分子诊断技术课件.ppt

1、分子诊断技术.Dot Bolt Hybridization for HBV DNA Quantitationin 5 l of Patient Sera.基因芯片基因芯片（或DNA Chip,或Microarray）又称DNA微阵列，是指固定在固相载体上的高密度DNA微点阵。即将大量靶基因或寡核苷酸片段有序地，高密度地（点与点间距一般小于500m）排列在玻璃、硅等载体上，称之为基因芯片。上图显示大量的DNA探针，按照一定的规律有序地排列在支撑物上，每个探针与相对应的特异互补序列结合后，即可发出荧光。利用该芯片可同时获取大量信息。DNA Microarray.以大量已知序列的寡核苷酸、以大量已知

2、序列的寡核苷酸、cDNAcDNA或基因片段作探针，检测或基因片段作探针，检测样品中哪些核酸序列与其互补，样品中哪些核酸序列与其互补，然后通过定性、定量分析得出待然后通过定性、定量分析得出待测样品的基因序列及表达的信息测样品的基因序列及表达的信息.原位合成原位合成直接点样直接点样原位光蚀刻合成原位光蚀刻合成原位喷印合成原位喷印合成 分子印章法分子印章法针式点样针式点样喷墨点样喷墨点样光导原位合成法光导原位合成法.u非对称非对称PCRu免疫免疫PCRu定量定量PCRu随机引物随机引物PCRu简并引物简并引物PCR u锚定锚定PCR.退火延伸切割聚合完成l该法也称TaqMan技术，在PCR系统中，加入能和靶核酸模板杂交的探针，其5端带有荧光报告基团，发射的荧光被3端带有的荧光淬灭基团所吸收。l引物延伸时，由于聚合酶具有的53核酸外切酶作用，可把荧光报告基团从探针上切下，因与淬灭基团远离，发出的荧光不被淬灭，随模板扩增和游离荧光报告基团的增加而增强，并和初始靶核酸的量呈正相关。.