人感染H7N9禽流感采样以及实验室检测技术课件.ppt
- 【下载声明】
1. 本站全部试题类文档,若标题没写含答案,则无答案;标题注明含答案的文档,主观题也可能无答案。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
2. 本站全部PPT文档均不含视频和音频,PPT中出现的音频或视频标识(或文字)仅表示流程,实际无音频或视频文件。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
3. 本页资料《人感染H7N9禽流感采样以及实验室检测技术课件.ppt》由用户(晟晟文业)主动上传,其收益全归该用户。163文库仅提供信息存储空间,仅对该用户上传内容的表现方式做保护处理,对上传内容本身不做任何修改或编辑。 若此文所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知163文库(点击联系客服),我们立即给予删除!
4. 请根据预览情况,自愿下载本文。本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
5. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007及以上版本和PDF阅读器,压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 感染 H7N9 禽流感 采样 以及 实验室 检测 技术 课件
- 资源描述:
-
1、流行性感冒病毒(简称流感病毒)流行性感冒病毒(简称流感病毒):是一种造成人类及动物患流行性感冒的RNA病毒,在分类学上,流感病毒属于正黏液病毒科理化特性:理化特性:对热敏感,5630min可灭活;最适pH为7.08.0,3.0和10.0感染力很快被破坏;对紫外线敏感;对乙醚、氯仿、丙酮等有机溶剂均敏感。禽流感病毒灭活应该是6530min,或者煮沸1002min。Gao RB,et al,NEJM,2013Morens DM et al,NEJM,2013Dliu et al.,Lancet,2013 Yi Guan et al,Nature,2013负责人感染H7N9禽流感病毒检测样本采集的操
2、作人员必须经过生物安全培训合格,并具备相应的操作技能。样本采集过程中操作者要加强防护,应穿戴防护服、眼罩、N95及以上水平的医用防护口罩、帽子、双层医用乳胶手套、鞋套等个体防护装备。不明原因肺炎病例。同时具备以下4条的病例:1.发热(腋下体温38);2.具有肺炎的影像学特征;3.发病早期白细胞总数降低或正常,或淋巴细胞分类计数减少;4.不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所致的肺炎。人感染H7N9禽流感疑似病例上呼吸道标本(包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液);下呼吸道标本(如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本);血清标本;如病人死亡,应当尽可能说服家属同意尸检,及时进行尸体解剖,采集
3、组织(如肺组织、气管、支气管组织)标本;注:注:应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本(尤其是下呼应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本(尤其是下呼吸道标本)和发病吸道标本)和发病7 7天内急性期血清以及间隔天内急性期血清以及间隔2-42-4周的恢复周的恢复期血清。期血清。要求p呼吸道标本:发病早期采样,每份不少于3mlp血清标本每份分为2管,每管不少于0.5ml咽拭子:咽拭子:左手用压舌板压住患者舌头,右手用2根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时檫拭双侧咽扁桃体及咽后壁,应避免接触舌头,将拭子头浸入含3ml采样液的管中,弃去尾部,旋紧管盖。样本采集方法样本采集方法(1)鼻拭子鼻拭子:将1根聚丙烯纤维头
4、的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处(通常5cm以上),停留片刻后缓慢转动退出;取另1根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子以同样的方法采集另一侧鼻孔;将上述2根拭子浸入同一含3ml采样液的管中,弃去尾部,旋紧管盖。患儿俯卧抬头,采集者左手托住患儿的下颌部,右手持无菌拭子,将干拭子与上颚平行插入鼻孔(不要向上)直接与鼻咽后壁接触,深度与到耳导管基本一致,轻轻旋转5秒吸附分泌物,慢慢移出拭子,将拭子头浸入采样液中,弃去尾部。拭子的要求:拭子的要求:标本应使用头部为合成纤维的拭子(例如,聚酯纤维)铝或塑料做柄,不推荐棉拭子和木柄标本采集管应包含3毫升病毒采样液(含有蛋白质稳定剂,阻止细菌和真菌生长的抗生素,缓冲液
5、)采样液中不能加入血清作为蛋白保护剂,可以加入BSA作为蛋白保护剂,加入BSA的采样液应-20保存备用。也可加入凝胶(gelatin)作为蛋白保护剂。使用商品化的无菌采样液,在分离病毒时需补加抗生素。鼻洗液鼻洗液 患者取坐姿,头微后仰,用移液管将5 ml生理盐水注入一侧鼻孔,嘱患者同时发K音以关闭咽腔。然后让患者低头使生理盐水流出,用平皿或烧杯收集洗液。重复此过程洗两侧鼻孔漱口液漱口液 用10 ml生理盐水漱喉。漱时让患者头部微后仰,发“噢”声,让生理盐水在咽部转动。然后,用50ml的无菌螺口塑料管收集洗液。血清标本血清标本 用真空负压采血管采集血液标本5ml,室温静置30分钟,1500200
6、0rpm离心10分钟,收集血清于2ml无菌螺口塑料管中。鼻咽抽取物或呼吸道抽取物:鼻咽抽取物或呼吸道抽取物:用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。先将收集器头部插入鼻腔或气管,接通负压,旋转收集器头部并缓慢退出;收集抽取的粘液,并用采样液3ml涮洗收集器1次(可用小孩导尿管接在50ml注射器上来代替收集)。呼吸道灌洗液呼吸道灌洗液:将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管(约30cm深处),注入5ml生理盐水,接通负压,旋转收集器头部并缓慢退出;收集抽取的粘液,并用采样液涮洗收集器1次(可用小孩导尿管接在50ml注射器上来代替收集)。采集粪便时一定要采集新鲜的(一般较湿
7、润)粪便,太陈旧(干燥)的粪便对我们的检测意义不大;在养殖户家中采集粪便标本时,由于多鸡鸭混养难以分辨鸭粪和鸡粪,最好能找到鸭子刚排泄的新鲜粪便;采样液中最好已加入抗生素,否则回实验室要先加入抗生素处理;1、病毒培养物按照A类感染性物质进行包装运输,其他感染性物质按照B类感染性物质进行包装运输。2、病例的临床标本采集后,县级疾病预防控制机构和病例收治的医疗机构要密切配合,按照生物安全的相关规定进行包装,在24小时内送到当地流感监测网络实验室进行检测。样本的分装:样本的分装:采集的呼吸道标本每份分为3 管,每管不少于1ml。血清标本每份分为2 管,每管不少于0.5ml。并填写湖南省不明原因肺炎病
8、例疑似人禽流感病例标本送检单。样本的保存:样本的保存:所有呼吸道标本应保存在4,并尽快放置在70。如果没有70度冰箱,标本应保存在4,但不超过24小时。切勿置于-20 长期保存。血清样本应置-20 长期保存。注:标本运送期间应避免反复冻融。(1)甲型流感病毒抗原筛查。呼吸道标本甲型流感病毒抗原快速检测阳性。但仅可作为初筛实验。(2)核酸检测。对患者呼吸道标本采用real time PCR(或RT-PCR)检测H7N9禽流感病毒核酸。(3)病毒分离。从患者呼吸道标本中分离H7N9禽流感病毒。(4)动态检测双份血清H7N9禽流感病毒特异性抗体水平呈4倍或以上升高。不明原因肺炎不明原因肺炎病例标本检
展开阅读全文