丙肝实验室检测课件.ppt

1、丙型肝炎实验室丙型肝炎实验室检测策略检测策略1 病原学病原学n病原病原丙型肝炎病毒（丙型肝炎病毒（HCV）2HCV 的特性的特性n黄病毒科黄病毒科n有包膜有包膜n单股正链单股正链 RNA 病毒病毒(9.6 kb)n3000 氨基酸组成的多聚蛋白氨基酸组成的多聚蛋白n 病毒基因组具有高度变异性病毒基因组具有高度变异性n增殖速度快，每日复制量：增殖速度快，每日复制量：10 兆兆(1012)病毒病毒颗粒颗粒34结合结合囊泡融合与病毒释放囊泡融合与病毒释放RNA 复制复制正链正链负链负链翻译与多肽链加工翻译与多肽链加工脱壳脱壳与膜融合与膜融合病毒装配与成熟病毒装配与成熟胞饮作用胞饮作用HCV 生活周期

2、生活周期Davis GL et al.Semin Liver Dis.1999;19(suppl 1):103-112.5 HCV、HIV的比较的比较HCVHIV病毒类型病毒类型RNA病毒病毒（黄病毒科）（黄病毒科）RNA病毒病毒（逆转录病毒科）（逆转录病毒科）血液传播血液传播血液水平传播为主血液水平传播为主,输血制输血制品、静脉吸毒、不洁注射、品、静脉吸毒、不洁注射、性乱、纹身美容等性乱、纹身美容等血液水平传播为主血液水平传播为主性乱、输血制品、静性乱、输血制品、静脉吸毒、不洁注射、脉吸毒、不洁注射、母婴传播母婴传播少见少见可见可见抗体抗体无保护作用无保护作用无保护作用无保护作用预防预防目前

3、无疫苗目前无疫苗目前无疫苗目前无疫苗6 HBVn双链双链 DNA 病毒病毒n嗜肝嗜肝 DNA 病毒科病毒科n4 个开放读框个开放读框 n高病毒血症高病毒血症n高感染性高感染性 n与宿主基因整合与宿主基因整合n无细胞毒性无细胞毒性 HCVn单链单链 RNA 病毒病毒n黄病毒科黄病毒科n1 个开放读框个开放读框 n低病毒血症低病毒血症n低感染性低感染性 n不与宿主基因整合不与宿主基因整合n细胞毒性细胞毒性(?)7HCV基因型n分为6个主要基因型及不同亚型n命名：以阿拉伯数字表示HCV的基因型，以小写的英文字母表示亚型（如1a、2b）n基因1-3型呈全球性分布n欧美和亚洲1和2型为主，东南亚为3型，

4、中东为4型，南非5和6型为主n我国以1b、2a型为主891a,1b 2a,2b,3a1a,1b 2a,2b,2c,3a45a1b1b,61b,3a1b,3a3b4Clinical Microbiology Reviews,2000,13(2)223-2351a,1b,2b,3a2a10 HCV 感染的自然史感染的自然史11HCV HCV 感染的自然史感染的自然史12 HCV急性感染痊愈的血清学特征急性感染痊愈的血清学特征13HCVHCV急性感染急性感染进展为进展为慢性感染的血清学特征慢性感染的血清学特征14HCV实验室检测技术规范实验室检测技术规范n第一章 丙型肝炎病毒 n第二章 丙型肝炎病毒

5、抗体检测 n第三章 丙型肝炎病毒抗原检测 n第四章 丙型肝炎病毒核酸检测 n第五章 丙型肝炎病毒基因型检测 n第六章 丙型肝炎病毒细胞培养 n第七章 实验样品的采集、保存、运输 n第八章 丙型肝炎病毒检测实验室的室内质量控制及能力验证 n第九章 实验室生物安全 15丙型肝炎病毒抗体检测 n筛查试验：酶联免疫吸附试验、胶体金法快速试验、化学发光试验、免疫荧光试验 n补充试验:重组免疫印迹（RIBA)蛋白印迹试验16丙型肝炎病毒抗原检测 n目前采用双抗体夹心ELISAn定性或定量检测样品中游离的HCV核心抗原或总核心抗原17丙型肝炎病毒核酸检测 nHCV RNA定性检测：血液筛查、发现窗口期感染n

6、HCV RNA定量检测：判断抗病毒治疗疗效n实时荧光定量PCR、b-DNA技术 18 丙型肝炎病毒检测策略 n诊断：确定个体HCV感染状况 n血液筛查：防止输血传播HCV n监测：了解人群HCV感染率及变化趋势 19筛查试剂样品阴性反应初筛试验初筛试验阳性反应复检试验复检试验均阴性反应一阴一阳均阳性反应补充试验补充试验原有试剂双孔或原有试剂加另一种不同原理（或厂家）试剂报告阴性图 临床诊断筛查检测流程20复检阳性样品阳性反应免疫印迹试验免疫印迹试验阴性反应报告阴性图 HCV临床诊断补充试验检测方法一流程可疑报告可疑报告阳性21初/复检阳性样品可疑免疫印迹试验免疫印迹试验阴性反应报告阴性图 HCV临床诊断补充试验检测方法二流程阳性反应报告阳性报告可疑根据S/CO值判断高S/CO值低S/CO值222324另一种抗体筛查试剂或NAT血液筛查相关的检测策略 样品阳性反应初筛试验初筛试验阴性反应复检试验复检试验阳性反应阴性反应报告阳性待确证抗体筛查试剂报告阴性图 血液筛查检测流程25疫情监测相关的检测策略 样品阴性反应初筛试验初筛试验阳性反应复检试验复检试验阴性反应阳性反应报告阴性筛查试剂1报告阳性筛查试剂2图 HCV感染疫情报告检测流程2627