、掌握各项检验的适应证与选用原则 2、掌握参考及其临床意义 3、了解原理、方法、影响因素等实验诊断学CAI课件l一、血液检查的相关知识实验诊断学CAI课件1、血液的基本功能(1)参与新陈代谢(2)参与各种功能调节(3)维持内、外环境的相对平衡参与机体的每一个功能活动实验诊断学CAI课件血 细 胞:R B C、W B C、P L T正 离 子:H a+、K+、C a+、M g+等负 离 子:H C O-3,C L-、H P O 4 2-,S O 4 2-等电 介 质有 机 物:营 养 物 质、代 谢 物、激 素 等血 浆 蛋 白:F b g
9、、A lb、G 等 三 大 类血 浆血 液实验诊断学CAI课件血液成分改变疾病(质与量)(组织、器官、细胞)实验诊断学CAI课件4、血液常规检验的概念变化(1)传统血常规:RBC、Hb、WBC、DC(手工法)(2)现代血常规:二分类、三分类、五分类全自动 血细胞分析仪 十多次参数至几十项参数实验诊断学CAI课件血细胞分析仪发展简史:1953年 第一名血细胞分析仪由Coulter发明问世60年代 血细胞分析用于RBC、Hb、WBC、MCV、MCH、MCHC、HCT测定70年代 增加Pet测定80年代 增加DC、RDW、PCV等新项目90年代 增加Ret,计数及分类计数等成为医学检 验领域的重要仪
10、器之一。实验诊断学CAI课件血细胞分析仪功能特点(1)多参数分析 20或40多项(2)精确度高 CV:5%10%(3)速度快 50120T/h(4)用血量少 250ml(个别6ul)(5)结果简明 参数、含义报告、直方图式或散点图(6)质检可靠 配套质控品、全国或全世界质控网络监测(7)自动清洗 各标本间互染率1%(8)报警功能 异常结果自动报警(9)有效筛查 三分类复检30%,五分类15%,提示 异常细胞实验诊断学CAI课件实验诊断学CAI课件实验诊断学CAI课件lDF2F-单核细胞,G-淋巴细胞,H-中性粒细胞,I-血小板lDF1:A-单核细胞,B-淋巴细胞,C-中性粒细胞,D-嗜性粒细胞
11、,E-血小板。在DF1中由于淋巴细胞或小单核细胞与嗜碱性细胞分布有重叠,故不能直接观察。只有在VCS三维图中才能区分实验诊断学CAI课件l各分类区细胞分别与血涂片中的白细胞类型相对应:噪声、幼红细胞、聚集血小板、淋巴与嗜碱粒细胞、大的未染色细胞(LUC),原始细胞的光散射比LUC更强、单核细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞实验诊断学CAI课件1、红细胞起源,演化和发育 HIV EPOTHSCBFU-ECFU-E-原红早红中红晚红成熟红 IL-3 24-48hBM:-72h-|-blood实验诊断学CAI课件l红细胞分化发育成熟:5天l 3-5次分裂l原红RBC(8-16个)lHb开始合成阶段:早幼
12、红l调节:EPO/IL-3/睾丸激素/神经体液/晚幼红l红细胞数量动态平衡l 120lRBC生成RBC破坏l(BM)1/200(脾脏)l红细胞主要功能:携O2/血液PH缓冲实验诊断学CAI课件铁 铁 代 谢 池胆 色 素 粪、尿 排 泄亚 铁 血 红 素珠 蛋 白 AA代 谢Hb实验诊断学CAI课件3、RBC、Hb参考值分组 RBC Hb男性 (4.05.5)1012/L 120160g/L女性 (3.55.0)1012/L 110150g/L新生儿(6.07.0)1012/L 170200g/L RBC Hb变化的关系(正色RBC)旧制单位 RBC:Hb100:3(万/mm3:g/dl)新制
13、单位 RBC:Hb1:3 (1012/L:g/L)影响因素:(1)总血容量改变:大量失血早期,血浓度改变小,难 反映贫血存在。(2)总血浆容量改变:浓缩或血稀释 (3)个体差异:性别、年龄、居住海拔高度实验诊断学CAI课件4、RBC、Hb检测的临床意义RBC、Hb量变 (1).生理性:a.婴幼儿(3m15y):造血原料不足 b.妊娠中、晚期:血容量 c.部分老年人:造血功能 (2)病理性 各种贫血(三大类)实验诊断学CAI课件RBC、Hb 量变 (1)相对:血浆容量、相对性、暂时性:呕吐、腹泻、烧伤、多汗、多尿(2)绝对(缺O2):生理性:胎儿、新生儿、高原生活、剧烈运动、应激等 病理性:a.
14、代偿性:多种心、肺疾患(严重、慢性)b.持续性:真红(Polycythemia vera):(710)1012/L,170250g/L EPO:肿瘤(肝癌、胃癌)、肾疾(肾盂积水,多囊肾)实验诊断学CAI课件类型形态特点常见疾病红细胞大小和染色异常正常红细胞和正常色素性(normocyte/normochromie)69um 淡染区正常正常人、AA、溶贫(多)失血(急)骨髓性贫血小 红 细 胞 和 低 色 素 性(microcyte/hypochromic)6um 淡染区扩大Fe 铁粒幼贫血,球蛋白贫血不同大红细胞,巨红和高色素性(maerocyte hyperchromic/magalocy
15、te hyperchromic)10um(15um),淡染区消失急性贫血,急性失血,巨幼贫红细胞大小不均(anisocytosis)相差 1 倍以上巨幼贫,MDS嗜多色性(Polychromatic)灰蓝色或紫灰色多种增生性贫血实验诊断学CAI课件红细胞形态异常球 形 红 细 胞(Spherocyte)6um 淡染区消失遗传性球形细胞增多症25%自身免疫性溶血性贫血椭 圆 形 红 细 胞(elliptocyte)椭圆形(1%)严重贫血(15%),遗传性椭圆形细胞增多症(25%),巨幼贫口形细胞(Stomatocyte)淡 染 区 似 鱼 口(4%)遗传性口形细胞增多症(10%)DIC、酒精中毒
16、靶形细胞(Targetcell)扁薄,中心形似靶子(2%)地中海贫血(20%),Hb 病(20%)镰形细胞(Sicklecell)形如镰刀状镰形细胞性贫血(Hbs 病)泪滴形红细胞(teardrop cell)形似泪滴状骨髓纤维化,地中海贫血溶贫、溶贫实验诊断学CAI课件红细胞形态异常棘形细胞(acanthocyte)表面有较多突起棘形红细胞增多症(25%)裂细胞(schistocyte)多种不规则形态微血管病性溶血贫(DIC、血 栓 性ITP,溶血性尿毒症、恶性高血压、创伤性心血管性溶血性贫血)细胞缗线状形成(rouleaouxformation)红细胞聚集成串状MM、原发性巨球蛋白血症实验
17、诊断学CAI课件红细胞结构异常嗜 碱 性 点 彩(basophilicstippling)含细小嗜碱性点状物质(核糖体)铅中毒,巨幼贫染色质小体(Hohell-Jollybody)0.51.0cm 圆紫红色小体(核残余)溶贫,巨贫,红白血病卡一波环(Cabot ring)淡紫红色线状体呈环状成“8”字形(纺锤体残余或脂蛋白变性)严 重 贫 血,溶贫,巨贫,铅中毒,白血病。有核红细胞(nucleated erythrocyte)有核红细胞各种溶贫,红白血病髓外造血,严重缺 O2实验诊断学CAI课件贫血的形态学分类MCV(80100fl)MCH(2734pg)MCHC(32%36%)病 因正常细胞
18、性贫血8010027343236再生障碍性贫血、急性失血性贫血、多数溶血性贫血、骨髓病性贫血如白血病等大细胞性贫血100343236叶酸及(或)维生素B12缺乏所引起的巨幼细胞贫血,如营养性妊娠、婴儿期巨幼细胞贫血及恶性贫血小细胞低色素性贫血802732缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、铁粒幼细胞性贫血单纯小细胞性贫血80273236慢性感染、炎症、肝病、尿毒症、恶性肿瘤、风湿性疾病等所致的贫血实验诊断学CAI课件MCV RDW贫血类型常见疾病增高正常增高大细胞均一性贫血大细胞非均一性贫血部分再生障碍性贫血巨幼细胞贫血、MDS正常正常增高正常细胞均一性贫血正常细胞非均一性贫血急性失血性贫血再生
19、障碍性贫血、PNH、G-6-PD缺乏症等减低正常增高小细胞均一性贫血小细胞非均一性贫血珠蛋白生成障碍性贫血、球形细胞增多等缺铁性贫血实验诊断学CAI课件类型发病机制疾病红细胞生成减少 骨髓功能衰竭 造血物质缺乏 或利用障碍造血干细胞减少造血干细胞或祖细胞暂时受抑制红系祖细胞缺陷造血调控因子缺乏铁缺乏铁利用障碍单核巨噬系统铁系统释放障碍铁转运障碍铜缺乏DNA 合成障碍再生障碍性贫血急性造血功能停滞单纯红细胞再生障碍性贫血、先天性红细胞生成障碍性贫血、肾性贫血、内分泌紊乱所致贫血缺铁性贫血铁粒幼细胞贫血炎症,感染所致慢性疾病贫血先天性运铁蛋白缺乏症缺铜性贫血叶酸、维生素 B12缺乏性巨幼细胞贫血及
20、其他巨细胞贫血实验诊断学CAI课件类型发病机制疾病红细胞破坏过多 红细胞内在缺陷红细胞膜缺陷红细胞酶缺陷血红蛋白异常 珠蛋白合成减少珠蛋白结构异常红细胞对补体过敏遗传性球形红细胞增多症遗传性椭圆形红细胞增多症遗传性口形红细胞增多症遗传性棘形红细胞增多症遗传性红细胞 G-6-PD 缺乏症遗传性红细胞丙铜酸激酶缺乏症糖无氧酵解,戊糖旁路及谷胱甘肽代谢中其他酶缺乏所致血性贫血珠蛋白生成障碍性贫血镰状细胞贫血、血红蛋白 C、D、E(HbC,D,E)病不稳定 Hb 所致溶血性贫血阵发性睡眠性血红蛋白尿症实验诊断学CAI课件类型发病机制疾病红细胞外在异常红细胞丢失(失血)免疫反应 自身免疫 同种免疫 药物
21、诱发免疫机械性损伤高温化学物质微生物,寄生虫脾功能亢进急性失血慢性失血温抗体型自身免疫性溶血性贫血,冷凝集综合征新生儿ABO 溶血病、新生儿Rh 溶血病、血型不合输血后溶血病药物性免疫性溶血性贫血红细胞破碎综合征、行军性Hb尿烧伤所致溶血性贫血药物和化学毒物所致溶血性贫血疟疾和多种细菌所致溶血性贫血脾功能亢进所致溶血性贫血急性失血性贫血慢性失血所致缺铁性贫血实验诊断学CAI课件缺铁性贫血铁粒细胞性贫血珠蛋白生成障碍性贫血慢性炎症贫血病因铁缺乏铁失利用Hb 异常缺铁或铁失利用网织红细胞正常()正常()略(正常)正常血清铁蛋白正常()血清铁总铁结合力正常未饱和铁结合力转铁蛋白饱和度正常骨髓外铁铁粒
22、幼细胞数环形铁粒幼细胞15%注:升高,降低实验诊断学CAI课件红细胞内异常红细胞外异常1.红细胞膜结构与功能缺陷 遗传性球形红细胞增多症遗传性椭圆形红细胞增多症2.红细胞内酶缺陷 红细胞无氧糖酵解途径酶缺陷 丙酮酸激酶等缺陷 红细胞磷脂戊旁路和谷胱甘肽代谢酶缺陷 葡萄糖-6-磷脂脱氢酶等缺陷 核苷酸代谢酶缺陷 嘧啶 5核苷酸酶缺陷3.珠蛋白的异常 珠蛋白肽链质的异常 镰形细胞性贫血、HbC、D、E 等4.阵发性睡眠性血红蛋白尿1.代谢因素 无脂蛋白血症2.免疫因素 自身免疫溶血性贫血 药物免疫血性贫血(青霉素、奎尼丁、甲基多巴等)新生儿溶血性贫血 血型不合的输血反应3.感染因素 见于疟疾、传染
23、性单核细胞增多症、支原体肺炎4.化学因素 苯肼、砷化氢、蛇毒等5.物理和机械因素 大面积烧伤、人造瓣膜、心瓣膜异常、微血管病性溶血性贫血实验诊断学CAI课件项目结果常见疾病红细胞渗透脆性试验抗人球蛋白试验酸溶血试验蔗糖溶血试验高铁血红蛋白还原试验血红蛋白电泳HbA2HbFHbH 包涵体检查异丙醇沉淀试验热变性试验镰变试验冷热血试验增高阳性阳性阳性还原率降低异常增高增高阳性阳性沉淀率增高阳性阳性遗传性球形细胞增多症自身免疫性溶血性贫血,药物免疫性溶血性贫血,新生儿同种免疫溶血病,冷凝集素综合症PNH(作为肯定诊断)PNH(作为筛检)G-6-PD 缺乏症常用于检查 HbC、HbBarts 等珠蛋白
24、生成障碍性贫血珠蛋白生成障碍性贫血珠蛋白生成障碍性贫血示有不稳定血红蛋白存在存在不稳定血红蛋白,10%有诊断意义HbS 病PCH 病实验诊断学CAI课件细胞核细胞质名称大小(直径)(m)外形核形核染质着色颗粒比值绝对值(10/L)St1015圆形弯 曲 呈 腊肠 样,两端钝圆深 紫 红色,粗糙淡 桔 红色量多,细小,均匀布满胞质,呈浅紫红色0.010.050.040.5Sg1015圆形分 为25叶 以 3 叶为多深 紫 红色,粗糙淡 桔 红色量多,细小,均匀布满胞质,呈浅紫红色0.500.7027E1116圆形分为 2 叶,呈眼镜样深 紫 红色,粗糙淡 桔 红色粗大,圆而均匀,充满胞质,呈鲜桔
25、红色0.0050.050.020.5B1012圆形核 结 构 不清,分 叶不明显淡 桔 红色量少,大小不匀,分布不均,常覆盖核上,呈蓝黑色00.0100.1L615圆 形 或椭圆形圆 形 或 椭圆形,着边深 紫 红色 粗 块状透 明 淡蓝色小淋巴细胞一般无颗粒,大淋巴细胞,可有少量粗大不均匀深紫红色嗜苯胺蓝颗粒0.200.400.84M620圆 形 或不 规 则形圆 形 或 不规则形淡 紫 红色 细 致疏 松 呈网状淡 灰 蓝色细小紫红色颗粒,似灰尘样弥散分布于胞质中0.030.080.120.8实验诊断学CAI课件中性粒细胞增多(neutrophilia)生理性增多:见于一天内波动(下午较早
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