泌尿系统感染的微生物学检验课件.ppt

1、泌尿系统感染的微生物学检验泌尿系统感染的微生物学检验泌尿系统泌尿系统v 泌尿系统包括肾脏、输尿管、膀胱和尿道。v 肾是泌尿器官，其余为贮尿和排尿器官。v 肾脏排泄代谢产物及异物和过剩物质，调节水、电解质的平衡和酸碱平衡，从而维持内环境的相对稳定。v 输尿管、膀胱和尿道是排尿器官，分别有输送、贮存和排尿的作用。v 尿道是从膀胱通向体外的管道。男性尿道细长，女性尿道粗而短。泌尿系统感染的微生物学检验泌尿系统感染的微生物学检验v 泌尿系统感染v 泌尿系统感染的临床特征v 泌尿系统感染常见微生物v 泌尿系统感染微生物学检验泌尿系统感染泌尿系统感染v 泌尿系统感染是细菌感染中最常见的类型之一，仅次于呼吸

2、道感染，居第二位。v 尿路内有微生物停留、繁殖并导致炎症反应发生（阻塞、尿路改造、尿道长度、膀胱输尿管反流）上尿路感染：肾、输尿管 下尿路感染：膀胱、尿道v 泌尿道感染（UTI）是常见的医院感染泌尿系统感染的临床特征泌尿系统感染的临床特征v 一般：尿频、尿急、尿痛等膀胱刺激征，也称尿道刺一般：尿频、尿急、尿痛等膀胱刺激征，也称尿道刺激征。激征。v 单纯膀胱炎引起发热，耻骨上压痛。尿液混浊，有时单纯膀胱炎引起发热，耻骨上压痛。尿液混浊，有时血尿。血尿。v 急性肾盂肾炎：以上，高热寒战、腰肋部疼痛，乏力、急性肾盂肾炎：以上，高热寒战、腰肋部疼痛，乏力、恶心呕吐，低血压等全身不适。恶心呕吐，低血压等

3、全身不适。v 新生儿尿路感染的症状往往是非特异性的、模糊的，新生儿尿路感染的症状往往是非特异性的、模糊的，可表现有厌食，呕吐，倦怠，常有高热；可表现有厌食，呕吐，倦怠，常有高热；2岁以后的尿岁以后的尿路感染才会有典型的临床表现；老年患者的尿路感染路感染才会有典型的临床表现；老年患者的尿路感染常缺乏明显的症状，更易造成菌血症和急性肾功能衰常缺乏明显的症状，更易造成菌血症和急性肾功能衰竭，应引起重视。竭，应引起重视。泌尿系统感染的临床特征泌尿系统感染的临床特征v 上尿路感染：发热、肾区不适、膀胱压痛，常与下尿路感染并存v 下尿路感染：膀胱刺激征；尿频、尿急、尿痛。排尿次数明显增加；尿意一来就要立即

4、排尿；排尿时膀胱区及尿道口产生疼痛，为烧灼感或刺痛。膀胱刺激征原因膀胱刺激征原因v 激惹：炎症性刺激，肾盂肾炎、膀胱炎、肾结石合并感染和泌尿系结核。急性炎症和活动性结核时明显。非炎症性刺激如结石、异物、肿瘤、妊娠压迫等也可引起膀胱刺激征。v 膀胱容量减少：占位性病变或膀胱壁炎症浸润、硬化、挛缩。v 膀胱神经功能调节失常：尿频可见于精神紧张和癔病，可伴有尿意，但无尿痛。泌尿系统感染常见微生物泌尿系统感染常见微生物细菌细菌v G-菌中最常见大肠埃希菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、克雷伯菌属。v G+菌中常见为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肠球菌属。泌尿系统感染常见微生物泌尿系统感染常见微生物MICRO

5、BIOLOGYvCatheter-associated urinary tract infections are caused by a variety of pathogens,including:-Escherichia coli -MRSA -Klebsiella -Proteus -Enterococcus -Pseudomonas -Enterobacter：VRSA -Serratia -Candida细菌细菌v 乳酸杆菌、甲型溶血链球菌或厌氧菌等因难以在尿液中生长，当其在尿液中被检出时，一般认为是污染所致。v 致病菌95 以上为单一细菌。v 90门诊和50住院病原菌大肠埃希菌。v

6、 10 一15尿路感染由革兰阳性细菌引起，主要为葡萄球菌属和肠球菌属。性病相关：淋病奈瑟菌性病相关：淋病奈瑟菌v 尿痛常为发病的早期症状。v 尿道口红肿溢脓，1224小时后疼痛略微减轻，排出稀薄的粘液样分泌物v 尿频尿急 与一般泌尿系感染类似v 会阴部坠胀痛及全身症状：发热（体温38左右），全身倦怠无力、不适，食欲不振，恶心、呕吐。性病相关：淋病奈瑟菌性病相关：淋病奈瑟菌v 尿道口红肿充血、水肿，有时有小的、浅表性脓肿、糜烂或小溃疡。v 第一周症状重，不治疗或治疗不彻底，23周后症状逐渐减轻，尿道分泌物减少，组织肿胀消退，一个月后症状完全消失。v 淋菌潜伏于瘢痕组织中缓慢生长，发展为慢性淋病。

7、非淋菌性尿道炎非淋菌性尿道炎v 临床上最常见的一种性传播疾病。严重危及人类健康。衣原体和支原体等引起。v 症状 尿道刺痒、烧灼感和排尿疼痛，少数有尿频。尿道口微红，晨起尿道口少量粘液性分泌物，症状与淋菌性尿道炎相似，程度较轻。部分患者无症状。厌氧菌泌尿系统感染厌氧菌泌尿系统感染v 起病缓慢，发热寒战、烦躁不安、膀胱刺激征v 尿道炎、尿道周围炎、尿道周围蜂窝织炎和脓肿、前列腺炎、迁徙性肾脏感染、肾周脓肿、肾盂积脓、腹膜后积脓、肾切除伤口感染、肾移植感染、化脓性血栓性肾静脉炎、膀胱坏疽等。v 常伴肾结石、恶性肿瘤、尿路梗阻、肾结核和先天性尿路解剖畸形。泌尿系统感染：结核泌尿系统感染：结核v 泌尿系

8、结核中肾结核是最为常见、最先发生，以后蔓延至整个泌尿系统。结核从肾脏而影响膀胱，造成膀胱结核时，有一系列症状出现：膀胱刺激症 血尿 脓尿 腰痛 及全身症状并发膀胱挛缩、膀胱破裂 病毒、真菌病毒、真菌v 麻疹、腮腺炎病毒以及柯萨奇病毒可引起尿路感染，少见，临床多无症状，腺病毒2型感染导致学龄期儿童发生急性出血性膀胱炎；巨细胞病毒偶可引起下尿路感染。v 真菌感染(主要为假丝酵母属)多发生于留置导尿、糖尿病、使用广谱抗生素或免疫抑制剂的患者。一般特征一般特征v 下尿路感染患者外周血白细胞通常在正常范围，而尿中红细胞增多，可伴镜下血尿。v 尿液涂片染色及尿培养常可发现相应致病微生物。v 上尿路感染的病

9、人的尿检结果常提示大量白细胞尿，甚至脓尿。中段尿培养甚至血液细菌培养常常发现致病微生物生长。泌尿系统感染实验室检查泌尿系统感染实验室检查尿常规尿常规尿沉渣尿沉渣v 显微镜对离心后尿液的沉渣物（尿中有形成分）进行检查，尿液干化学分析仪不能替代。对泌尿系统疾病诊断十分重要。有时是无症状情况下的唯一的实验室取证。肾功能检查肾功能检查尿素氮、肌酐、尿酸测定不是直接诊断指标，但对患者处理有非常重要的参考价值，故必须常规进行。微生物学检查微生物学检查采集指征：采集指征：（1 1）有典型的尿路感染症状；）有典型的尿路感染症状；(2(2）肉眼脓尿或血尿；）肉眼脓尿或血尿；（3 3）不明原因的发热，无其他局部症

10、状；）不明原因的发热，无其他局部症状；（4 4）留置导尿管的患者出现发热；）留置导尿管的患者出现发热；（5 5）膀胱排空功能受损；）膀胱排空功能受损；(6(6）泌尿系统疾病手术前。）泌尿系统疾病手术前。样本采集样本采集中段尿中段尿v 新鲜晨尿：夜间饮水少，尿液浓缩，提高检出率，其他随机留取的尿液也可。v 中段尿：尿液分为前段、中段、后段。因前段尿和后段尿容易被污染，因此一般都留取中段尿。尿常规检查时，尿液不少于10毫升。v 清洁干燥的容器v 尽快送实验室检查导尿管导尿管v 较好的无菌采集法。v 1危重病人每小时尿量、尿比重。2盆腔手术排空膀胱。3手术后留置导尿管，便于引流和冲洗。4尿失禁或会阴

11、部伤口的病人引流尿液，保持会阴部的清洁干燥。5为尿失禁病人行膀胱功能训练。肾盂尿肾盂尿v 确定是否来自肾脏。冲洗膀胱，末次冲洗尿作对照。v 导尿管插入输尿管，标记左右侧，各收集三次尿；v 输尿管比对照尿菌数多或第三次尿比第一次多，该菌尿可能来自肾脏；反之，如果第一次尿多于第三次尿菌，可能来自膀胱。膀胱穿刺膀胱穿刺v 膀胱穿刺尿采集法：将病人耻骨上皮肤经碘酒、酒精消毒后，以无菌针筒作膀胱穿刺。v 用于尿液中厌氧菌的培养，故在取得尿液后，针头插于橡皮塞上送检。v 儿童或婴儿采集中段尿困难或培养结果与患者病情矛盾，可考虑用此法采集尿液。集尿集尿v 24h 的尿液，取沉淀于清洁瓶内送检。v 污染杂菌，

12、无菌操作。v 立即送检，病原菌增殖影响细菌计数的正确性。v 不加防腐剂，否则影响检出的阳性率。注意事项注意事项v 严格无菌操作。v 用药前采集标本，不加防腐剂或消毒剂。v 晨起第一次尿液送检v 立即送检，否则导致感染菌和过度生长。v 临时存放4冰箱不得超过2h。v 淋病奈瑟菌应首选床边接种，否则保温送检，不能存放于冰箱内，以免影响检出。直接镜检直接镜检v 一般细菌：Gram染色v 淋病奈瑟菌v 假丝酵母菌v 抗酸杆菌分离培养鉴定分离培养鉴定v 一般细菌培养：涂布法、倾注法v 淋病奈瑟菌 v 假丝酵母菌v 结核分枝杆菌v 厌氧菌v 支原体v L型定量定量v 膀胱穿刺取尿作定性，只要培养出细菌，不

13、论细菌数多少，均认为是感染，不会出现假阳性。是避免尿培养污染的最好方法。缺点是患者有一定痛苦。v 尿液细菌培养：尿道口周围亦有大量细菌。表皮葡萄球菌、链球菌、枯草杆菌、变形杆菌、大肠埃希菌、乳酸杆菌、卡他布兰汉菌及耻垢分枝杆菌等。细菌常混入尿中，但细菌数小于103/毫升。定量定量清洁中段尿涂布法清洁中段尿涂布法目的是运用中段尿培养菌落计数的方法鉴别是否为尿路感染。v 常用定量接种环法，取1l 10l的新鲜中段尿，均匀涂划在血液琼脂平板上，37，24小时孵育，整个平板上所见的菌落数乘以1000即得每毫升菌落数。v 计数生长的菌落数，生长过多不可计数时，报告105cfu/ml即可。根据菌落形状及涂

14、片镜检特征，选择相应方法进一步鉴定。48h无细菌生长方可报告“无细菌生长”。倾注法倾注法v 液体稀释的方法分散细胞，最常用的液体稀释方法为10倍系列稀释，参考下图：v 随着稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散。倾注法倾注法v 合适稀释度的菌悬液与灭完菌冷却到50-55C的培养基混合均匀，倒入无菌培养皿，冷却形成平板后，培养。v 操作较麻烦。热敏感微生物的影响明显；影响严格好氧微生物的生长；表面菌落与培养基内菌落形态影响菌落形态的判别。v 分散均匀，计数准确。细菌学标准细菌学标准v 革兰阴性杆菌落计数105cfu/ml或革兰阳性球菌菌落计数104 cfu/ml，应同时报告

15、鉴定结果及药敏试验结果。v 菌落计数低于此标准，并不能完全排除尿路感染。这多见于以下几种情况：1.应用抗菌药物；2.采尿时消毒剂混入尿中3.尿频，细菌停留时间短；4.大量输液或使用利尿剂使尿液稀释；5.尿液PH。泌尿系统感染常见细菌泌尿系统感染常见细菌v 大肠埃希菌泌尿系统感染常见细菌泌尿系统感染常见细菌v 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌v 细长革兰阴性杆菌，极单鞭毛，严格需氧，氧化利用葡萄糖v 蓝绿色水溶性绿脓素和黄绿色青脓素v 血平板上形成大而扁平，湿润，边缘不齐，有金属光泽，有生姜气味的灰绿色菌落，并形成透明溶血环v 最适生长温度35，4不生长，42生长MACO/F试验（氧化型）硝

16、酸盐还原试验（）硝酸盐还原试验（）泌尿系统感染常见细菌泌尿系统感染常见细菌v 肺炎克雷伯菌荚膜染色肺炎克雷伯菌粘丝试验肺炎克雷伯菌粘丝试验肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌KIAKIA（A AA A-）、）、MIUMIU（）泌尿系统感染常见细菌泌尿系统感染常见细菌v 鲍曼不动杆菌鲍曼不动杆菌鲍曼不动杆菌v 严格需氧、无动力、氧化酶阴性、硝酸盐还原阴性的革兰染色阴性球杆菌。v 似双球菌，不易脱色，易误认阳性菌；v 血平板培养24小时后，菌落半透明到不透明，凸起，边缘整齐，无色素形成；v 大多数菌株麦康凯平板上生长良好，呈无色或淡粉红色变形杆菌变形杆菌v 革兰染色阴性、无芽胞、无荚膜、周身鞭毛、运动活泼、两

17、端钝圆的小杆菌。v 0.40.61.03.0微米。兼性厌氧。v 普通固体培养基上迁徙生长。自然界中存在极广，健康人和动物的肠道中，条件致病菌。变形杆菌变形杆菌KIA（K A+）MIU（+/-+）变形杆菌苯丙氨酸脱氨酶试验（）变形杆菌苯丙氨酸脱氨酶试验（）v 根据典型的迁徙现象根据典型的迁徙现象,迅速分解尿素，苯丙氨酸脱氨酶阳性，迅速分解尿素，苯丙氨酸脱氨酶阳性，KIAKIA为为KA+KA+，IMViCIMViC为为-/+-/+-，可鉴定为变形杆菌。，可鉴定为变形杆菌。泌尿系统感染常见细菌泌尿系统感染常见细菌v 肠球菌、链球菌、葡萄球菌肠球菌肠球菌v 肠球菌：营养要求低，正常寄居皮肤、上呼吸道、

18、消化道和泌尿生殖道，引起的感染有尿路感染、心内膜炎等，罹患者多为老年人、女性、体弱或肿瘤患者。v 粪肠球菌所致感染中最为常见的，绝大部分为院内感染。葡萄球菌葡萄球菌v 革兰阳性菌属约占泌尿感染的25，以葡萄球菌最常见，主要是金黄色葡萄球菌。v 表皮葡萄球菌：导管相关。淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌v 培养：将标本立即接种于巧克力琼脂平板或淋球菌专用培养基，置35 5%10%二氧化碳中培养2448h，若有可疑菌落，按淋病奈瑟菌进行鉴定。L型型v 明显提高尿路感染的细菌阳性检出率。v 尿液接种于血琼脂平板和高渗液体培养基，置35培养，高渗管置57d。在液体中，L型细菌呈颗粒状生长，可粘附管壁或沉于管底，吸出

19、颗粒镜下观察，同时转种平板。无阳性发现可报告无L型细菌生长。结核分枝杆菌结核分枝杆菌v 24小时尿液抗酸杆菌检查：尿液浓缩作直接涂片抗酸染色后作抗酸杆菌检查，方法简单，结果迅速，阳性率可达5070%，但尿液中的抗酸杆菌并不等于结核杆菌。v 培养v 尿液结核IgG抗体测定v 结核菌素试验解脲脲原体检测解脲脲原体检测v 微生物学检验：分泌物v 核酸检测；v 营养要求高，菌落细小v 分离培养：利用尿素、精氨酸，半定量结果报告结果报告v 直接涂片：1.未找到菌；2.找到革兰染色性菌呈排列，疑似菌；3.找到抗酸杆菌；4.找到真菌菌丝及（或）孢子。结果报告结果报告v 细菌培养：1.普通培养无菌生长；培养48h无菌落生长，即为阴性。接种lul尿量者，应报告“培养48h，菌落计数103CFU/ml”；接种10ul尿量者，应报告“培养48h，菌落计数102CFU/ml”。2.无意义的阳性培养结果报告；纯培养报告“革兰性菌生长，菌落计数：CFU/ml”；混合菌生长报告“革兰性菌和革兰性菌混合生长”。有意义的阳性培养结果报告：报告菌落计数、细菌种属名称及标准抗菌药物敏感性试验结果。Thank You世界触手可及世界触手可及携手共进，齐创精品工程携手共进，齐创精品工程