急性毒性及其评价方法课件.ppt
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- 急性 毒性 及其 评价 方法 课件
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1、 急性毒性及其评价方法Acute Toxicity Testing急性毒性及其评价方法一、急性毒性的概念 急性毒性:是指机体(人或实验动物)一次或24小时内多次接触外源化学物后在短期内所产生的毒性效应。包括外观改变、大体形态变化、行为方式及死亡效应,最主要观察指标是LD50 急性毒性及其评价方法实验动物接触化学物的方式或途径不同,“一次”的含义也有所不同经口和注射接触,“一次”是指在瞬间将受试化学物输入实验动物体内 经呼吸道吸入与经皮肤接触,“一次”是指在一个特定的期间内实验动物持续地接触受试化学物的过程 急性毒性及其评价方法二、急性毒性试验的目的 1.测试和求出受试化学物的致死剂量(通常以L
2、D 50 为主要参数),并对该外源化学物进行急性毒性分级 2.通过观察动物中毒作用表现、毒作用强 度和死亡情况,初步评价毒物对机体的毒效应特征、靶器官、剂量反应关系和对人体产生损害的危险性 急性毒性及其评价方法 3.为亚慢性及慢性毒性试验研究以及其他 毒理试验提供接触剂量和观察指标选择的依据 4.为毒作用机理研究提供线索,了解中毒 效应的特征(包括症状,生理、生化与组织病理损伤)5.研究化学物急性中毒诊断、预防和急救 治疗措施急性毒性及其评价方法三、急性毒性试验方法的要点(一)实验动物选择 选择实验动物的原则:尽量选择急性毒性反应与人近似的动物 易于饲养,试验动物操作方便 繁殖生育力较强,数量
3、较大能够保障供应 价格较低,易于获得动物 常用实验动物为大白鼠和小白鼠急性毒性及其评价方法急性毒性及其评价方法性别 急性毒性试验所用的动物应当是雌、雄各半 如果在研究中发现待测化学物对雌、雄动物的毒性大小有明显差异时,应分别求出雌性与雄性动物各自的LD 50 值 如果试验是为致畸试验作剂量准备,也可仅做雌性动物的LD 50 试验急性毒性及其评价方法实验动物分组和数量 在利用不同的方法测定化学物LD 50 时,实验设计中对动物数的要求不同 霍恩氏法测 LD 50 时要求有 4个剂量组,每组4或 5只动物 改进寇氏法、概率单位法、Bliss法测定则要求57个 剂量组,每组10只动物或10只以上对于
4、不同的化学物测定应根据其相应的试验规程确定实验动物数量急性毒性及其评价方法动物分组的原则:均衡性和随机性 均衡性:要求各组动物的平均体重及体重的离散度尽可能一致。具体来说是:(1)实验动物的体重不应超过全体实验动物平均体重的10-控制离散度(2)每组之间的平均体重相差不应超过 5 -控制均衡性随机性:每只动物分散到各组去的机会是均等的,以避免成见或系统误差急性毒性及其评价方法实验动物的预处理 适应性饲养一周,选择生理健康的动物 凡经口染毒时,要求试验前要对动物禁食,以保证胃内无食物,减少食物对化学物毒性的干扰 大鼠、小鼠大鼠、小鼠隔夜进食;染毒后禁食隔夜进食;染毒后禁食4h4h 大动物大动物每
5、日上午喂食前染毒每日上午喂食前染毒 染毒后继续禁食染毒后继续禁食24h24h,但在禁食时要保障饮水,但在禁食时要保障饮水急性毒性及其评价方法(二)受试物及处理 受试物的接受、分样、保管、称重、配制 以及在此过程中严格的质量保证影响急性 毒性试验 受试物剂型:水溶液、混悬液、油溶液急性毒性及其评价方法(三)染毒方法1.经口(胃肠道)染毒:(1)灌胃:空腹 灌胃后2-3 h复食 灌胃的体积不超过体重的1-2:小鼠为 0.21.0ml/只或0.10.5ml/10g较合适 大鼠为5ml/只(通常用0.51.0ml/100g)家兔为10ml/2kg体重,狗不超过50ml/10kg 急性毒性及其评价方法灌
6、胃器具制作灌胃器具制作 取l2号普通注射针头,首先将针头尖部去掉,然后用细锉刀把去掉部分锉平、锉光,再用沙纸磨光滑,有条件时可在针尖处点焊成球型。加工成有20度弧度的灌胃针,连接1ml或5ml的注射器,即成为大小鼠的灌胃器。急性毒性及其评价方法灌胃操作方法灌胃操作方法 先固定动物,即用右手将小鼠尾巴提起,置于鼠笼或粗糙的平面上,当小鼠向前挣扎时,用左手的拇指和食指捏住小鼠两耳后颈背皮肤,翻转小鼠置于掌心,拉直后肢,以小指压住小鼠尾巴即可。在固定小鼠过程中,不要用力过大,勿握其颈部,以免窒息死亡。以灌胃器轻轻压其头部,使口腔与食道成一条直线,再将灌胃针沿上腭壁轻轻进入食道,当灌胃针进入约3cm左
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