染色体工程与植物育种课件精美版.ppt
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1、陈佩度陈佩度本课教材编者本课教材编者AABBDDRR八倍体小黑麦二、染色体组的消减:即单倍体产生和二倍体化细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)3、无同源染色体组物种间的遗传操纵(3)在基因定位、研究基因效应、基因互作方面有特殊优越性(特别是整套代换系)3、同源异源多倍体(如AAAAGG)是介于同源多倍体和异源多倍体之间的过渡类型。将3个关键序列用分子生物学方法拼接起来就得到人造微小染色体(artificial minichromosome),在大片段DNA分子的克隆、基因组分析、基因功能鉴定、基因治疗以及研究染色体结构与功能关系等研究中得到了
2、广泛的应用,具有极为重要的价值。胞或染色体,使其受热蒸发,最后只留下目的染色体。3、三倍体无子西瓜是怎么形成的?第五节 染色体微切割和人工染色体(2)加速纯系的获得,尤其对于玉米等异花授粉作物杂种优势利用来说具有特别重要意义。生化标记(同工酶和蛋白质)、因缺体的生活力较弱,占很少一部分几乎全部为显性性状三、染色体组的添加异源多倍体、同源多倍体等(1)在远缘杂交的回交、自交过程中自发产生指在显微镜下利用特种工具对某个特定的染色体片断切割加工。染色体上DNA的碱基序列是不同的,因此这些特异性染料和不同染色体上DNA结合的量和比例是不同的。P a突变纯合二体(n-1)aa+三体(n-1)AA+其它药
3、物:N2O 和聚乙二醇等。染色体组和部分同源群染色体组和部分同源群而上述这些人工染色体都是针对基因克隆存在的一些问题而设计的。染色体计数:是鉴定多倍性的一个准确的直接方法。生化分析:如在关东系银鲫中,三倍体红血球的丙酮酸激酶的含量含著高于二倍体。典型的例子是普通小麦和小黑麦(2)用作品种改良的亲本:指携有亲缘物种有用基因的易位系,如小麦簇毛麦6Vs/6AL易位系。(2)加速纯系的获得,尤其对于玉米等异花授粉作物杂种优势利用来说具有特别重要意义。第三节 染色体水平的细胞遗传学操纵(4)利用单倍体进行突变体的选择,由于单倍体没有显隐性关系,所以无论是培养过程中引起的体细胞变异还是在人工诱导产生的突
4、变体,特别是隐性突变体,均可以有效地表现出来。此法廉价、易操作,是诱导动物细胞多倍体化的常用手段,也有利于养殖场大规模生产使用。典型例子:三倍体无籽西瓜染色体要确保在细胞分裂中保持稳定,必须要能够自我复制和向子细胞中平均分配。(n-1)AA+(n-1)Aa+(n-1)aa+(2)在选育异附加系过程中,由于产生n-1+1配子而产生染色体要确保在细胞分裂中保持稳定,必须要能够自我复制和向子细胞中平均分配。(2)转移有利基因的同时不可避免地带入不利基因。特点:无同源性,有性杂交极其困难,或至今得不到有性杂种。染色体计数:是鉴定多倍性的一个准确的直接方法。(五)利用着丝粒融合诱发易位,以及利用“染色体
5、组重建”基因诱发易位三倍体香鱼对声音和光线的感受能力比二倍体香鱼略显迟钝,适于在噪音较大的环境中放养。狭义:指人工分离染色体或染色体片段,导入受体原生质体,再经过原生质体培养再生细胞壁、愈伤组织,直至再生出完整植株的过程。(n-1)2、单倍体在育种上的优势和不足分别是什么?2、染色体操纵:整条染色体的附加、消除、代换,导入的染色体要有完整的着丝粒和端粒,以保持其结构稳定性和进行正常的复制分裂。F1 (n-1)Aa+由外源染色体代换受体品种染色体的个体称异代换系。(*不育,不结籽,在外界花粉刺激下可结实)是基于大肠杆菌的 F 质粒构建的,高通量低拷贝的质粒载体。三体在育种实践上最成功的实例是大麦
6、核不育系的杂交2、含有部分同源染色体组物种间的遗传操纵染色体上DNA的碱基序列是不同的,因此这些特异性染料和不同染色体上DNA结合的量和比例是不同的。1、单倍体:含有配子染色体数目的孢子体。抗大麦黄矮病毒的RAPD特异带(五)利用着丝粒融合诱发易位,以及利用“染色体组重建”基因诱发易位要进行染色体微切割,首先要对染色体进行识别鉴定。通过花粉培养可得到类型丰富的花粉植株,这些植株在遗传育种中具有重要的研究利用价值。DNA含量测定法是较为先进常用的方法,其测定快速准确,并能测出嵌合体,但需要特殊的仪器设备。生化分析:如在关东系银鲫中,三倍体红血球的丙酮酸激酶的含量含著高于二倍体。染色体要确保在细胞
7、分裂中保持稳定,必须要能够自我复制和向子细胞中平均分配。染色体工程在培育抗病新品种上有重要意义,而且是基因定位和染色体转移等基础研究的有效手段。(1)在远缘杂交的回交、自交过程中自发产生多倍体动物的其它经济性状又由于目标染色体片断DNA的量很少,或者由于目标基因大多数为单拷贝或寡拷贝,因此,常要借助PCR技术。陆地棉三体PMC:25+3例如,已知某植物的某对性状是由A和a一对基因控制的,而且已获得该植物的所有单体或缺体,用单体法或缺体法确定A(a)基因所在的染色体。一粒小麦(一粒小麦(AA)2n14?(?(BB)AB染色体自然加倍染色体自然加倍二粒小麦(二粒小麦(AABB)2n28 节节麦(节
8、节麦(DD)2n14ABD染色体自然加倍染色体自然加倍普通小麦(普通小麦(AABBDD)2n42普通小麦普通小麦AABBDD黑麦黑麦RR ABDR(不育)(不育)染色体加倍染色体加倍 AABBDDRR八倍体小黑麦八倍体小黑麦 染色体计数:是鉴定多倍性的一个准确的直接方法。一粒小麦(AA)2n14?(BB)为此,在应用染色体工程方法开展植物育种时应注意几个方面:第一节 染色体工程的一般概念和主要内容原位杂交等方法鉴定异附加系。染色体计数:是鉴定多倍性的一个准确的直接方法。温度休克法:包括冷休克法和热休克法两种,即用略高于或略低于致死温度的冷或热休克来诱导三倍体或四倍体的方法。2、单倍体在育种上的
9、优势和不足分别是什么?(二)用细胞、组织培养诱导染色体易位,原因可能与培养基中的某些成分和培养过程中的理化因素刺激有关,因此,组织培养结合理化诱变可大大提高变异体的频率,其中将会有不少易位。(1)在远缘杂交的回交、自交过程中自发产生策略:通过回交,育成异附加系或异代换系;3、染色体片段操纵:指染色体片段的转移易位、添加或消除。一粒小麦(AA)2n14?(BB)F2 (n-1)+aa单体异附加系添加了1条外源染色体的个体;此种方法诱导率高(90%100%)、处理时间短(35min),对受精卵损伤小、成活率高。若待测基因A在缺体染色体上,则:(1)整倍体单倍体:一倍体、多倍单倍体(同源多倍单倍体、
10、异源多倍单倍体)由于多倍体动物具有生长速度快,成活率高及抗病能力强等特点,所以人工诱导多倍体、改善动物经济性状倍受重视二、人工染色体构建的依据多倍体动物的其它经济性状若待测基因在某单体染色体上时,则AA基因型二体(2n)与a基因型的该染色体单体(2n-1)杂交后,F2代的分离情况为:硬粒小麦(硬粒小麦(AABB)黑麦()黑麦(RR)ABR(不育)(不育)染色体加倍染色体加倍 AABBRR(六倍体小黑麦)(六倍体小黑麦)二倍体西瓜(二倍体西瓜(BB 2n2x22)0.2%秋水仙素处理生长点秋水仙素处理生长点 四倍体西瓜(四倍体西瓜(BBBB)二倍体西瓜二倍体西瓜 三倍体西瓜(三倍体西瓜(BBB)
11、(*不育,不结籽,不育,不结籽,在外界花粉刺激下可结实在外界花粉刺激下可结实)3、染色体片段操纵:指染色体片段的转移易位、添加或消除。(2)在选育异附加系过程中,由于产生n-1+1配子而产生细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)在减数分裂时,两个非同源的单价染色体同时发生错分裂,产生端着丝粒染色体。(n-1)AA+(n-1)Aa+(n-1)aa+(*不育,不结籽,在外界花粉刺激下可结实)三倍体西瓜(BBB)还有研究认为小麦农林26的3B染色体上带有抑制杀配子效应的基因Igcl,该基因和杀配子基因(3S、3C染色体上)互作,产生染色体断裂、重接,
12、并可诱导易位。我国自80年代开始进行染色体工程育种研究,经过“六五”和“七五”协作攻关,在小麦染色体工程育种方面有较大进展,创制了小麦与黑麦(Secale cereals)、山羊草(Aegilops tauschii)、簇毛麦(Haynaldia villosa)、大麦(Hodeum vulgare)、类麦(Thinopyrum)等近缘种、属的双二倍体,转育了不同生态型的小麦单体系统和缺体系统,选育出了多种异附加系、异代换系和易位系。广义的还应包括应用细胞遗传学技术通过有性杂交和回交、细胞组织培养和体细胞杂交等方法,按预定目标有计划有步骤地转移染色体组、染色体或染色体片段。生化标记(同工酶和蛋
13、白质)、1992),一个易于 DNA 复制的由 ATP 驱动的解旋酶(RepE)以及三个确保低拷贝质粒精确分配至子代细胞的基因座(parA,parB,和 parC)。F2 (n-1)+aaG (n-1)+a (n-1)(n-1)+A可自然加倍,但频率很低,一般需要人工加倍。是基于大肠杆菌的 F 质粒构建的,高通量低拷贝的质粒载体。单体异附加系添加了1条外源染色体的个体;策略:通过回交,育成异附加系或异代换系;(*不育,不结籽,在外界花粉刺激下可结实)DNA含量测定法是较为先进常用的方法,其测定快速准确,并能测出嵌合体,但需要特殊的仪器设备。如三倍体甜菜、橡胶、香蕉、西瓜、草莓等。诱导率、成活率
14、及孵化率的提高;以小偃以小偃6号号1D单体(含单体(含1415)作为受体与含有)作为受体与含有510优质亚优质亚基的品种杂交,进行优质亚基聚合的染色体工程法。基的品种杂交,进行优质亚基聚合的染色体工程法。2D单体小麦与遗单体小麦与遗4212杂交杂交F1出现的单价体出现的单价体F1 (n-1)+a 全部为a表现型的单体2、染色体操纵:整条染色体的附加、消除、代换,导入的染色体要有完整的着丝粒和端粒,以保持其结构稳定性和进行正常的复制分裂。(1)在远缘杂交的回交、自交过程中自发产生为此,在应用染色体工程方法开展植物育种时应注意几个方面:(2)异附加系的鉴定:簇毛麦6VS端体:a,T240-6-1(
15、2n=41+t);b,T240-6-1(2n=41+2t)生化标记(同工酶和蛋白质)、第六节 染色体工程和作物育种温度休克法:包括冷休克法和热休克法两种,即用略高于或略低于致死温度的冷或热休克来诱导三倍体或四倍体的方法。F2 (n-1)AA+(n-1)Aa+(n-1)aa+多倍体动物的性腺发育及其应用5,二倍体与四倍体的核体积之比为1:1.(一)目标性状:是欠缺的或急需的,最好是单基因或寡基因控制;4D缺体小麦PMC减数分裂MI 2n=20因此,又有人构建了双元细菌人工染色体(BIBAC)和可能转化人工染色体(TAC)。DNA含量测定法是较为先进常用的方法,其测定快速准确,并能测出嵌合体,但需
16、要特殊的仪器设备。此种方法诱导率高(90%100%)、处理时间短(35min),对受精卵损伤小、成活率高。如果去掉的是两条非同源染色体则称为双单体(2n-1-1)。(n-1)3、染色体片段操纵:指染色体片段的转移易位、添加或消除。细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)激光共聚焦扫描显微系统,依靠高能量激光照射非选择细箭头示双单体箭头示双单体4D缺体小麦缺体小麦PMC减数分裂减数分裂MI 2n=20八倍体小堰麦八倍体小堰麦PMC减数分裂减数分裂MI 2n=28杂种杂种F1根尖染色根尖染色体体 2n=48簇毛麦簇毛麦6VS端体:端体:a,T240-
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