形态实验法医学血痕检验课件.ppt

1、血痕检验血痕检验n是否是血n是否人血n遗传标记，个人识别n其他出血量、出血时间、部位肉眼检查n部位：室内、室外；受害者、嫌疑人n颜色：干燥程度和颜色-推测时日n形状：滴状、流柱状、喷溅状、擦拭状、血印痕、血泊、血水、其他n范围：出血量n预实验筛除灵敏高 联苯胺试验n确证实验证明灵敏度低 血色原结晶试验高山结晶试验n种属鉴定 免疫学方法/分子生物学方法联苯胺试验n原理：血中过氧化物酶活性物质可使H2O2释放活性氧，将试剂氧化显色n操作：针尖大小检材n 顺序滴加试剂n 冰醋酸联苯胺-H2O2n注意：微量、致癌，结果判断血色原结晶试验高山结晶试验n原理：n血红蛋白在碱性条件分解成正铁血红素和变性珠蛋

2、白，n经还原剂作用与含氮化合物结合，n生成血色原结晶n呈樱红色、针状或菊花状血色原结晶试验高山结晶试验n操作：n血痕纤维0.30.4cm，一端稍分离n加高山试剂n加热n镜检n注意：加热方法、结果判断种属鉴定n原理：特异性抗体与可溶性抗原相遇，当比例适当，可产生抗原抗体复合物，在两液界面出现白色沉淀n个人识别遗传标记检验n血型n酶型nDNA多态分析n性别鉴定血型测定ABO系统n有血型抗原，又有天然抗体n试剂易得，方法简单n分布广泛n抗原可保存数十年，抗体可保存数周至数月凝集素测定玻片法n原理：n血痕经浸泡，干燥的凝集素溶出n遇相应指示红细胞，出现凝集。n判断被检血痕中有相应凝集原凝集素测定玻片法

3、n操作：n22mm血痕三块分别放置于标记A、B、O的载玻片上n加相应型0.10.2%红细胞n保湿盒内，每十分钟镜检n注意：凝集素是免疫球蛋白易破坏；结果判断凝集原测定吸收法n原理：n血痕中的血型物质可与相应抗血清中的凝集素特异结合（吸收），使之效价显著降低甚至消失n遇指示红细胞，凝集力明显减弱或不凝n表明血痕含有相应的凝集原凝集原测定吸收法n操作：n取血痕11cm两份置于两个标记好的试管中n分别滴加抗A、抗B血清46滴，震荡混合、充分浸透n37度水浴30分钟凝集原测定吸收法n准备两列试管，分别标记好n分别取上清液两滴，加入两个试管中，n分别用生理盐水稀释成1:2,1:16n每个试管中加入相应的2%指示红细胞一滴n1500转/分，离心30秒n肉眼观察凝集情况凝集原测定吸收法n注意：必须做已知和空白对照 抗体效价下降越显著，表明血痕中含相应凝集原的证据越充分n判断标准：对照正确，血痕与血清的凝集程度比原效价相差三级或以上，说明备件血痕中有相应凝集原血痕的DNA多态分析