免疫实验诊断课件.ppt

1、 免疫学实验诊断免疫学实验诊断临床免疫学检查及意义临床免疫学检查及意义 免疫学检查由于具有特异性和敏感性，免疫学检查由于具有特异性和敏感性，在实验诊断中应用越来越广泛。常应用于体在实验诊断中应用越来越广泛。常应用于体液免疫、细胞免疫、感染免疫、肿瘤免疫、液免疫、细胞免疫、感染免疫、肿瘤免疫、变态反应、移植免疫等相关疾病诊断和预后变态反应、移植免疫等相关疾病诊断和预后观察。免疫学检查意义：应用免疫学理论和观察。免疫学检查意义：应用免疫学理论和技术研究疾病的病因、发生、发展和转归，技术研究疾病的病因、发生、发展和转归，帮助疾病诊断和预防治疗。帮助疾病诊断和预防治疗。AntigenB-lymphoc

2、ytephagocyte T-lymphocyte Primed TLcytokine Plasma cellantibodyT memory cellB memory cellReviewimmune responseNKcomplementTumor marker其它其它n做免疫学检查思考点做免疫学检查思考点特异性、灵敏性特异性、灵敏性性别、年龄性别、年龄检测物质性质检测物质性质地域性地域性时效性时效性免疫抑制剂等免疫抑制剂等药物影响药物影响n介绍常用免疫学检测方法介绍常用免疫学检测方法凝集沉淀试验凝集沉淀试验流式细胞技术流式细胞技术ELISAELISA发光物标记技术发光物标记技术生物芯片

3、技术生物芯片技术快速金标技术快速金标技术免疫印迹免疫印迹PCR第一节：免疫球蛋白检测第一节：免疫球蛋白检测n免疫球蛋白合成、分泌及特性：免疫球蛋白合成、分泌及特性：IgG IgA IgM IgEIgG IgA IgM IgE特性特性IgG IgA IgM IgG IgA IgM IgEIgE病理变化病理变化IgGIgG亚类检测亚类检测nIgGIgG亚类分为亚类分为4 4种，血液中含量种，血液中含量IgG1 IgG2 IgG1 IgG2 IgG3 IgG4IgG3 IgG4，最高和最低可差，最高和最低可差1010倍以上，亚类增倍以上，亚类增高或减低通常与总高或减低通常与总IgGIgG相关，但有些

4、患者亚类异相关，但有些患者亚类异常，而总常，而总IgGIgG正常或与亚类异常情况反相。正常或与亚类异常情况反相。n IgG1 IgG1缺失常见于免疫缺陷疾病，导致反复感染缺失常见于免疫缺陷疾病，导致反复感染nIgG2IgG2缺陷为缺陷为IgGIgG亚类缺陷中最常见者，且多见于亚类缺陷中最常见者，且多见于儿童儿童 ，可引起呼吸道反复感染，可引起呼吸道反复感染nIgG3IgG3缺陷见于成人反复性呼吸道感染缺陷见于成人反复性呼吸道感染nIgG4IgG4缺陷与缺陷与IgG2IgG2和和IgAIgA缺乏有关。缺乏有关。IgG4IgG4水平升高水平升高见于异位性皮炎、哮喘和某些寄生虫疾病。见于异位性皮炎、

5、哮喘和某些寄生虫疾病。M M蛋白检测临床意义蛋白检测临床意义nM M蛋白或称单克隆免疫球蛋白，是由一种单克隆蛋白或称单克隆免疫球蛋白，是由一种单克隆B B细胞异细胞异常增殖时产生，一般不具抗体活性。常增殖时产生，一般不具抗体活性。n阳性主要见于阳性主要见于1.1.多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤 2.2.巨球蛋白血症巨球蛋白血症3.3.重链病重链病 4.4.半分子病半分子病5.5.恶性淋巴瘤恶性淋巴瘤 6.6.良性良性M M蛋白血症蛋白血症 蛋白电泳蛋白电泳第二节：补体检测（第二节：补体检测（complementcomplement）补体是主要由巨噬细胞分泌存在于新鲜补体是主要由巨噬细胞分泌存在于新鲜

6、血液中具有酶样活性的球蛋白，补体不耐热血液中具有酶样活性的球蛋白，补体不耐热易降解，故补体检测须用新鲜血清。补体有易降解，故补体检测须用新鲜血清。补体有C1-C9(C1-C9(经典途径）及经典途径）及BFBF、DFDF、PFPF（旁路途径）（旁路途径）和补体调节因子组成。临床常作总补体活性和补体调节因子组成。临床常作总补体活性（CH50CH50）和单一因子）和单一因子C3C3、C4C4、BFBF及及C1qC1q检测。检测。总补体溶血活性（总补体溶血活性（CH50)CH50)检测检测 增高增高 急性感染、急性组织损伤、恶性肿瘤和风湿病早急性感染、急性组织损伤、恶性肿瘤和风湿病早期，补体增高常与其

7、它血浆蛋白改变相伴随。期，补体增高常与其它血浆蛋白改变相伴随。降低降低 自身免疫性疾病自身免疫性疾病SLESLE的活动期的活动期 急性肾小球肾炎急性肾小球肾炎 冷球蛋白血症等冷球蛋白血症等 严重肝病变严重肝病变 先天性缺乏先天性缺乏SRBCAbcSRBCc c3 3、c c4 4、c c1q1q、B B因子检测因子检测第三节第三节 细胞免疫检查细胞免疫检查n簇分化抗原簇分化抗原CDCD（Cluster of differentiationCluster of differentiation）:细胞在发育分化过程中，细胞表面抗原物质发细胞在发育分化过程中，细胞表面抗原物质发生变化，生变化，CDC

8、D抗原即指细胞变化过程中不同时期产抗原即指细胞变化过程中不同时期产生的抗原。目前临床生的抗原。目前临床CD4CD4（THTH）与）与CD8CD8（TSTS）检测）检测应用广泛。簇分化抗原检测方法目前较多采用流应用广泛。簇分化抗原检测方法目前较多采用流式细胞仪技术进行分析，流式细胞免疫分析技术式细胞仪技术进行分析，流式细胞免疫分析技术为特异抗体加标记技术加单细胞检测。特点：特为特异抗体加标记技术加单细胞检测。特点：特异性、灵敏性高、检测精密度均较以前手工操作异性、灵敏性高、检测精密度均较以前手工操作高很多。高很多。流式细胞仪检测简介流式细胞仪检测简介n 淋巴细胞表面标志检测淋巴细胞表面标志检测E

9、 E玫瑰花形成实验玫瑰花形成实验TCSRBCSRBCSRBCSRBCSRBCSRBCSERSERSERSERSERSERT T细胞表面标志检测细胞表面标志检测n CD3 CD3（总（总T T细胞）、细胞）、E E玫瑰花试验检测临床意义玫瑰花试验检测临床意义 增高：甲亢、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无力、器增高：甲亢、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无力、器 官移植后排异反应官移植后排异反应 减低：减低：AIDSAIDS、胸腺发育不良、联合免疫缺陷、也可见、胸腺发育不良、联合免疫缺陷、也可见 于放疗和化疗及免疫抑制类药物治疗于放疗和化疗及免疫抑制类药物治疗 CD4 CD4、CD8CD8检测临床意义检测临

10、床意义 CD4 CD4+增高：类风湿关节炎活动期，自身免疫疾病增高：类风湿关节炎活动期，自身免疫疾病 CD4 CD4+减低：减低：AIDSAIDS等病毒感染、免疫抑制剂治疗、严重等病毒感染、免疫抑制剂治疗、严重 创伤、大手术等创伤、大手术等 CD8 CD8+增高：传染性单核细胞增多症和巨细胞病毒感染增高：传染性单核细胞增多症和巨细胞病毒感染 急性期、慢性乙型肝炎急性期、慢性乙型肝炎 CD8 CD8+降低：部分自身免疫性疾病、降低：部分自身免疫性疾病、型糖尿病等型糖尿病等B B细胞表面标志检测细胞表面标志检测nB B细胞表面抗原和表面受体检测临床意义细胞表面抗原和表面受体检测临床意义表面抗原表面

11、抗原CD19CD19、CD20CD20、CD21CD21、CD22CD22CD19CD19增高：增高：B B细胞系统恶性肿瘤细胞系统恶性肿瘤CD19CD19降低：体液免疫缺陷疾病降低：体液免疫缺陷疾病CD21CD21为为EBEB病毒和病毒和CD3CD3受体受体CD20CD20在在B B细胞激活后逐步降低细胞激活后逐步降低CD22CD22在在B B细胞激活时逐步增高细胞激活时逐步增高 SmIg BSmIg B细胞表面特异性标志细胞表面特异性标志SmIgSmIg增高：增高：B B细胞恶性增殖相关疾病，如慢淋、毛细胞白细胞恶性增殖相关疾病，如慢淋、毛细胞白血病、巨球蛋白血症。血病、巨球蛋白血症。Sm

12、IgSmIg降低：体液免疫缺陷相关疾病降低：体液免疫缺陷相关疾病CD4/CD8CD4/CD8测定临床意义测定临床意义nCD4/CD8CD4/CD8测定临床意义测定临床意义增高：多见于自身免疫性疾病，如类风关活动期、增高：多见于自身免疫性疾病，如类风关活动期、多发性硬化症、多发性硬化症、SLESLE、器官移植后排异反应、膜、器官移植后排异反应、膜性肾小球肾炎等性肾小球肾炎等降低：降低：AIDSAIDS、瘤型麻风病、恶性肿瘤发作期、传、瘤型麻风病、恶性肿瘤发作期、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染急性期、染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染急性期、血吸虫病等。血吸虫病等。淋巴细胞功能检测淋巴细胞功

13、能检测nT T淋巴细胞转化试验意义淋巴细胞转化试验意义细胞生物学功能的体外试验，应用于免疫缺陷、增强、细胞生物学功能的体外试验，应用于免疫缺陷、增强、移植等。实验要求较高。移植等。实验要求较高。转化率增高：转化率增高：DownDown氏综合症氏综合症转化率降低：细胞免疫功能低下或缺陷相关疾病转化率降低：细胞免疫功能低下或缺陷相关疾病nNKNK细胞活性测定意义细胞活性测定意义NKNK细胞无需抗原刺激可直接杀伤靶细胞，可释放细胞无需抗原刺激可直接杀伤靶细胞，可释放IFN-rIFN-r、TNF-BTNF-B和和GM-CSF,GM-CSF,在机体抗肿瘤和抗感染免疫中发挥重要在机体抗肿瘤和抗感染免疫中发

14、挥重要作用作用增高：感染早期，器官移植干扰素等免疫增强剂治疗增高：感染早期，器官移植干扰素等免疫增强剂治疗降低：恶性肿瘤，免疫缺陷疾病，使用免疫抑制剂。降低：恶性肿瘤，免疫缺陷疾病，使用免疫抑制剂。细胞因子检查细胞因子检查 细胞因子种类繁多，功能复细胞因子种类繁多，功能复杂，多种因子可具有相同功能，杂，多种因子可具有相同功能，各种细胞因子间可互相作用，细各种细胞因子间可互相作用，细胞因子功能同时受到细胞因子受胞因子功能同时受到细胞因子受体功能影响，因此在选择检测项体功能影响，因此在选择检测项目和结果分析时要综合考虑。目和结果分析时要综合考虑。肿瘤标志物的概念肿瘤标志物的概念n一般而言，一般而言

15、，TMTM是指存在于肿瘤细胞内或肿瘤细胞表达及脱是指存在于肿瘤细胞内或肿瘤细胞表达及脱落的物质，或是宿主对肿瘤反应而产生的物质。由于肿瘤落的物质，或是宿主对肿瘤反应而产生的物质。由于肿瘤发生、发展原因至今尚未完全解决，提示肿瘤的标志也并发生、发展原因至今尚未完全解决，提示肿瘤的标志也并未完全明确，所以肿瘤标志物概念还有待补充和修正。未完全明确，所以肿瘤标志物概念还有待补充和修正。nTumor markers are substances,usually proteins,Tumor markers are substances,usually proteins,that are produce

16、d by the body in response to that are produced by the body in response to cancer growth or by the cancer tissue itself.Some cancer growth or by the cancer tissue itself.Some tumor markers are specific,while others are seen tumor markers are specific,while others are seen in several cancer types.Many

17、 of the well-known in several cancer types.Many of the well-known markers are also seen in non-cancerous conditions.markers are also seen in non-cancerous conditions.Consequently,these tumor markers are not Consequently,these tumor markers are not diagnostic for cancer.diagnostic for cancer.第四节：肿瘤标志

18、物本质第四节：肿瘤标志物本质n广义上肿瘤标志物是指与肿瘤发生、发展、消亡相广义上肿瘤标志物是指与肿瘤发生、发展、消亡相关的各种物质。包含遗传物质（如致癌或抑癌基关的各种物质。包含遗传物质（如致癌或抑癌基因）、病毒（如因）、病毒（如EBV-IgAEBV-IgA与鼻咽癌与鼻咽癌)、酶（、酶（NSE)NSE)、激、激素（素（HCG)HCG)和临床应用广泛的一些肿瘤抗原（和临床应用广泛的一些肿瘤抗原（CEACEA、AFP)AFP)等。等。n肿瘤细胞本身产生的肿瘤标志物常分为两类：肿瘤细胞本身产生的肿瘤标志物常分为两类：1 1）当）当理化、病毒、遗传等因素引起正常细胞内基因突变理化、病毒、遗传等因素引起

19、正常细胞内基因突变而发生癌变时，癌变细胞内及表达在其表面的蛋白而发生癌变时，癌变细胞内及表达在其表面的蛋白质等成份发生某种变化，形成肿瘤抗原，这种抗原质等成份发生某种变化，形成肿瘤抗原，这种抗原可以表达在正常细胞，而肿瘤细胞表达高，也可因可以表达在正常细胞，而肿瘤细胞表达高，也可因肿瘤导致组织结构变化，肿瘤抗原进入血液，如肿瘤导致组织结构变化，肿瘤抗原进入血液，如PSA PSA；或仅在胚胎组织中表达，正常成人细胞中不；或仅在胚胎组织中表达，正常成人细胞中不表达，在发生肿瘤时又重新表达，如表达，在发生肿瘤时又重新表达，如AFPAFP、CEACEA。2 2）由肿瘤细胞产生的特殊抗原，这种抗）由肿瘤

20、细胞产生的特殊抗原，这种抗原在性质上与正常细胞所表达的抗原不同。原在性质上与正常细胞所表达的抗原不同。癌基因的发现证明正常细胞有癌基因存在，癌基因的发现证明正常细胞有癌基因存在，只是处于不表达状态，其一旦被激活，就只是处于不表达状态，其一旦被激活，就失去正常调控，使细胞发生癌变。而由于失去正常调控，使细胞发生癌变。而由于癌基因表达产物与肿瘤抗原的关系至今未癌基因表达产物与肿瘤抗原的关系至今未完全清楚，所以目前未发现很特异的肿瘤完全清楚，所以目前未发现很特异的肿瘤抗原（基因理论和动物实验得到证实）。抗原（基因理论和动物实验得到证实）。肿瘤标志物的分类肿瘤标志物的分类血清血清胚胎抗原胚胎抗原肿瘤相

21、关糖肿瘤相关糖脂及糖蛋白脂及糖蛋白激素肽、激素肽、酶、蛋白等酶、蛋白等 瘤标志物目前有瘤标志物目前有100100多种。尚未有统一全面的分多种。尚未有统一全面的分类标准。常分为血清类标准。常分为血清/血浆肿瘤标志物和组织肿瘤标志物。血浆肿瘤标志物和组织肿瘤标志物。组织组织分化标志分化标志转移潜转移潜在性标志在性标志癌基因及癌基因及抑癌基因抑癌基因增殖标志增殖标志理想肿瘤标志物的要求理想肿瘤标志物的要求TM特性要求特性要求与临床意义与临床意义灵敏灵敏含量与肿瘤含量与肿瘤病情相符病情相符部位特异部位特异肿瘤特异肿瘤特异早发现早发现早诊断早诊断判断复发判断复发区分良性与恶性区分良性与恶性鉴定肿瘤类型鉴

22、定肿瘤类型器官部位器官部位特异特异病程和病程和治疗观察治疗观察TMTM检测临床意义检测临床意义n辅助临床早发现、早诊断辅助临床早发现、早诊断n帮助区分区分良性与恶性肿瘤帮助区分区分良性与恶性肿瘤n协助临床肿瘤类型鉴定及肿瘤部位鉴别协助临床肿瘤类型鉴定及肿瘤部位鉴别n帮助临床对肿瘤病程判断帮助临床对肿瘤病程判断n治疗效果观察，提前判断复发治疗效果观察，提前判断复发几种肿瘤标志物检测意义几种肿瘤标志物检测意义几种肿瘤标志物检测意义几种肿瘤标志物检测意义肿瘤标志物的选择建议肿瘤标志物的选择建议同一肿瘤多种肿瘤标志物选择同一肿瘤多种肿瘤标志物选择1000255075100灵敏度%假阳性率（1-特异度）

23、%AFP检测CEA检测0255075无意义试验ROC曲线 人类具有完善的免疫系统，正常情况下，免疫人类具有完善的免疫系统，正常情况下，免疫系统具有识别自我与异己的功能，因而能够防御异系统具有识别自我与异己的功能，因而能够防御异物入侵，而对自身组织不产生或产生极微弱的免疫物入侵，而对自身组织不产生或产生极微弱的免疫应答反应，称自身耐受。一旦机体外部或内部因素应答反应，称自身耐受。一旦机体外部或内部因素发生改变，可使免疫耐受受到影响，导致免疫系统发生改变，可使免疫耐受受到影响，导致免疫系统对自身组织产生明显的免疫应答反应。如是低限度对自身组织产生明显的免疫应答反应。如是低限度和非持久性，一般影响不

24、大，高限度和持久存在则和非持久性，一般影响不大，高限度和持久存在则引起自身免疫性疾病。自身免疫性疾病血清学检测引起自身免疫性疾病。自身免疫性疾病血清学检测方法很多，特异性较差，动态检测可帮助临床对预方法很多，特异性较差，动态检测可帮助临床对预后及疗效观察。后及疗效观察。第五节第五节 自身抗体检测自身抗体检测荧光免疫技术荧光免疫技术n目前常用于免疫组化和自身抗体检测，特定可用目前常用于免疫组化和自身抗体检测，特定可用于定位。较多用于于定位。较多用于PCRPCR和流式细胞技术和流式细胞技术细胞核常见自身抗体检测及临床意义常见自身抗体检测及临床意义n 名称名称 临床意义临床意义n类风湿因子（类风湿因

25、子（RFRF）类风湿性关节炎及其它免疫性疾病）类风湿性关节炎及其它免疫性疾病n抗抗ds-DNAds-DNA抗体抗体 SLE SLE的较特异性抗体的较特异性抗体n抗抗SmithSmith抗体抗体 SLE SLE的较特异性抗体的较特异性抗体n抗组蛋白抗体抗组蛋白抗体 药物性狼疮及其它免疫性疾病药物性狼疮及其它免疫性疾病n抗核糖核蛋白抗体抗核糖核蛋白抗体 混合结缔组织病、混合结缔组织病、SLESLE等等n抗抗SS-ASS-A和和SS-BSS-B抗体抗体 干燥综合症、干燥综合症、SLESLE、RARA等等n抗抗Scl-70Scl-70抗体抗体 系统性硬化症等系统性硬化症等n抗线粒体抗体抗线粒体抗体 原

26、发性胆汁性肝硬化等原发性胆汁性肝硬化等常见自身抗体检测及临床意义常见自身抗体检测及临床意义n名称名称 临床意义临床意义nJo-1Jo-1抗体抗体 肌炎和间质性肺纤维化肌炎和间质性肺纤维化n抗中性粒细胞胞浆抗体抗中性粒细胞胞浆抗体 血管炎症、自身免疫血管炎症、自身免疫 性肝病等性肝病等n抗甲状腺球蛋白抗体抗甲状腺球蛋白抗体 乔本氏甲状腺炎等甲乔本氏甲状腺炎等甲 状腺疾病状腺疾病n抗血小板抗体抗血小板抗体 血小板减少症血小板减少症n抗平滑肌抗体抗平滑肌抗体 自身免疫性肝病自身免疫性肝病n抗精子抗体抗精子抗体 男子不育症男子不育症n抗心磷脂抗体抗心磷脂抗体 SLE SLE、RARA等疾病等疾病nHL

27、A-B27 HLA-B27 强直性脊椎炎等强直性脊椎炎等第六节第六节 感染免疫检查感染免疫检查n人体感染病原体后经过一段时间产生抗体人体感染病原体后经过一段时间产生抗体一般可持续数月或数年，因此抗体检测可一般可持续数月或数年，因此抗体检测可判断现症感染和既往感染情况判断现症感染和既往感染情况 风湿热是一种变态结缔组织疾病，常见有风湿风湿热是一种变态结缔组织疾病，常见有风湿性心脏病、风湿性关节炎等。风湿热常由性心脏病、风湿性关节炎等。风湿热常由A A 组溶血组溶血性链球菌引起，此菌可产生一种性链球菌引起，此菌可产生一种“O”“O”溶血素具有抗溶血素具有抗原性，原性，ASLOASLO就是检测机体产

28、生的抗溶血素就是检测机体产生的抗溶血素“O”“O”抗体。抗体。链球菌感染后抗链球菌感染后抗“O”O”的产生一般在一周左右，的产生一般在一周左右，4-64-6周达高峰。可见于风湿性心脏病、风湿性关节周达高峰。可见于风湿性心脏病、风湿性关节炎、急性肾小球肾炎、呼吸道感染等。炎、急性肾小球肾炎、呼吸道感染等。ASLOASLO动态检动态检测对病程及疗效观察意义较大，结合测对病程及疗效观察意义较大，结合CRPCRP和和ESRESR检测检测临床意义更大。临床意义更大。抗链球菌溶血素抗链球菌溶血素“O”“O”检测（检测（anti-streptolysin anti-streptolysin O ASLOO

29、ASLO）伤寒是由伤寒杆菌引起的急性肠道传染病。伤伤寒是由伤寒杆菌引起的急性肠道传染病。伤寒杆菌有两种抗原，即菌体抗原寒杆菌有两种抗原，即菌体抗原“O”“O”抗原和鞭毛抗原和鞭毛抗抗“H”“H”原。肥达氏反应就是检测由上述两种抗原原。肥达氏反应就是检测由上述两种抗原刺激机体产生的抗体。刺激机体产生的抗体。肥达氏反应用于辅助诊断伤寒和副伤寒感染，肥达氏反应用于辅助诊断伤寒和副伤寒感染，由于抗体产生需要一定时间，故第一周阳性率由于抗体产生需要一定时间，故第一周阳性率10%10%，第二周达第二周达60%-70%60%-70%，第四周达，第四周达90%90%。临床常以二次标。临床常以二次标本（早期和中

30、期或恢复期）的凝集效价变化来判断本（早期和中期或恢复期）的凝集效价变化来判断是否感染。伤寒病人的是否感染。伤寒病人的“O”“O”抗体较抗体较“H”“H”出现早，出现早，存在时间短，存在时间短，“H”“H”相反。预防接种可引起相反。预防接种可引起“H”“H”增增高，高，“O”“O”正常。正常。肥达氏试验肥达氏试验肥达氏试验肥达氏试验 结核分枝杆菌主要引起细胞免疫，结核分枝杆菌主要引起细胞免疫，但也可引起体液免疫产生特异性但也可引起体液免疫产生特异性IgGIgG抗抗体，临床常用体，临床常用ELISAELISA方法检测特异性方法检测特异性IgGIgG抗体，抗体，PCRPCR方法检测结核方法检测结核D

31、NADNA，但两，但两种方法均存在部分假阳性，样本找结种方法均存在部分假阳性，样本找结核杆菌方法最为经典。核杆菌方法最为经典。结核抗体和结核抗体和DNADNA检测检测幽门螺杆菌检测幽门螺杆菌检测n幽门螺杆菌（幽门螺杆菌（HpHp）感染是人类最常见的慢性感染）感染是人类最常见的慢性感染之一，与胃十二指肠等消化系统疾病密切相关。之一，与胃十二指肠等消化系统疾病密切相关。由于由于HPHP感染具较大危害性，故近几年感染具较大危害性，故近几年HPHP检测方法检测方法被高度重视，也取得飞速发展。目前诊断幽门螺被高度重视，也取得飞速发展。目前诊断幽门螺杆菌感染的方法很多，依据是否需做内窥镜检查杆菌感染的方法

32、很多，依据是否需做内窥镜检查分为侵入性和非侵入性两大类分为侵入性和非侵入性两大类 。侵入性常做尿。侵入性常做尿素酶试验。非侵入性试验除素酶试验。非侵入性试验除C C1313或或C C1414 呼气试验外，呼气试验外，目前血清学目前血清学HPHP是诊断现症感染较好方法，易于儿是诊断现症感染较好方法，易于儿童童HPHP感染检测和体检普查。感染检测和体检普查。梅毒血请学检测梅毒血请学检测 当机体感染梅毒螺旋体后，会产生二种抗体，当机体感染梅毒螺旋体后，会产生二种抗体，一种为抗类脂抗体，另一种为抗螺旋体抗原抗一种为抗类脂抗体，另一种为抗螺旋体抗原抗体，后者较前者特异性强。由于目前螺旋体体体，后者较前者

33、特异性强。由于目前螺旋体体外培养较难，故血清学检测是目前临床常用检外培养较难，故血清学检测是目前临床常用检查方法。常用方法有快速血浆素反应（查方法。常用方法有快速血浆素反应（RPRRPR）和梅毒螺旋体血凝试验（和梅毒螺旋体血凝试验（TPPATPPA），后者特异性），后者特异性高一般用于确定试验，高一般用于确定试验，RPRRPR一般作过筛试验和一般作过筛试验和既往感染标志。既往感染标志。TORCHTORCH感染免疫学检测感染免疫学检测n日本血吸虫抗体检测日本血吸虫抗体检测n机体感染血吸虫后可产生特异抗体，可作血清机体感染血吸虫后可产生特异抗体，可作血清IgGIgG、IgMIgM、IgEIgE检测

34、，帮助临床诊断和流行病检测，帮助临床诊断和流行病调查。调查。n常用方法：环卵沉淀试验，常用方法：环卵沉淀试验，ELISA ELISA法特异抗体法特异抗体检测检测n血吸虫感染早期引起肝、脾肿大，晚期发展为血吸虫感染早期引起肝、脾肿大，晚期发展为门脉高压、巨脾和腹水。门脉高压、巨脾和腹水。n简介囊虫抗体检测简介囊虫抗体检测 猪肉绦虫的幼虫寄生人体猪肉绦虫的幼虫寄生人体,机体产生特异抗体机体产生特异抗体.寄生虫感染免疫学检测寄生虫感染免疫学检测 CRP CRP是一种急性时相蛋白，由肝脏合成，能激活是一种急性时相蛋白，由肝脏合成，能激活补体促进细胞吞噬等免疫功能。近年来补体促进细胞吞噬等免疫功能。近年

35、来CRPCRP检测被广检测被广泛应用。泛应用。CRPCRP增高特点为：急性期增高明显，预后降低迅速，增高特点为：急性期增高明显，预后降低迅速，且受其它因素影响很小，特异性较差。且受其它因素影响很小，特异性较差。明显增高：急性细菌性感染、严重创伤、烧伤、大手明显增高：急性细菌性感染、严重创伤、烧伤、大手术、风湿病活动期等。术、风湿病活动期等。轻度增高：病毒感染、恶性肿瘤、心血管疾轻度增高：病毒感染、恶性肿瘤、心血管疾 病、肝炎、移植等。病、肝炎、移植等。冷球蛋白特征：冷球蛋白特征：3737C C溶解，温度降低凝固溶解，温度降低凝固 循环复合物检测：循环复合物检测：丙反应蛋白和冷球蛋白及循环复合物

36、检测丙反应蛋白和冷球蛋白及循环复合物检测艾滋病血清血检查艾滋病血清血检查 艾 滋 病 又 称 获 得 性 免 疫 缺 陷 综 合 症艾 滋 病 又 称 获 得 性 免 疫 缺 陷 综 合 症（acquired immunodeficiency syndrome ADISacquired immunodeficiency syndrome ADIS）机体感染艾滋病病毒后血清中产生抗体，实验室机体感染艾滋病病毒后血清中产生抗体，实验室一般首先用过筛试验进行检测，发现阳性再作确一般首先用过筛试验进行检测，发现阳性再作确诊试验。过筛试验常用酶免疫法，要求敏感性高，诊试验。过筛试验常用酶免疫法，要求敏感

37、性高，不能有假阴性，允许少量假阳性。确定试验一般不能有假阴性，允许少量假阳性。确定试验一般用蛋白印迹法，要求敏感性高、特异性高。遇到用蛋白印迹法，要求敏感性高、特异性高。遇到可疑标本，一般病人三月后复查可疑标本，一般病人三月后复查,我国感染我国感染HIVHIV较较多为多为 型。型。RNARNA检测用于检测病毒载量。检测用于检测病毒载量。HIVHIV与与CD4+TCD4+T细胞细胞n 移植免疫检查移植免疫检查 人类白细胞抗原（人类白细胞抗原（human leukocyte human leukocyte antigen,HLA)antigen,HLA)：由：由HLAHLA基因复合体所编码的产物。

38、基因复合体所编码的产物。目前已确定目前已确定HLAHLA复合体共有复合体共有372372个等位基因，每个个等位基因，每个基因编码一种特异性抗原，主要表达在细胞膜上，基因编码一种特异性抗原，主要表达在细胞膜上，也有以游离状态存在于血液和其它体液中。也有以游离状态存在于血液和其它体液中。HLA HLA可分为可分为类抗原和类抗原和类抗原。类抗原。类抗原存在于所类抗原存在于所有有核细胞膜上，淋巴细胞密度最高，是组织排有有核细胞膜上，淋巴细胞密度最高，是组织排斥反应的主要抗原。斥反应的主要抗原。类抗原主要存在于类抗原主要存在于B B细胞细胞和巨噬细胞及其他抗原提呈细胞膜上，与免疫应和巨噬细胞及其他抗原提

39、呈细胞膜上，与免疫应答和免疫调节有关。答和免疫调节有关。PCRPCR方法方法HLAHLA配型配型 由于免疫学组织配型存在：由于免疫学组织配型存在：1 1）分型用抗）分型用抗血清来源困难血清来源困难 2 2）受检者标本必须为新鲜活）受检者标本必须为新鲜活淋巴细胞淋巴细胞 3 3）实验干扰因素多，实验误差大，）实验干扰因素多，实验误差大，目前已较少应用。而目前已较少应用。而PCRPCR基因分析方法目前有基因分析方法目前有标准商品试剂提供，实验误差小，简单快捷，标准商品试剂提供，实验误差小，简单快捷，易于标准化。供体和受体之间易于标准化。供体和受体之间HLAHLA位点不同易位点不同易导致急性排斥反应

40、，碱基顺序导致急性排斥反应，碱基顺序1 1个或多个不同个或多个不同易导致慢性排斥反应或急性排斥反应易导致慢性排斥反应或急性排斥反应特定细胞群反应抗体检测特定细胞群反应抗体检测n特定细胞群反应抗体检测（特定细胞群反应抗体检测（PRA)PRA)是将多种是将多种已知抗原淋巴细胞与患者血清和补体共同已知抗原淋巴细胞与患者血清和补体共同孵育，如血清中存在与淋巴细胞表面抗原孵育，如血清中存在与淋巴细胞表面抗原结合的抗体，在补体存在情况下，细胞会结合的抗体，在补体存在情况下，细胞会发生溶解。从而判断患者的免疫状态和发生溶解。从而判断患者的免疫状态和HLAHLA抗体的特异性。结果以抗体的特异性。结果以PRAPRA值表示，值表示，PRA50%PRA50%提示不宜作移植。提示不宜作移植。注意免疫学检查特殊性注意免疫学检查特殊性关注免疫学检查的发展关注免疫学检查的发展 2007.11 2007.11