实验专题复习(物质的提取分离鉴定)课件.ppt

1、教材基本实验（二）教材基本实验（二）二、物质的提取、分离及鉴定二、物质的提取、分离及鉴定 2022-10-261、生物体内物质的提取2022-10-26he2生物组织中还原性糖、蛋白质的鉴定叶绿体色素的提取、分离DNA的粗提取和鉴定如何选材？提取的方法？鉴定原理？实验现象？总结：物质的提取、分离和鉴定实验总结：物质的提取、分离和鉴定实验选材选材破碎细胞破碎细胞组织样液组织样液提纯或提纯或分离分离鉴定鉴定物质含量高物质含量高避免材料本避免材料本身颜色干扰身颜色干扰过滤或离心过滤或离心 层析层析 盐析盐析 萃取萃取溶解度差异溶解度差异 试剂试剂反应条件反应条件 现象现象研磨研磨渗透渗透加洗涤剂加洗

2、涤剂榨汁榨汁2、化合物的分离（1 1）纸层析法）纸层析法溶解度大小溶解度大小（2）盐析例如：蛋白质的析出（3）萃取不同溶剂中溶解度不同（4）离心分子大小（质量不同）（5）电荷电泳？2022-10-26he42022-10-26he5胡萝卜素（橙黄色）叶黄素（黄色）叶绿素a（蓝绿色）叶绿素b（黄绿色）3、化合物的鉴定2022-10-26he8（NHNH2 2-CO-NH-CO-NH-CO-NH-CO-NH2 2 ）（双缩脲）（双缩脲）NHHCONHCONHHNHHCONHH+NHHCONHH（NH3）DNADNA粗提取和鉴定实验粗提取和鉴定实验鸡全血破碎细胞蓝色析出DNA粘稠物析出DNA丝状物溶

3、解、鉴定鸡血细胞液静置或离心加蒸馏水、搅拌细胞核物质过滤溶解核物质2mol/LNaCI加蒸馏水溶解DNA粘稠物2mol/LNaCI破碎细胞，获得匀浆香蕉或菜花研磨SDS：破坏细胞膜 使蛋白质变性EDTA:保护DNA1.5mol/LNaCI：溶解DNA滤液：含DNA过滤、离心冷酒精NaCI、二苯胺三、调查与模拟实验三、调查与模拟实验教材基本实验（三）教材基本实验（三）1、遗传学调查群体调查、家系分析注意：（1）调查时，除了记录人群中 的发病率还要记录不同性别人群的发病率；（2）要随机取样，所调查群体要足够大；（3）在群体调查的基础上，还需要在取得患者同意后，进行家系调查，以了解遗传病的类型。调查

4、目的、对象、方法、注意事项、结果或数据的处理和分析（10海南卷）某城市兔唇畸形新生儿出生率明显高于其他城市，研究这种现象是否由遗传因素引起方法不包括 A.对正常个体与畸形个体进行基因组比较研究 B.对该城市出生的双胞胎进行相关的调查统计分析 C.对该城市出生的兔唇畸形患者的血型进行调查统计分析 D.对兔唇畸形患者家系进行调查统计分析答案C调查目的：兔唇畸形新生儿出生率明显高于其他城市的原因是 遗传因素还是环境因素A分子水平分析遗传物质的不同；B遗传物质相同的情况下考查环境因素的影响；D家系分析，寻找遗传规律人类遗传病的研究方法1、家谱法也称家系分析法2、双生儿法探讨遗传和环境对个体表型 的影响

5、3、数理统计方法2、生态学调查种群层次种群密度 样方法、标志重捕法群落层次丰富度和优势种生态系统层次（10海南卷）某同学拟调查一个面积为100 hm2草地上某种双子叶草本植物的种群密度，设计了四个调查方案，其中最可行的是A计数该草地上该种植物的全部个体数目B设置1个1 m2样方，计数样方中该种植物的个体数目C随机设置1 m2样方若干，计数每个样方中该种植物的个体数目D在该种植物密集处设置1m2样方若干，计数每个样方中该种植物的个体数目植物种群密度调查方法样方法注意事项：随机取样、多个样本、平均值答案：C（10江苏）科研人员对江苏某地沿海滩涂米草群落和裸露泥滩的大型底栖（土壤）动物丰富度进行了对

6、比研究。在相同取样条件下，利用一种常用底泥采样器（50cm 50cm 30cm）采得各动物类群的物种数和个体总数如下表。下列有关本研究的叙述，正确的有招潮蟹类招潮蟹类厚蟹类厚蟹类沙蚕类沙蚕类泥螺类泥螺类蛤类蛤类物种物种数数个体个体总数总数物种物种数数个体个体总数总数物种物种数数个体个体总数总数物种物种数数个体个体总数总数物种物种数数个体个体总数总数裸露泥滩裸露泥滩518114212110214米草群落米草群落312290011000A裸露泥滩的大型底栖动物物种丰富度高于米草群落B米草群落的大型底栖动物种群密度高于裸露泥滩C改用另一规格的常用底泥采样器会影响对比研究的结论D改变采样的时间会影响采

7、集到的物种数和个体总数116答案：AD3、模拟实验斐林试剂斐林试剂检测还原糖检测还原糖斐林试剂：0.1g/ml的NaOH（甲）2ml和0.05g/ml的CuSO4（乙）4滴混合，生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。反应：CH2OH-(CHOH)4-CHO+2Cu(OH)2 CH2OH-(CHOH)4-COOH +Cu2O+2H2O颜色变化：浅蓝色砖红色检测方法：现配斐林试剂，取葡萄糖溶液加入斐林试剂，加热煮沸2022-10-26221本尼迪特（BENEDICT）试剂 配制：173克柠檬酸钠和100克无水碳酸钠溶解于800毫升水中。再取17.3克结晶硫酸铜溶解在100毫升水中，慢慢将此溶液加入上述溶

8、液中，最后用水稀释到1升，当溶液不澄清时可过滤之。2022-10-26231反应原理与斐林试剂略有差别。利用斐林试剂鉴定时，斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应生成Cu（OH）2，Cu（OH）2和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。本尼迪特试剂中Cu（OH）2的产生却是这样的：柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐，在水中它们均可水解产生OH-，当柠檬酸钠-碳酸钠溶液和CuSO4溶液混合时，Cu2+和OH-结合，生成Cu（OH）2，Cu（OH）2与葡萄糖中的醛基反应生成砖红色沉淀。2022-10-26241双缩脲试剂检测蛋白质双缩脲试剂：0.1g/ml的NaOH（甲），0.01g/ml的CuSO4（乙）双缩脲反

9、应：H2NOC-NH-CONH2能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因而能与双缩脲试剂发生颜色反应检测方法：取蛋清溶液依次加入2mlNaOH和4滴CuSO42022-10-26251苏丹和染液脂肪的检测苏丹红即苏丹染液，为一种工业染料，具有致癌作用。苏丹染料还有、和名称的由来与“苏丹”国没有直接关系，推测是100多年前科学家发明时，联想到苏丹人常喝的一种的红色天然植物饮料而得名。苏丹染液为亲脂性化合物。苏丹和能溶解于脂肪，与脂肪反应呈现橘黄色检测方法：一、在样液中滴加3滴苏丹；二、对切片染色，用显微镜观察。本实验用方法二检测，涉及徒手切片、临时装片制作、显微镜使用等技术2022-10-26261